李繼霞，羅南萍，公衍文，胡成進

尿17－OH、17－KS、VMA與血漿ALD、COR聯(lián)合檢測在腎上腺腫瘤中的診斷價值

李繼霞，羅南萍，公衍文，胡成進＊

目的探討17－羥皮質類固醇（17－h(huán)ydroxycorticosteroids，17－OH）、17－酮皮質類固醇（17－ketosteroids，17－KS）、香草扁桃酸（vanilmandelic acid，VMA）、醛固酮（aldosterone，ALD）和皮質醇（Cortisol，COR）在腎上腺腫瘤中的診斷價值。方法采用微柱比色法和電化學發(fā)光技術，對筆者所在醫(yī)院400例不同病理類型的腎上腺腫瘤患者進行24小時尿17－OH、17－KS、VMA及血漿ALD、COR檢測。對照組30名，均為排除腎上腺、內分泌、心血管、腫瘤等疾病的健康人。結果與對照組比較，17－OH水平在腎上腺腫瘤（除腎上腺增生組）均顯著增高（P＜0．05）；17－KS水平除腹膜后腫瘤組外，其他各組均顯著增高（P＜0．05）；VMA水平在腎上腺增生組、腎上腺惡性腫瘤組和嗜鉻細胞瘤組顯著增高（P＜0．05）；ALD在腎上腺囊腫組、腎上腺良性腫瘤組、腎上腺惡性腫瘤組和腹膜后腫瘤組均顯著增高（P＜0．05）；COR在腎上腺良性腫瘤組、腎上腺惡性腫瘤組、嗜鉻細胞瘤組和腹膜后腫瘤組顯著增高（P＜0．05）。嗜鉻細胞瘤組的VMA水平明顯高于其他組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．05）。以超出正常值范圍為陽性，不同腫瘤組均有不同程度的增高，17－OH以腎上腺惡性腫瘤組（31%）為最高；17－KS以腎上腺囊腫組（60%）和嗜鉻細胞瘤組（44%）為最高；VMA以嗜鉻細胞瘤組（88%）為最高；ALD和COR以腎上腺增生組為最高，分別是31%和38%。相關分析顯示，血漿ALD與17－OH、17－KS之間呈正相關（r=0．502，0．796，P＜0．01）；COR與17－OH、17－KS之間亦呈正相關（r=0．648，0．584，P＜0．01）；ALD、COR與VMA之間無相關性（r=0．090，0．010，P＞0．05）。結論應用24小時尿17－OH、17－KS、VMA和血漿ALD、COR的聯(lián)合檢測，對良、惡性腎上腺腫瘤的鑒別診斷以及腫瘤功能性的判斷，為臨床手術的實施方案和預后具有重要的指導意義。

17－羥皮質類固醇；17－酮皮質類固醇；香草扁桃酸；腎上腺疾病；微柱比色法；電化學發(fā)光法

17－羥皮質類固醇（17－h(huán)ydroxycorticosteroids，17－OH）、17－酮皮質類固醇（17－ketosteroids，17－KS）和香草扁桃酸（vanilmandelic acid，VMA）分別是皮質醇、睪酮和兒茶酚胺的代謝產(chǎn)物，分別來自腎上腺皮質和髓質，其上述激素及異常表達與腎上腺腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。目前國內對腎上腺疾病時醛固酮（ALD）、皮質醇（COR）和香草扁桃酸（VMA）的研究報道較多，而17－OH和17－KS的臨床應用鮮見報道。該研究采用微柱比色法和電化學發(fā)光法對200例不同類型腎上腺疾病患者進行17－OH、17－KS、VMA、ALD和COR檢測，旨在探討腎上腺腫瘤時與疾病相關的激素及其代謝產(chǎn)物的變化規(guī)律，為臨床疾病的診斷、鑒別診斷提供新的思路和應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料2010年1月—2016年8月于筆者所在醫(yī)院住院患者400例，男236例，女164例；年齡14～78歲，平均（43．32±18．18）歲。根據(jù)CT、核磁共振及病理分為腎上腺增生52例；腎上腺囊腫60例；腎上腺良性腫瘤178例；腎上腺惡性腫瘤32例；嗜鉻細胞瘤68例；腹膜后腫瘤10例。對照組30名，男22名，女8名；平均年齡（35．34±12．13）歲；均為排除腎上腺、內分泌、心血管、腫瘤等疾病的健康人。

