何文剛 趙玉振 廖秀東 張麗陽 呂 林* 郭艷麗** 羅緒剛(.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州730070；.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所礦物元素營養(yǎng)研究室，北京0093)

酵母硒對肉仔雞的生物安全性評價(jià)

何文剛1趙玉振2*廖秀東2張麗陽2呂 林2**郭艷麗1**羅緒剛2
(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州730070；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所礦物元素營養(yǎng)研究室，北京100193)

本試驗(yàn)旨在研究飼糧添加不同水平酵母硒對愛拔益加(AA)肉仔雞生長性能、血液血紅蛋白含量和紅細(xì)胞壓積、血漿生化指標(biāo)、器官指數(shù)和組織結(jié)構(gòu)變化的影響，進(jìn)而評價(jià)酵母硒對肉仔雞的生物安全性。試驗(yàn)采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，選用288只1日齡AA肉仔雞，隨機(jī)分為4個(gè)組，每個(gè)組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞(公母各占1/2)。各組分別在玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧中添加0、0.4、2.4和4.9 mg/kg(以硒計(jì))的酵母硒試驗(yàn)。試驗(yàn)期為42 d。結(jié)果表明：1)與對照組相比，飼糧添加0.4和2.4 mg/kg酵母硒顯著提高了22～42日齡肉仔雞平均日采食量(P<0.05)；飼糧添加0.4、2.4和4.9 mg/kg酵母硒顯著提高了1～42日齡肉仔雞平均日增重(P<0.05)，而各酵母硒添加組之間差異不顯著(P>0.05)。2)飼糧添加不同水平酵母硒除對21日齡肉仔雞血漿尿素氮含量和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性以及42日齡肉仔雞血漿GSH-Px活性有顯著影響(P<0.05)外，對其他血漿生化指標(biāo)均無顯著影響(P>0.05)。與對照組相比，各酵母硒添加組21和42日齡肉仔雞血漿GSH-Px活性隨著酵母硒添加水平的增加均顯著提高(P<0.05)，且飼糧添加2.4 mg/kg酵母硒顯著降低了21日齡肉仔雞血漿尿素氮含量(P<0.05)。3)飼糧添加不同水平酵母硒對21和42日齡肉仔雞血液血紅蛋白含量和紅細(xì)胞壓積及42日齡肉仔雞器官指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)，且并未引起主要器官的組織結(jié)構(gòu)變化。綜上所述，肉仔雞飼糧中酵母硒的添加水平為0.4 mg/kg(飼糧中總硒含量為0.41 mg/kg)時(shí)，具有10倍的安全系數(shù)，即飼糧中以酵母硒形式添加硒對肉仔雞是安全的。

酵母硒；生物安全性評價(jià)；肉仔雞

1973年，世界衛(wèi)生組織(WHO)和國際營養(yǎng)組織確認(rèn)硒為人和動(dòng)物體內(nèi)必需的微量元素[1]。硒的營養(yǎng)主要是通過與酶蛋白結(jié)合發(fā)揮抗氧化作用。此外，硒還具有增強(qiáng)機(jī)體免疫、促生長、提高繁殖性能、降血脂、抗應(yīng)激、抗衰老、抗癌等作用。長期以來，飼糧中硒的補(bǔ)充通常以無機(jī)硒(亞硒酸鈉)作為硒源。然而，由于亞硒酸鈉毒性較大且生物利用率較低，對動(dòng)物和環(huán)境可能造成潛在的危害。Kim等[2]在豬飼糧中添加0～20 mg/kg酵母硒和亞硒酸鈉形式的硒時(shí)豬表現(xiàn)出不同的中毒反應(yīng)，且硒添加水平大于5.0 mg/kg時(shí)，隨著硒添加水平的繼續(xù)增加，與酵母硒組相比，亞硒酸鈉組的豬中毒癥狀更嚴(yán)重，主要表現(xiàn)在豬的采食量和日增重大大降低，以及脫毛、蹣跚步態(tài)、冠狀帶分離、血漿谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性升高的發(fā)生率高等方面。郭軍蕊[3]研究了飼糧中添加0～5.0 mg/kg蛋氨酸硒對肉仔雞的飼用安全性，結(jié)果表明，飼糧中添加5.0 mg/kg蛋氨酸硒對1～42日齡肉仔雞無明顯不良影響。然而，關(guān)于酵母硒對肉仔雞的安全性評價(jià)尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)通過測定肉仔雞生長性能、血液生理和血漿生化指標(biāo)、器官指數(shù)和組織結(jié)構(gòu)變化，以評價(jià)玉米-豆粕型飼糧添加不同水平酵母硒對1～21日齡和22～42日齡肉仔雞的影響，為確定酵母硒在肉仔雞飼糧中最高添加水平的安全系數(shù)提供科學(xué)依據(jù)，以確保其在肉仔雞生產(chǎn)中的安全應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與處理

