張新蘭，于清磊

（1.蘭州市動物疫病預(yù)防控制中心，蘭州 730050；2.甘肅省動物疫病預(yù)防控制中心，蘭州 730046）

2013～2016年蘭州市三種奶?？谔阋邷缁钜呙鏏型抗體效價比較

張新蘭1，于清磊2

（1.蘭州市動物疫病預(yù)防控制中心，蘭州 730050；2.甘肅省動物疫病預(yù)防控制中心，蘭州 730046）

為掌握近年來蘭州市奶牛強制免疫使用的A型口蹄疫滅活疫苗、O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗、O型-A型二價口蹄疫滅活疫苗的免疫效果，科學(xué)評價免疫質(zhì)量和合理制定口蹄疫免疫程序，本研究應(yīng)用液相阻斷ELISA方法對2013～2016年蘭州市三種奶牛口蹄疫滅活疫苗的A型抗體效價進行了血清學(xué)監(jiān)測與對比分析。結(jié)果表明，三種口蹄疫疫苗接種奶牛21d后，均能很好地誘導(dǎo)奶牛機體產(chǎn)生A型抗體，免疫效果差異不顯著。

奶牛；A型口蹄疫；血清學(xué)監(jiān)測；免疫效果；比較分析

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起偶蹄動物感染的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，以口腔黏膜、鼻鏡、蹄部和乳房皮膚發(fā)生水皰和潰爛為特征。該病傳播迅速，感染率和發(fā)病率都很高，對公共衛(wèi)生及國際貿(mào)易危害嚴重，是世界動物衛(wèi)生組織（0IE）規(guī)定的必須報告的動物傳染病之一，我國將其列為一類動物疫病。目前，預(yù)防和控制口蹄疫的主要方法是疫苗免疫接種，我國采取強制免疫措施進行口蹄疫防控。目前廣泛使用的奶牛口蹄疫疫苗有滅活疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗等，以滅活疫苗使用最為廣泛。國內(nèi)有多家獸用生物制品企業(yè)生產(chǎn)口蹄疫滅活疫苗，但產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，免疫效果差異較大[1～3]。曹世幀等[4]曾于2012年對蘭州市使用的國內(nèi)4個疫苗生產(chǎn)企業(yè)的4種O型-亞洲Ⅰ型口蹄疫滅活疫苗進行了免疫效果對比試驗，證實4種口蹄疫滅活疫苗對奶牛機體保護性抗體誘導(dǎo)能力參差不齊。本研究對2013～2016年蘭州市強制免疫使用的三種奶?？谔阋邷缁钜呙绲腁型抗體效價進行比較分析，為今后有效防控奶牛口蹄疫提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 疫苗

政府招標(biāo)采購的國內(nèi)兩個主要口蹄疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的A型口蹄疫滅活疫苗（批號：C131210J）、O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗（批號：20140824）、O型-A型二價口蹄疫滅活疫苗（批號：E160310J）；按照規(guī)定保存，按照使用說明進行書免疫接種。

1.2 血清樣品

全市所屬6區(qū)3縣2013～2016年春秋兩季強制免疫21d后，隨機采集免疫奶牛的血清樣品，共計2 923份，其中商品代奶牛場2 691份，奶牛養(yǎng)殖戶232份。

1.3 診斷試劑

口蹄疫A型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒（批號：2013091103、20131028、2014052003、20150422103-4、20150821103-2、20160518103-1），均由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

1.4 試驗設(shè)計

1.4.1 疫苗接種

按照國家口蹄疫免疫方案及口蹄疫免疫接種技術(shù)規(guī)范（NY/T 1955-2010）[5]進行疫苗免疫。

1.4.2 血清學(xué)檢測

按照口蹄疫診斷技術(shù)（GB/T 18935-2003）[6]進行操作與判定，免疫接種21d后采血，分離血清，進行免疫抗體水平抽樣檢測。液相阻斷ELISA檢測抗體效價≥1∶128為免疫合格。