1.2 試劑與儀器17－OH、17－KS、VMA試劑由西班牙Biosystems公司提供，實驗所用濃硫酸、無水乙醇及氫氧化鈉自備，均為AR試劑。754型紫外分光光度計由上海美譜達儀器有限公司提供，波長范圍為200～1000 nm。ALD檢測儀器為深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學工程有限公司公司提供的maqlumi2000型，試劑為配套提供ALD檢測試劑盒。COR檢測儀器為羅氏601型，試劑為配套提供COR檢測試劑盒。

1.3 樣本收集與處理收集患者24 h尿液以10 mol/L鹽酸防腐，記錄總尿量后留取20 ml置2～8℃冰箱內待測。17－OH、17－KS尿樣pH值應為1～2之間，VMA樣本在檢測前以20%氫氧化鈉將pH調至6～6．5之間。ALD、COR抽取以肝素鈉抗凝的靜脈血，分離血漿后置4℃冰箱內待檢。

1.4 樣品檢測以中性樹脂作為吸附劑，通過Porter－Silber、Zimmermann反應和過碘酸鈉法進行17－OH、17－KS、VMA的定量檢測；ALD和COR采用電化學發(fā)光法進行檢測，嚴格按照說明書及實驗操作規(guī)程操作。

1.5 統(tǒng)計學分析應用SPSS 17．0軟件進行統(tǒng)計學處理，計數(shù)資料以例數(shù)表示，各組數(shù)據(jù)以（x±s）表示，各分組數(shù)據(jù)與對照組數(shù)據(jù)之間的比較采用成組設計t檢驗，各組之間數(shù)據(jù)的比較采用q檢驗，各指標之間相關分析采用直線回歸。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組17-OH、17-KS、VMA、ALD、COR水平比較與對照組比較，17－OH水平除腎上腺增生組外，其他各組均顯著增高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學差異（P＜0．05）；17－KS水平除腹膜后腫瘤組外，其他各組均顯著增高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學差異（P＜0．05）；VMA水平在腎上腺增生組、腎上腺惡性腫瘤組和嗜鉻細胞瘤組顯著增高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學差異（P＜0．05）；ALD水平在腎上腺囊腫組、腎上腺良性腫瘤組、腎上腺惡性腫瘤組和腹膜后腫瘤組顯著增高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學差異（P＜0．05）；COR水平在腎上腺良性腫瘤組、腎上腺惡性腫瘤組、嗜鉻細胞瘤組和腹膜后腫瘤組均顯著增高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學差異（P＜0．05），見表1。嗜鉻細胞瘤組VMA水平高達114．63 μmol/24 h，與其余各組的VMA值比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．05），其余各指標在各病例組間比較無統(tǒng)計學意義（P＞0．05）。

2.2 各組17-OH、17-KS、VMA、ALD、COR陽性率以超出17－OH、17－KS、VMA、ALD、COR正常值為陽性，即：17－OH＞47．7 μmol/24 h（男）、42．2 μmol/ 24 h（女）；17－KS＞87 μmol/24 h（男）、49 μmol/24 h（女）；VMA＞66 μmol/24 h；ALD＞400 pg/ml；COR＞ 536 nmol/L。不同疾病時各組均有不同程度的增高陽性率，17－OH以腎上腺惡性腫瘤組（27%）為最高；17－KS以腎上腺囊腫組（60%）和嗜鉻細胞瘤組（41%）為最高；VMA以嗜鉻細胞瘤組（88%）為最高；ALD以腎上腺增生組（31%）為最高；COR以腎上腺增生組為最高（38%），嗜鉻細胞瘤組也有較高的陽性率（29%）。見表2。

表1 各組17-OH、17-KS、VMA、ALD、COR水平（x±s）

表2 各組17-OH、17-KS、VMA、ALD、COR陽性率

2.3 相關性分析對各試驗指標兩兩之間進行相關性分析，所得值即為相關系數(shù)。結果顯示血漿ALD與17－OH、17－KS之間呈正相關（r=0．502，0．796，P＜0．01）；COR與17－OH、17－KS之間亦呈正相關（r= 0．648，0．584，P＜0．01）；ALD、COR與VMA之間無相關性（r=0．090，0．010，P＞0．05），見表3。