試驗(yàn)采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)。根據(jù)前期試驗(yàn)研究得到的肉仔雞玉米-豆粕型飼糧中酵母硒形式的硒適宜添加水平為0.15～0.50 mg/kg的結(jié)果[4-15]，以及農(nóng)業(yè)部頒布的《飼料和飼料添加劑畜禽靶動(dòng)物耐受性評價(jià)試驗(yàn)指南(試行)》中的有關(guān)規(guī)定，將0.5 mg/kg看作是肉仔雞飼糧以酵母硒為硒源時(shí)總硒含量的最高限量，共設(shè)置4個(gè)組，即不添加酵母硒的對照組、硒最高限量組以及分別為硒最高限量組的5和10倍的2個(gè)硒高倍劑量添加組，即酵母硒的添加水平分別為0、0.5、2.5和5.0 mg/kg(以硒計(jì))。考慮到飼糧本底中硒含量約為0.1 mg/kg，故酵母硒添加水平分別設(shè)為0、0.4、2.4和4.9 mg/kg(以硒計(jì))。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼糧

選用320只健康商品代1日齡愛拔益加(AA)肉仔雞，從中按體重和性別選取288只，隨機(jī)分為4個(gè)組，每個(gè)組6個(gè)重復(fù)(籠)，每個(gè)重復(fù)12只雞(公母各占1/2)。試驗(yàn)期為42 d，分為2個(gè)階段：1～21日齡和22～42日齡。飼養(yǎng)管理和常規(guī)免疫按《AA肉仔雞飼養(yǎng)管理手冊》進(jìn)行。雞只自由采食和飲水。試驗(yàn)期每天觀察記錄雞只健康狀況，如有雞只死亡，立即解剖，觀察分析病理死因，并結(jié)料。分別于試驗(yàn)期第21和42天以重復(fù)(籠)為單元稱雞空腹體重和剩料量，計(jì)算平均日采食量、平均日增重、料重比和死亡率。

參照NRC(1994)[16]家禽營養(yǎng)需要量中肉仔雞營養(yǎng)建議量配制試驗(yàn)雞1～21日齡和22～42日齡的玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1，并按上述組別設(shè)置分別在各階段基礎(chǔ)飼糧中通過調(diào)整玉米淀粉的用量而配制4種試驗(yàn)飼糧。酵母硒由安琪酵母有限公司提供，硒含量2 265 mg/kg。試驗(yàn)飼糧以粉料喂給。肉仔雞飼糧中硒含量分析值見表2。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items含量Content1～21日齡1to21daysofage22～42日齡22to42daysofage蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys0．900．77鈣Ca1．000．90非植酸磷NPP0．450．40硒Se/(mg/kg)0．0300．022

