徐紅，高萌，關(guān)欣，董浩，劉穎涵，金小涵，張成鴻，田燕

（大連醫(yī)科大學(xué)1.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室；2.藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室；3.2015級(jí)八年制臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)，遼寧大連116044）

槲皮素PLGA-TPGS納米粒在荷HCa-F細(xì)胞小鼠體內(nèi)肝靶向性的研究

徐紅1，高萌2，關(guān)欣2，董浩2，劉穎涵3，金小涵3，張成鴻1，田燕2

（大連醫(yī)科大學(xué)1.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室；2.藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室；3.2015級(jí)八年制臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)，遼寧大連116044）

目的評(píng)價(jià)槲皮素（QT）/香豆素6（C6）乳酸羥基乙酸共聚物-水溶性維生素E納米粒（QCPTN）在荷肝癌細(xì)胞HCa-F異位實(shí)體瘤小鼠體內(nèi)的分布及對(duì)小鼠肝臟的靶向性。方法建立RP-HPLC法測(cè)定QT在荷肝癌細(xì)胞HCa-F異位實(shí)體瘤小鼠血漿及肝、實(shí)體瘤、脾、肺、腎和心的濃度。將QCPTN和QT溶液（QTS）經(jīng)小鼠尾靜脈注射后，測(cè)定不同給藥時(shí)間后小鼠血漿及各組織中的QT濃度。采用相對(duì)靶向效率（Re）和靶向效率（Te），同時(shí)通過(guò)對(duì)各組織進(jìn)行冰凍切片、熒光倒置顯微鏡下觀察熒光納米粒QCPTN在各組織的分布，定性、定量地全面評(píng)價(jià)QCPTN對(duì)肝臟的靶向性。結(jié)果QCPTN在血漿、實(shí)體瘤、脾、肺、腎、心中的Te均＞3，表明QT在肝臟比血漿和其他組織勻漿中的曲線下面積（AUC）高3倍以上。冰凍切片圖可見在1 h的QCPTN組小鼠各組織中，肝中熒光分布面積最大。結(jié)論QCPTN對(duì)荷肝癌細(xì)胞HCa-F異位實(shí)體瘤小鼠肝臟有良好的靶向作用。

槲皮素/香豆素6乳酸羥基乙酸共聚物-水溶性維生素E納米粒；小鼠；實(shí)體瘤；體內(nèi)；肝；靶向性

槲皮素（quercetin，QT），化學(xué)名為3，5，7，3’，4’-五羥基黃酮，分布在近百種中草藥或其他植物的花、葉、果實(shí)中，具有抗炎、抗病毒、降糖、降壓及抗肝癌等作用［1-5］。

納米粒（nanoparticles，NPs）是常用的靶向給藥載體，在抗腫瘤方面具有一定的優(yōu)勢(shì)［6］。本研究以QT為模型藥物，以自制高分子材料乳酸羥基乙酸共聚物-維生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯（polylacticco-glycolic acid-D-α-tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate，PLGA-TPGS）為載體［7-8］，制備同時(shí)包載QT和香豆素6（coumarin-6，C6）的熒光納米粒槲皮素/香豆素6 PLGA-TPGS納米粒（QT/C6-loaded PLGA-TPGS nanoparticles，QCPTN），在前期研究中已經(jīng)測(cè)得QCPTN平均粒徑為（193.6±2.8）nm，Zeta電位為（-23.1±1.4）mV（n=3），易被動(dòng)靶向于肝臟［6］，同時(shí)由于載體材料中的TPGS可以改善納米粒的滲透性［9］，可使QCPTN更好地實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的治療作用。

本研究在此基礎(chǔ)上，建立荷小鼠腹水型高淋巴道轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞HCa-F異位移植實(shí)體瘤模型，定量、定性地全面評(píng)價(jià)QCPTN在荷瘤小鼠體內(nèi)對(duì)肝臟的靶向性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器：HM500冰凍切片機(jī)（德國(guó)Microm International GmbH公司）；Olympus IX81熒光倒置顯微鏡（日本Olympus公司）；1200高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；Sorvall ST 16R臺(tái)式離心機(jī)（美國(guó)Thermo Fisher公司，離心半徑為13.5 cm）；MS105DU電子天平（瑞士梅特勒托利多有限公司，0.01 mg）。

