王玉清

(黃淮學(xué)院體育系，河南 駐馬店 463000)

運(yùn)動(dòng)配合艾灸治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制

王玉清

(黃淮學(xué)院體育系，河南 駐馬店 463000)

目的 觀察運(yùn)動(dòng)及艾灸對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠骨代謝和骨密度的干預(yù)效應(yīng)并探討其作用機(jī)制。方法 通過卵巢去勢的方法造成大鼠骨質(zhì)疏松模型，造模后隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組、模型組、運(yùn)動(dòng)組、艾灸組、運(yùn)動(dòng)+艾灸組。治療12 w后，檢測大鼠體重、血清鈣(S-Ca)、血清磷(S-P)、血清雌二醇(E2)、 血清骨鈣素(BGP)及骨密度(BMD)。結(jié)果 與假手術(shù)組比較，骨質(zhì)疏松大鼠體重增加，S-Ca降低，S-P上升，E2 降低，BGP降低，BMD下降(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比，各治療組大鼠體重增長受到抑制，但差異不顯著(P>0.05)；S-Ca上升，S-P下降，其中運(yùn)動(dòng)+艾灸組有顯著差異(P<0.05)；S-P明顯下降(P<0.05或P<0.01)；BMD均明顯上升，運(yùn)動(dòng)+艾灸組BMD值高于運(yùn)動(dòng)組或艾灸組。結(jié)論 運(yùn)動(dòng)+艾灸可以有效降低骨質(zhì)疏松大鼠的骨代謝異常旺盛水平，明顯提高其BMD，運(yùn)動(dòng)+艾灸在治療骨質(zhì)疏松方面具有良好的協(xié)同增效作用。

運(yùn)動(dòng)；艾灸；骨質(zhì)疏松；骨代謝；骨密度

骨質(zhì)疏松(OP)使骨強(qiáng)度降低，骨脆性增加，引起全身性骨折〔1〕。臨床多采用藥物治療，雖有一定療效，但費(fèi)用昂貴、副作用大。運(yùn)動(dòng)療法具有簡便、易行、安全、經(jīng)濟(jì)和療效持久等特點(diǎn)，而艾灸治療操作簡便，無痛舒適，患者參與度高，在民間早已廣泛為患者所樂于接受。然而在既往研究中，運(yùn)動(dòng)配合艾灸治療方法療效優(yōu)劣和療法特點(diǎn)目前卻未見報(bào)道。本研究通過血清鈣(S-Ca)、血清磷(S-P)、血清雌二醇(E2)、血清骨鈣素(BGP)及骨密度(BMD)檢測，評(píng)價(jià)運(yùn)動(dòng)配合艾灸對(duì)去勢大鼠骨代謝和BMD的干預(yù)效應(yīng)，并探討其作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 動(dòng)物造模及分組 7個(gè)月齡雌性健康大鼠體重280～320 g，共70只，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證書：豫醫(yī)動(dòng)字第4104035號(hào)。將大鼠隨機(jī)分為2組，假手術(shù)組18只，其余52只為去卵巢模型組。大鼠在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，假手術(shù)組大鼠行假手術(shù)，其余大鼠行雙側(cè)卵巢去除術(shù)〔2〕。手術(shù)后第10周從假手術(shù)組和模型組分別隨機(jī)選出6只大鼠處死后取右側(cè)股骨，將附著肌肉和結(jié)締組織去除，采用雙能X線骨密度測試儀進(jìn)行檢測，用來驗(yàn)證造模成功與否。造模成功后，假手術(shù)組留10只大鼠。將去卵巢大鼠隨機(jī)分為4組，模型組、運(yùn)動(dòng)組、艾灸組、運(yùn)動(dòng)+艾灸組，每組10只。