1)微量成分為每千克飼糧提供 Micronutrients provided the following per kilogram of the diet: 1～21日齡 1 to 21 days of age，VA 15 000 IU，VD34 500 IU，VE 24 U，VK33 mg，VB13 mg，VB29.6 mg，VB63 mg，VB120.018 mg，泛酸鈣 pantothenic acid calcium 15 mg，煙酸 nicotinic acid 39 mg，葉酸 folic acid 1.5 mg，生物素 biotin 0.15 mg，膽堿 choline 700 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，Mn (as manganese sulfate) 110 mg，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 60 mg，Zn (as zinc sulfate) 60 mg，I (as potassium iodide) 0.35 mg；22～42日齡 22 to 42 day of age，VA 10 000 IU，VD33 400 IU，VE 16 IU，VK32.0 mg，VB12.0 mg，VB26.4 mg，VB62.0 mg，VB120.012 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 10 mg，煙酸 nicotinic acid 26 mg，葉酸 folic acid 1.0 mg，生物素 biotin 0.1 mg，膽堿 choline 500 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，Zn (as zinc sulfate) 40 mg，Mn (as manganese sulfate) 80 mg，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 60 mg，I (as potassium iodide) 0.35 mg。

2)粗蛋白質(zhì)、鈣和硒為實(shí)測值，其余均為計(jì)算值。CP, Ca and Se were measured values, while the others were calculated values.

表2 肉仔雞飼糧中硒含量分析值

分析值為2個(gè)平行測定結(jié)果的平均值。

Analyzed values were mean values based on duplicate determinations.

1.3 樣品采集與制備

配合試驗(yàn)飼糧時(shí)現(xiàn)場采樣，粉碎過200目篩后置于封口樣品袋中低溫干燥保存以備分析粗蛋白質(zhì)、鈣和硒含量。分別于試驗(yàn)雞的21和42日齡時(shí)，所有雞只禁食而不禁水1夜后，于第2天08:00分別稱雞只空腹個(gè)體活重，從每個(gè)重復(fù)籠中按籠平均體重選取2只雞(公母各1只)，翅靜脈采血10～15 mL。其中，取一份抗凝血測定血液常規(guī)生理指標(biāo)；另一份于3 000 r/min離心20 min，分離血漿并分裝，于-20 ℃凍存，以備分析血漿生化指標(biāo)。各重復(fù)(籠)2只雞的全血或血漿合為1個(gè)分析樣品。

于42日齡試驗(yàn)結(jié)束采血后，從每組的各重復(fù)(籠)中按籠平均體重另選取2只雞(公母各1只)，屠宰后摘取胸腺、法氏囊、脾臟、胰臟、心臟、肺臟、肝臟、腎臟、腺胃和肌胃，另取出十二指腸、空腸和回腸擠出其中內(nèi)容物，分別稱重，計(jì)算器官指數(shù)；測量十二指腸、空腸、回腸長度，計(jì)算小腸各段長度指數(shù)；同時(shí)觀察記錄各個(gè)臟器的形態(tài)變化。

臟器指數(shù)(%)=(器官重量/活體體重)×100；
小腸各段長度指數(shù)(%)=(小腸各段
長度/小腸總長度)×100。

各臟器稱重后，每個(gè)組從其中3個(gè)重復(fù)(籠)各取1只公雞、另3個(gè)重復(fù)(籠)各取1只母雞的部分肝臟、腎臟、心臟、肺臟和脾臟，放入裝有4%福爾馬林溶液的棕色瓶中固定，以備制作切片，觀測其組織結(jié)構(gòu)變化。

1.4 樣品分析

1.4.1 飼料原料和飼糧樣品分析

樣品經(jīng)濃硝酸和高氯酸濕法消化后，采用IRIS IntrepidⅡ等離子體發(fā)射光譜儀(TE，美國)測定飼料原料和飼糧中鈣含量[17]；飼料原料和飼糧中粗蛋白質(zhì)含量按AOAC(1990)[18]中所述方法測定；酵母硒產(chǎn)品及飼料原料和飼糧中的硒含量采用熒光法[19]測定。

