陳建酬，高 騰，張濟培，楊樹浩

(1.佛山科學技術學院 生命科學與工程學院，廣東 佛山 528231；2.廣東省清遠市水產技術推廣站，廣東 清遠 511515)

養(yǎng)殖密度和投餌策略對羅氏沼蝦幼體生長發(fā)育的影響

陳建酬1，高 騰2，張濟培1，楊樹浩1

(1.佛山科學技術學院 生命科學與工程學院，廣東 佛山 528231；2.廣東省清遠市水產技術推廣站，廣東 清遠 511515)

以羅氏沼蝦幼體為研究對象，研究了60、110、160、210尾/L共4種養(yǎng)殖密度和2種不同投餌策略組合而成的8種養(yǎng)殖模式對羅氏沼蝦幼體生長發(fā)育的影響。結果表明，羅氏沼蝦幼體適宜的養(yǎng)殖密度為110～160尾/L；在養(yǎng)殖密度和投餌總量不變的情況下，投餌6次/d比投餌3次/d培育出的幼體存活率更高、變態(tài)發(fā)育時間更短。

羅氏沼蝦；幼體；密度；投餌策略

羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)又稱馬來西亞大蝦、淡水長臂大蝦，是目前世界上重要的淡水養(yǎng)殖蝦類之一[1]。20世紀60年代，林紹文博士在馬來西亞濱浪嶼海洋漁業(yè)研究所研究了羅氏沼蝦人工繁殖并取得成功，從此結束了羅氏沼蝦靠天然蝦苗的被動局面，推動了羅氏沼蝦規(guī)?；庇宛B(yǎng)殖事業(yè)的全球化發(fā)展。

養(yǎng)殖密度是水生動物種群生態(tài)學研究的一個重要方面。人們認為養(yǎng)殖密度的增加，單位水體的產量也會增加。可當養(yǎng)殖密度超過一定范圍時，養(yǎng)殖動物的新陳代謝加快，耗氧量增加，殘餌及代謝廢物增加，毒性物質氨氮、亞硝酸鹽含量迅速上升，這時水體容易發(fā)生惡化，導致養(yǎng)殖產量不升反而下降。目前人工養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體時，養(yǎng)殖密度主要是靠技術人員的養(yǎng)殖經驗來決定。當養(yǎng)殖密度上升時，需要調整投餌比例和次數(shù)，特別是羅氏沼蝦具有同類相殘的習性，水體中餌料不足或周圍環(huán)境發(fā)生劇烈變化時，它們會互相殘殺、殘食。然而，過量投喂餌料不僅會浪費餌料還會造成水體污染，加快水體中有毒有害物質的累積，對沼蝦幼體的生長發(fā)育極為不利。因此，開展羅氏沼蝦幼體養(yǎng)殖密度和投餌次數(shù)的研究，在生產上具有一定的技術實用價值。

1 材料與方法

1.1 試驗用蝦及管理

挑選體重(35.00±1.00)g、體長(10.00±0.50)cm羅氏沼蝦親蝦100只，雄雌性別數(shù)量比為1∶3。親蝦養(yǎng)殖池塘用水經消毒、滅菌，水溫控制在(28±1)℃，每天投喂新鮮碎魚塊以及成品蝦料3次，投餌2 h后人工吸污，清除殘餌及死蝦，1次/周更換親蝦養(yǎng)殖池內1/3的等溫池水，確保水質安全、干凈。試驗過程中所孵化的幼體來源于同一批次同一天生產的母蝦，幼體孵出后，撈取趨光性強、活力好的幼體暫養(yǎng)在體積為100 L的塑料桶中。幼體養(yǎng)殖的水質因子控制：咸淡水鹽度1.2%，1000 lx的光照照射12 h/d，溫度(30±1)℃，溶解氧(6.0±0.5)mg/L，pH(7.8±0.5)，總氨氮含量小于0.02 mg/L等。

1.2 試驗設計

試驗設置幼體4個不同的養(yǎng)殖密度，分別為60、110、160、210尾/L，2種不同投餌策略隨機組合成8個孵化養(yǎng)殖試驗(表1)。投餌策略：投餌3次的時間及投餌百分比(7:00，30%；12:00，30%；17:00，40%)，投餌6次的時間和投餌百分比(7:00，15%；10：00，15%；13:00，15%；16:00，15%；19:00，15%；22：00，25%)。試驗在體積為5 L(25 cm×20 cm×10 cm)塑料箱中孵化，每個試驗平行重復6次。

