江衛(wèi)紅,范世珍,莫 莉,黃炳坤

(深圳市福田區(qū)中醫(yī)院,廣東 深圳518034)

深圳市福田區(qū)18749例婦女宮頸人乳頭瘤病毒分型檢測結(jié)果的分析

江衛(wèi)紅,范世珍,莫 莉,黃炳坤

(深圳市福田區(qū)中醫(yī)院,廣東 深圳518034)

目的 分析2011年至2015年18749例婦女生殖道人乳頭瘤病毒(Human Papilloma Virus,HPV)分型檢測結(jié)果。方法 對在深圳市福田區(qū)居住的18749例婦女采用PCR+膜雜交法HPV分型檢測，共21型，其中14種高危型人乳頭瘤病毒(High Risk Human Papilloma Virus,HR-HPV)及7種低危型人乳頭瘤病毒(Low Risk Human Papilloma Virus,LR-HPV)，并按年齡段進行分析。結(jié)果 HPV總感染率為18.35%，LR-HPV感染率為6.32%，HR-HPV感染率為14.36%。前3位LR-HPV亞型為CP8304型、53型和6型，3者在LR-HPV感染人群中構(gòu)成比共占78.35%。前3位HR-HPV亞型為52型、16型、58型，3者在HR-HPV感染人群中構(gòu)成比共占50.54%。經(jīng)年齡標化，35-54歲此年齡段HR-HPV感染率最低，為12.10%-12.51%，16-34歲HR-HPV感染率最高，55-80歲HR-HPV感染率較35-54歲有所升高，此3年齡段之間HR-HPV感染率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。HPV多重基因亞型混合感染發(fā)生率以16-19歲最高，約14.55%；其次為20-29歲和55-64歲，約4%水平；最低為30-54歲和65-80歲，為2%水平。多重基因混合感染中多以高危型基因聯(lián)合其他基因型感染為主，混合型感染中HPV亞型前10名排序：52、CP8304、53、58、16、39、51、33、6、18型。結(jié)論 深圳市福田區(qū)35-54歲HR-HPV感染率較穩(wěn)定，為12.10%-12.51%，最能代表人群感染水平。常見HR-HPV亞型前3位為52、16、58， HPV18 不占主導地位。低年齡組的HPV感染率和多重基因亞型混合感染率高，而多重基因混合感染中以HR-HPV亞型聯(lián)合其他基因型感染為主。

人乳頭狀瘤病毒；分型檢測；感染率

(ChinJLabDiagn,2017,21:1201)

宮頸癌居全球婦女常見惡性腫瘤的第3位，目前已公認HPV感染是宮頸癌的主要病因[1]。HPV亞型眾多，目前已發(fā)現(xiàn)200多種，每種亞型致病力和分布都不同。在世界不同地區(qū)，HPV感染率及亞型分布存在顯著的差異[2]，了解其流行病學特征，可對今后各個地區(qū)制定宮頸癌篩查策略以及研發(fā)應(yīng)用HPV疫苗具有重大的意義。深圳市是沿海地區(qū)，是中國的經(jīng)濟特區(qū)，是個移民城市，人口眾多，組成復雜。本文對深圳市福田區(qū)18749例婦女HPV分型檢測結(jié)果進行分析，以期為本地區(qū)的宮頸癌防治工作提供數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料

選取2011年1月至2015年12月，對在深圳市福田區(qū)居住的18749例婦女以免費篩查、門診機會性篩查、體檢、婦科住院手術(shù)患者術(shù)前篩查方式進行HPV分型檢測，無子宮及宮頸手術(shù)史、目前非妊娠、無骨盆放療史，2年內(nèi)未進行過宮頸癌篩查者。

1.2 方法

由我院婦科門診、住院部、體檢科臨床工作5年以上的人員進行婦科檢查及采集標本工作，進行HPV DNA檢測。

PCR+膜雜交法HPV亞型檢測：先用PCR法檢測樣本中是否有可倍增的HPV DNA，再采用膜雜交法對21種HPV亞型(14種高危型16、18、31、33、35、39、45、51、52，56、58，59、66、68；7種低危型6，11、42、43、44、53、CP8304)進行檢測。試劑來源于廣東省凱普生物化學有限公司，檢測過程按產(chǎn)品說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學方法