1.4.2 全血、血漿及組織指標(biāo)分析

采用KX-21血細(xì)胞自動(dòng)分析儀(SYSMEX，日本)測定血液常規(guī)生理指標(biāo)(血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積)；采用TBA-40FR全自動(dòng)生化分析儀(Toshiba，日本)測定血漿生化指標(biāo)[乳酸脫氫酶(LDH)、GOT、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、肌酸磷酸激酶(CK)、堿性磷酸酶(APK)活性及尿素氮(UN)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、總膽紅素(TBILL)、肌酐(CREA)、總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量]；采用試劑盒(南京建成生物工程研究所)測定血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。

1.4.3 組織結(jié)構(gòu)檢查

按Deng等[20]和Ashraf等[21]報(bào)道的方法進(jìn)行組織結(jié)構(gòu)檢查。主要步驟為：將固定的標(biāo)本經(jīng)水洗、透明、浸蠟、包埋等處理后，制成5 μm的切片，經(jīng)蘇木精-伊紅(HE)染色后，在顯微鏡下觀察肝臟、腎臟、心臟、肺臟和脾臟組織結(jié)構(gòu)形態(tài)變化，并用圖像采集系統(tǒng)采集相應(yīng)組織圖像。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)均用SAS 9.0[22]軟件中的一般線性模型(GLM)程序進(jìn)行方差分析，差異顯著者，以最小顯著差異(LSD)法比較平均值間的差異顯著性。以0.05作為本研究中各項(xiàng)數(shù)據(jù)的差異顯著性檢驗(yàn)水平。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母硒對肉仔雞生長性能及死亡率的影響

由表3可知，飼糧添加不同水平酵母硒除對肉仔雞22～42日齡平均日采食量和1～42日齡平均日增重有顯著影響(P<0.05)外，對1～21日齡、22～42日齡和1～42日齡肉仔雞其他生長性能指標(biāo)及死亡率均無顯著影響(P>0.05)，而對1～42日齡肉仔雞平均日采食量有影響趨勢(P=0.07)。與對照組相比，飼糧添加0.4和2.4 mg/kg酵母硒顯著提高了22～42日齡肉仔雞平均日采食量(P<0.05)，飼糧添加0.4、2.4和4.9 mg/kg酵母硒顯著提高了1～42日齡肉仔雞平均日增重(P<0.05)，而各酵母添加硒之組間差異不顯著(P>0.05)。

以上結(jié)果表明，飼糧添加不同水平酵母硒能顯著提高肉仔雞22～42日齡平均日采食量和1～42日齡平均日增重，而對其他生長性能指標(biāo)及死亡率均無顯著影響。

表3 酵母硒對肉仔雞生長性能及死亡率的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母表示差異不顯著(P>0.05)，肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same column, values with no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05)， while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below．

2.2 酵母硒對肉仔雞血液血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積及血漿生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼糧添加不同水平酵母硒對21和42日齡肉仔雞血液血紅蛋白含量及紅細(xì)胞壓積均無顯著影響(P>0.05)。

表4 酵母硒對肉仔雞血液血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積的影響

由表5可知，飼糧添加不同水平酵母硒除對21日齡肉仔雞血漿尿素氮含量和GSH-Px活性以及42日齡血漿GSH-Px活性有顯著影響(P<0.05)外，對21和42日齡肉仔雞血漿其他生化指標(biāo)均無顯著影響(P>0.05)。與對照組相比，飼糧添加2.4 mg/kg酵母硒顯著降低了21日齡肉仔雞血漿尿素氮含量(P<0.05)，但各酵母硒添加組之間無顯著差異(P>0.05)；隨著飼糧酵母硒添加水平的增加，21和42日齡肉仔雞血漿GSH-Px活性均顯著提高(P<0.05)。