表1 羅氏沼蝦幼體的養(yǎng)殖密度和投喂策略

注：A代表投餌3次/d；B代表投餌6次/d。

1.3 試驗指標的測定方法

幼體全長：用攜帶有測量功能的顯微鏡測量幼體全長。

幼體體重：取出用5%酒精處理過的幼體放在濾紙上，5 min后，轉移幼體到另外一張濾紙上，如此重復幾次，直到濾紙上沒有留下水痕跡為止，接著把幼體放到恒重的濾紙上稱重，記錄幼體的總重量，連續(xù)稱重3批幼體，求出每尾幼體的平均重量。

存活率=存活幼體總數(shù)/試驗飼養(yǎng)的幼體總數(shù)×100%

變態(tài)時間：試驗組的羅氏沼蝦幼體全部發(fā)育變態(tài)成為仔蝦的時間。

生產效率：指在單位數(shù)量鹵蟲和單位體積水體下孵化生產仔蝦的效率。

幼體期指數(shù)：參照Maddox等[2]的方法，計算公式如下：

幼體期指數(shù)(LSI)=(Z1×1+Z2×2+Z3×3+Z4×4+，…，+Z11×11+P×12)/(Z1+Z2+Z3+Z4+，…，+Z11+P)

公式中：Z1,Z2,Z3,Z4，…，Z11分別代表羅氏沼蝦幼體各期的存活數(shù)量，P表示變態(tài)為仔蝦的數(shù)量；且從溞狀幼體一期到仔蝦分別賦予一個數(shù)值，即1、2、3、4，…，11和12，分別代表幼體所處發(fā)育階段。

特定生長率(Specific Growth Rate，SGR)采用以下公式進行計算：

SGR體重=100×(lnWt-lnW0)/t

SGR全長=100×(lnLt-lnL0)/t

式中，W0、Wt分別為初體質量(mg)和末體質量(mg)，L0、Lt分別為初全長(mm)和末全長(mm)，t為養(yǎng)殖時間(d)。

1.4 數(shù)據統(tǒng)計分析

采用Excel和SPSS 17.0軟件的對數(shù)據進行處理分析。結果用平均值±標準差(Mean±SD)來表示，組間平均值之間進行差異顯著性分析，確定差異顯著后進行方差分析和多重比較，顯著水平P<0.05。

2 結果與分析

2.1 養(yǎng)殖密度和投餌對羅氏沼蝦幼體生長和攝食的影響

從表2可知，培育第10天、第15天，60B和110B兩個組合的幼體期指數(shù)LSI值最大，分別對應為7.8和7.9、9.7和9.5，表示幼體變態(tài)生長速度較快；而160A和210A兩個組合的幼體期指數(shù)LSI最小，分別對應為7.0和6.9、8.3和8.1，表示幼體變態(tài)生長速度較慢。經兩因素分析，可知單因素密度和單因素投餌對幼體的變態(tài)發(fā)育影響達到顯著水平(P<0.05)，但兩因素之間相互作用對幼體生長發(fā)育的影響不顯著(P>0.05)。

幼體變態(tài)成為仔蝦所需要的時間長短，也可以說明幼體生長發(fā)育的快慢。養(yǎng)殖密度和投餌對幼體變態(tài)時間的影響跟幼體發(fā)育指數(shù)的規(guī)律基本相同。

在密度因素相同條件下，每天投餌6次的試驗組平均所消耗的鹵蟲數(shù)量少于每天投餌3次的試驗組；在投餌因素相同的條件下，隨著養(yǎng)殖密度的上升，各試驗組平均所消耗的鹵蟲數(shù)量也逐步增加。

2.2 養(yǎng)殖密度和投餌對羅氏沼蝦幼體存活率和生產效率的影響

從圖1可知，幼體變態(tài)存活率最高是60B組，為63.3%；其次是60A組，為54.2%；最低是210A組，為11.5%。經兩因素分析，發(fā)現(xiàn)單因素密度對幼體存活率的影響效果達到顯著水平(P=0.037<0.05)；而單因素投餌對幼體存活率的影響不顯著(P=0.084>0.05)。另外，經兩因素分析，發(fā)現(xiàn)密度和投餌兩因素相互作用對幼體存活率的影響不顯著(P=0.103>0.05)。

從試驗的最終結果來看，生產效率最高的是110B組，平均產出變態(tài)仔蝦達37尾/L；生產效率最低的是210A組，平均產出變態(tài)仔蝦22尾/L；其他6組的生產效率處于中間水平。經兩因素分析，由此可知，生產效率受到養(yǎng)殖密度的影響效果顯著(P=0.001<0.05)，而且還受到投餌次數(shù)的明顯影響(P=0.006<0.05)，但密度和投餌兩因素相互作用對仔蝦生產效率的影響效果并不顯著(P=0.309>0.05)。

