吳翠霞　路興濤　馬沖　孫竹波　孔繁華

摘要：為明確山東省濟寧市魚臺縣稻茬麥區(qū)菵草對炔草酯的抗性水平，采用溫室盆栽法和培養(yǎng)皿法，分別測定14個稻茬麥田菵草對炔草酯的抗性水平。結(jié)果表明，溫室盆栽法和培養(yǎng)皿法測得的菵草對炔草酯抗性趨勢基本一致，除采自王廟鎮(zhèn)南房村路邊的菵草仍處于敏感狀態(tài)外，其余種群均對炔草酯產(chǎn)生了較高水平的抗性。在13個抗性種群中，中抗種群4個，高抗種群9個，其中老寨鄉(xiāng)張埝村的3個種群抗性水平相對較高，溫室盆栽法的抗性倍數(shù)分別為763.75、2278.85、4411.79，培養(yǎng)皿法下的抗性倍數(shù)分別為313.75、394.50、624.00。

關(guān)鍵詞：稻茬麥區(qū)；菵草；炔草酯；抗藥性

中圖分類號：S451文獻標(biāo)志碼：A文章編號：1003-935X（2016）02-0045-04

山東省小麥田雜草因氣候、種植模式不同，分布也存在較大差異，但雜草群落主要以播娘蒿、薺菜、看麥娘、節(jié)節(jié)麥等10種雜草為主，而菵草作為區(qū)域性優(yōu)勢雜草，主要分布于山東省西南部平洼區(qū)的菏澤市、濟寧市[1]。

菵草（Beckmanniasyzigachne），禾本科菵草屬雜草，一年或越年生，種子繁殖，適生于水邊及潮濕處，在長江流域及西南地區(qū)稻茬麥田和油菜田危害嚴重，也是山東省濟寧市魚臺縣單季稻作區(qū)麥田的主要雜草。歷年來，菵草的防除主要以化學(xué)防治為主，主要藥劑有精[XCY1.tif]唑禾草靈和炔草酯，兩者作用機理相同，均為脂肪酸合成抑制劑，作用靶標(biāo)為乙酰輔酶A羧化酶（acetylCoAcarboxylase，ACCase）。精[XCY1.tif]唑禾草靈作為生產(chǎn)中防除禾本科雜草的主要除草劑，在我國使用已近20年，對菵草的防效逐年下降，多數(shù)地區(qū)菵草已產(chǎn)生較高抗性[2-6]。盡管炔草酯使用年限相對較短，但已有少數(shù)抗精[XCY1.tif]唑禾草靈種群對其產(chǎn)生交互抗性[5-6]，其中包括采自魚臺縣老寨鄉(xiāng)張埝村的抗性種群[6]。鑒于此，筆者采用溫室盆栽法和培養(yǎng)皿法，檢測了魚臺縣稻茬麥區(qū)菵草對炔草酯的抗性水平，以期為菵草的有效防除提供理論支持。

1材料與方法

1.1材料

95%炔草酯原藥和15%炔草酯可濕性粉劑，均購自瑞士先正達作物保護有限公司。

2014年5月，于山東省濟寧市魚臺縣稻麥輪作區(qū)采集14個稻茬麥田菵草種群，采集地點與用藥歷史見表1。

1.2試驗方法

1.2.1溫室盆栽法

每盆（直徑12cm）播種15粒已解除休眠催芽露白的種子，覆土0.5～1.0cm，置于溫室內(nèi)培養(yǎng)，室內(nèi)溫度20～26℃，相對濕度（65±15）%，自然光照。以盆缽底部滲灌方式補水，保持土壤濕度。雜草1～2葉期間苗，每盆保留10株，3～4葉期采用ASS-3型農(nóng)藥室內(nèi)噴灑系統(tǒng)，DG8003噴頭施藥，噴霧壓力2.75MPa，噴液量400L/hm2，濃度為11.25、22.50、45.00、90.00、180.00ga.i./hm2，分別為田間常規(guī)用量的1/4、1/2、1、2、4倍，以噴施清水作為對照。處理1～5d后，目測雜草情況，21d后剪取雜草地上部分并稱質(zhì)量，計算鮮質(zhì)量抑制率[7]，使用DPS7.05軟件對藥劑劑量的對數(shù)值x與鮮質(zhì)量防效的概率值y進行回歸分析，得到劑量-鮮質(zhì)量防效回歸方程、抑制雜草生長50%的除草劑劑量GR50（50%reductioningrowth）、置信區(qū)間及相關(guān)系數(shù)，進而計算供試雜草抗性生物型的相對抗性倍數(shù)（resistance/susceptibility，R/S）。試驗重復(fù)3次。

