朱 勇，卜令雷，馬靈珍，楊文峰

（亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 藥學(xué)院，安徽 亳州 236800）

亳白芷鮮切片加工技術(shù)的研究

朱 勇，卜令雷，馬靈珍，楊文峰

（亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 藥學(xué)院，安徽 亳州 236800）

目的：優(yōu)選亳州地產(chǎn)藥材白芷最佳鮮切片工藝，為進(jìn)一步研究白芷的新型加工工藝積累資料。方法：以白芷傳統(tǒng)加工工藝為參考，以水分、浸出物、色澤、歐前胡素和異歐前胡素的總含量為指標(biāo)，對(duì)新采白芷進(jìn)行鮮切片研究，針對(duì)切片時(shí)機(jī)與干燥方法、切片厚度與干燥時(shí)間進(jìn)行優(yōu)選，并與傳統(tǒng)工藝指標(biāo)比對(duì)。結(jié)果：亳白芷鮮切片最佳工藝是取新產(chǎn)干凈鮮白芷，在60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘8 h，冷卻至室溫。

亳白芷；歐前胡素；異歐前胡素；鮮切片

白芷，系古本草傳統(tǒng)藥用白芷，為傘形科當(dāng)歸屬植物白芷Angelica dahurica（Fisch.ex Hoffm.）Benth.et Hook．f的干燥根。因其根呈圓錐形，斷面白色，故名曰白芷。白芷性溫，氣芳香，味辛，微苦，具有散風(fēng)除濕、通竅止痛、消腫排膿的作用，臨床廣泛應(yīng)用[1]。亳州地區(qū)所產(chǎn)白芷被稱為亳白芷，是該地區(qū)的道地藥材之一，近年來(lái)種植白芷面積達(dá)30～40 km2，是白芷的主產(chǎn)區(qū)。[1]由于白芷個(gè)大且淀粉含量高，所以干燥時(shí)間長(zhǎng)且易霉變，當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)常常采用硫磺熏蒸避免霉變，不過(guò)這嚴(yán)重影響了白芷的質(zhì)量。本研究通過(guò)鮮切片法直接在產(chǎn)新后切片干燥，試從根源上改變這一現(xiàn)狀，提高白芷飲片的質(zhì)量。

1 儀器、試劑和材料

1.1 儀器

電熱恒溫干燥箱（202-0型，天津泰斯特儀器有限公司）；高速中藥粉碎機(jī)（111型，浙江瑞安市永歷制藥機(jī)械有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（HH-2型，浙江金壇晶玻試驗(yàn)儀器廠）；蒸發(fā)皿；干燥器；安捷倫1260超高壓液相色譜儀（二元泵，在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱）；電子天平（AUW220D，日本島津）；超聲波清洗儀（SK250HP，上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑

歐前胡素（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：CFLG-LCC5）；異歐前胡素（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：ERSN-W9SH）；色譜乙腈（美國(guó)天地）；色譜甲醇（美國(guó)天地）；超純水（實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)，Direct-Q5，法國(guó)默克密理博公司制備）；其他試劑為分析純。

1.3 材料

相關(guān)實(shí)驗(yàn)選取實(shí)驗(yàn)原料為傘形科當(dāng)歸屬植物白芷的干燥根，于2016年10月在亳州市不同白芷藥材產(chǎn)區(qū)采收樣品，經(jīng)毫州職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院中藥教研室主任馬靈珍教授鑒定，所采收的樣品都是傘形科當(dāng)歸屬植物白芷的干燥根。

2 方法與結(jié)果

2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》一部規(guī)定,對(duì)白芷藥材的質(zhì)量檢測(cè)指標(biāo)是對(duì)白芷中歐前胡素的含量進(jìn)行測(cè)定，因白芷中成分較多，僅以歐前胡素的含量為指標(biāo)略顯不足，所以在此選取了白芷中含量較高的歐前胡素及異歐前胡素兩種香豆素類成分為檢測(cè)指標(biāo)，并根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)歐前胡素的測(cè)定方法進(jìn)行了部分改進(jìn)，并建立了歐前胡素及異歐前胡素兩種香豆素類成分的分離測(cè)定方法。[2-3]