1.2 治療方法 運(yùn)動(dòng)組大鼠術(shù)后在傾角為7°的跑臺(tái)上進(jìn)行中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)，大鼠跑步速度為18 m/min,每天練習(xí)1 h，每周訓(xùn)練5 d，連續(xù)訓(xùn)練12 w〔3〕。艾灸組根據(jù)大鼠穴位圖譜《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》〔4〕，對(duì)艾灸組大鼠的脾俞、腎俞和三陰交穴進(jìn)行艾灸。將去勢大鼠固定在灸鼠盒內(nèi)，保持清醒的狀態(tài)，選取雙側(cè)的脾俞、腎俞和三陰交穴進(jìn)行無煙艾懸灸，艾條距離大鼠穴位大約5 cm，以施術(shù)者的手部皮膚感覺到溫?zé)釣槎?，每穴每次艾?0 min，每天艾灸1次，1個(gè)療程為5 d，休息2 d后再繼續(xù)進(jìn)行下1個(gè)療程，治療時(shí)間為13 w。運(yùn)動(dòng)+艾灸組，運(yùn)動(dòng)和艾灸方法同上。假手術(shù)組每次給予蒸餾水10 ml/kg 灌胃。在治療的過程中，本組大鼠的活動(dòng)和飲食不受限制。

1.3 試劑和儀器 S-Ca、S-P、E2、 血清BGP由159醫(yī)院科技開發(fā)中心提供的試劑盒，采用比色的方法和放免法，根據(jù)計(jì)算公式分別求出各指標(biāo)水平。各組大鼠治療結(jié)束后腹主動(dòng)脈采血后處死，收集血清，放置在-20℃的冰箱里待測。每組大鼠采血處死后，摘取右側(cè)的股骨，用雙能X線骨密度測定儀(CHALCENGER法國DMS產(chǎn)品)對(duì)BMD進(jìn)行測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠試驗(yàn)前后體重的變化比較 試驗(yàn)前各組大鼠體重?zé)o明顯差異(P>0.05)，進(jìn)行卵巢切除造模，各組去勢大鼠體重增長顯著超過假手術(shù)組(P<0.05,P<0.01)。模型組體重增加最多(P<0.01)；運(yùn)動(dòng)組和艾灸組能夠抑制體重增長的趨勢(P<0.05)。運(yùn)動(dòng)+艾灸組體重雖然比假手術(shù)組有所增長，但無明顯差異(P>0.05)。表明運(yùn)動(dòng)配合艾灸能有效地抑制去勢大鼠體重的增長。見表1。

表1 各組大鼠試驗(yàn)前后體重比較

與假手術(shù)組比較：1)P<0.01，2)P<0.05，與模型組比較：3)P<0.01，4)P<0.05，下表同

2.2 各組大鼠S-Ca、S-P和BGP比較 與假手術(shù)組比較，其他組大鼠S-Ca明顯下降(P<0.01，P<0.05)。與模型組比較，運(yùn)動(dòng)組和艾灸組均存在顯著差異(P<0.05)，運(yùn)動(dòng)+艾灸組與模型組比較存在極顯著差異(P<0.01)。模型組S-P與假手術(shù)組之間差異顯著(P<0.01)，提示造模成功。運(yùn)動(dòng)組和艾灸組與假手術(shù)組相比有顯著差異(P<0.05)。運(yùn)動(dòng)+艾灸組與假手術(shù)組相比差異不明顯(P>0.05)；運(yùn)動(dòng)組及艾灸組與模型組相比均有顯著差異(P<0.05)，運(yùn)動(dòng)+艾灸組與模型組之間差異顯著(P<0.01)。與假手術(shù)組大鼠比較，模型組大鼠BGP顯著降低(P<0.01)，與模型組比較，各治療組BGP均上升，其中運(yùn)動(dòng)+艾灸組有極顯著差異(P<0.01)。見表2。