抗性水平判定標(biāo)準為敏感種群：1≤R/S<5；低抗種群：5≤R/S<10；中抗種群：10≤R/S<50；高抗種群：R/S≥50[8]。

1.2.2培養(yǎng)皿法

選擇飽滿一致的種子，自來水沖洗，30%次氯酸鈉溶液消毒10min，滅菌水沖洗3～5次。消毒后的種子于無菌條件下播種在1.3%瓊脂培養(yǎng)基平板上，每皿20粒，光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。晝夜培養(yǎng)溫度分別為20、15℃，每天光照10h，光照強度3000lx。在瓊脂培養(yǎng)基中加入炔草酯，以梯度濃度0.005、0.050、0.250、0.500、2.500、5.000、50.000mga.i./hm2進行抗藥性水平測定，以不加炔草酯為對照，7d后測量主根長，計算抑制率[9-10]，使用DPS7.05軟件對藥劑濃度的對數(shù)值與根長抑制率的概率值進行回歸分析，得出回歸方程、相關(guān)系數(shù)及抑制根長50%的除草劑濃度IC50（50%inhibitioningrowth），進而計算抗性倍數(shù)。重復(fù)3次。

2結(jié)果與分析

2.1溫室盆栽法

除采自王廟鎮(zhèn)南房村路邊的菵草種群（編號4）較為敏感外，其余種群均對炔草酯產(chǎn)生了不同程度的抗藥性，抗性倍數(shù)均在20.79～4411.79之間，其中，中抗種群4個，高抗種群9個。老寨鄉(xiāng)張埝村采集的3個菵草種群（編號9～11）對炔草酯的抗性水平較高，抗性倍數(shù)分別為763.75、2278.85、4411.79；其次為唐馬鎮(zhèn)楊宅子村采集的種群（編號8），抗性倍數(shù)為311.51。王廟鎮(zhèn)林莊村的2個種群（編號1、2）抗性水平也較高，抗性倍數(shù)分別為247.33、148.61，王廟鎮(zhèn)南房村（編號3）、濱湖鎮(zhèn)街道辦事處張廟村的菵草種群（編號5、6）抗性倍數(shù)則分別為54.93、59.36、67.56。中抗水平種群中，除張皂鎮(zhèn)楊婁村種群（編號12）的抗性倍數(shù)為41.52外，其余3個種群的抗性倍數(shù)均略大于20（表2）。

2.2培養(yǎng)皿法

除采自王廟鎮(zhèn)林莊村（編號1）、王廟鎮(zhèn)南房村路邊（編號4）、唐馬鎮(zhèn)楊宅子村（編號7、8）、西外環(huán)水溝旁（編號13）的菵草種群抗性倍數(shù)<2外，其他均>2。采自老寨鄉(xiāng)張埝村的3個種群（編號9～11）

抗性水平較高，抗性倍數(shù)分別為313.75、394.50、624.00，這與溫室盆栽法的結(jié)果一致。

3討論

雜草抗藥性的發(fā)生與除草劑使用頻次、農(nóng)藝措施等密切相關(guān)，重復(fù)使用1種除草劑或作用機制相同的不同除草劑，在選擇壓力的作用下，即可產(chǎn)生自然抗性雜草[11]。本研究中，于山東省濟寧市魚臺縣稻茬麥區(qū)采集的菵草種群已經(jīng)對炔草酯產(chǎn)生了不同程度的抗藥性，其中，用藥歷史較長的老寨鄉(xiāng)張埝村采集點的抗藥性相對較高，這與李凌緒的研究結(jié)果[6]一致。盡管本研究中的菵草種群表現(xiàn)出不同程度的抗藥性，但是由于采樣點較少，尚不能明確該地區(qū)菵草對炔草酯的抗性分布情況，仍須進行大范圍的抗性監(jiān)測工作。

本研究采用溫室盆栽法和培養(yǎng)皿法進行試驗，2種方法測定的抗藥性結(jié)果趨于一致，但略有差異。溫室盆栽法是篩選抗性雜草的常規(guī)方法，但與培養(yǎng)皿法相比，后者更省時省力，培養(yǎng)皿法在檢測雜草抗藥性中的作用有待進一步研究。

雜草抗藥性種群的發(fā)生不僅給雜草防除帶來困難，而且在縮短除草劑使用年限的同時，給除草劑新品種的開發(fā)帶來巨大壓力[12-13]。山東省濟寧市魚臺縣抗炔草酯菵草種群是否對其它常用除草劑品種產(chǎn)生交互抗性，以及其抗性機制，均有待進一步研究。

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