表2 不同養(yǎng)殖密度和投餌策略培育下羅氏沼蝦幼體生長的結果

注：數(shù)據經分差分析多重比較獲得，均為平均數(shù)±標準差的形式 ；同一列中數(shù)據上肩字母不同表示差異顯著(P<0.05)； ①因素表示的養(yǎng)殖密度；②因素表示投餌次數(shù)。

圖1 不同養(yǎng)殖密度和投餌頻率對羅氏沼蝦

2.3 不同養(yǎng)殖密度和投餌策略下羅氏沼蝦變態(tài)仔蝦的全長、體重及特定生長率

如表3所示，養(yǎng)殖密度和投餌策略對羅氏沼蝦變態(tài)仔蝦的全長和體重影響不同。從變態(tài)仔蝦的全長方面看，110B組的變態(tài)仔蝦平均全長最大，為6.70 mm；210A組變態(tài)仔蝦的全長最小，僅為6.38 mm。經兩因素分析可知，單因素密度對變態(tài)仔蝦的全長影響效果顯著(P=0.037<0.05)，單因素投餌對變態(tài)仔蝦的體長也存在顯著的影響(P=0.006<0.05)，但密度和投餌兩因素之間相互作用對變態(tài)仔蝦的全長影響效果不明顯(P=0.092>0.05)。從變態(tài)仔蝦的體重看，60B組的變態(tài)仔蝦的體重最大，為6.41 mg；210A組的變態(tài)仔蝦的體重最小，僅4.05 mg。經兩因素分析，發(fā)現(xiàn)單因素密度、單因素投餌、密度和投餌兩因素之間相互作用對變態(tài)仔蝦的體重影響均達到顯著水平(P<0.05)。變態(tài)仔蝦的體重特定生長率的規(guī)律與變態(tài)仔蝦的體重規(guī)律基本相同。

變態(tài)仔蝦的全長特定生長率的規(guī)律基本與變態(tài)仔蝦的全長規(guī)律基本相同，但存在少許差異，全長特定生長率最大的是60B組，為5.50%/d；同樣，210A組的全長特定生長率最小，僅為4.16%/d。

3 討論

養(yǎng)殖密度是人工養(yǎng)殖管理中較為容易掌控的因素，同時也是影響水體生產力的重要因素之一。為了追求高產量、高利潤，在相對有限空間和餌料資源條件下，過度增加養(yǎng)殖孵化密度，容易導致種群內個體競爭激烈，不利于養(yǎng)殖對象生長發(fā)育，甚至會發(fā)生養(yǎng)殖對象全部死亡的現(xiàn)象。Naranjo等[3]研究發(fā)現(xiàn)，高密度養(yǎng)殖可以提升水體空間的利用率，充分提高水生生物生產力，但高密度養(yǎng)殖容易導致水生動物體表受損、能量消耗增加、生長率降低和死亡率升高。劉國興等[4]認為隨著養(yǎng)殖密度增大，克氏原螯蝦終末體重、體重增重率、終末體長和體長增長率降低，說明過大的養(yǎng)殖密度對克氏原螯蝦具有明顯的抑制作用。本研究表明，除低密度組60尾/L外，在投餌次數(shù)相同的情況下，羅氏沼蝦幼體的體長、體重、體長特定生長率、體重特定生長率均隨幼體養(yǎng)殖密度的增大而呈現(xiàn)出下降趨勢，這與張國新[5]的研究結果基本相同。養(yǎng)殖密度對生長的影響可能是通過某種直接或間接作用對蝦類幼體的攝食產生影響，影響幼體總體能量收支平衡，擾亂幼體生長的能量分配。在有限的養(yǎng)殖環(huán)境中，高密度養(yǎng)殖增加了種內個體間接觸和斗爭的機會，特別是羅氏沼蝦有著好斗、同類相殘的特性，幼體需要消耗更多的能量來獲取食物和爭奪隱蔽地點以及相互對抗上，造成其代謝耗能增加，用于實際生長的能量相對減少，最終導致羅氏沼蝦幼體的生長速度減緩，這在本試驗中也得到證實，高密度養(yǎng)殖的羅氏沼蝦幼體發(fā)育變態(tài)時間較長。Anger等[6]解釋類似的現(xiàn)象是螃蟹幼體大量攝食外界的食物是為了用來抵消應激所需要消耗的能量，而這個應激恰好就是高密度養(yǎng)殖螃蟹所引起的。由于養(yǎng)殖密度過大的原因，養(yǎng)殖對象用于實際生長的耗能減少，導致機體生長發(fā)育過慢，這種現(xiàn)象不僅在甲殼類中普遍存在，在魚類中也常常發(fā)生。

