江哲， 張軒， 莫春妍

（1廣州血液中心花都區(qū)血站 檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510800；2廣東省中醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510120；3廣州血液中心 臨床輸血研究所，廣東 廣州 510095）

受血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩選在臨床輸血中的價(jià)值評(píng)價(jià)

江哲1， 張軒2， 莫春妍3

（1廣州血液中心花都區(qū)血站 檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510800；2廣東省中醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510120；3廣州血液中心 臨床輸血研究所，廣東 廣州 510095）

目的 探討受血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩選在臨床輸血中的實(shí)用價(jià)值。方法 隨機(jī)選取2014年1月至2015年12月期間進(jìn)行手術(shù)備血或治療性輸血的1 200例患者，采用微柱凝膠法篩查其不規(guī)則抗體，并對(duì)陽性標(biāo)本進(jìn)行特異性鑒定，以確保臨床中輸血安全。結(jié)果 在所有不規(guī)則抗體中，男性患者的陽性率為5.20% （37例），女性患者的陽性率為8.20% （40例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）；懷孕患者的陽性率為19.72% （85例），非懷孕患者的陽性率為8.77% （5例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。結(jié)論 術(shù)前受血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩選對(duì)臨床輸血安全具有重要的意義，能夠有效減少輸血不良反應(yīng)。

不規(guī)則抗體；紅細(xì)胞血型；臨床輸血；實(shí)用價(jià)值

人類血液的不規(guī)則抗體是指除ABO血型外的其他抗體類型，主要為IgG，還有少部分的IgM［1］，一般情況下并不存在于人體內(nèi)。目前IgG抗體通常可引起新生兒免疫溶血和交叉配血困難，而在保障輸血安全中，抗體篩查［2］是一項(xiàng)比較重要的檢查。相關(guān)研究［3］顯示，我國(guó)因抗原抗體因素造成的溶血反應(yīng)占12.6%，其中溶血性輸血反應(yīng)占2.56%。當(dāng)前我國(guó)血型抗體的檢出率為0.30%～2.00%［4］，在輸血前進(jìn)行抗體篩查能夠發(fā)現(xiàn)不同血型的抗體類型。但由于患者存在輸血、妊娠或疾病等情況，因此由不規(guī)則抗體引起的溶血反應(yīng)仍舊經(jīng)常發(fā)生。本研究探討在臨床輸血中采用微柱凝膠法對(duì)受血者血型不規(guī)則抗體進(jìn)行篩選的實(shí)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料隨機(jī)選取2014年1月至2015年12月期間進(jìn)行手術(shù)備血或治療性輸血的1 200例患者作為研究對(duì)象，同一人多次輸血按照一人計(jì)。其中男性712例，女性488例；年齡1～88歲，平均年齡 （45.5±2.3）歲。男性患者中，無輸血史398例，1～2次輸血史157例，≥3次輸血史157例。女性患者中，無輸血史247例，1～2次輸血史127例，≥3次輸血史114例；無妊娠史57例，1～2次妊娠史212例，≥3次妊娠史219例。排除伴有嚴(yán)重腎臟疾病、抑郁癥和神經(jīng)疾病患者。

1.2 試劑與儀器①儀器：BASO細(xì)胞洗滌離心機(jī)，Dianafuge專用離心機(jī)，Diana專用孵育器。②試劑：抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥有限公司），抗體譜細(xì)胞和篩選細(xì)胞 （長(zhǎng)春博德公司），抗人球蛋白微柱凝膠卡 （班珀斯技貿(mào)有限公司）；所有的微柱凝膠卡和試劑均在有效使用期內(nèi)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 微柱凝膠實(shí)驗(yàn) 先將三個(gè)微柱凝膠卡標(biāo)號(hào)1、2、3，再分別于對(duì)應(yīng)孔內(nèi)加入50 μL Serigrup Diana 1、2、3濃度為0.8%的紅細(xì)胞懸濁液，隨后在對(duì)應(yīng)孔內(nèi)分別加入25 μL受檢者的血清或血漿，將三張微柱凝膠卡同時(shí)放進(jìn)Diana孵育器，調(diào)定恒溫37℃，持續(xù)15 min，結(jié)束后取出卡片，立即放入Dianafuge專用離心機(jī)中，1 100 r／min持續(xù)離心9 min，離心結(jié)束后放置在白色背景上，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果［3］。結(jié)果判定［5］：100%的紅細(xì)胞沉淀于微管底端時(shí)用 “－”表示；100%的紅細(xì)胞在微管下段1／3以內(nèi)沉淀時(shí)用 “＋／－”表示；80%的紅細(xì)胞在微管下段2／3以內(nèi)沉淀時(shí)用 “1＋”表示；80%的紅細(xì)胞在微管上端2／3以內(nèi)沉淀時(shí)用 “2＋”表示；80%的紅細(xì)胞在微管上端1／3以內(nèi)沉淀時(shí)用 “3＋” 表示； 所有紅細(xì)胞都沉淀于微管頂部時(shí)用 “4＋” 表示；dp表示雙群；Hemo表示有溶血。

