桑白皮中摩魯新L的含量測定方法研究

2017-03-15 01:50:10薛天樂

宿州學(xué)院學(xué)報 2017年1期

關(guān)鍵詞：桑白皮亳州測定方法

薛天樂，丁銳

亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，亳州，236800

桑白皮中摩魯新L的含量測定方法研究

薛天樂，丁銳

亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，亳州，236800

為探索桑白皮中摩魯新L含量的測定方法，利用高效液相色譜法對桑白皮中摩魯新L含量進行了測定(色譜條件：Alltima C18色譜柱：4.6 mm×250 mm,5μm，流動相乙腈:水:乙酸=50∶50∶0.1，檢測波長270 nm)，結(jié)果表明：摩魯新 L在3.6～18 μg/mL之間線性良好(R2= 0.9993)，平均回收率為100.2%，RSD=1.1%。

桑白皮；摩魯新L；高效液相色譜法

桑白皮是桑科植物桑(MorusalbaL.)的干燥根皮，是常用的中藥材之一，有利水消腫、瀉肺平喘的功效。近年來，有研究表明桑白皮還具有降血糖、降血壓、降血脂、抗病毒、抗炎、止咳平喘等多種藥理活性[1-6]，極具開發(fā)潛力。但是，2015年版的中國藥典中還未給出桑白皮中有效成分含量的測定方法，限制了其應(yīng)用。桑白皮中黃酮類化合物含量豐富，其中摩魯新L的含量較大且和多種藥理活性有關(guān)[7-8]，因此，本文擬建立桑白皮中摩魯新L的含量測定方法，希望能為桑白皮的二次開發(fā)提供參考。

1 儀器與試劑

Agilent1100液相色譜儀(美國Agilent)，KQ2200超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器有限公司)，摩魯新L(自制，經(jīng)多種方法檢測均為單體，高效液相色譜歸一化法檢測其純度達到99.76%)，桑白皮飲片(亳州同仁堂飲片廠)，乙腈(色譜純)，實驗室用水為雙蒸水，乙酸(色譜純)，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 確定提取溶劑

分別采用氯仿，乙酸乙酯，40%、80%和無水甲醇等溶劑超聲處理40min，結(jié)果顯示氯仿和乙酸乙酯的提取效率差，而40%、80%及無水甲醇提取效率相當(dāng)。無水甲醇無需配置，且提取物水溶性雜質(zhì)小，因此以無水甲醇作為提取溶劑。

2.2 確定提取方法與時間

將桑白皮粉碎成粗粉，取6份，每份1.0g，分別加入無水甲醇50.0mL，用超聲提取法和加熱回流提取法分別提取20、40和60min，結(jié)果顯示兩種提取方法效率相當(dāng)，均為處理60min提取率最高。與回流法相比，超聲提取法具有不加熱、有效成分損失少的優(yōu)點，因此以超聲提取60min作為制備方法。

2.3 對照品溶液的制備

準確稱取經(jīng)105℃干燥至恒量的摩魯新L4.5mg，置于容量瓶中，用無水甲醇定容至25.0mL, 搖勻得0.18mg/mL對照品溶液，微孔濾膜(0.45μm)濾過，備用。

2.4 供試品溶液的制備

將桑白皮飲片粉碎成粗粉，精密稱取1.0g，加無水甲醇50.0mL，超聲提取60min，提取液濃縮，置于容量瓶中，再用無水甲醇定容至25.0mL，作為供試品溶液。

2.5 色譜條件

AlltimaC18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)，流動相乙腈-水-乙酸(50∶50∶0.1);檢測波長270nm，柱溫室溫，流速1.0mL·min-1。在此條件下摩魯新L與其他組分均能達到基線分離(圖1、2、3)。

2.6 標準曲線的繪制

精密吸取摩魯新L對照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別置于10.0mL容量瓶中，以無水甲醇定容至刻度線，按“2.5”的色譜條件，進樣量為20μL，以峰面積為縱坐標，對照品的質(zhì)量濃度為橫坐標，制定標準曲線，結(jié)果顯示摩魯新L在3.6～18μg/mL濃度之間線性良好，曲線方程為：y=112193x+26335，R2=0.9993。

2.7 精密度試驗

精密吸取濃度為7.2 μg/mL對照品溶液，連續(xù)進樣5次，結(jié)果如表1。