2.1 實(shí)驗(yàn)條件

2.1.1 色譜柱與進(jìn)樣量

使用反相 C18色譜柱：色譜柱的型號(hào)為Aglient Zorbax SB-C18，色譜柱的規(guī)格為（4.60×250 mm，5 μm），柱溫控制為25 ℃，樣品及對(duì)照品的進(jìn)樣量為20 μL。[4]

2.1.2 流動(dòng)相

經(jīng)過(guò)參考相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)實(shí)際的試驗(yàn)進(jìn)行選擇，最終以乙腈∶水（70%∶30%）為流動(dòng)相，流速1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm。[5]

2.2 對(duì)照品和供試品溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥12 h的歐前胡素對(duì)照品5.05 mg、異歐前胡素對(duì)照品2.02 mg，置于50 mL容量瓶中，用甲醇作溶劑溶解，定容至刻度，即得混合對(duì)照品溶液。進(jìn)樣后得出對(duì)照品溶液的HPLC圖譜（見(jiàn)圖1）。2.2.2 供試液溶液的制備

圖 1 對(duì)照品歐前胡素和異歐前胡素的HPLC圖譜

精密稱取白芷粉末（過(guò)三號(hào)篩）0.4050 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇45 mL，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）1 h，取出，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液，然后用0.45 μm的微孔濾膜過(guò)濾，即得。其HPLC圖譜（見(jiàn)圖2）。

圖 2 白芷樣品溶液的HPLC圖譜

2.3 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

2.3.1 方法學(xué)考察

分別精密吸取2.2.1所配制的混合對(duì)照品溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL置于10 mL容量瓶中，分別加甲醇定容至刻度。設(shè)置進(jìn)樣量20 μL，液相色譜儀依次進(jìn)樣，依法測(cè)定。[5]以混合對(duì)照品的濃度（以10 mL試液所含2.2.1所配制的混合對(duì)照品溶液體積表示）為橫坐標(biāo)（X），色譜峰的面積值為縱坐標(biāo)（Y），同時(shí)得出兩種對(duì)照品的回歸方程：歐前胡素 Y=1250.7X+106.53，r＝0.9997；異歐前胡素 Y=420.06X+34.575，r=0.9997。結(jié)果表明：歐前胡素在5.1～50.5 μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，異歐前胡素在2.0～20.2 μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。

表1 歐前胡素、異歐前胡素線性范圍

2.3.2 精密度試驗(yàn)

取2.2.1所配制的混合對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，進(jìn)樣量為10 μL，同時(shí)測(cè)定歐前胡素和異歐前胡素2種成分的色譜峰面積。得出RSD值分別為1.2 %，1.83%，結(jié)果表明所選擇的實(shí)驗(yàn)條件的精密度符合要求。

2.3.3 穩(wěn)定性考察

取2.2.2所制備的供試樣品溶液，放置0 h，2 h，4 h，8 h，12 h，24 h，48 h后分別進(jìn)樣，并按2.1色譜條件測(cè)定其歐前胡素和異歐前胡素的峰面積。其RSD值分別為1.02%，1.16%,說(shuō)明所制備的樣品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.4 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一采收區(qū)所采收的白芷樣品，根據(jù)2.2.2方法制備樣品溶液，并按2.1色譜條件對(duì)樣品中歐前胡素、異歐前胡素的含量進(jìn)行測(cè)定，其RSD值分別為1.25%，0.483%，結(jié)果表明白芷樣品的重復(fù)性很好。

2.3.5 回收率試驗(yàn)

取已知?dú)W前胡素、異歐前胡素兩種成分含量的白芷樣品各5份，精密稱定，精密加入兩種對(duì)照品，按2.2.2樣品處理制備樣品溶液，并按2.1色譜條件測(cè)定方法測(cè)定其兩種成分含量，測(cè)定結(jié)果：歐前胡素平均回收率為98.56%、RSD為1.121%，異歐前胡素為97.98%、RSD為1.3723%，結(jié)果表明白芷樣品的回收率很好。

2.3.6 系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)

按照該色譜條件分別注入甲醇的對(duì)照品溶液及供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，在該色譜條件下，按照甲醇的色譜峰計(jì)算，理論塔板數(shù)較高、拖尾因子及分離度均符合規(guī)定?？紤]到不同色譜柱的性能以及流動(dòng)相比例等條件的差異，理論板數(shù)按甲醛色譜峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

