趙丹,趙遠(yuǎn)琴,石慶柳,劉維佳,葉賢偉,張湘燕

(1貴州大學(xué)醫(yī)學(xué)院·貴州省人民醫(yī)院·貴州省呼吸疾病研究所，貴陽(yáng)550000；2貴州醫(yī)科大學(xué))

OSAHS患者血清KL-6、SP-A、SP-D水平變化及意義

趙丹1,趙遠(yuǎn)琴2,石慶柳2,劉維佳1,葉賢偉1,張湘燕1

(1貴州大學(xué)醫(yī)學(xué)院·貴州省人民醫(yī)院·貴州省呼吸疾病研究所，貴陽(yáng)550000；2貴州醫(yī)科大學(xué))

目的 探討阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)患者血清Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原6(KL-6)、肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、肺泡表面活性蛋白D(SP-D)水平的變化及意義。方法 根據(jù)多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)的睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)將67例受試者隨機(jī)分為輕、中、重度OSAHS組，并設(shè)立正常對(duì)照組。采用ELISA法檢測(cè)各組血清KL-6、SP-A和SP-D水平，并進(jìn)行比較；分析上述指標(biāo)與AHI、最長(zhǎng)呼吸暫停低通氣時(shí)間(LA/HT)、最低血氧飽和度(LSaO2)、血氧飽和度小于90%的時(shí)間(T<90%)之間的相關(guān)性。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，輕、中、重度OSAHS組AHI、LA/HT均升高，血清KL-6、SP-A水平升高(P均<0．05)；中、重度OSAHS組血清SP-D水平升高(P均<0．05)；重度OSAHS組夜間LSaO2降低，T<90%延長(zhǎng)(P均<0．05)。與輕、中度OSAHS組比較，重度OSAHS組AHI、LA/HT、T<90%均升高，LSaO2降低，血清SP-A、SP-D水平升高(P均<0．05)?；颊哐錝P-A、SP-D水平與AHI、LA/HT呈正相關(guān)，SP-D水平與T<90%呈正相關(guān)(P均<0．05)。結(jié)論 OSAHS患者血清KL-6、SP-A、SP-D水平升高，血清SP-A、SP-D水平與OSAHS病情嚴(yán)重程度有關(guān)。

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征；Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原6；肺泡表面活性蛋白A；肺泡表面活性蛋白D

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)是一種臨床常見(jiàn)病，由于睡眠過(guò)程中反復(fù)發(fā)生的間歇低氧，可累及機(jī)體多個(gè)系統(tǒng)損害。越來(lái)越多的研究表明OSAHS患者存在亞臨床肺損傷[1]。間歇性低氧大鼠模型肺泡壁間隔增寬，間質(zhì)水腫、充血，少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，部分肺泡結(jié)構(gòu)破壞、融合，提示間歇性低氧可引起肺組織損傷[2]。Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原6(KL-6)、肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、肺泡表面活性蛋白D(SP-D)主要由肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞分泌，在肺間質(zhì)纖維化[3]、肺泡蛋白沉積癥[4]、肺部慢性感染[5]、機(jī)化性肺炎[6]等疾病中表達(dá)均升高，能有效反映肺損傷程度[7]。血清KL-6、SP-A、SP-D水平在OSAHS患者中的水平變化及其與病情嚴(yán)重程度相關(guān)性的研究較少，本研究對(duì)此進(jìn)行了相關(guān)探討，為臨床預(yù)防和治療OSAHS繼發(fā)性肺部疾病提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年8～12月貴州省人民醫(yī)院門診及住院就診的OSAHS患者67例，均符合阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南—2011年修訂版[8]中的標(biāo)準(zhǔn)?；颊吣?1例、女26例，年齡16～76(50.95±12.22)歲,體質(zhì)量指數(shù)(26.97±3.71)kg/m2，頸圍(39.57±3.53)cm，胸圍(98.47±8.48)cm，腰圍(98.31±10.47)cm，日間愛(ài)波沃斯嗜睡評(píng)分(ESS)(7.47±3.99)分。按多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)(PSG)的睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)分為輕度OSAHS組(AHI 5～<15次/h)20例、中度OSAHS組(AHI 15～<30次/h)17例、重度OSAHS組(AHI≥30次/h)30例。并將14例行PSG的健康人群作為正常對(duì)照組(AHI <5次/h)，男8例、女6例，年齡20～72(47.98±13.14)歲,體質(zhì)量指數(shù)(23.75±3.24)kg/m2，頸圍(33.08±3.30)cm，胸圍(94.15±8.22)cm，腰圍(88.81±11.34)cm，ESS(7.86±3.46)分。排除其他疾病，如慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺間質(zhì)纖維化、惡性腫瘤、結(jié)締組織病、結(jié)核病、嚴(yán)重心力衰竭、代謝性疾病及肝、腎功能不全者,近期采用手術(shù)、激素、營(yíng)養(yǎng)支持治療者。各組年齡、性別有可比性。