2.3 各組大鼠E2、BMD比較 與假手術(shù)組相比，模型組大鼠E2顯著降低(P<0.01)，與模型組相比，各治療組大鼠E2均上升，其中運(yùn)動(dòng)+艾灸組有極顯著差異(P<0.01)。切除卵巢后，模型組BMD顯著下降(P<0.01)，表明造模成功。各治療組大鼠BMD下降趨勢不明顯，表明運(yùn)動(dòng)和艾灸可起到抑制BMD下降的作用。運(yùn)動(dòng)組和艾灸組大鼠與模型組相比差異顯著(P<0.05)，而模型組與運(yùn)動(dòng)+艾灸組比較具有極顯著差異(P<0.01)。見表3。

表2 各組大鼠S-Ca、S-P 和BGP比較

表3 各組大鼠E2、BMD比較

3 討 論

卵巢切除對(duì)體重增加有顯著的促進(jìn)作用，而運(yùn)動(dòng)或艾灸對(duì)體重的增加有一定的抑制作用，且運(yùn)動(dòng)配合艾灸聯(lián)合作用比單純運(yùn)用運(yùn)動(dòng)或艾灸抑制體重增長作用明顯。

本文結(jié)果說明運(yùn)動(dòng)能夠增加去卵巢大鼠E2、S-Ca和BGP水平，但卻不能使其恢復(fù)到假手術(shù)組水平，與多數(shù)報(bào)道相似〔5，6〕；運(yùn)動(dòng)能夠使去卵巢大鼠血清E2、BGP、S-Ca和股骨BMD水平顯著增加?？赡軝C(jī)制是：運(yùn)動(dòng)使脂肪代謝加強(qiáng)，而血管和骨骼肌等組織器官的代償性促進(jìn)E2合成。雌激素的降低使血磷增加。戶外體育運(yùn)動(dòng)能得到充足陽光的照射，促進(jìn)維生素D增加，從而使鈣在腸道的吸收能力增強(qiáng)；運(yùn)動(dòng)可以增加骨量，同時(shí)對(duì)鈣的需求量也有所增加。經(jīng)常運(yùn)動(dòng)的人，因骨骼得到應(yīng)力刺激，常?？色@得較好的骨質(zhì)量。因此，運(yùn)動(dòng)可以在一定程度上抑制去勢大鼠的高轉(zhuǎn)換型骨代謝，對(duì)OP起到預(yù)防和治療作用。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為腎精虧損是導(dǎo)致OP的主要原因，腎精的虧損使骨質(zhì)無力脆弱。臨床表現(xiàn)一般將其歸屬于“骨痿”、“骨痹”的范疇。中醫(yī)理論認(rèn)為腎主骨，生髓，為先天之本，脾胃氣血化生之源，為后天之本。這就指明了腎虛、肝郁、脾虛、血疲相互影響是OP發(fā)生的根本原因。