2 結(jié)果與分析

2.1 A型口蹄疫抗體效價檢測

在全市157個奶牛養(yǎng)殖場點隨機抽取2 923份免疫過口蹄疫滅活疫苗的血清樣品，進行A型口蹄疫抗體效價檢測，免疫合格份數(shù)為2 533份，平均合格率86.66%。結(jié)果見表1。

表1 2013～2016年蘭州市奶牛A型口蹄疫抗體效價檢測結(jié)果

在117個商品代奶牛場隨機抽取2 691份免疫血清樣品進行A型口蹄疫抗體效價檢測，免疫合格份數(shù)為2 346份，平均合格率87.18%；在40個散養(yǎng)戶隨機抽取232份免疫樣品進行抗體效果檢測，免疫合格份數(shù)為187份，平均合格率80.60%。結(jié)果見表2。

表2 不同養(yǎng)殖場點奶牛A型口蹄疫免疫抗體檢測結(jié)果

A型口蹄疫滅活疫苗在73個場點隨機抽取1 197份免疫血清樣品進行抗體效價檢測，免疫合格份數(shù)為1 006份，平均合格率84.04%；O型-A型-亞洲I型口蹄疫三價滅活疫苗在49個場點隨機抽取956份免疫血清樣品進行A型抗體效價檢測，免疫合格份數(shù)為869份，平均合格率90.90%；O型-A型口蹄疫二價滅活疫苗在35個場點隨機抽取770份免疫血清樣品進行A型抗體效價檢測，免疫合格份數(shù)為658份，平均合格率85.45%。結(jié)果見表3。

2.2 結(jié)果分析

2.2.1 三種口蹄疫疫苗的A型免疫抗體效價

國內(nèi)兩個主要口蹄疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的三種口蹄疫滅活疫苗的A型口蹄疫免疫抗體效價合格率均達到農(nóng)業(yè)部≥70%的規(guī)定要求（圖1），說明三種疫苗均能很好地誘導(dǎo)機體產(chǎn)生A型抗體，免疫效果符合國家規(guī)定。

圖1 2013～2016年三種口蹄疫滅活疫苗A型免疫抗體效價合格率

表3 三種口蹄疫滅活疫苗A型抗體效價檢測結(jié)果

2.2.2 不同養(yǎng)殖場A型口蹄疫免疫抗體效價檢測結(jié)果

從2013～2016年蘭州市奶牛A型口蹄疫免疫抗體效價檢測結(jié)果看，規(guī)模奶牛場和散養(yǎng)戶免疫抗體合格率差異不顯著（圖2）。此結(jié)果與馬長賓等[7]監(jiān)測結(jié)果相符，說明規(guī)模養(yǎng)殖場或散養(yǎng)戶只要按照正確的操作方法和科學(xué)的免疫程序操作，使用合格的疫苗產(chǎn)品，并做好疫苗的貯存工作，就能保障良好的免疫效果。

圖2 不同養(yǎng)殖場點A型口蹄疫免疫抗體效價合格率

2.2.3 三種口蹄疫疫苗的免疫合格率比較

理想的口蹄疫疫苗應(yīng)該是在一次免疫接種后就能刺激機體產(chǎn)生有效、持久的免疫應(yīng)答。圖1和圖3顯示，三種口蹄疫疫苗免疫合格率均很高，而O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗一免多效，操作省工省時，可縮短防疫周期，大大減輕防疫員的勞動強度。

圖3 A型口蹄疫免疫抗體效價檢測合格率

3 建議

3.1 進一步加快奶牛口蹄疫的防控與凈化工作

口蹄疫的強制免疫事關(guān)我國口蹄疫的防控與凈化工作，也事關(guān)公共衛(wèi)生安全，各級政府和獸醫(yī)行政管理部門應(yīng)高度重視，不斷加大免疫效果監(jiān)測力度，不斷擴大監(jiān)測覆蓋面，通過科學(xué)檢測，達到凈化目標(biāo)。