1.1.2 藥品與試劑：QT對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為100081-200907，純度99%）；QT（美侖生物公司，批號(hào)為20140105，純度96%）；QCPTN（藥劑學(xué)教研室自制，批號(hào)為20140510，規(guī)格：105 mg/g）；香蘭素（分析純，北京化學(xué)試劑公司，批號(hào)為010901，純度99%）；乙腈（色譜純，美國(guó)Tedia公司，批號(hào)為14015027）。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康8周昆明種小鼠（SPF級(jí)），體質(zhì)量20～25 g，由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)為SCXK（遼）2008-0002。

1.2 方法

1.2.1 體內(nèi)測(cè)定QT的色譜條件：色譜柱為Hypersil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)為360 nm；流速為0.8 mL/min；流動(dòng)相為乙腈-0.03%磷酸水溶液（33∶67）；柱溫為30℃；進(jìn)樣量為20 μL。

1.2.2 小鼠HCa-F肝癌模型建立：常規(guī)方法將凍存的HCa-F細(xì)胞復(fù)蘇后，用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法計(jì)活細(xì)胞數(shù)，用無(wú)菌生理鹽水調(diào)整細(xì)胞濃度約為3×107/mL，取200 μL細(xì)胞懸液進(jìn)行小鼠腹腔注射，1周后小鼠腹部微微隆起，即得腹水。無(wú)菌條件下抽取小鼠腹水，調(diào)整細(xì)胞濃度為（2～2.3）×107/mL，注射在小鼠的腋下（0.01 mL/g），10 d左右腋下可見明顯的實(shí)體瘤，用游標(biāo)卡尺測(cè)量小鼠腫瘤的長(zhǎng)徑，選取長(zhǎng)徑在12～15 mm范圍內(nèi)的荷瘤小鼠備用。

1.2.3 生物樣品的預(yù)處理：從小鼠的心尖取血。按1∶9的比例加入濃度為109 mmol/L的枸櫞酸鈉抗凝，5 000 r/min離心10 min，取出上層血漿；同時(shí)取出小鼠的肝臟、實(shí)體瘤、脾臟、肺臟、腎臟、心臟，分別精密稱重，加入4倍量的生理鹽水后研磨成勻漿，備用。

1.2.4 生物樣品中QT含量的測(cè)定：

1.2.4.1 QT和香蘭素對(duì)照貯備液的配制精密稱取干燥至恒重的QT對(duì)照品5.0 mg，用甲醇溶解、定容至50 mL，配成濃度為100 μg/mL的QT對(duì)照貯備液。精密稱取香蘭素對(duì)照品25.0 mg，加甲醇溶解、定容至10 mL中，配成濃度為2.5 mg/mL的內(nèi)標(biāo)對(duì)照貯備液，4℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4.2 QT系列濃度對(duì)照溶液的配制精密量取QT對(duì)照貯備液5、20、40、80、160、320、640 μL于10 mL量瓶中，分別加入香蘭素內(nèi)標(biāo)對(duì)照貯備液100 μL，加甲醇定容至刻度，配成濃度為0.5、2.0、5.0、8.0、16.0、32.0、64.0 μg/mL的QT系列對(duì)照品溶液（含香蘭素25.0 μg/mL），4℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4.3 QT標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制稱取1.2.3項(xiàng)下制備的血漿及各組織勻漿400 μL，置5 mL離心管中，分別加入QT系列濃度對(duì)照品溶液100 μL，渦旋1 min混合均勻，加入乙酸乙酯2 mL萃取，渦旋混合1 min，10 000 r/min離心10 min。分離出有機(jī)層并用氮?dú)饬鞔蹈桑瑲埩粑锛尤爰状?.1 mL復(fù)溶，渦旋1 min后，按1.2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。