艾灸在中醫(yī)理論中具有溫經(jīng)通絡(luò)、溫陽散寒、溫熙內(nèi)臟、行氣升陽、散瘀活血之功效。通過熱和艾條的協(xié)同作用于體表的腧穴，具有行氣通絡(luò)、扶陽固脫、升陽舉陷之功效。眾多研究表明穴位治療能調(diào)節(jié)BGP、性激素和降鈣素水平等等，從而達(dá)到抑制骨吸收，促進(jìn)骨形成，糾正骨代謝的負(fù)平衡狀態(tài)，提高BMD，預(yù)防和治療OP〔7～9〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示艾灸脾俞、腎俞和三陰交穴，對(duì)E2、S-Ca、BGP和股骨BMD的下降均有抑制作用。說明灸脾俞、腎俞和三陰交穴可以提高大鼠血清 E2和血清BGP的含量，具有補(bǔ)腎精滋養(yǎng)骨髓、清除自由基、抗衰老的作用。本實(shí)驗(yàn)表明，去勢大鼠E2 、S-Ca、BGP和股骨BMD顯著降低，S-P顯著上升，運(yùn)動(dòng)和艾灸組大鼠在各指標(biāo)都起到抑制其下降或上升趨勢。而運(yùn)動(dòng)配合艾灸組大鼠與模型組相比，各指標(biāo)均存在極顯著差異。這說明運(yùn)動(dòng)和艾灸有協(xié)同作用。運(yùn)動(dòng)+艾灸組大鼠，有兩種因素干預(yù)，即運(yùn)動(dòng)和艾灸，一方面運(yùn)動(dòng)增加了骨的負(fù)荷，引起骨較大的應(yīng)變，另一方面艾灸穴位在刺激經(jīng)絡(luò)的同時(shí)，也起到了艾灸的治療作用，艾灸調(diào)節(jié)的可能作用機(jī)制是通過刺激神經(jīng)調(diào)整人體內(nèi)分泌系統(tǒng)，通過下丘腦-垂體-腎上腺(性腺)軸刺激有關(guān)BMD指標(biāo)的分泌，從而建立了卵巢與垂體之間的負(fù)反饋關(guān)系。脾俞、腎俞和三陰交起到健脾益胃，養(yǎng)血培元、益腎補(bǔ)精，強(qiáng)壯筋骨之效，提示運(yùn)動(dòng)和艾灸聯(lián)合對(duì)OP的防治有著良好的協(xié)同作用。

綜上，運(yùn)動(dòng)聯(lián)合艾灸在調(diào)節(jié)動(dòng)物骨代謝、增加BMD具有顯著療效。但也有研究證明大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)改善OP的程度作用不大〔10〕，中長期的大運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致骨量減少〔11〕，但如何制定合理的運(yùn)動(dòng)量和艾灸的穴位選取是非常關(guān)鍵的。所以在這方面有待進(jìn)一步研究。

1 肖建德.實(shí)用骨質(zhì)疏松學(xué)〔M〕.北京：科學(xué)出版社，2004：3.

2 高志成，鄧曉東，王心愉，等.復(fù)方補(bǔ)骨膠囊對(duì)去勢大鼠骨密度的影響〔J〕.河北醫(yī)藥,2004;26(1)：16.

3 李 靖，陳一冰，張 穎,等.運(yùn)動(dòng)對(duì)去勢雌性大鼠骨質(zhì)疏松的保護(hù)作用〔J〕.中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志,2003;25(12)：705-7.

4 李忠仁.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)〔M〕.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：133.

5 章曉霜.不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢大鼠血清雌二醇水平的影響〔J〕.首都體育學(xué)院學(xué)報(bào)，2006;18(5)：35-7.

6 Tabensky AD,Williams J,Deluca V,etal.Bone mass,area,and volumetric bone density are equally accurate,sensitive and specific surrogates of the breaking strength of the vertedbral body:an in vitro study〔J〕.J Bone Miner Res,1996；21(11):1981-8.

7 曾 奕.艾灸作用的實(shí)驗(yàn)研究新進(jìn)展〔J〕.山東中醫(yī)雜志，2005；24(3)：187-90.

8 劉 飛，任 平，徐雅麗，等.艾灸防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2012;32(4)：1655-6.

9 范琳燕，趙可偉，江鋼輝，等.艾灸對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型大鼠骨代謝的影響〔J〕.新中醫(yī)，2011;43(12)：116-7.

10 章曉霜，高順生，李青南,等.不同運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度對(duì)去卵巢大鼠骨量的影響及其機(jī)理〔J〕.中國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志，2001;20(2)：147.

11 王人衛(wèi)，高 勇，陸愛云，等.大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)雌性大鼠性激素和骨密度的影響〔J〕.中國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志，2003;22(2)：121.

〔2015-09-25修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢(mèng)園)

河南省科技廳資助項(xiàng)目(No.152102310243)

王玉清(1970-)，男，碩士，副教授，主要從事運(yùn)動(dòng)保健與康復(fù)研究。

R285.5

A

1005-9202(2017)04-0839-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.023