應(yīng)用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學分析。以感染率描述HPV及HR-HPV、LR-HPV的感染情況,同時計算各年齡段中HPV及HR-HPV、LR-HPV的感染率。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 HPV亞型感染狀況

18749例婦女中，檢測的21種 HPV基因亞型均被檢出。14種HR-HPV亞型感染率順位見表1。HPV感染及多重基因混合感染情況見表2。

不論單一亞型或混合亞型感染，LR-HPV前3型為CP8304、53型和6型，3者在LR-HPV感染人群中構(gòu)成比共占78.35%(1024/1307)。HPV52、HPV16型和HPV58型為深圳市福田區(qū)最常見的3種HR-HPV亞型，3者在HR-HPV感染人群中構(gòu)成比共占50.54%(1670/3304)。多基因混合感染中多以高危型基因聯(lián)合其他基因型感染為主，混合型感染中HPV亞型前10名排序：52、CP8304、53、58、16、39、51、33、6、18。

表1 深圳市福田區(qū)14種HR-HPV亞型感染率

表2 HPV感染及多重基因混合感染情況

2.2 HPV亞型的年齡分布狀況

18749例婦女中，年齡范圍16-80歲，平均年齡(39.2±10.5)歲，分為11個年齡段：16-19歲、20-24歲、25-29歲、30-34歲、35-39歲、40-44歲、45-49歲、50-54歲、55-59歲、60-64歲、65-80歲。HPV感染率及各亞型感染率按年齡段標化，見圖1及表3。從圖表可看出，年齡標化HPV感染率與年齡標化HR-HPV變化一致，各年齡組HR-HPV感染率經(jīng)統(tǒng)計學比較，16-、20-兩年齡組相當，高達22%以上，16-、20-、25-、30-、35-各年齡組間有顯著差異(P<0.01),且呈直線下降趨勢，降至12%左右；而35-至50-各年齡組間無顯著差異(P>0.05),基本穩(wěn)定在12%左右；55-以上3個年齡組感染率又有所上升，約16%(P<0.01),但低于16-、20-組的22%(P<0.01)。可見HR-HPV感染在30歲前年輕婦女中最高，35-54歲HR-HPV感染率較穩(wěn)定，HR-HPV感染率12.10%-12.51%，最能代表人群感染水平。55歲后感染水平有所上升，但仍低于30歲前年輕婦女。各年齡組LR-HPV感染率經(jīng)統(tǒng)計學比較，16-、20-、25-、30-年齡組依次呈逐漸下降趨勢，有顯著性差異(P<0.01);30-歲及以后各組穩(wěn)定在6%左右較低水平，各年齡組間比較無顯著差異(P>0.05)。說明30歲以前LR-HPV感染率最高，30歲下降，穩(wěn)定在6%左右較低水平。另外，不同年齡組 HPV 多重基因亞型混合感染經(jīng)統(tǒng)計學比較分為3個感染水平年齡段：16-歲最高，約14.55%；其次為20-、25-和55-、60-歲四組，約4%水平；最低為其他各年齡組，為2%水平。三個水平混合感染比較有顯著性差異(P<0.01)。

圖1 深圳市福田區(qū)不同年齡段婦女HPV感染率

總體16?19(%)20?24(%)25?29(%)30?34(%)35?39(%)40?44(%)45?49(%)50?54(%)55?59(%)60?64(%)65?80(%)HPV感染率(%)18．3529．0928．9423．62I18．9316．4416．4115．8617．5119．5617．2118．97LR?HPV感染率(%)6．3218．1810．508．766．235．506．056．297．506．736．884．50HR?HPV感染率(%)14．3625．5022．6018．0614．6812．5111．2411．3512．1016．9014．1516．40

3 討論

3.1 HPV亞型的地區(qū)分布特點

宮頸癌是嚴重威脅全球婦女生命健康的惡性腫瘤，已證實HPV的持續(xù)感染是導致宮頸癌的主要病因[1]。目前已發(fā)現(xiàn)的200多種HPV型別約有40種型別與生殖道感染有關(guān)?？芍聦m頸癌及其癌前病變被稱為HR-HPV，多與生殖道濕疣等良性病變有關(guān)被稱為LR-HPV[3]。在全球范圍內(nèi)，HPV16和HPV18的感染可導致將近70%的宮頸癌[4]，而HPV6和HPV11的感染可導致將近90%的生殖器疣[5]。

