李天潔，梁建梅，王向東，王清澤，秦麗欣，楊宏潔，封紀(jì)珍*

(1.河北省石家莊市婦幼保健院優(yōu)生遺傳科，河北 石家莊 050081；2.河北省石家莊市婦幼保健院婦二科,河北 石家莊 050081；3.河北省石家莊市平安醫(yī)院功能科,河北 石家莊 050021；4.河北省辛集市婦幼保健院檢驗(yàn)科,河北 石家莊 052360；5.河北省石家莊市婦幼保健院保健部,河北 石家莊 050081)

·論著·

23 763例新生兒聽力篩查聯(lián)合耳聾基因檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用

李天潔1，梁建梅2，王向東3，王清澤4，秦麗欣2，楊宏潔5，封紀(jì)珍1*

(1.河北省石家莊市婦幼保健院優(yōu)生遺傳科，河北 石家莊 050081；2.河北省石家莊市婦幼保健院婦二科,河北 石家莊 050081；3.河北省石家莊市平安醫(yī)院功能科,河北 石家莊 050021；4.河北省辛集市婦幼保健院檢驗(yàn)科,河北 石家莊 052360；5.河北省石家莊市婦幼保健院保健部,河北 石家莊 050081)

目的通過(guò)對(duì)石家莊市23 763例新生兒聽力篩查及耳聾基因檢測(cè)數(shù)據(jù)的分析，探討聽力篩查聯(lián)合耳聾基因檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用價(jià)值。方法新生兒于出生后3 d同步進(jìn)行聽力篩查及常見耳聾基因檢測(cè)。其中聽力篩查采用初篩耳聲發(fā)射(otoacoustic emission，OAE)和復(fù)篩OAE+自動(dòng)聽性腦干反應(yīng)兩步法，常見耳聾基因檢測(cè)采用熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法(熒光PCR)，最后對(duì)聯(lián)合篩查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果23 763例新生兒中有20 443例通過(guò)了聽力初篩，初篩通過(guò)率為86.03%(20 443/23 763)；3 087例參加復(fù)篩的新生兒中有2 964例通過(guò)了復(fù)篩，復(fù)篩通過(guò)率為96.02%(2 964/3 087)。23 763例新生兒中有960例攜帶常見耳聾基因突變，隨機(jī)人群常見耳聾基因突變率為4.04%(960/23 763)；123例未通過(guò)聽力篩查的新生兒中有20例攜帶常見耳聾基因突變，高危人群攜帶率為16.26%(20/123)，高危人群組常見耳聾基因突變攜帶率高于隨機(jī)人群組(P<0.05)。最終在37例進(jìn)行聽力學(xué)診斷的新生兒中確診中度耳聾1例，重度耳聾4例，確診為聽力損失的5例新生兒中有1例為235delC純合突變型，1例為235delC/299-300delAT復(fù)合雜合突變型，2例為IVS7-2A>G純合突變型，1例為IVS7-2A>G/2168A>G復(fù)合雜合突變型。結(jié)論將聯(lián)合篩查應(yīng)用于臨床可以擴(kuò)大聽力障礙的防治范圍，有效提高新生兒耳聾的檢出率，有助于提早發(fā)現(xiàn)新生兒聽力障礙并實(shí)施早期個(gè)性化靶向預(yù)防，為患兒提供有針對(duì)性的醫(yī)療咨詢與干預(yù)。

聽力檢查；基因檢測(cè)；嬰兒，新生

聽力障礙是新生兒常見的出生缺陷，聽力障礙在新生兒期的發(fā)生率為1‰～1.86‰[1]。聽覺(jué)是語(yǔ)言發(fā)育的基礎(chǔ)，聽力障礙會(huì)影響語(yǔ)言發(fā)育，嚴(yán)重者還有行為異常，給患兒的交流和學(xué)習(xí)帶來(lái)困難[2]。新生兒聽力篩查工作的廣泛開展使得人們能早日發(fā)現(xiàn)聽力障礙患兒，極大程度降低了因聾致啞的發(fā)生率。常見耳聾基因檢測(cè)有助于明確聽力障礙患兒的遺傳學(xué)病因，并能提早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，避免藥物性耳聾，以達(dá)到預(yù)防后天耳聾發(fā)生的目的。因此，將聽力篩查聯(lián)合耳聾基因檢測(cè)應(yīng)用于臨床有助于聽力障礙的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療[3]，這對(duì)降低出生缺陷、提高人口素質(zhì)有著及其重要的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1月—2017年5月在河北省石家莊市婦幼保健院出生并進(jìn)行聽力篩查聯(lián)合常見耳聾基因檢測(cè)的新生兒23 763例，男性12 398例，女性11 365例。