2.4 亳白芷產(chǎn)地鮮切片技術(shù)的研究

2.4.1 亳白芷鮮切片的干燥方法及切片時(shí)機(jī)的優(yōu)化

2.4.1.1 樣品處理

取譙城區(qū)譙東鎮(zhèn)大黃莊的新產(chǎn)鮮白芷去除泥土，去除細(xì)根和雜質(zhì)，用清水沖洗干凈，取8份樣品分別作如下處理：1）稱取1 000 g，切0.45 cm厚片，直接在太陽(yáng)下曬干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；2）稱取1 000 g，曬去30%重量的水分，切0.45 cm厚片，直接在太陽(yáng)下曬干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；3）稱取1 000 g，曬去60%重量的水分，切0.45 cm厚片，直接在太陽(yáng)下曬干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；4）稱取1 000 g，曬去70%重量的水分，切0.45 cm厚片，直接在太陽(yáng)下曬干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；5）稱取1 000 g，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；6）稱取1 000 g，在60℃烘去30%重量的水分，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；7）稱取1 000 g，在60 ℃烘去60%重量的水分，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；8）稱取1 000 g，在60 ℃烘去70%重量的水分，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩。

2.4.1.2 試驗(yàn)方法

將上述不同產(chǎn)區(qū)的白芷樣品粉末，按2.2.2實(shí)驗(yàn)條件配制樣品溶液，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測(cè)定水分、浸出物、歐前胡素和異歐前胡素含量。結(jié)果見(jiàn)表2和圖3。

表2 亳白芷鮮切片不同干燥方法及切片時(shí)機(jī)下質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果/%

圖 3 鮮切片厚度及干燥溫度下白芷樣品溶液的HPLC圖譜

通過(guò)對(duì)亳白芷鮮藥材兩個(gè)不同干燥方法各自又有4種不同切片時(shí)機(jī)的9批樣品的質(zhì)量考察，分別通過(guò)水分、灰分、浸出物及含量測(cè)定等方面進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)8個(gè)樣品均能達(dá)到2015版《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求，其中在8個(gè)樣品中灰分?jǐn)?shù)據(jù)比較接近，差別不大；水分略有差別，水分檢測(cè)數(shù)據(jù)表明：60 ℃熱風(fēng)烘烤法略低于晾曬干燥法，但兩種干燥法獲得飲片含水量均在9%左右，差別不大，符合12%的標(biāo)準(zhǔn)；在浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量測(cè)定數(shù)據(jù)表現(xiàn)出相同的規(guī)律：7號(hào)樣品＞3號(hào)樣品＞6號(hào)樣品＞8號(hào)樣＞4號(hào)樣品＞5號(hào)樣品＞2號(hào)樣品＞1號(hào)樣品，由此可知：7號(hào)樣品工藝最優(yōu)，即取凈選后鮮白芷1 000 g在60 ℃下，烘去60%重量的水分切片干燥。2.5 亳白芷鮮切片厚度及干燥時(shí)間的優(yōu)化

白芷鮮切片的厚度及其干燥所用時(shí)間是影響白芷質(zhì)量的重要因素。實(shí)驗(yàn)將白芷鮮切片的厚度和干燥時(shí)間分別設(shè)成3個(gè)等級(jí)9種情況進(jìn)行試驗(yàn)。

2.5.1 樣品處理

取譙城區(qū)譙東鎮(zhèn)大黃莊的新產(chǎn)鮮白芷去除泥土，去除細(xì)根和雜質(zhì)，用清水沖洗干凈，取9份樣品分別作如下處理：1）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.25 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘6 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；2）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.25 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘8 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；3）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.25 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘10 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；4）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘6 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；5）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘8 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；6）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘10 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；7）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.45 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘6 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；8）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.45 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘8 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩；9）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.45 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘10 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過(guò)三號(hào)篩。

2.5.2 試驗(yàn)方法

將上述不同產(chǎn)區(qū)的白芷樣品粉末，按2.2.2 配制樣品溶液，測(cè)定水分、浸出物、歐前胡素和異歐前胡素含量。結(jié)果見(jiàn)表3和圖4。

表3 亳白芷不同鮮切片厚度及干燥時(shí)間的質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果/%