1.3.2 間接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn) 將受檢者的100 μL血清分別加入事先標(biāo)記1、2、3的小試管內(nèi)，再分別加入Serigrup Diana 1、2、3紅細(xì)胞懸濁液各50 mL，置于恒溫37℃水浴30～60 min，結(jié)束后取出卡片立即放入BASO專用離心機(jī)中，3 000 r／min持續(xù)15 s，棄掉上清液后吸干，用生理鹽水洗滌離心，3 000 r／min持續(xù) 45 s，3次以上。最后一次洗滌完畢后，棄掉生理鹽水，試管邊緣用濾紙吸干，每個(gè)試管中再加入100 μL人球蛋白試劑，充分混合后放入BASO離心機(jī)，3 000 r／min持續(xù)15 s，結(jié)束后取出輕搖，直至試管底部出現(xiàn)均勻的凝集物為止。結(jié)果判定［6］：試管底部出現(xiàn)凝集或有溶血?jiǎng)t為陽性反應(yīng)，沒有凝集和溶血?jiǎng)t為陰性反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別患者的陽性率比較在所有不規(guī)則抗體中，男性患者的陽性率為5.20% （37例），女性患者的陽性率為8.20%（40例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。見表1。

表1 不同性別患者的陽性率比較 ［n（%）］

2.2 懷孕患者與非懷孕患者的陽性率比較懷孕患者的陽性率為19.72% （85例），非懷孕患者的陽性率為8.77% （5例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。見表2。

表2 懷孕患者與非懷孕患者的陽性率比較 ［n（%）］

3 討論

隨著我國(guó)醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，輸血科醫(yī)護(hù)人員的專業(yè)知識(shí)也不斷增長(zhǎng)，臨床中一般不會(huì)發(fā)生因ABO血型不符而引發(fā)的輸血反應(yīng)，目前輸血反應(yīng)一般是由不規(guī)則抗體引起的［7］。不規(guī)則抗體產(chǎn)生的原因?yàn)楹腥蹩贵w的受血者輸入含有相應(yīng)抗原的血細(xì)胞、妊娠母子血型不符、無察覺刺激、免疫刺激等。

不規(guī)則抗體的篩查率在各研究中并不一致，可能與人群分布或樣本數(shù)量有關(guān)。本研究的檢出率為0.66%，其中抗－cE 60例，抗－E 61例，抗－c 10例，抗－D 35例，抗－M 16例，抗－Le 83例，抗－Fyb 6例，抗－Jka 10例。雖然在實(shí)際工作中陽性檢出率較低，但一旦發(fā)現(xiàn)需引起高度重視，并進(jìn)行嚴(yán)格配血，減少輸血不良反應(yīng)。不規(guī)則抗體主要出現(xiàn)在Rh系統(tǒng)，且以抗－D、抗－E、抗－c為主，其他少見，其抗原由強(qiáng)至弱的順序?yàn)镈＞E＞c＞C＞e，其中E抗原是除D外最強(qiáng)的抗原，本研究未做常規(guī)檢測(cè)，是導(dǎo)致近年E抗體增加并引起溶血反應(yīng)最主要的原因。Rh系統(tǒng)多見不規(guī)則抗體，血型抗體的頻率和種類中以Rh系統(tǒng)最多見，是引起疑難配血、新生兒溶血、血型鑒定困難、輸血不良反應(yīng)的重要原因。我國(guó)人群大多是D抗原陽性，陰性占0.2%～0.5%，且D抗原致敏性極強(qiáng)，80%的孕婦在輸血后2～5個(gè)月內(nèi)會(huì)出現(xiàn)免疫應(yīng)答，臨床中需特別注意。