1.2 篩查方法 新生兒出生3d后采用初篩耳聲發(fā)射(otoacousticemissionOAE)進(jìn)行聽力初篩，未通過(guò)初篩的新生兒于出生42d采用OAE+自動(dòng)聽性腦干反應(yīng)(automatedauditorybrainstemresponse,AABR)進(jìn)行聽力復(fù)篩，未通過(guò)復(fù)篩的新生兒于出生3個(gè)月進(jìn)行聽力學(xué)診斷。常見耳聾基因檢測(cè)于新生兒出生后3d采足跟血3滴于專用濾紙片上自然晾干，應(yīng)用熒光PCR法對(duì)常見耳聾基因GJB2(235delC、299-300delAT)、SLC26A4(IVS7-2A>G、2168A>G)、mtDNA12SrRNA(1555A>G)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 隨訪方法 對(duì)于目標(biāo)隨訪對(duì)象定期召回檢查，不能回院者定期電話隨訪。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 聽力篩查結(jié)果 23 763例新生兒中20 443例通過(guò)了聽力初篩，初篩通過(guò)率為86.03%(20 443/23 763)。初篩未通過(guò)的3 320例新生兒中有3 087例于出生后42d接受了聽力復(fù)篩，其中2 964例通過(guò)了復(fù)篩，復(fù)篩通過(guò)率96.02%(2 964/3 087)。未通過(guò)復(fù)篩的123例新生兒家屬被告知于新生兒3個(gè)月時(shí)進(jìn)行聽力學(xué)診斷，僅有37例前來(lái)確診，最終在37例進(jìn)行聽力學(xué)診斷的新生兒中確診5例聽力損失，其中3例為前庭導(dǎo)水管擴(kuò)張綜合征，2例為先天遺傳性耳聾。

2.2 常見耳聾基因檢測(cè)結(jié)果 23 763例新生兒(隨機(jī)人群組)中共檢出960例耳聾基因突變攜帶者，隨機(jī)人群常見耳聾基因突變攜帶率為4.04%(960/23 763)；未通過(guò)聽力篩查的123例新生兒(高危人群組)中有20例攜帶常見耳聾基因突變，高危人群常見耳聾基因突變攜帶率為16.26%(20/123)。高危人群組常見耳聾基因突變攜帶率高于隨機(jī)人群組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=46.445，P=0.000)。見表1，2。

確診為聽力損失的5例新生兒中有1例為235delC純合突變型，1例為235delC/299-300delAT復(fù)合雜合突變型，2例為IVS7-2A>G純合突變型，1例為IVS7-2A>G/2168A>G復(fù)合雜合突變型。其中攜帶235delC雜合/299-300delAT雜合復(fù)合雜合突變型的新生兒為中度耳聾，其余4例均為重度耳聾。

表1 23 763例新生兒常見耳聾基因突變結(jié)果Table 1 Mutation results of common deafness gene in 23 763 newborns

表2 123例未通過(guò)聽力篩查的新生兒耳聾基因突變結(jié)果Table 2 Mutation results of deafness genes in 123 infants unpassed the hearing screening

3 討 論

3.1 聽力篩查聯(lián)合耳聾基因檢測(cè)意義重大 OAE是一種聲能量，它產(chǎn)生于耳蝸，并經(jīng)過(guò)聽骨鏈和鼓膜傳導(dǎo)到外耳道[4]，只有在中耳功能正常的前提下才能檢測(cè)到此聲信號(hào)。OAE的臨床意義為提供了一條檢測(cè)耳蝸放大功能和外毛細(xì)胞功能完整性的途經(jīng)，但它并不能檢測(cè)出聽覺(jué)中樞及神經(jīng)傳導(dǎo)通路有無(wú)病變[5]。AABR則是OAE的有效補(bǔ)充[6],能全面反映耳蝸、聽神經(jīng)傳導(dǎo)通路和腦干聽覺(jué)功能狀態(tài)。因此，臨床常用初篩使用OAE，未通過(guò)者使用AABR進(jìn)行復(fù)篩的聯(lián)合篩查方式以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確率[7]。但是即便OAE聯(lián)合AABR進(jìn)行檢測(cè)，聽力篩查只能反映篩查當(dāng)時(shí)的聽力情況，不能反映篩查時(shí)尚無(wú)表型的耳聾，耳聾基因檢測(cè)則進(jìn)一步提高了聽力篩查的檢出率，不但可以提前檢出遲發(fā)性耳聾和藥物性耳聾，而且可以對(duì)患者進(jìn)行遺傳咨詢與生活指導(dǎo)[8]。本研究共計(jì)聯(lián)合篩查23 763例新生兒，受試者來(lái)源于石家莊市區(qū)及周圍各縣區(qū)，所得聽力篩查通過(guò)率及耳聾基因攜帶率有地域代表性，基因篩查中以GJB2基因235delC位點(diǎn)突變頻率最高，在先天遺傳性耳聾患者檢測(cè)時(shí)應(yīng)首先考慮篩查該位點(diǎn)。