圖 4 不同鮮切片厚度及干燥時(shí)間下白芷樣品溶液的HPLC圖譜

上述檢測(cè)數(shù)據(jù)表明：除7號(hào)樣品外均能達(dá)到2015版《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求，但只有1、2、3、5、6樣品水分含量較低干燥效果較理想；浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量測(cè)定數(shù)據(jù)表現(xiàn)出相同的規(guī)律：7號(hào)樣品＞4號(hào)樣品＞5號(hào)樣品＞1號(hào)樣＞8號(hào)樣品＞6號(hào)樣品＞9號(hào)樣品＞2號(hào)樣＞3號(hào)樣品，浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量隨著鮮切片厚度增加而增大；在同等切片厚度條件下熱風(fēng)烘培時(shí)間越長(zhǎng)浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量越低；考慮水分含量因素，發(fā)現(xiàn)5號(hào)樣品水分含量符合標(biāo)準(zhǔn)的樣品中浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量最高。

2.6 工藝驗(yàn)證

按照2.4和2.5確定的亳白芷藥材的亳白芷鮮切片最佳工藝為：取亳新產(chǎn)鮮白芷去除泥土，去除細(xì)根和雜質(zhì)，用清水沖洗干凈，稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘8 h，冷卻至室溫。制備三批樣品，分別按照上述方法測(cè)定其指標(biāo)性成分含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 亳白芷鮮切片工藝三批驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果/%

結(jié)果表明，三批驗(yàn)證試驗(yàn)樣品的測(cè)定結(jié)果與2.4和2.5測(cè)定結(jié)果接近，優(yōu)選出的白芷藥材的鮮切片最佳工藝可行、穩(wěn)定。

3 結(jié)論與討論

亳白芷鮮切片最佳工藝為：取亳新產(chǎn)鮮白芷去除泥土，去除細(xì)根和雜質(zhì)，用清水沖洗干凈，稱取1 000 g，60℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風(fēng)烘8 h，冷卻至室溫。研究數(shù)據(jù)表明，鮮切片的白芷飲片質(zhì)量明顯優(yōu)于傳統(tǒng)加工所得白芷飲片的質(zhì)量，且可以有效根除硫磺熏蒸。不過(guò)，白芷鮮切片技術(shù)的推廣需要飲片加工企業(yè)直接與中藥材種植戶對(duì)接，即：產(chǎn)新白芷直接送到飲片加工企業(yè)進(jìn)行鮮切片加工。若當(dāng)?shù)卣谡呱线M(jìn)行宏觀協(xié)調(diào)，將會(huì)大大促進(jìn)亳白芷鮮切片技術(shù)產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。

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[2]黃新蘋(píng)，包淑云，楊隆河，等. 中藥川白芷的化學(xué)成分研究[J].河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2011（4）：88-90.

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（責(zé)任編輯 張 鐵）

Processing Technology Research of Fresh Bozhou Angelica Dahurica Slices

ZHU Yong, PU Linglei, MA Lingzhen, YANG Wenfeng (School of Pharmacy, Bozhou Vocational and Technical College, Bozhou Anhui 236800, China)

Purpose: The paper accumulates new processing techniques for further study of Angelica Dahurica process using fresh cut slice from Bozhou. Method: The timing, drying method, slice thickness and drying time of fresh newly-collected Bozhou Angelica Dahurica slices are optimized by using moisture content, extract, color, total content of Imperatorin and Isoimperatorin as quality indicators. Results: The optimal processing conditions of clean newly-produced Bozhou Angelica Dahurica slices are as follows: removing 60% moisture content at 60 ℃, 0.35cm slice thickness, heated air drying for 8h at 60 ℃, and cooling to room temperature.

Angelica Dahurica from Bozhou; Imperatorin; Isoimperatorin; fresh slices

R282.4

A

1674 - 9200（2017）03 - 0015 - 05

2016 - 11 - 29

朱勇，男，安徽亳州人，亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院助教，碩士，主要從事中藥材的檢測(cè)與加工工藝研究；卜令雷，男，安徽毫州人，毫州職業(yè)技術(shù)學(xué)院助教，碩士，主要從事中藥材栽培與鑒定研究；馬靈珍，男，安徽毫州人，毫州職業(yè)技術(shù)學(xué)院副教授，碩士，主要從事中藥材炮制工藝研究。