劉 瀟，張 偉，楊麗珍，樸圣愛，柳琳琳，張瑩瑩

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

感冒后哮喘發(fā)作患兒經(jīng)小兒推拿干預(yù)后EOS、血清IL與IgE相關(guān)性研究*

劉 瀟，張 偉，楊麗珍，樸圣愛，柳琳琳，張瑩瑩△

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

目的:探討外周血嗜酸性粒細(xì)胞、白細(xì)胞介素、血清IgE與兒童感冒后哮喘發(fā)作的相關(guān)性，闡明經(jīng)小兒推拿治療后哮喘停止發(fā)作的機(jī)理。方法:將120例患兒隨機(jī)分成兩組，藥物組(進(jìn)行常規(guī)止喘藥物治療)，推拿組(藥物加推拿)，每組60例，另外選擇20例健康兒童作為對(duì)照組。分別檢測(cè)藥物組、推拿組治療前后及對(duì)照組患兒血清中IgE、IL-33的水平以及外周血EOS水平，并進(jìn)行相關(guān)性統(tǒng)計(jì)。結(jié)果：感冒后哮喘發(fā)作患兒治療前血清中IgE、IL-33的水平、EOS數(shù)值均顯著升高，與對(duì)照組比較(P<0.05)；藥物組、推拿組與治療前比較患兒血清中IgE、IL-33的水平、EOS數(shù)值有顯著降低(P<0.05)；推拿組與藥物組療后比較(P<0.05)，推拿組使患兒血清中IgE、IL-33的水平EOS數(shù)值有顯著降低，優(yōu)于藥物組；患兒感冒后哮喘發(fā)作時(shí)血清IL-33水平與血清IgE、EOS 絕對(duì)計(jì)數(shù)呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：患兒血清中IgE、IL-33的水平以及外周血嗜酸性粒細(xì)胞水平增高與感冒后哮喘發(fā)作直接相關(guān)，其中IL-33發(fā)揮主導(dǎo)作用，推拿干預(yù)后可使上述指標(biāo)下降而達(dá)到緩解哮喘發(fā)作的目的。

感冒；哮喘；小兒推拿;白細(xì)胞介素-33；嗜酸性粒細(xì)胞

支氣管哮喘(Bronchial asthma，BA)簡(jiǎn)稱哮喘，是兒童臨床多發(fā)病與常見病。感冒后哮喘發(fā)作是指患兒既往存在支氣管哮喘病史，在某一次感冒后誘發(fā)支氣管哮喘發(fā)作，哮喘患病率逐年上升為1%～4%，同時(shí)因感冒后誘發(fā)本病發(fā)作情況也逐年上升，本病病情復(fù)雜,研究表明主要與免疫反應(yīng)相關(guān)，故本研究以此方向?yàn)榍腥朦c(diǎn)探討IgE、IL-33的水平以及嗜酸性粒細(xì)胞與本病發(fā)生的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料

120例患兒均來(lái)自我院兒科門診2012年6月至2014年10月確診的感冒后哮喘發(fā)作患兒。納入患兒運(yùn)用奇偶法按先后就診順序隨機(jī)給每位患兒編號(hào)，隨機(jī)抽取單數(shù)為藥物組，偶數(shù)為推拿組，每組60例。其中女患兒62例，男患兒58例；年齡5～14歲，平均(9.5±4.6)歲;根據(jù)病情分為：輕度58例，中度48例，重度14例;既往哮喘病史2～10年。同時(shí)選擇健康兒童20例作為對(duì)照組，其中男性12例，女性8例，平均年齡(9.5±4.6)歲。各組患兒性別、年齡、病情無(wú)顯著差異(P>0.05)，具有臨床可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

參照2008年中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)會(huì)哮喘組制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，每個(gè)患兒既往均有哮喘病史，均在感冒后1周內(nèi)出現(xiàn)哮喘發(fā)作。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