在中國，總體上較易感的HPV型別依次為HPV16、HPV18、HPV58、HPV33、HPV52、HPV31、HPV45、HPV9、HPV6和HPV35。其中，又以HPV 16為主，感染率為58.7%，而HPV18和HPV58是除HPV16型以外最常見的兩個型別[6]。流行病學調(diào)查研究表明，不同的HPV型別的感染存在明顯的地域性差異，不同地區(qū)的HPV易感型別不同[2]且不同型別可引起的疾病及致病程度各不相同[7]。我國地域遼闊，不同民族和地區(qū)甚至同一個省的不同城市之間HPV的流行情況也存在著較大的差異[8-10]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，深圳市福田區(qū)HR-HPV前三位亞型為52、16、58，3者在高危型感染人群中構(gòu)成比共占50.54%。LR-HPV前三位為CP8304、53、6型，3者在LR-HPV感染人群中構(gòu)成比共占78.35%。本研究HR-HPV前3位亞型與王月云[11]報道的深圳市前3位HR-HPV亞型為HPV16、52、58相同，只是16和52型順位改變。Bao等[12]對亞洲的HPV亞型研究并進行薈萃分析后發(fā)現(xiàn)，亞洲最常見的HPV亞型為16、58、33、52和18型。國內(nèi)對HPV感染高發(fā)地區(qū)山西省的調(diào)查發(fā)現(xiàn)該地區(qū)HPV優(yōu)勢亞型為16、58、52、33和18型[13]， Chan等[14]對香港地區(qū)婦女的調(diào)查顯示，HPV感染優(yōu)勢亞型為16、58、11、CP8304、33和18型。由此可見，本研究結(jié)果符合亞洲地區(qū)前3位HR-HPV亞型為16、HPV52、HPV58，只是順序變?yōu)镠PV52、HPV16、HPV58。LR-HPV前3位為HPV-CP8304、53型、6型占優(yōu)勢的分布特點。

本研究人群 HPV總感染率為18.35%，LR-HPV感染率為6.32%，HR-HPV感染率為14.36%。HR-HPV感染率與我國報道的HPV 陽性感染率[15]基本相近，但低于山西襄垣[13],高于國外有關(guān)文獻報道[16，17]，感染率的不同可能與檢測方法，地域、人群和種族，經(jīng)濟狀態(tài)及衛(wèi)生條件存在差異有關(guān)。

3.2 HPV亞型的年齡分布特點

年齡是宮頸癌和HPV感染的相關(guān)因素[18]。有研究顯示，HPV在年輕婦女中感染率最高，其后，隨年齡增長而逐漸下降[19]。

本研究結(jié)果顯示，年齡標化HPV感染率與年齡標化HR-HPV感染率變化一致，HR-HPV感染率顯示三個年齡段水平：在30歲前年輕婦女中最高；35-54歲較穩(wěn)定，HR-HPV感染率12.10%-12.51%，最能代表人群感染水平；55歲后感染水平有所上升，但仍低于30歲前年輕婦女。LR-HPV感染率30歲以前最高，30歲后下降，穩(wěn)定在6%左右較低水平?？赡茉颍孩贆z測的型別少；②LR-HPV致病力低，結(jié)構(gòu)上不易整合至宿主細胞，易清除；③30歲后婦女對LR-HPV產(chǎn)生了一定的免疫力。

本研究結(jié)果與De Sanjose[19]等薈萃分析結(jié)果相似，只是年齡段稍有所區(qū)別，其分析結(jié)果為HPV感染率在<35歲的年輕婦女中最高，并隨年齡增加而降低；在非洲、歐洲、美國等部分地區(qū)，>55歲的婦女中，存在HPV的第2個感染高峰。本研究結(jié)果也提示>55歲老年婦女HR-HPV感染率有所增高，且有統(tǒng)計學意義。發(fā)生原因目前尚不清楚?？赡苡幸韵聨追矫嬖颍孩僭谥欣夏陭D女中，可能由于絕經(jīng)后體內(nèi)雌激素水平的急劇變化以及自身免疫能力的下降等，導致了機體清除HPV能力受損或抑制潛伏感染復發(fā)的能力下降，從而導致HPV感染高發(fā)。②該年齡段婦女性生活習慣的改變；③區(qū)域性或種族性的特殊表現(xiàn)。Castle等[20]的研究結(jié)果顯示，年齡>45歲的婦女中，HPV的持續(xù)感染遠大于新發(fā)HPV感染，因此，中老年婦女HPV感染率高也可能是由于HPV的持續(xù)感染或潛伏感染的復發(fā)所造成的?？傊霈F(xiàn)感染高峰的兩個年齡段應(yīng)引起重視。