1.2.4.4 絕對(duì)回收率試驗(yàn)精密量取QT對(duì)照貯備液0.12、1.0、5.0 mL置10 mL量瓶中，分別加入香蘭素內(nèi)標(biāo)對(duì)照貯備液100 μL，用甲醇定容至刻度，配成濃度為1.2、10.0、50.0 μg/mL的低、中、高3個(gè)濃度的樣品溶液（含香蘭素25.0 μg/mL），按1.2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積比A1。精密量取按1.2.3項(xiàng)下制備的血漿及各組織勻漿400 μL 9份，分別精密加入上述樣品溶液100 μL，按1.2.4.3項(xiàng)下方法處理，配成低（1.2 μg/mL）、中（10.0 μg/mL）、高（50.0 μg/mL）3個(gè)濃度的生物樣品溶液各3份，按照1.2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積比A2。

1.2.4.5 相對(duì)回收率試驗(yàn)精密量取1.2.3項(xiàng)下制備的血漿及各組織勻漿400 μL 9份，按1.2.4.3項(xiàng)方法配成低（1.2 μg/mL）、中（10.0 μg/mL）、高（50.0 μg/mL）3個(gè)濃度的生物樣品溶液各3份。按照1.2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積。

1.2.5 QT在小鼠體內(nèi)的肝靶向性評(píng)價(jià)：小鼠體內(nèi)給藥方案如下，將實(shí)體瘤長(zhǎng)徑在12～15 mm范圍內(nèi)的荷瘤小鼠隨機(jī)分為2組，禁食12 h后，取3只頸椎脫位法處死，剖取每只小鼠的肝臟、實(shí)體瘤、脾臟、肺臟、腎臟、心臟，分別在-80℃冰箱中凍存20 min，作為冰凍切片的空白對(duì)照，其余進(jìn)行尾靜脈注射給藥。（1）QCPTN組98只，根據(jù)小鼠體質(zhì)量，尾靜脈注射給予10 mg/kg（以QT計(jì)）的QCPTN［自制，批號(hào)為20150410，規(guī)格為105 mg/g，用20%（V/V）PEG400生理鹽水溶液分散，并在100 W冰水浴中超聲1 min］；（2）QTS組80只，根據(jù)小鼠體質(zhì)量，經(jīng)尾靜脈按10 mg/kg的劑量注射濃度為1 mg/mL的QT溶液（精密稱取QT原料藥10 mg，置10 mL量瓶中，加20% PEG400的生理鹽水溶液溶解、定容至10 mL，得濃度為1 mg/mL的QT溶液）。分別于給藥0.08（即5 min）、0.5、1、2、4、8、12、24 h時(shí)每組各處死10只小鼠，按1.2.3項(xiàng)下處理生物樣品，得到各時(shí)間點(diǎn)下的樣品溶液。將各時(shí)間點(diǎn)下的樣品溶液按照1.2.4.3項(xiàng)下方法測(cè)定峰面積。另取QCPTN組在0.5、1、2、4、8、12 h時(shí)的小鼠各3只，分別用頸椎脫位法處死，剖取每只小鼠的肝臟、心臟、脾臟、肺臟、腎臟、實(shí)體瘤，分別在-80℃冰箱中凍存20 min后取出，用冰凍切片機(jī)進(jìn)行冰凍切片，每個(gè)組織厚度為7 μm，在熒光倒置顯微鏡下觀察各組織在不同時(shí)間點(diǎn)的冰凍切片。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)用x±s表示，2組間比較用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 生物樣品中QT含量的測(cè)定

2.1.1 體內(nèi)測(cè)定QT的色譜條件：在1.2.1色譜的條件下，QT及其他各組分峰與內(nèi)標(biāo)物香蘭素（1.0 μg/mL）色譜峰能達(dá)到基線分離，空白小鼠血漿和各組織勻漿對(duì)樣品的測(cè)定均無(wú)干擾，保留時(shí)間分別為7.1 min、5.1 min，理論板數(shù)按QT峰計(jì)算不低于3 000，其血漿和各組織勻漿的色譜圖見圖1。