表3 不同養(yǎng)殖密度和投餌策略下羅氏沼蝦變態(tài)仔蝦的全長、體重及特定生長率

注：數(shù)據均為平均值±標準差，同一行中字母不同表示有顯著性差異(P<0.05)；*表示Ⅰ期幼體的平均初始體長和體重；**表示幼體剛剛變態(tài)成為仔蝦(以向前游泳為標志)時的平均體長和平均體重。

養(yǎng)殖密度不僅會影響甲殼蝦類的生長發(fā)育，對甲殼蝦類的存活也起到非常顯著的影響。一般認為，養(yǎng)殖對象的存活率與養(yǎng)殖密度存在著一定的相關性，超出一定的密度范圍，養(yǎng)殖密度越高，養(yǎng)殖對象存活率越低。Williams等[7]比較了平均體重2.0 g對蝦稚蝦在不同養(yǎng)殖密度下的成活率，結果表明：存活率與養(yǎng)殖密度呈負相關，28.4～113.6尾/m2密度下的存活率為95.0%，而227.3～284.1尾/m2密度下的存活率僅為81.9%。Luis Cunha等[8]發(fā)現(xiàn)高密度孵化南美白對蝦幼體會加劇幼體間的種內競爭和生存環(huán)境壓力，甚至是同類相殘的發(fā)生頻率大大提高，最終導致全部幼體表現(xiàn)出較低的存活率。一方面，隨著養(yǎng)殖密度的增加，幼體之間相互接觸頻率增加，加劇了幼體間相互撕咬和吞食的程度，導致幼體殘殺率大幅提高；另一方面，羅氏沼蝦幼體的發(fā)育需要進行蛻皮生長。有研究報道過蝦體甲殼硬化之前對外界的抵抗能力較差，蛻皮間隔期延長或者蛻不出殼會造成死亡，并且高密度孵化幼體增大了蛻皮中的幼體被其他幼體殘食的機會，最終導致整個養(yǎng)殖系統(tǒng)幼體的存活率降低。本試驗也發(fā)現(xiàn)死亡的羅氏沼蝦幼體均有不同程度的殘食現(xiàn)象，甚至有的死亡幼體僅剩下軀干的1/3左右。張沛東等[9]也發(fā)現(xiàn)，在高密度養(yǎng)殖條件下中國明對蝦運動活躍，攻擊頻率高，自殘行為高發(fā)，間隔行為明顯，這也與本試驗研究結果一致。相關研究表明，養(yǎng)殖密度是影響甲殼類幼體同類相殘的主要因子。曹梅等[10]從死亡的對蝦來分析，認為存活率較低的原因主要是同類殘食造成的，這可能是反映了種群的一種自我調控機制，是水產動物為避免未來更為激烈的種內競爭而采取的自我保護性調節(jié)行為。

國外學者Robertson研究發(fā)現(xiàn)在1～5次/d的投餌頻率范圍內，提高投餌頻率可顯著提高凡納濱對蝦的生長。曹梅等[10]發(fā)現(xiàn)在3個密度水平(361、722、1084尾/m2)下，隨投餌頻率的升高，對蝦攝食量、存活率、特定生長率、飼料系數(shù)和吸收效率均呈上升趨勢；在3個投餌頻率水平投餌頻率(1、2、4次/d)下，隨密度的升高，對蝦攝食量、存活率、特定生長率和飼料系數(shù)均呈下降趨勢。本試驗表明，在投餌總量相同的情況下，投餌6次的育苗效果要比投餌3次的育苗效果好，這與Robertson和曹梅的研究結論一致。有學者報道過，剛孵化出來的鹵蟲投進入育苗池24 h后，鹵蟲機體營養(yǎng)干物質減少16%～34%，而總能量減少22%～34%，原因是剛孵化出來的鹵蟲隨著發(fā)育進入了中間狀態(tài)Ⅱ期，蟲體的營養(yǎng)物質逐漸減少，這表明投喂剛孵化出來的鹵蟲，種苗的生長發(fā)育效果好于投喂中間狀態(tài)Ⅱ期鹵蟲幼體。每天投餌6次，保持適當餌料密度，能較好地保證羅氏沼蝦幼體成功地攝食和消化；而每天投餌3次，可能由于初始餌料密度過大，羅氏沼蝦幼體不能及時攝食完全部鹵蟲幼體，過剩的鹵蟲幼體在孵化系統(tǒng)中會蛻皮變態(tài)發(fā)育，其餌料營養(yǎng)價值就會大大降低，導致羅氏沼蝦幼體攝取的營養(yǎng)物質和能量不能滿足自身的生長需求，加劇幼體間同類相殘相食，導致整個養(yǎng)殖系統(tǒng)內幼體的存活率下降。