表3 ALD、COR分別與17-OH、17-KS、VMA的相關性

3 討論

腎上腺腫瘤可分為兩大類，即主質細胞（皮質和髓質）腫瘤及間質細胞瘤，腎上腺主質細胞源于胚胎神經(jīng)脊，屬于APUD（amine precursor uptake and decarboxlation）細胞，可產(chǎn)生生物胺及多肽激素［1］。此外還可以是轉移淋巴瘤等［2］。功能性腎上腺腫瘤包括能分泌激素的皮質醇分泌瘤，醛固酮分泌瘤和嗜鉻細胞瘤，無功能性則起病隱匿，預后較差，一旦確診需手術治療［3］。國外研究已經(jīng)證實原發(fā)性醛固酮增多癥患者左心室肥厚、心肌缺血、腦血管疾病及腎功能障礙的發(fā)生率往往較高，其機制是醛固酮通過鹽皮質激素受體而發(fā)揮作用，從而導致血管損害，促進心臟和腎的纖維化［4－6］，嗜鉻細胞瘤、亞臨床庫欣綜合征患者亦會分泌相應激素引起大血管、微血管損害及糖脂等代謝功能紊亂［7，8］。本組應用微柱法對400例腎上腺良性和惡性腫瘤患者17－OH、17－KS、VMA、ALD、COR水平檢測中發(fā)現(xiàn)，兩組患者的上述指標均較對照組有不同程度顯著增高（P＜0．05），腎上腺惡性腫瘤組除ALD水平稍低于良性組外，其他各項指標均高于良性組，但無統(tǒng)計學意義。結果表明，腎上腺皮質球狀帶分泌過多鹽皮質激素（醛固酮）和糖皮質激素（皮質醇），還可分泌過多的性激素（睪酮），而17－OH、17－KS及VMA分別是皮質醇、睪酮和兒茶酚胺的代謝產(chǎn)物，增高提示不同腎上腺腫瘤時激素及其代謝產(chǎn)物的改變。當腎上腺腫瘤或增生時，可分泌過多的醛固酮，引起電解質紊亂，即原發(fā)性醛固酮增多癥；當束狀帶分泌過多皮質醇，則引起皮質醇增多癥，即庫欣氏綜合征；網(wǎng)狀帶發(fā)生病變時，分泌過多的睪酮，發(fā)生腎上腺性征異常癥；髓質病變時，嗜鉻細胞分泌過多腎上腺和去甲腎上腺，見于嗜鉻細胞瘤或腎上腺髓質增生。

該組結果中有功能性改變的腎上腺腫瘤為336例，占84%，其中嗜鉻細胞瘤組17-OH、17-KS、VMA、ALD和COR的陽性檢出率為最高，分別為21%、41%、88%、12%和29%。腎上腺囊腫組17-KS的陽性率高達60%（36/60），其他各組亦具有一定的增高陽性率，臨床對于這類激素分泌異常的患者需要進行手術干預，其術后預后較好。腎上腺腫瘤無功能改變者為64例，占16%。臨床上無功能性腎上腺腫瘤比較少見，無激素分泌改變，早期診斷困難，確診需依賴病理證實，而對于無功能性惡性腎上腺腫瘤則預后較差。結果表明可依據(jù)17-OH、17-KS、VMA、ALD和COR水平檢測來判斷腎上腺腫瘤是否有功能性或無功能性，為進一步對疾病分類診斷、預后判斷和針對性治療提供重要的理論依據(jù)。另外本組還檢測到四例神經(jīng)母細胞瘤患者尿VMA增高（87.6 μmol/24 h；102.37 μmol/24 h；235.15 μmol/ 24 h；98.57 μmol/24 h）。

嗜鉻細胞瘤是源于腎上腺髓質和腎上腺外嗜鉻組織的腫瘤，是內分泌性高血壓的重要原因，近年來有學者報告嗜鉻細胞瘤在高血壓人群中的患病率為1.9%［9］。目前，腎上腺嗜鉻細胞瘤主要通過CT診斷［10-12］，主要通過手術治療［13］。嗜鉻細胞瘤產(chǎn)生和釋放兒茶酚胺是多相的，目前還無一種實驗室檢查能對嗜鉻細胞瘤做出100%的診斷［14］。本組采用微柱比色法通過對24 h尿液VMA的定量分析，其方法操作簡便，具有較高的特異性。本組68例嗜鉻細胞瘤患者24 h尿液VMA高達（114.63± 82.94）μmol/24 h，68例中有60例增高，其陽性檢出率高達88%，與文獻報道一致［15］。在影像學檢查同時進行VMA的檢測，對診斷嗜鉻細胞瘤無疑是一項必要的手段。嗜鉻細胞瘤患者能夠分泌大量的腎上腺素和去甲腎上腺素，其中大約60%最終轉化為VMA，隨尿液排出體外。近年來隨著高血壓發(fā)病率的不斷增長，其臨床癥狀極易與嗜鉻細胞瘤相混淆，而對腎上腺占位進行B超、CT難以最終確定其性質。結果表明對臨床陣發(fā)性或持續(xù)性高血壓和代謝紊亂者，應采用內分泌檢測，確定是否為功能性腎上腺腫瘤或由腎上腺腫瘤引起的繼發(fā)性高血壓，故檢測尿液VMA是臨床診斷、鑒別診斷及篩查嗜鉻細胞瘤的重要實驗室指標。