2.1.2 QT的標(biāo)準(zhǔn)曲線：以QT與香蘭素峰面積（A）的比值對(duì)濃度C進(jìn)行線性回歸，得到血漿及各組織勻漿中QT的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，見表1。結(jié)果表明，QT在血漿及各個(gè)組織勻漿中0.5～64.0 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。以信噪比（signal to noise ratio，S/N）=3及S/N=10作為QT的檢測(cè)限與定量限，測(cè)得二者分別為0.3 μg/mL與0.5 μg/mL。

2.1.3 絕對(duì)回收率和相對(duì)回收率試驗(yàn)：根據(jù)1.2.4.4方法測(cè)定低、中、高3個(gè)濃度的樣品溶液的峰面積，再根據(jù)公式：絕對(duì)回收率（%）=A2/A1×100計(jì)算。結(jié)果表明，3個(gè)濃度的絕對(duì)回收率均＞80%，RSD值均＜3.0%，表明此法用于提取QT的效率高。根據(jù)

1.2.4.5 方法測(cè)定低、中、高3個(gè)濃度的樣品溶液的峰面積，再根據(jù)相對(duì)回收率公式［相對(duì)回收率（%）=測(cè)得量/加入量×100］計(jì)算。結(jié)果測(cè)得3個(gè)濃度的相對(duì)回收率RSD均＜3.0%，表明此法用于測(cè)定QT在血漿及各組織中的含量準(zhǔn)確度好。

2.2 QT在小鼠體內(nèi)的分布

將各時(shí)間點(diǎn)下的樣品溶液按照1.2.4.3項(xiàng)下方法測(cè)定，QCPTN組和QTS組各時(shí)間點(diǎn)QT在血漿和各組織勻漿中的藥物濃度見圖2。結(jié)果測(cè)得QCPTN經(jīng)尾靜脈注射后，QT在小鼠血漿中緩慢釋放至4 h，在肝臟中可達(dá)到24 h；而QTS經(jīng)尾靜脈注射后測(cè)得QT在小鼠血漿和肝臟中只能滯留約2 h，表明NPs能有效延長(zhǎng)QT在小鼠肝臟中的滯留時(shí)間，也明顯提高了QT在肝臟中的濃度。QCPTN在整個(gè)考察時(shí)間范圍內(nèi)1 h時(shí)在肝臟中的濃度達(dá)到最大值。另外QCPTN的QT在實(shí)體瘤中的滯留時(shí)間也達(dá)到24 h，但是各時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的QT濃度比相應(yīng)的肝中的濃度低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。

2.3 藥物濃度法評(píng)價(jià)QCPTN的肝靶向性

用梯形法計(jì)算0～24 h QT在小鼠血漿及各組織勻漿中的藥物濃度-時(shí)間曲線下面積（area under the concentration-time curve，AUC0～24h）。采用相對(duì)靶向效率（relative targeting efficiency，Re）、靶向效率（targeting efficiency，Te）評(píng)價(jià)QCPTN對(duì)肝臟的靶向性。

2.3.1 Re的評(píng)價(jià)：Re是指尾靜脈注射載藥納米粒QCPTN（T）和游離藥物QTS（S）后，各器官AUC的比值，即Re=AUCT/AUCS，見表1。肝臟的Re值最大，是QTS的50.8倍，表明QCPTN具有較大的肝靶向性。

2.3.2 Te的評(píng)價(jià)：Te是指給予小鼠QCPTN或QTS后，靶器官（肝臟）與各非靶器官（脾臟、肺臟、心臟、腎臟、實(shí)體瘤）的AUC之比，即Te=AUC靶器官/ AUC非靶器官，見表2。QCPTN經(jīng)尾靜脈注射后，各組織中的Te值均遠(yuǎn)高于相應(yīng)的藥物溶液，同時(shí)QCPTN在肝臟中的AUC較其他組織勻漿的AUC高，表明QCPTN對(duì)肝臟有很好的靶向性作用。