總之，本試驗結果表明：羅氏沼蝦幼體合適的養(yǎng)殖密度為110～160尾/L；多次投餌，可以縮短羅氏沼蝦幼體的變態(tài)發(fā)育周期，還可以提高變態(tài)仔蝦的存活率，同時也有利于養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)的物質能量循環(huán)。

[1] 李新正，劉瑞玉，梁象秋.中國動物志：無脊椎動物四十四卷[M].北京:科學出版社，2007:130-134.

[2] Maddox M B, Manzi J J. The effects of algal supplements on static system culture ofMacrobrachiumrosenbergii(de Man) larvae[J]. Journal of the World Aquaculture Society, 1976, 7(1/4): 677-698.

[3] Naranjo J， Hernandez A，Villarreal H. Effect of stocking density on growth，survival and yield of juvenile redclaw crayfishCheraxquadricarinatus(Decapoda: Parastacidae) in gravel lined commercial nursery ponds[J]. Aquaculture, 2004, 242(1/4): 197-206.

[4] 劉國興，李玲，彭剛,等.放養(yǎng)密度對克氏原螯蝦生長和養(yǎng)殖水質的影響[J].江西農業(yè)學報，2014，26(4)：86-89.

[5] 張國新.不同養(yǎng)殖密度對南美白對蝦生長的影響[J].河北漁業(yè)，2008(8):11-18.

[6] Anger K, Schubart C D. Experimental evidence of food-independent larval development in endemic Jamaican freshwater-breeding crabs[J]. Physiological & Biochemical Zoology, 2005, 78(2): 246-258.

[7] Williams A S, Davis D A, Arnold C R. Density dependent growth and survival ofPenaeussetiferusandPenaeusvannameiin a semi-closed recirculation system[J]. Journal of the World Aquaculture Society, 1996, 27(1): 107-112.

[8] Luis Cunha, Maite Mascaro, Xavier Chiapa. Experimental studies on the effect of food in early larvae of the cleaner shrimpLysmataamboinensis(De Mann, 1888) (Decapoda: Caridea: Hippolytidae)[J]. Aquaculture, 2008, 277(1/2): 117-123.

[9] 張沛東，張秀梅，李健,等.中國明對蝦、凡納濱對蝦仔蝦的行為觀察[J].水產學報，2008，32(2):223-228.

[10] 曹梅，王興強，閻斌倫.密度和投餌頻率對凡納濱對蝦存活和生長的影響[J].水利漁業(yè)，2006，26(2):34-39.

(責任編輯：曾小軍)

Influences of Breeding Density and Bait-casting Strategy on Growth and Development ofMacrobrachiumrosenbergiiLarvae

CHEN Jian-chou1, GAO Teng2, ZHANG Ji-pei1, YANG Shu-hao1

(1. College of Life Science and Engineering, Foshan University of Science and Technology, Foshan 528231, China;2. Fishery Technique Popularization Station of Qingyuan City in Guangdong Province, Qingyuan 511515, China)

The larvae ofMacrobrachiumrosenbergiiwere taken as research objects, eight breeding patterns which consisted of 4 breeding densities (60, 110, 160 and 210 larva/L) and 2 bait-casting strategies were designed, and the influences of different breeding patterns on the growth and development of this shrimp were studied. The results showed that: the appropriate breeding density ofMacrobrachiumrosenbergiilarvae was 110～160 larva/L; under the conditions of constant breeding density and total bait-casting quantity, the larvae fed 6 times/d had higher survival rate and shorter metamorphic development time than those fed 3 times/d.

Macrobrachiumrosenbergii; Larvae; Breeding density; Bait-casting strategy

2016-07-19

廣東省科技計劃項目(2013B020502003)；廣東省佛山市科技創(chuàng)新專項基金項目(2014AG10022)。

陳建酬(1964─)，男，廣東湛江人，副教授，主要從事淡水養(yǎng)殖和水產動物繁育技術研究。

S968.22

A

1001-8581(2017)01-0092-04