本研究中，在所有不規(guī)則抗體中，男性患者的陽性率為

5.20% （37例），女性患者的陽性率為8.20% （40例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）；懷孕患者的陽性率為19.72% （85例），非懷孕患者的陽性率為8.77% （5例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）；表明女性患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于男性，有妊娠史或輸血史的女性患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于其他患者。不規(guī)則抗體陽性患者在妊娠時(shí)，異體紅細(xì)胞會(huì)刺激孕婦體內(nèi)的IgG進(jìn)入新生兒體內(nèi)，進(jìn)而刺激母體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，提示醫(yī)護(hù)人員應(yīng)重視患者輸血前的各項(xiàng)檢查，尤其是妊娠史、輸血史、輸血不良反應(yīng)等，重視該類型患者的抗體篩查實(shí)驗(yàn)，避免發(fā)生溶血反應(yīng)，保障輸血安全。臨床輸血科工作中篩查抗體的目的是發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體，盡量減少患者的輸血不良反應(yīng)，而受血者血液內(nèi)不規(guī)則抗體的存在情況受性別、妊娠史、輸血史等影響，因此在篩查過程中要注意個(gè)體差異，有效避免溶血反應(yīng)發(fā)生。自身免疫性溶血性貧血患者自身血清中含有大量冷凝激素和自身抗體，可使受血者紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)，從而影響篩查結(jié)果，因此在進(jìn)行交叉配血和抗體篩查實(shí)驗(yàn)時(shí)，要鑒別不規(guī)則抗體和自身抗體，避免延誤患者的血液輸注。

綜上所述，術(shù)前受血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩選對(duì)臨床輸血安全具有重要的意義，能夠有效減少輸血不良反應(yīng)。

[1]趙穎欣,王德輝,柴慧麗,等.血型不規(guī)則抗體篩查用于預(yù)防和降低臨床無效輸血的發(fā)生 [J].中國(guó)輸血雜志,2015,28(1)：48-50.

[2]孫麗芳,李杰,劉瑜.不規(guī)則抗體篩查在臨床安全輸血中的重要性分析 [J].甘肅醫(yī)藥,2012,31(2)：90-91.

[3]郭長(zhǎng)義,宋雪冬,宋任浩.5種不規(guī)則抗體篩查方法的檢測(cè)閾值比較[J].臨床血液學(xué)雜志,2014,27(12)：1042-1044.

[4]李篤軍,王新光,陳海霞,等.輸血前不規(guī)則抗體篩查對(duì)臨床安全輸血的意義 [J].臨床血液學(xué)雜志,2015,28(1)：103-104.

[5]敖小梅.受血者不規(guī)則抗體篩查在臨床安全輸血中的意義 [J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2016,22(25)：18-19.

[6]龔晨輝,饒美英,葉水文,等.血型不規(guī)則抗體檢測(cè)在臨床輸血中的作用 [J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(6)：597-598.

[7]張曉蘭,趙紅,丁喜玉.不規(guī)則抗體篩選在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志,2014,46(4)：490-491.

（責(zé)任編輯： 何華）

Evaluation on the Value of Erythrocyte Blood Group Irregular Antibody Screening of Recipients in Clinical Blood Transfusion

JIANG Zhe1,ZHANG Xuan2,MO Chunyan3(1Clinical Laboratory,Huadu District Blood Station of Guangzhou Blood Center, Guangzhou 510800,China;2Clinical Laboratory,Guangdong Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou 510120, China;3Institute of Clinical Blood Transfusion,Guangzhou Blood Center,Guangzhou 510095,China)

ObjectiveTo explore the practical value of erythrocyte blood group irregular antibody screening of recipients in blood transfusion.Methods 1 200 cases of patients with surgical or therapeutic blood transfusion from January 2014 to December 2015 were randomly selected.The irregular antibody was screened by microcolumn gel method,and the positive samples

specific identification to ensure the safety of blood transfusion in clinical practice.Results Of all the irregular antibodies,the positive rates of male patients and female patients were respectively 5.20%(37 cases)and 8.20%(40 cases),with statistical difference(P＜0.05).The positive rates of pregnant patients and non-pregnant patients were respectively 19.72%(85 cases)and 8.77%(5 cases),with statistical difference(P＜0.05). ConclusionsErythrocyte blood group irregular antibody screening of recipients before surgery has important significance for safety of clinical blood transfusion,which can effectively reduce the adverse reactions of blood transfusion.

Irregular antibody;Erythrocyte blood group;Clinical blood transfusion;Practical value

R446.6

A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.05.0627

2017－01－27

2017-03-17

江哲 （1982－），湖南耒陽人，本科學(xué)歷，主管技師，從事血液檢驗(yàn)工作。