3.3 HPV混合感染情況

HPV的多重基因亞型混合感染并不少見。但有關(guān)研究報道的比例不盡相同，這與研究的人群、地域和檢測方法不同有關(guān)[21]。

該組研究資料中，18749例婦女中混合感染情況：總的混合感染率4.55%，低于王月云[11]報道的深圳市混合感染率12.2%。不同年齡組 HPV 多重基因亞型混合感染發(fā)生率經(jīng)統(tǒng)計學比較分為3個感染水平年齡段：16-19歲最高，約14.55%；其次為20-29歲和55-64歲，約4%水平；最低為其他年齡段，約2%水平。LR-HPV混合感染率0.29%，HR-HPV混合感染率1.93%，HR-HPV+LR-HPV混合感染2.33%。多基因混合型感染中HPV亞型前10名排序：52、CP8304、53、58、16、39、51、33、6、18。HPV52亞型在多重亞型混合感染中占有最高優(yōu)勢比例，應(yīng)該引起足夠的重視。本研究人群顯示混合感染中多以高危型基因聯(lián)合其他基因型感染為主，無疑對HPV預防性疫苗的研制和有效應(yīng)用提出了更高的要求。

HPV亞型在女性人群中的分布是子宮頸癌防治中的熱點問題之一，涉及子宮頸癌及癌前病變的篩查，對子宮頸癌預防性疫苗的研究與應(yīng)用有直接影響。本研究結(jié)果對本地區(qū)新一代疫苗研制應(yīng)用和子宮頸癌的防治工作有著十分重要的意義。

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Analysis on the Detection Results of Cervical Papilloma Virus in 18749 Cases of Futian District,Shenzhen City

JIANGWei-hong,FANShi-zhen,MOLi,etal.

(FutianDistrictHospitalofTraditionalChineseMedicine,Shenzhen,Guangdong518034,China)

Objective To analyze the results of genotyping test of human papilloma virus (HPV) in 18749 women from 2011 to 2015.Methods A total of 18749 women who were residing in Futian District of Shenzhen were tested by PCR + membrane hybridization with HPV typing.Among them,14 were high risk human papilloma virus (HR-HPV) and 7 were low risk human papilloma virus (LR-HPV) ，and analyzed the result by age group.Results The total infection rate of HPV was 18.35%,the infection rate of LR-HPV was 6.32%,and the rate of HR-HPV infection was 14.36%.The first three LR-HPV subtypes were CP8304,53 and 6,and the three group accounted for 78.35% in the LR-HPV population.The first three HR-HPV subtypes were type 52,type 16,type 58,the three HR-HPV subgroups in the HR-HPV population assumed to 50.54%.The infection rate of HR-HPV was the lowest at the age of 35-54 years old,which was 12.10% -12.51%.The infection rate of HR-HPV between the three age groups (16-34,35-54 and 55-80)was statistically significant (P<0.01).The incidence of HPV multiple subtypes of mixed infection was highest at 16-19 years,about 14.55%;followed by 20-29 years old and 55-64 years old,about 4% level; the lowest was 30-54 years old and 65-80 years old,is 2%.In addition,the infection with HR-HPV subtypes combined with other subtypes is predominant in mixed infection of multiple genes.The top 10 subtype in the mixed HPV infection were:52,CP8304,53,58,16,39,51,33 ,6,18 type.Conclusion The infection rate of HR-HPV in 35-54 years old in Futian District,Shenzhen is 12.10% -12.51%,which is the most representative of the population infection level.HR-HPV subtype of the first three were 52,16,58,HPV18 is not dominant.The infection rate of HPV infection and multiple subtypes were higher in the low age group.In addition,the infection with HR-HPV subtypes combined with other subtypes is predominant in mixed infection of multiple genes.

human papilloma virus; typing detection; infection rate

1007-4287(2017)07-1201-05

R737.33

A

江衛(wèi)紅(1970-)，女，碩士學位，副主任醫(yī)師,主攻方向：宮頸病變。

2016-06-14)