均符合哮喘納入標(biāo)準(zhǔn)：反復(fù)發(fā)作喘息、胸悶、氣促、咳嗽，多與接觸冷空氣、變應(yīng)原、化學(xué)性、物理刺激、運(yùn)動(dòng)以及呼吸道感染相關(guān)，多在晨起或夜晚發(fā)作；可聞及肺部彌漫性或散在的哮鳴音(呼氣相為主)，呼氣延長(zhǎng)；上述癥狀、體征可自行緩解或經(jīng)抗哮喘藥治療有效；排除其他導(dǎo)致喘息、氣促、胸悶、咳嗽疾??；知情同意并簽署協(xié)議書。

2 治療方法

2.1 推拿組

采用推拿配合藥物治療。給予定喘穴(第7頸椎棘突下旁開0.5寸，左右各1個(gè)穴)、大椎穴(第7頸椎棘突下)順時(shí)針方向按揉，每穴各50次，每日早晚各推拿1次，15天為一療程。同時(shí)配合藥物喘定(常州蘭陵制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H32021912；規(guī)格2 ml：0.25 g)，每公斤體重15 mg，加入5%葡萄糖注射液稀釋，每日1次靜脈滴注，15天為一療程。

2.2 藥物組

采用常規(guī)止喘藥物治療,應(yīng)用喘定，其中用法、劑量和療程等情況與推拿組相同。

3 療效觀察

3.1 指標(biāo)檢測(cè)

清晨空腹采藥物組、推拿組治療前后以及對(duì)照組外周靜脈血7 ml，分別裝入兩個(gè)EDTA抗凝管中(1管2 ml，2管5 ml)。

3.1.1 EOS與IgE檢測(cè) 取已抽取的5 ml靜脈血，EOS絕對(duì)計(jì)數(shù)采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(美國(guó)庫(kù)爾特五分類)檢測(cè)，IgE檢測(cè)用ELISA試劑盒由上海酶聯(lián)生物耗材有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明步驟進(jìn)行操作。

3.1.2 IL-33檢測(cè) 取已抽取的2 ml外周靜脈血離心后取血清，-80℃保存。采用ELISA法檢測(cè)血清IL-33的濃度(上海酶聯(lián)生物公司所提供)，經(jīng)自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司)對(duì)吸光度(A)值進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算IL-33值。

3.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3.3 治療結(jié)果

3.3.1 各組患兒血清IgE含量比較 與對(duì)照組比較，藥物組、推拿組療前血清IgE含量均升高(P<0.05)。推拿組與藥物組療后均可使患兒血清IgE明顯降低(P<0.05)，推拿組降低程度優(yōu)于藥物組(P<0.05)。具體見表1。

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05；與治療前比較，ΔP<0.05；與藥物組比較，▲P<0.05

3.3.2 各組患兒EOS 絕對(duì)計(jì)數(shù)比較 與對(duì)照組比較，藥物組、推拿組療前EOS絕對(duì)計(jì)數(shù)均升高(P<0.05)。推拿組與藥物組療后均可使患兒外周血EOS絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯降低(P<0.05)，推拿組降低程度優(yōu)于藥物組(P<0.05)。具體見表2。

表2 各組患兒EOS絕對(duì)計(jì)數(shù)比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05；與治療前比較，ΔP<0.05；與藥物組比較，▲P<0.05

3.3.3 各組患兒IL-33值比較 與對(duì)照組比較，藥物組、推拿組療前IL-33 值均升高(P<0.05)。推拿組與藥物組療后均可使患兒血清IL-33 值明顯降低(P<0.05)，推拿組降低程度優(yōu)于藥物組(P<0.05)。具體見表3。

表3 各組患兒IL-33值比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05；與治療前比較，ΔP<0.05；與藥物組比較，▲P<0.05