隨著內分泌檢測手段和影像學技術的發(fā)展，目前對腎上腺腫瘤的定性和定位診斷水平不斷提高，該研究表明檢測患者24 h尿液17-OH、17-KS、VMA和血漿中ALD和COR并結合相應的臨床表現(xiàn)，可將腎上腺腫瘤中功能性和無功能性、醛固酮瘤、嗜鉻細胞瘤和庫欣氏綜合征等區(qū)別開來，為患者是否手術治療提供重要的激素水平檢測依據(jù)，對腎上腺疾病的診斷和鑒別診斷是良好的指標。

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［2016－10－20收稿，2016－11－18修回］［本文編輯：吳蓉］

The value of combined detection of 24 h urine 17-OH，17-KS，VMA，and plasma ALD，COR in the diagnosis of adrenal neoplasms

LI Ji－xia，LUO Nan－ping，GONG Yan－wen，et al．
The General Hospital of Jinan Military Region，Laboratory Diagnosis Department，Jinan，Shandong 250031，China

ObjectiveTo study the value of combined detection of 17－h(huán)ydroxycorticosteroids（17－OH），17－ketone corticosteroids（17－KS），vanillylmandelic acid（VMA），aldosterone（ALD）and cortisol（COR）in adrenal nepplasms diagnosis．MethordsThe 400 hospitalized patients in author's hospital from 2010－01 to 2013－08，according to CT，nuclear magnetic resonance and pathology were divided into：26 cases of adrenal hyperplasia；30 cases of adrenal cyst；benign adrenal tumors in 89 cases；16 cases of adrenal malignant tumor；pheochromocytoma in 34 cases；5 cases of retroperitoneal tumors．A control group had 30，all health people excluded adrenal，endocrine，cardiovascular，cancer and other diseases．By using microcolumn chromatography 24h urine 17－KS，VMA and 17－OH levels were detected and by electrochemical luminescence technology for plasma ALD，COR levels．ResultsComparedwithcontrolgroup，17－OHinothergroupsweresignificantlyincreasedexceptdrenal hyperplasia group（P＜0．05）；17－KS in the other groups were significantly increased except retroperitoneal tumor group（P＜0．05）．VMA increased significantly in the adrenal hyperplasia group，adrenal malignant tumor group and pheochromocytoma group（P＜0．05）．ALD increased significantly in adrenal cyst group，benign adrenal tumor group，adrenal malignant tumor group and retroperitoneal tumor group（P＜0．05）．COR increased significantly in adrenal benigntumorgroup，adrenalmalignanttumorgroup，andretroperitonealpheochromocytomagroup（P＜0．05）．Pheochromocytoma group VMA had significant differences with the rest of the group（P＜0．05），and to adrenal cyst group，benign adrenal tumor group，retroperitoneal tumor group VMA value（P＜0．01），the rest of the targets in the cases of no statistical significance between the two groups（P＞0．05）．With more than the normal value waspositive，different disease groups had different degrees of positive rate increased，the positive rate of 17－OH in adrenal malignant tumor group（31%）was the highest；the positive rate of 17－KS in adrenal cyst group（60%）and pheochromocytoma group（44%）was the highest；the positive rate of VMA in pheochromocytoma group（88%）was the highest；the positive rate of ALD in adrenal hyperplasia group（31%）was the highest；the positive rate of COR in adrenal hyperplasia group was the highest（38%）．Correlation analysis showed that there was a positive correlation between plasma ALD，17－OH，17－and KS（r=0．502，0．796，P＜0．01）；also a positive correlation between COR and 17－OH，17－KS（r=0．648，0．584，P＜0．01）；there was no correlation between the ALD，COR and VMA（r= 0．090，0．010，P＞0．05）．ConclusionThe combined detection of 17－OH，17－KS，VMA and plasma ALD，COR has the value of diagnosis and differential diagnosis in benign，malignant adrenal tumors，and whether it has function．

17－h(huán)ydroxycorticosteroids；17－ketone corticosteroids；Vanillylmandelic acid；Adrenal disease；Micro column chromatography；Electrochemical luminescence method

R736．6

A

10．14172/j．issn1671－4008．2017．05．006

250031山東濟南，原濟南軍區(qū)總醫(yī)院實驗診斷科（李繼霞，羅南萍，公衍文，胡成進）

胡成進，Email：hcj6289@163．com