3.2 復(fù)篩通過(guò)率高的原因分析 本研究未通過(guò)初篩的新生兒3 320例中有3 087例于產(chǎn)后42 d接受了聽力復(fù)篩，2 964例通過(guò)了AABR篩查，復(fù)篩通過(guò)率為96.02%(2 964/3 087)。對(duì)于通過(guò)復(fù)篩的2 964例新生兒而言，有可能是因?yàn)樾律鷥和舛篮椭卸淮嬖谘蛩?、胎脂、胎性殘積物滯留，對(duì)傳入的聲刺激和傳出的反應(yīng)信號(hào)造成衰減，導(dǎo)致耳聲發(fā)射能量減弱或消失，造成了聽力篩查“未通過(guò)”的假象。隨著吃奶、哭鬧等帶動(dòng)軟骨運(yùn)動(dòng)，可以使一部分羊水和胎性殘積物排除，從而在產(chǎn)后42 d復(fù)篩時(shí)順利通過(guò)[9]。另外，早產(chǎn)兒和低體質(zhì)量?jī)郝犃鲗?dǎo)和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育可能不成熟[10]，住院期間聽力篩查未通過(guò)屬暫時(shí)性，隨著身體各器官的發(fā)育，產(chǎn)后42 d復(fù)查時(shí)聽力篩查通過(guò)率會(huì)明顯提高。

3.3 耳聾基因檢測(cè)對(duì)臨床的指導(dǎo)意義

3.3.1 提早確診時(shí)間、提高確診率 新生兒耳聾基因檢測(cè)可以將遺傳性耳聾的確診時(shí)間提前到出生后2周，并避免了不確定因素的影響，提高了診斷效率[11]，提高了患兒家長(zhǎng)對(duì)遺傳性耳聾的認(rèn)識(shí)。耳聾基因檢測(cè)還可對(duì)出生時(shí)通過(guò)了聽力篩查但未通過(guò)基因檢測(cè)的新生兒行進(jìn)一步基因診斷及聽力學(xué)監(jiān)測(cè)[12]，避免遲發(fā)性耳聾和藥物性耳聾的發(fā)生。

3.3.2 未通過(guò)聽力篩查的新生兒是高危人群 本研究結(jié)果顯示高危人群組常見耳聾基因突變攜帶率高于隨機(jī)人群組(P<0.05)。說(shuō)明未通過(guò)聽力篩查的新生兒是攜帶耳聾基因突變的高危人群，應(yīng)引起家長(zhǎng)的高度重視，應(yīng)對(duì)患兒家長(zhǎng)進(jìn)行遺傳性耳聾的宣教及育兒指導(dǎo)，對(duì)攜帶有耳聾基因突變的新生兒應(yīng)定期進(jìn)行聽力學(xué)檢測(cè)，密切關(guān)注其聽力變化情況。

3.3.3 特殊病例跟蹤 本研究中有1例235delC純合突變型新生兒通過(guò)了聽力篩查并于后期3年的隨訪及聽力學(xué)檢測(cè)中均證明聽力發(fā)育良好，其父母均為235delC雜合突變型且純音聽閾測(cè)試結(jié)果正常，三人基因檢測(cè)結(jié)果均得到測(cè)序驗(yàn)證。有研究顯示通過(guò)了聽力篩查的攜帶有GJB2純合突變基因型的新生兒最終確診聽力損失的時(shí)間為12～60個(gè)月[13]，但這只是基于歐美人群高發(fā)的35delG位點(diǎn)。之后國(guó)內(nèi)也曾有攜帶235delC純合突變的新生兒在出生時(shí)通過(guò)了新生兒聽力篩查的報(bào)道[14]。無(wú)論是35delG還是235delC，其致聾特點(diǎn)均是因堿基的缺失導(dǎo)致了基因的框移突變，使翻譯過(guò)程過(guò)早終止，從而引發(fā)蛋白質(zhì)功能障礙，導(dǎo)致聽力損失[15],因此，不排除該新生兒患有遲發(fā)性耳聾的可能，對(duì)此家長(zhǎng)也應(yīng)引起重視，定期對(duì)新生兒進(jìn)行聽力檢測(cè)，并跟蹤隨訪。