3.3.4 IL-33水平與EOS計(jì)數(shù)、IgE水平相關(guān)性分析 經(jīng)分析感冒后哮喘發(fā)作IL-33水平與EOS計(jì)數(shù)Person相關(guān)系數(shù)值為0.889，P值為0.001 ；IL-33水平與IgE水平Person相關(guān)系數(shù)值為0.439，P值為0.025?？梢缘贸觯焊忻昂笙l(fā)作IL-33水平與EOS計(jì)數(shù)、 IgE值均呈正相關(guān)(P<0.05)。

4 討論

感冒后哮喘發(fā)作是指患兒具有支氣管哮喘病史，在某一次感冒后誘發(fā)哮喘發(fā)作。目前研究表明感冒后哮喘發(fā)作主要與自身免疫有關(guān)，其中IL-33在兒童哮喘發(fā)作時(shí)起到重要作用，其機(jī)制可通過(guò)配體結(jié)合受體IL-1和Th2，Th2通過(guò)免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)，肥大細(xì)胞受刺激產(chǎn)生炎癥因子參與機(jī)體炎性反應(yīng)[2]。EOS升高可導(dǎo)致氣道上皮細(xì)胞脫落、損傷，氣道大量分泌黏液，氣道阻塞與氣道髙反應(yīng)，在本病發(fā)病中起重要作用[3]。血清IgE顯著升髙，大量Th2細(xì)胞可以促進(jìn)B細(xì)胞釋放大量IgE和炎性因子從而產(chǎn)生炎性介質(zhì)，導(dǎo)致氣道炎性反應(yīng)與速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)[3-4]。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)120例感冒后哮喘發(fā)作患兒進(jìn)行推拿配合藥物治療及單純用藥后與健康兒童進(jìn)行外周血嗜酸性粒細(xì)胞、白細(xì)胞介素33、血清IgE檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)哮喘發(fā)作時(shí)患兒血清中血嗜酸性粒細(xì)胞、白細(xì)胞介素33、血清IgE均可明顯升高(P<0.05)，推拿治療后可以顯著降低，療效優(yōu)于藥物組(P<0.05)。表明患兒血清中IgE、IL-33的水平以及外周血嗜酸性粒細(xì)胞水平增高與感冒后哮喘發(fā)作直接相關(guān)，推拿干預(yù)后可使上述指標(biāo)下降而達(dá)到緩解哮喘發(fā)作的目的。更進(jìn)一步研究認(rèn)為IL-33是關(guān)鍵的促炎因子[5]，并可導(dǎo)致氣道壁的病理變化及重塑，有在感冒后支氣管哮喘中提供信息的功能[6]，是體現(xiàn)哮喘病情及療效的指標(biāo)[7]。EOS浸潤(rùn)是哮喘的特征，IL-33介導(dǎo)EOS可以釋放大量促炎因子，趨化因子[8]，引起氣道高反應(yīng)。IL-33能夠產(chǎn)生IgE，并調(diào)節(jié)支氣管上皮肥大細(xì)胞分泌黏液[9]。同時(shí)還可以介導(dǎo)IgE致敏的肥大細(xì)胞脫顆粒[10]。對(duì)Th2免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)增強(qiáng)，促進(jìn)IgE的合成[11]。

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論感冒后哮喘發(fā)作患兒血清IL-33水平與EOS計(jì)數(shù)、IgE值均呈正相關(guān)(P<0.05)，哮喘發(fā)作時(shí)EOS計(jì)數(shù)、IgE值隨IL-33水平升高而升高，說(shuō)明患兒血漿中IL-33水平顯著增高在哮喘發(fā)作時(shí)發(fā)揮主導(dǎo)作用。

[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病分會(huì)哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南(支氣管哮喘的定義、診斷、治療、療效判斷標(biāo)準(zhǔn)及教育和管理方案)[J].中華哮喘雜志:電子版,2008,2(1):3-13

[2] 葉志光，李惠，蘇雪媚，等.加味參蛤散對(duì)緩解期哮喘患者Th1/Th2平衡及細(xì)胞因子水平的影響研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2014,42(3):83-86