2.3 酵母硒對肉仔雞器官指數(shù)的影響

由表6可知，飼糧添加不同水平酵母硒除了有增加42日齡肉仔雞肌胃指數(shù)和空腸指數(shù)的趨勢(P=0.07)外，對其他各器官指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)，且以上內(nèi)臟器官外觀未觀測到任何異常變化，表明在本次試驗(yàn)條件下，飼糧添加0.4、2.4和4.9 mg/kg酵母硒不影響肉仔雞主要內(nèi)臟器官的發(fā)育。

2.4 酵母硒對肉仔雞主要內(nèi)臟器官組織結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可見，飼糧添加不同水平酵母硒各組42日齡肉仔雞心臟未見組織結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為心臟被膜光滑；心肌細(xì)胞排列緊密、整齊，細(xì)胞染色均勻；潤盤及橫紋間質(zhì)無炎性細(xì)胞浸潤；細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，位于肌細(xì)胞的中央。

由圖2可見，飼糧添加不同水平酵母硒各組42日齡肉仔雞肝臟未見組織結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為肝小葉呈多角棱柱體，結(jié)構(gòu)完整；肝細(xì)胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列，界限清晰，呈均勻的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；肝索和肝竇結(jié)構(gòu)完整清晰。

由圖3可見，飼糧添加不同水平酵母硒各組42日齡肉仔雞肺臟未見組織結(jié)構(gòu)變化。各組肺臟成鮮紅色；三級支氣管上皮細(xì)胞無炎性滲出物；表面微絨毛粗細(xì)一致，分布均勻；肺房上皮表面平整，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，位于細(xì)胞的中央；呼吸毛細(xì)管徑大小均勻一致，管腔內(nèi)無異物，上皮細(xì)胞表面光滑；呼吸毛細(xì)管周圍毛細(xì)血管豐富。

由圖4可見，飼糧添加不同水平酵母硒各組42日齡肉仔雞脾臟未見組織結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為脾臟結(jié)構(gòu)清晰完整，脾小結(jié)數(shù)量和脾小結(jié)直徑未見變化；中央動(dòng)脈直徑和周圍淋巴鞘厚度未見差異。

由圖5可見，飼糧添加不同水平酵母硒各組42日齡肉仔雞腎臟未見組織結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為腎臟皮質(zhì)部腎小球體積適中，結(jié)構(gòu)正常，囊腔清晰；腎小管上皮細(xì)胞胞漿均質(zhì)紅染；髓質(zhì)小體的集合管上皮細(xì)胞胞漿較均質(zhì)。

以上結(jié)果表明，在本次試驗(yàn)條件下，飼糧添加不同水平酵母硒的肉仔雞主要內(nèi)臟器官均未觀測到其顯微結(jié)構(gòu)和形態(tài)的組織結(jié)構(gòu)變化。