3.2 進一步加強奶牛口蹄疫免疫效果監(jiān)測工作

疫苗免疫效果受多種因素的影響，不僅要針對奶牛場的實際情況制定科學(xué)的免疫程序，更要注意牛群中口蹄疫免疫抗體的變化情況，應(yīng)認真做好免疫抗體監(jiān)測工作，及時補免，確保牛群保持較高的免疫抗體水平。

3.3 進一步加大口蹄疫疫苗質(zhì)量跟蹤監(jiān)測力度

根據(jù)大量的國內(nèi)文獻資料報道，國內(nèi)生產(chǎn)的口蹄疫疫苗存在質(zhì)量參差不齊的現(xiàn)象，國家有關(guān)部門應(yīng)加大疫苗生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管和實時跟蹤監(jiān)測工作，從源頭上杜絕不合格疫苗流入市場。

3.4 嚴格按照口蹄疫免疫程序進行口蹄疫免疫

賈澤穎等[8]對奶牛A型口蹄疫免疫抗體消長規(guī)律監(jiān)測結(jié)果表明，A型口蹄疫在免疫后4個月抗體水平下降到臨界值；郭日東等[9]對奶?？谔阋呙庖叱绦虮O(jiān)測結(jié)果表明，口蹄疫最佳的免疫程序是1年免疫3次。犢牛應(yīng)在首免后1個月進行二免，以后每4個月加強免疫一次，成年母牛首免后，每4個月加強一次。

3.5 在秋末入冬前對奶牛進行一次全面的強制免疫

從三種口蹄疫滅活疫苗A型免疫抗體效價檢測結(jié)果看， O型-A型-亞洲I型三價口蹄疫滅活疫苗抗體水平較好，該疫苗抗原含量為6個PD50，是入冬前免疫首選疫苗。冬春季節(jié)特別是1～2月份為口蹄疫高發(fā)季節(jié)，應(yīng)在入冬前開展一次免疫接種工作。

[1] 裴潔,田峰,金鑫,等.四種豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫效果的比較[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2013,9:14-15.

[2] 黃志堅.兩種豬口蹄疫O型疫苗應(yīng)用效果對比試驗[J].福建畜牧獸醫(yī),2013,5(5):17-18.

[3] 文崇利,蘭家暖,陳田嬌,等.三種豬O型口蹄疫商品滅活疫苗免疫效果比較[J].廣西畜牧獸醫(yī),2014,30(5):251-254.

[4] 曹世幀,汪占弟,魏素紅,等.奶牛口蹄疫O型-亞洲Ⅰ型二價滅活疫苗免疫效果對比試驗[J]. 中國奶牛,2012,13:44-46.

[5] 農(nóng)業(yè)部.NY/T 1955-2010口蹄疫免疫接種技術(shù)規(guī)范[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010-09-21.

[6] 農(nóng)業(yè)部.GB/T 18935-2003口蹄疫診斷技術(shù)[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003-01-10.

[7] 馬長賓,劉向鵬,陳文武,等.不同養(yǎng)殖模式下牛群口蹄疫免疫抗體監(jiān)測情況分析[J].中國草食動物科學(xué),2015,35(4):57-58.

[8] 賈澤穎,劉鄧,郭又春,等.奶牛O型、亞洲Ⅰ型、A型口蹄疫免疫抗體變化規(guī)律觀察[J]. 中國奶牛,2013,4:36-38.

[9] 郭日東,宋麗華,韓吉雨,等.奶?？谔阋呙庖叱绦虻难芯縖J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘,2014,30(5):100-102.

S858.23

A

1004-4264（2017）03-0030-03

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.03.009

2016-09-12

張新蘭（1962-），女，高級獸醫(yī)師，主要從事動物疫病防控技術(shù)的研究和動物疫病實驗室檢測工作推廣應(yīng)用。

于清磊。