[3] 陶紹華.嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白在支氣管哮喘中的研究[J].四川解剖學(xué)雜志,2012,20(1):3942

[4] 周姍，劉蘭英，王和生，等.咳喘停貼劑穴位貼敷對(duì)哮喘合并過(guò)敏性鼻炎患者血清IgE的影響[J].針灸臨床雜志,2016,32(5):40-43

[5] 胡偉林，趙珊珊，涂明利，等.疏風(fēng)化痰方對(duì)咳嗽變異性哮喘臨床療效及氣道炎性因子的影響[J].中醫(yī)藥信息,2016,33(5):81-84

[6] Stolarski B,Kurowska M,Kewin P.IL-33 exacerbates Eosin-phil mediated airway inflammation[J].J Immunol,2010,15(6):3472-3480

[7] 孫麗瀛.血清IL-18和IL-33對(duì)急性哮喘發(fā)作患者的檢測(cè)價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊,2014,16(2):155-157

[8] Chow JY,Wong CK,Cheung PF.Intracellular signaling mechanisms regulating the activtion of human eosinophils by the novel Th2 cytokine IL-33：implications for allergic inflammation[J].Cell Mol Immunol,2010,7(1): 26-34

[9] Eiwegger T,Akdis CA.IL-33 links tissue cells, dendritic cells and TH2 cell development in a mouse model of asthma[J].Eur J Immunol,2011,41(6):1535-1538

[10] Pushparaj PN,Tay HK,Hng SC.The cytokine interleukin-33 mediates anaphylactic shock[J].Proc Natl Acad Sci USA,2009,106:9773-9778

[11] 劉艷明,農(nóng)光民,李樹全.輕-中度哮喘患兒氣道炎癥類型與病情、糖皮質(zhì)激素療效的關(guān)系[J].臨床兒科雜志,2010,28(2):145-149

The Correlation of EOS,IL and IgE with Childhood Asthma Attack after Cold with Massage Intervention

LIU Xiao, ZHANG Wei, YANG Li-zhen, PIAO Sheng-ai, LIU Lin-lin, ZHANG Ying-ying△

(TheFirstAffiliatedHospitalofHeilongjiangUniversityofChineseMedicine,Harbin150040,China)

Objective：To study the correlation of eosinophils(EOS), interleukin(IL), and IgE with childhood asthma attack after cold, and to clarify the mechanism of the massage intervention for this kind of disease.Methods：120 children patients with asthma attack after a cold were randomly divided into the medication group(conventional medication) and the massage group(conventional medication+massage), with 60 patients in each group; another 20 healthy children were taken into the control group. The levels of IL-33 and IgE in plasma, and EOS in peripheral blood were detected in all groups before and after treatment to do the statistic analysis. Results：Before treatment, the levels of IL-33, IgE, and EOS significantly increased in the children patients compared to those in the healthy children(P<0.05); whereas they all significantly decreased after the interventions(P<0.05), of which the massage group was superior to the medication group(P<0.05). There was a positive correlation between the levels of IL-33, IgE, and EOS with asthma attack after cold.Conclusion：The increase of IL-33, IgE, and EOS is directly related to the asthma attack after cold, in which IL-33 was the main factor. Massage intervention may relieve asthma attack by reducing IL-33, IgE, and EOS.

Cold; Asthma; Infantile tuina; Interleukin-33(IL-33); Eosinophil(EOS)

黑龍江省自然基金面上項(xiàng)目，編號(hào)：H2015033；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)?；痦?xiàng)目，編號(hào)：201213。

劉瀟(1981-)，男，主治醫(yī)師，主要從事兒科臨床工作。

△通訊作者：張瑩瑩(1980-)，女，主治醫(yī)師，主要從事中醫(yī)臨床研究。

R244.1

A

1005-0779(2017)06-0015-03

2016-12-03