表5 酵母硒對肉仔雞血漿生化指標(biāo)的影響

表6 酵母硒對42日齡肉仔雞器官指數(shù)的影響

圖1 酵母硒對42日齡肉仔雞心臟組織結(jié)構(gòu)變化的影響

圖2 酵母硒對42日齡肉仔雞肝臟組織結(jié)構(gòu)變化的影響

圖3 酵母硒對42日齡肉仔雞脾臟組織結(jié)構(gòu)變化的影響

圖4 酵母硒對42日齡肉仔雞肺臟組織結(jié)構(gòu)變化的影響

圖5 酵母硒對42日齡肉仔雞腎臟組織結(jié)構(gòu)變化的影響

3 討 論

3.1 酵母硒對肉仔雞生長性能及死亡率的影響

硒是甲狀腺原氨酸脫碘酶Ⅰ(ID-Ⅰ)的主要組成成分，ID-Ⅰ控制著機(jī)體甲狀腺激素[三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)]的活性。ID-Ⅰ能催化T4脫碘轉(zhuǎn)變成活性更強(qiáng)的T3，甲狀腺激素對于動(dòng)物體的生長發(fā)育起重要作用。研究顯示，動(dòng)物缺硒能引起ID-Ⅰ的活性下降，進(jìn)而降低了T4向T3的轉(zhuǎn)化速度，使血液T4的含量上升而T3的含量下降。因此，缺硒動(dòng)物生長受阻的機(jī)制可能是其體內(nèi)生長激素合成量的不足，進(jìn)而影響機(jī)體正常的生理代謝和生長發(fā)育。飼糧中添加適宜的有機(jī)硒對畜禽生長性能有明顯的改善作用。范淳[6]研究表明，飼糧添加0.1～0.2 mg/kg酵母硒形態(tài)硒可使生長快速的白羽肉雞達(dá)到較好的日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率。林長光等[23]研究表明，飼糧中添加酵母硒或納米硒，可顯著提高仔豬初生窩重和斷奶窩重。郭云霞等[24]研究表明，夏季高溫條件下在柴雞飼糧中添加0.5 mg/kg酵母硒形態(tài)硒可極顯著提高其產(chǎn)蛋率，且添加0.5和1.0 mg/kg酵母硒形態(tài)硒均可極顯著降低料蛋比。本試驗(yàn)研究表明，飼糧添加不同水平酵母硒能顯著提高22～42日齡肉仔雞平均日采食量和1～42日齡平均日增重，而對其他生長性能及死亡率無顯著影響。

3.2 酵母硒對肉仔雞血液中血紅蛋白含量及紅細(xì)胞壓積的影響

動(dòng)物血液中血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積等血液常規(guī)指標(biāo)可作為衡量機(jī)體健康狀況的依據(jù)。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，飼糧添加不同水平酵母硒對肉仔雞21和42日齡血紅蛋白含量及紅細(xì)胞壓積均無顯著影響。郭軍蕊[3]研究結(jié)果顯示，飼糧中添加高劑量蛋氨酸硒(總硒含量為5 mg/kg)對42日齡肉仔雞血液中血紅蛋白含量及紅細(xì)胞壓積均無顯著影響，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。這表明飼糧中添加酵母硒對肉仔雞血液中血紅蛋白含量及紅細(xì)胞壓積無明顯影響。

3.3 酵母硒對肉仔雞血漿生化指標(biāo)的影響

血漿總蛋白和白蛋白的含量在一定程度上可以反映機(jī)體蛋白質(zhì)的合成和代謝狀況[25]。尿素氮是動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)消化代謝的主要終末產(chǎn)物。血漿中尿素氮含量可以反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平，當(dāng)血漿尿素氮含量低時(shí)，說明蛋白質(zhì)利用率高。本研究結(jié)果表明，與對照組相比，飼糧添加2.4 mg/kg酵母硒顯著降低了21日齡肉仔雞血漿尿素氮含量，而對血漿總蛋白和白蛋白的含量無顯著影響。孫春陽等[26]研究結(jié)果表明，飼糧中添加葡萄糖氧化酶和酵母硒混合添加劑顯著降低了21和42日齡血清尿素氮含量，與本試驗(yàn)結(jié)果類似。這說明酵母硒有提高肉仔雞機(jī)體蛋白質(zhì)利用率的作用。

血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是反映機(jī)體肝功能的重要指標(biāo)。當(dāng)肝臟受到損傷時(shí)，血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性會(huì)升高。血漿中磷酸肌酸激酶活性能反映出心肌細(xì)胞受損的水平。堿性磷酸酶多存在于骨骼及肝臟中，可以將相應(yīng)底物去磷酸化產(chǎn)生磷酸，然后與鈣結(jié)合沉積于骨骼中，肝臟或成骨細(xì)胞出現(xiàn)損傷時(shí)，堿性磷酸酶活性會(huì)升高。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，飼糧添加不同水平酵母硒對血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸磷酸激酶及堿性磷酸酶等活性均無顯著影響，這與郭軍蕊[3]研究結(jié)果相似。這表明飼糧中添加0.4、2.4、4.9 mg/kg酵母硒對肉仔雞肝臟和心臟均無不良影響。