2.4 冰凍切片法評(píng)價(jià)QCPTN的肝靶向性

圖1 QT的反相高效液相色譜圖Fig.1 RP-HPLC images o f QT

在熒光倒置顯微鏡下觀察各組織在不同時(shí)間點(diǎn)的冰凍切片，各正常組織沒(méi)有顯現(xiàn)任何熒光，其中不同組織1 h時(shí)的典型切片圖結(jié)果見圖3。顯綠色熒光的區(qū)域在肝臟中最大，其次是肺臟、脾臟、實(shí)體瘤，最后是腎臟和心臟。表明QCPTN靜脈注射后對(duì)肝臟有較好的靶向性，而在心臟、腎臟中分布很少；同時(shí)各個(gè)組織（實(shí)體瘤除外）中都是1 h時(shí)熒光最強(qiáng)，QCPTN在該時(shí)間時(shí)在組織中分布的最多，這與用血藥濃度法測(cè)定小鼠體內(nèi)的AUC和Cmax是一致的。二者結(jié)合，能更直觀形象定性、定量的表明QCPTN對(duì)小鼠肝臟具有較強(qiáng)的靶向性。

圖2 荷實(shí)體瘤小鼠注射QCPTN和QTS后，QT在血漿和各組織勻漿中的濃度（x±s，n=10）Fig.2 Concentration of QT in plasma and different tissues of solid tumor-bearing m ice injected w ith QCPTN and QTS（x±s，n=10）

表1 QT在荷實(shí)體瘤小鼠血漿和各組織勻漿中的AUC和Re（n=10，x±s）Tab.1 AUC and Re values o f QT in p lasma and different tissues o f solid tum or-bearing m ice（n=10，x±s）

表2 荷實(shí)體瘤小鼠尾靜脈注射QCPTN和QTS后的Te值Tab.2 Te va lues of both，QCPTN group and QTS group in solid tumor-bearing m ice a fter intravenous adm inistration in the tail

圖3 QCPTN組荷實(shí)體瘤小鼠給藥1 h后各組織的冰凍切片熒光顯微鏡圖×200Fig.3 Fluorescence m icroscopy im ages of frozen slices o f different tissues from the so lid tum or-bearing m ice injected w ith QCPTN at 1 h×200

3 討論

由于藥物被包載到納米粒載體內(nèi)部，藥物的理化性質(zhì)被隱藏，因此其在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程依賴于載體的理化特性，一定程度上可改善水溶性差藥物的體內(nèi)吸收。通過(guò)將納米粒與熒光標(biāo)記物結(jié)合，利用顯像方法觀察藥物在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，可實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物體內(nèi)吸收進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的目的［10］。常用的脂溶性熒光染料C6是一種激光轉(zhuǎn)化率較高、性能比較穩(wěn)定的熒光標(biāo)記物，有文獻(xiàn)［10］報(bào)道包載0.05%C6的納米粒在熒光顯微鏡下即能觀察到較強(qiáng)烈的熒光，并可用HPLC進(jìn)行定量測(cè)定［11-12］。由于模型藥物QT無(wú)熒光，故無(wú)法直觀地觀察QT納米粒在小鼠體內(nèi)的分布情況。本研究首次制備同時(shí)包載QT和熒光標(biāo)記物C6的QCPTN，采用血藥濃度測(cè)定和冰凍切片觀察相結(jié)合的方法，定量、定性地全面評(píng)價(jià)QCPTN在小鼠體內(nèi)對(duì)肝臟的靶向性。本研究采用荷瘤小鼠模型考察QCPTN在其體內(nèi)對(duì)肝臟的靶向性，由于實(shí)體瘤是長(zhǎng)在小鼠的腋下，該處血流比肝臟中小，但淋巴循環(huán)相對(duì)豐富，又由于腫瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的吞噬能力，腫瘤等病變組織中血管豐富且形態(tài)不規(guī)則，血管內(nèi)皮細(xì)胞的間隙遠(yuǎn)大于正常組織內(nèi)皮細(xì)胞的間隙，納米粒更易滲入腫瘤毛細(xì)血管壁的間隙并被腫瘤細(xì)胞攝取進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，同時(shí)由于淋巴回流系統(tǒng)不完善導(dǎo)致淋巴回流受阻，因而QCPTN會(huì)在腫瘤組織聚集，故24 h內(nèi)在實(shí)體瘤中分布比肝臟中少，但比相應(yīng)的其他器官中多，而QTS中的QT在實(shí)體瘤中持續(xù)分布僅約4 h。