綜上所述，將新生兒聽力篩查聯(lián)合耳聾基因檢測(cè)應(yīng)用于臨床，能發(fā)現(xiàn)部分聽力篩查不能發(fā)現(xiàn)的遲發(fā)性耳聾和藥物性耳聾高?；純?，擴(kuò)大重點(diǎn)隨訪-干預(yù)對(duì)象，有效提高隨訪率并指導(dǎo)臨床提早作出預(yù)警，做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，降低聾啞患兒的發(fā)生率，具有長(zhǎng)遠(yuǎn)的現(xiàn)實(shí)意義[16]。

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(本文編輯：趙麗潔)

Clinical application of hearing screening combined with deafness gene detection in 23 763 neonates

LI Tian-jie1, LIANG Jian-mei2, WANG Xiang-dong3, WANG Qing-ze4, QIN Li-xin2, YANG Hong-jie5, FENG Ji-zhen1*

(1.DepartmentofEugenicsandGenetics,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China； 2.DepartmentofGynaecology,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China； 3.DepartmentofFunctional，thePinganHospitalofofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050021，China； 4.DepartmentofClinicalLaboratory，theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofXinjiCity，HebeiProvince，Xinji052360，China；5.DepartmentofHealth,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China)

ObjectiveToexplorethevalueofhearingscreeningcombineddeafnessgenesdetectioninclinicalapplicationbyanalyzingthedatafrom23 763newbornsinShijiazhuang.MethodsNewbornbabiesundergosimultaneoushearingscreeningandcommondeafnessgenetestingat3dafterbirth.Thetwo-stepscreeningmethodwasusedinhearingscreening.Otoacousticemission(OAE)wasusedatthebeginningofthescreenandOAE+automatedauditorybrainstemresponsewasusedonthosewhofailedthefirstscreening.CommondeafnessgenesweredetectedbyfluorescentPCR.Finallyweanalyzedthestatisticaldatasofcombinedscreening.Results20 443fromthe23 763newbornspassedfirsthearingscreeningandthepassingratewas86.03%(20 443/23 763). 3 087newbornsreceptthesecondhearingscreeningand2 964passedit.Thesecondpassingratewas96.02%(2 964/3 087). 960newbornscarriedmutationsofcommondeafnessgenesandthecarrierratewas4.04%(960/23 763)fromtherandompopulationof23 763.Thecarrierratewas16.26%(20/123)inthose123infantsunpassedthehearingscreeningwhowerecalledhighriskpopulation.Significationdifferenceswereobservedbetweenthetwogroupsofrandomandhighrisk(P<0.05).Finally5caseswerediagnosedashearinglossinthe37newbornswhowererecalledforaudiologicaldiagnosis.Wefounda235delChomozygousmutationanda235delC/299-300delATcompoundheterozygousinGJB2geneand2casesofIVS7-2A>GhomozygousmutationandaIVS7-2A>G/ 2168A>GcompoundheterozygousinSLC26A4geneamongthe5hearingloss.The235delC/299-300delATcompoundheterozygouswasdiagnosedasmoderatedeafnessandtheotherswereprofoundhearingloss.ConclusionThesynchronousdetectionforclinicalapplicationcouldexpandthescopeofdeafnesspreventionandimprovethedetectionrateofneonataldeafnesseffectively.Itcontributestotheearlydetectionofneonatalhearingdisordersandprovidesearlyindividualizedtargetedprevention.Itcanprovidetargetedmedicaladviceandinterventionforchildrenwithhearingdisorders.

hearingtests；genetictesting；infant,newborn

2017-07-12；

2017-08-16

河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題(20170216)

李天潔(1982-)，女，河北安國(guó)人，河北省石家莊市婦幼保健院主管檢驗(yàn)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事耳聾基因等新生兒疾病及孕產(chǎn)婦疾病的篩查研究。

*通訊作者。E-mail：litianjie616@163.com

R764.04

A

1007-3205(2017)09-1054-04

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.09.015