1.2 PSG 在正式進(jìn)行PSG前，運(yùn)用ESS評(píng)估患者白天嗜睡程度，該評(píng)估在安靜環(huán)境里由受試者獨(dú)立完成，并測(cè)量頸圍、胸圍、腰圍，計(jì)算體質(zhì)量。 PSG：采取美國(guó)飛利浦Alice 5 多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，監(jiān)測(cè)腦電圖、眼電圖、下頜肌電圖、心電圖、口鼻氣流、胸部呼吸運(yùn)動(dòng)、腹部呼吸運(yùn)動(dòng)、血氧飽和度、體位、鼾聲、脛前肌電圖等。監(jiān)測(cè)時(shí)間自晚9點(diǎn)至次日晨6點(diǎn)共9 h。

1.3 血清KL-6、SP-A、SP-D水平的檢測(cè) 采用ELISA法。所有研究對(duì)象在行PSG后的次日晨6時(shí),空腹抽取外周靜脈血4 mL，注入非抗凝管中，室溫靜置30 min后，4 ℃、3 000 r/min離心10 min，留取血清，用于檢測(cè)KL-6、SP-A、SP-D水平。KL-6、SP-A、SP-D試劑盒均由美國(guó) R&D公司提供。

2 結(jié)果

2.1 各組PSG指標(biāo)比較 與正常對(duì)照組比較，輕、中、重度OSAHS組AHI、最長(zhǎng)呼吸暫停/低通氣時(shí)間(LA/HT)均升高，重度OSAHS組夜間最低血氧飽和度(LSaO2)降低，血氧飽和度小于90%的時(shí)間(T<90%)延長(zhǎng)(P均<0．05)。與輕度OSAHS組比較，中度OSAHS組AHI升高，重度OSAHS組AHI、LA/HT、T<90%均升高，LSaO2降低(P均<0．05)。與中度OSAHS組比較，重度OSAHS組AHI、LA/HT、T<90%均升高，LSaO2降低(P均<0．05)。詳見(jiàn)表1。

表1 各組PSG指標(biāo)比較

注：與正常對(duì)照組比較，aP<0．05；與輕度OSAHS組比較，bP<0．05；與中度OSAHS組比較，cP<0．05。

2.2 各組血清KL-6、SP-A、SP-D水平比較 詳見(jiàn)表2。

表2 各組血清KL-6、SP-A、SP-D水平比較

注：與正常對(duì)照組比較，aP<0．05；與輕度OSAHS組比較，bP<0．05；與中度OSAHS組比較，cP<0．05。

2.3 各組血清KL-6、SP-A、SP-D水平與PSG指標(biāo)之間的關(guān)系 患者血清SP-A、SP-D水平與AHI呈正相關(guān)(rs分別為0.339、0.278,P均<0．05)，與LA/HT呈正相關(guān)(rs分別為0.209、0.147，P分別為0.001、0.041)，SP-D水平與T<90%呈正相關(guān)(rs=0.217，P<0．05)。KL-6與各指標(biāo)均無(wú)相關(guān)性(P均>0．05)。

3 討論

OSAHS是睡眠時(shí)反復(fù)發(fā)生的上呼吸道塌陷阻塞，導(dǎo)致慢性間斷缺氧及睡眠片段化，患者常表現(xiàn)為打鼾、自覺(jué)窒息而覺(jué)醒、白天睡眠增多、注意力難以集中等。慢性間斷缺氧致氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，損傷肺泡屏障致肺泡部位內(nèi)皮細(xì)胞損傷、上皮細(xì)胞滲透性增高，最終導(dǎo)致肺部損害。人的肺泡上皮主要由肺泡Ⅰ型及Ⅱ型上皮細(xì)胞構(gòu)成。肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞較多，被認(rèn)為是合成和分泌肺泡表面活性物質(zhì)(PS)及其相關(guān)蛋白的主要細(xì)胞，同時(shí)具有增殖分化、肺水轉(zhuǎn)運(yùn)、參與固有免疫等多種功能，對(duì)維持肺泡結(jié)構(gòu)和功能及局部環(huán)境穩(wěn)態(tài)具有重要作用[8,9]。