本研究制備的QCPTN使QT在肝臟和血漿中維持時(shí)間明顯延長(zhǎng)，在肝臟中的濃集作用明顯加強(qiáng)，這是QCPTN的緩釋效應(yīng)和肝靶向性所致。在血漿中QCPTN組的QT可維持到4 h，而QTS組僅能維持到2 h；在肝臟中QCPTN組可維持到24 h，而QTS組也只能維持到2 h。冰凍切片中各時(shí)間點(diǎn)時(shí)C6熒光強(qiáng)度與用QCPTN靶向性評(píng)價(jià)參數(shù)在小鼠體內(nèi)的Cmax是一致的，表明納米粒在小鼠體內(nèi)1 h左右就可以多數(shù)分布聚集在肝臟細(xì)胞中，然后隨著材料的部分溶解和降解緩慢的將QT釋放出來(lái)，更好地發(fā)揮其對(duì)肝癌的治療作用。

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（編輯于溪）

Investigation of the Liver-targeting Properties of Quercetin-loaded PLGA-TPGS Nanoparticles in HCa-F Cell-bearing M ice

XU Hong1，GAO Meng2，GUAN Xin2，DONG Hao2，LIU Yinghan3，JIN Xiaohan3，ZHANG Chenghong1，TIAN Yan2

（1.Laboratory of Medical Function，College of Basic Medical Sciences，Dalian Medical University，Dalian 116044，China；2.Department of Pharmaceutics，College of Pharmacy，Dalian Medical University，Dalian 116044，China；3.Students at Grade 2015 in Clinical Medical Eight Grade，Dalian Medical University，Dalian 116044，China）

Objective The aim of this study was to investigate the distribution and liver-targeting properties of quercetin（QT）/coumarin 6（C6）-loaded polylactic-co-glycolic acid-D-α-tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate（PLGA-TPGS）nanoparticles（QCPTN）in a hepatocarcinoma ectopic transplantation solid tumor model using HCa-F cell-bearing mice.Methods The QT concentrations in biological samples were determined using reverse phase-high performance liquid chromatography（RP-HPLC）analysis.After intravenous administration to mice in the QCPTN and QTS groups，the QT concentration in plasma and in different tissues was simultaneously analyzed at the different time points.Detection indexes（relative targeting efficiency，Re；targeting efficiency，Te）and fluorescence inversion microscopy images of the frozen tissue（liver，solid tumor，spleen，lungs，kidneys，and heart）slices were used for quantitatively and qualitatively evaluating the liver-targeting properties of QCPTN in solid tumor-bearing mice.Results Te of the QCPTN group in the plasma，liver，solid tumor，spleen，lungs，kidneys，and heart were all greater than 3，indicating that the area under the concentration-time curve（AUC）of liver was more than three times that of the plasma and other organs.Fluorescence inversion microscopy images showed that the green fluorescence of QCPTN was mostly observed in the liver.Conclusion Using HCa-F cellbearing mice，QCPTN was found to have better in vivo liver-targeting properties in hepatocarcinoma ectopic transplantation solid tumor.

quercetin/coumarin 6-loaded PLGA-TPGS nanoparticles；mice；solid tumor；in vivo；liver；targeting properties

R944.9

A

0258-4646（2017）07-0613-06

10.12007/j.issn.0258-4646.2017.07.009

遼寧省自然科學(xué)基金（2015020308）

徐紅（1970-），女，實(shí)驗(yàn)師，本科.

田燕，E-mail：tiany2004@126.com

2016-12-08

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