硒是GSH-Px的必需組成部分，GSH-Px的活性高低可反映機(jī)體抗氧化能力強(qiáng)弱。Wang等[27]研究結(jié)果表明，飼糧添加不同硒源(亞硒酸鈉、酵母硒)均顯著提高了肉仔雞血漿GSH-Px活性。王巧莉等[28]研究結(jié)果表明，添加酵母硒可顯著提高肉鵝血漿中GSH-Px活性。硒是GSH-Px的活性中心，機(jī)體中30%～40%的硒以GSH-Px的形式存在，GSH-Px活性與硒在一定水平范圍內(nèi)隨硒水平的升高而升髙。本研究結(jié)果表明， 21和42日齡，各酵母硒添加組隨著酵母硒添加水平的增加肉仔雞血漿GSH-Px活性均顯著提高。這說明飼糧添加高水平酵母硒可提高肉仔雞的抗氧化能力。

3.4 酵母硒對肉仔雞器官指數(shù)的影響

免疫器官指數(shù)和消化器官指數(shù)是反映動(dòng)物免疫和消化功能的重要參考指標(biāo)。杜禛等[29]報(bào)道，高硒對雞腸道黏膜有毒性作用，而在本試驗(yàn)中，飼糧添加0.4、2.4、4.9 mg/kg酵母硒對肉仔雞內(nèi)臟和胃腸器官指數(shù)均無顯著影響。本試驗(yàn)中添加的高水平硒并未對雞腸道黏膜有顯著影響，可能與硒添加形態(tài)的不同及雞品種的不同有關(guān)。

3.5 酵母硒對肉仔雞主要組織結(jié)構(gòu)變化的影響

祁周約等[30]用硒含量分別為8.06和13.08 mg/kg的高硒玉米配制的高硒飼糧飼喂60日齡的育成雞，釆集心臟、肝臟、脾臟、胸肌等組織進(jìn)行病理學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)高硒組以心肌萎縮變形、肝臟灶狀壞死為主要癥狀。尹小平[31]添加12 mg/kg亞硒酸鈉形態(tài)硒，飼喂柳州黑雞45 d，病理變化主要表現(xiàn)在心臟、肝臟等實(shí)質(zhì)器官的變性、壞死。本試驗(yàn)中，飼糧添加酵母硒未觀測到肉仔雞心臟等主要內(nèi)臟器官組織顯微結(jié)構(gòu)和形態(tài)的組織結(jié)構(gòu)變化。此結(jié)果與前人研究結(jié)果[30-31]不一致，可能因?yàn)楸驹囼?yàn)的高水平酵母硒組的硒含量更低，且硒的添加形態(tài)不同。這表明飼糧添加高水平酵母硒(2.4、4.9 mg/kg)不會(huì)引起肉仔雞重要組織結(jié)構(gòu)變化。

本試驗(yàn)中，由于實(shí)際測得的基礎(chǔ)飼糧硒含量值低于0.10 mg/kg，使得飼糧中添加0.4 mg/kg酵母硒的最高限量組實(shí)測總硒含量只為0.41 mg/kg，低于我國農(nóng)業(yè)部于2009年發(fā)布的《飼料添加劑安全使用規(guī)范》(第1224號)公告中規(guī)定的以酵母硒為硒源時(shí)配合飼糧中硒的最高限量0.5 mg/kg。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，飼糧添加0.4、2.4、4.9 mg/kg酵母硒并未對肉仔雞生長性能、血漿生化指標(biāo)、免疫器官及主要臟器發(fā)育造成不良影響，因此，肉仔雞飼糧中酵母硒的添加水平為0.4 mg/kg，即肉仔雞飼糧中硒的總量為0.41 mg/kg時(shí)，具有10倍多的安全系數(shù)，對肉仔雞飼喂是安全的。