KL-6是一種高分子黏液素樣蛋白，主要在Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞頂端及支氣管上皮細(xì)胞表達(dá)[10]。在生理情況下，外周血循環(huán)中KL-6水平很低。本研究發(fā)現(xiàn)，OSAHS患者血清KL-6水平高于正常對(duì)照組。其機(jī)制可能是OSAHS患者夜間間斷缺氧及再氧合損傷肺泡屏障致肺泡部位內(nèi)皮細(xì)胞損傷,使KL-6分泌增多，同時(shí)肺泡上皮及內(nèi)皮功能失調(diào)，引起局部血管內(nèi)皮通透性升高，導(dǎo)致KL-6滲透入血增多，使外周血循環(huán)中KL-6水平升高[11]。因此，KL-6可作為反映OSAHS患者肺泡上皮細(xì)胞受損的指標(biāo)。在氧化損傷的肺組織中KL-6表達(dá)升高，其對(duì)肺泡具有保護(hù)作用。

PS是復(fù)雜的脂類蛋白質(zhì)混合物，其中蛋白質(zhì)約10%。蛋白質(zhì)主要為肺泡表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白(SP)，分布于支氣管表面和肺泡氣液界面的單分子層， 能起到降低肺泡表面張力、維持肺內(nèi)穩(wěn)態(tài)、參與局部防御、調(diào)節(jié)肺部免疫和炎性反應(yīng)的作用，具有肺特異性，可用來(lái)評(píng)價(jià)肺氣血屏障的完整性[12]。SP-A和SP-D是水平較豐富的PS，主要由肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞及下呼吸道的Clara細(xì)胞分泌，在其他的組織及腺體上皮細(xì)胞也少量分泌[13]，屬凝集素家族。SP-A和SP-D在肺部起天然免疫防御作用,通過(guò)調(diào)理吞噬結(jié)合過(guò)敏原、與多種免疫分子相互作用來(lái)調(diào)節(jié)急慢性炎癥反應(yīng)。健康人因肺泡-毛細(xì)血管屏障完好無(wú)損，可以阻止SP-A和SP-D進(jìn)入血液循環(huán)，血清中只能檢測(cè)到少量SP-A和SP-D。本研究發(fā)現(xiàn)，OSAHS患者血清SP-A、SP-D水平高于正常對(duì)照組。機(jī)制可能為慢性間歇性低氧，導(dǎo)致氧化應(yīng)激產(chǎn)生大量致炎因子，包括TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等，這些炎癥介質(zhì)刺激Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分裂增殖，SP-A、SP-D合成增多，其合成速率大于消耗速率，使肺組織SP-A、SP-D水平維持在高水平，以增強(qiáng)肺局部免疫能力[14]；同時(shí)某些致炎因子又可直接損傷血管內(nèi)皮，使血管通透性升高，從而使肺組織SP-A和SP-D滲出到血液中，血清SP-A、SP-D水平增加。

患者血清SP-A、SP-D水平與AHI、LA/HT有明顯的相關(guān)性，呼吸暫停次數(shù)越多、呼吸暫停時(shí)間越長(zhǎng)、血氧飽和度越低，血清SP-A、SP-D水平越高，可能與肺損傷時(shí)支氣管肺泡中的SP分泌增加，以減輕氣道壁萎陷及防止液橋形成等來(lái)降低氣道阻力和維持小氣道穩(wěn)定有關(guān)。SP-A、SP-D在肺組織的表達(dá)遠(yuǎn)高于其他組織，并且其水平和肺損傷程度密切相關(guān)，肺部損傷越重血清中SP-A、SP-D水平就越高，檢測(cè)患者血循環(huán)中SP-A、SP-D水平可以判斷肺損傷程度，預(yù)測(cè)疾病轉(zhuǎn)歸情況[15]。本研究中OSAHS患者病情嚴(yán)重程度與KL-6無(wú)相關(guān)性，可能與樣本量小有關(guān)，期待大樣本多中心研究加以證實(shí)。

綜上，OSAHS患者血清KL-6、SP-A、 SP-D水平升高，SP-A、 SP-D水平與患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)，同時(shí)KL-6、SP-A、SP-D可能參與OSAHS所致肺損傷過(guò)程，此為臨床預(yù)防和治療OSAHS繼發(fā)性肺部疾病提供了依據(jù)。

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貴州省科技合作計(jì)劃資助項(xiàng)目(黔科合LH字[2015]7127號(hào))；貴州省人民醫(yī)院青年基金資助項(xiàng)目(GZSYQN[2016]16號(hào))；貴州省科技支撐計(jì)劃社會(huì)發(fā)展攻關(guān)項(xiàng)目(黔科合SY字[2009]3052)。

趙丹(E-mail：zhaodan800@foxmail.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.29.017

R473.5

B

1002-266X(2017)29-0052-03

2017-01-07)