4 結(jié) 論

飼糧添加0.4～4.9 mg/kg的酵母硒對肉仔雞生長性能、血常規(guī)指標(biāo)、多數(shù)血漿生化指標(biāo)和主要臟器發(fā)育均無不良影響，主要內(nèi)臟均未觀測到組織病理學(xué)變化，所有雞只均未出現(xiàn)毒性反應(yīng)。因此，肉仔雞飼糧中酵母硒的添加水平為0.4 mg/kg，即肉仔雞飼糧中硒的總含量為0.41 mg/kg時(shí)，具有10倍多的安全系數(shù)，對肉仔雞飼喂是安全的。

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*Contributed equally

**Corresponding authors: LYU Lin, associate professor, E-mail: lulin1225@163.com; GUO Yanli, professor, E-mail: guoyl@gsau.edu.cn

(責(zé)任編輯 武海龍)

Evaluation of the Biological Safety of Selenium Yeast for Broilers

HE Wengang1ZHAO Yuzhen2*LIAO Xiudong2ZHANG Liyang2LYU Lin2**GUO Yanli1**LUO Xugang2
(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070,China; 2.MineralNutrition
ResearchDivision,InstituteofAnimalScience,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193,China)

This experiment was conducted to investigate the effects of dietary different supplemental levels of selenium yeast on growth performance, hemoglobin content and hematocrit in blood, plasma biochemical parameters, organ indices and histopathological changes of Arbor Acres (AA) broilers so as to evaluate the biological safety of selenium yeast for broiler chicks．A total of 288 one-day-old AA broilers were randomly allocated into four groups with six replicates per group and twelve broilers per replicate (half male and half female) in a completely randomized design. Broilers were fed the corn-soybean meal basal diets supplemented with 0, 0.4, 2.4 or 4.9 mg/kg selenium yeast (as selenium). The experiment lasted for 42 days. The results showed as follows: 1) compared with the control group, dietary supplemented with 0.4 and 2.4 mg/kg selenium yeast significantly increased the average daily feed intake of broilers during 22 to 42 days of age (P<0.05), dietary supplemented with 0.4, 2.4 and 4.9 mg/kg selenium yeast significantly increased the average daily gain of broilers during 1 to 42 days of age (P<0.05), but no significant differences were found in the above two indices among all the selenium yeast groups (P>0.05). 2) Except dietary different supplemental levels of selenium yeast significant affected the urea nitrogen content and glutathione peroxidase (GSH-Px) activity in plasma of broilers at 21 days of age and plasma GSH-Px activity of broilers at 42 days of age (P<0.05), but did not affect the other plasma biochemical parameters (P>0.05). Compared with the control group, the plasma GSH-Px activity of broilers at 21 and 42 days of age in selenium yeast groups was significantly increased as dietary selenium yeast level increased (P<0.05), and dietary supplemented with 2.4 mg/kg selenium yeast significantly decreased plasma urea nitrogen content of broilers at 21 days of age (P<0.05). 3) Dietary different supplemental levels of selenium yeast had no significant effects on hemoglobin content and hematocrit in blood of broilers at 21 and 42 days of age and organ indices of broilers at 42 days of age (P>0.05), and did not cause the histopathological changes of major organs. These results indicate that when dietary supplemental level of selenium yeast is 0.4 mg/kg (dietary total selenium content is 0.41 mg/kg), the supplemental level of chromium (as selenium yeast) to diet which is 10 times of the allowance will be safe for broilers.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(5)：1634-1644]

selenium yeast; biological safety evaluation; broilers

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.05.023

2016-11-18

農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管(飼料質(zhì)量安全監(jiān)管)項(xiàng)目；國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系崗位專家專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)(CARS-42)；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)(ASTIP-IAS08)

何文剛(1990—)，男，甘肅會(huì)寧人，碩士研究生，從事動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究。E-mail: 1039785970@qq.com

S831

A

1006-267X(2017)05-1634-11

*同等貢獻(xiàn)作者

**通信作者：呂 林，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail： lulin1225@163.com；郭艷麗，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: guoyl@gsau.edu.cn