余和平， 崔 樂(lè)， 王必蓉， 潘躍進(jìn)

武漢市普愛(ài)醫(yī)院甲狀腺乳腺外科，武漢 430033

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青蒿素對(duì)乳腺癌MT40的抑制作用及對(duì)CD71表達(dá)的影響

余和平， 崔 樂(lè)， 王必蓉， 潘躍進(jìn)

武漢市普愛(ài)醫(yī)院甲狀腺乳腺外科，武漢 430033

目的 探討青蒿素對(duì)乳腺癌細(xì)胞MT40的抑制作用及對(duì)CD71表達(dá)的影響。方法 采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)不同濃度青蒿素對(duì)乳腺癌MT40細(xì)胞的增殖抑制作用，流式細(xì)胞儀檢測(cè)其對(duì)CD71表達(dá)的影響。建立MT40荷瘤小鼠模型，分為陰性對(duì)照組、青蒿素實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組，測(cè)量各組腫瘤體積并制作生長(zhǎng)曲線(xiàn)，檢測(cè)各組腫瘤組織的細(xì)胞凋亡率及CD71的表達(dá)。結(jié)果 不同濃度的青蒿素作用后，均對(duì)MT40細(xì)胞增殖產(chǎn)生了抑制作用，50、100、150、200 μmol/L青蒿素實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖抑制率分別為(16.32±0.12)%、(28.13±0.28)%、(44.36 ±0.23)%、(54.32 ±0.41)%，呈劑量依賴(lài)性；青蒿素作用后MT40細(xì)胞CD71表達(dá)受到抑制，50、100、150、200 μmol/L青蒿素實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞CD71陽(yáng)性表達(dá)率分別為(54.43±2.15)%、(46.32±2.14)%、(37.22±1.98)%、(30.75±2.87)%，100 μmol/L及以上濃度青蒿素可以明顯抑制細(xì)胞CD71的表達(dá)(P<0.05)。與陰性對(duì)照組比較，青蒿素實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組荷瘤鼠腫瘤生長(zhǎng)均受到抑制(均P<0.05)；細(xì)胞凋亡率，青蒿素實(shí)驗(yàn)組為(21.23±4.56)%，陽(yáng)性對(duì)照組為(17.42±1.23)%，陰性對(duì)照組為(1.22±0.33)%，青蒿素實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.193，P<0.05)，而與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.140，P>0.05)；CD71表達(dá)陽(yáng)性率，陰性對(duì)照組為(77.81±4.33)%，陽(yáng)性對(duì)照組為(70.42±5.23)%，青蒿素實(shí)驗(yàn)組為(40.23±4.56)%，青蒿素實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.371，P<0.05)，與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.338，P<0.05)。結(jié)論 青蒿素對(duì)乳腺癌細(xì)胞MT40具有顯著抑制生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用，其機(jī)制可能與下調(diào)腫瘤組織CD71的表達(dá)有關(guān)。

青蒿素； 乳腺癌； CD71； 細(xì)胞凋亡

乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，在乳腺癌綜合治療中，藥物治療占重要地位，臨床廣泛使用的化療藥物易產(chǎn)生顯著的毒副作用及耐藥性。青蒿素是由我國(guó)研制的抗瘧藥，具備抗瘧效果突出、體內(nèi)過(guò)程穩(wěn)定、半哀期較短、消除較快、毒副作用小、價(jià)格低廉的特點(diǎn)，近年發(fā)現(xiàn)其具有抗多種腫瘤的作用及耐藥逆轉(zhuǎn)作用。本研究探討青蒿素在體內(nèi)外對(duì)小鼠乳腺癌MT40細(xì)胞的作用及與CD71表達(dá)的關(guān)系，以期為乳腺癌的治療尋找新途徑。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器

昆明小鼠，4～6周齡，體質(zhì)量(22±2)g，雌性，由江西省中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。主要實(shí)驗(yàn)材料：青蒿素(陜西匯生醫(yī)藥科技有限公司)，絲裂霉素(MMC，浙江海正藥業(yè)股份有限公司)，高糖DMEM培養(yǎng)液(HYCLONE公司)，胎牛血清(FCS杭州四季青公司)，噻唑藍(lán)(MTT，Amresco公司)，小鼠CD71一抗(BD公司)，乳腺癌MT40細(xì)胞株(本實(shí)驗(yàn)室液氮保存)，TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒(南京凱基生物科技發(fā)展有限公司)，CD71 ELISA試劑盒(BD公司)。主要儀器：倒置顯微鏡(重慶重光儀器公司)，LD4-2臺(tái)式離心機(jī)(北京醫(yī)用離心廠(chǎng))，電熱恒溫水浴箱(北京長(zhǎng)風(fēng)儀器廠(chǎng))，BB 16HF二氧化碳?xì)怏w培養(yǎng)箱(香港力新儀器公司)，超凈工作臺(tái)(北京長(zhǎng)城空氣凈化工程公司)，Multiskan Ascent全自動(dòng)酶標(biāo)儀(芬蘭Thermo Labsysterms公司)，UFRO-01純水裝置(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生裝備研究所)，流式細(xì)胞儀(FACS Calibur SE，美國(guó)BD公司)。

1.2 體外實(shí)驗(yàn)

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組 實(shí)驗(yàn)分3組：①陰性對(duì)照組，不加任何藥物；②青蒿素組，分別加入不同濃度的青蒿素溶液，使其終濃度分別為50、100、150、200 μmol/L；③陽(yáng)性對(duì)照組，加10 μmol/L絲裂霉素。

1.2.2 噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)乳腺癌MT40細(xì)胞生長(zhǎng) MT40細(xì)胞以含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液加雙抗、37℃、飽和濕度、5%CO2條件下培養(yǎng)。2 d換培養(yǎng)液1次，胰蛋白酶消化、傳代和收集細(xì)胞。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MT40細(xì)胞以5×104/mL密度加入96孔培養(yǎng)板，置于5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12 h，按分組分別給予相應(yīng)藥物。繼續(xù)培養(yǎng)16 h后，每孔加入MTT 20 μL(5 mg/mL)，溫浴4 h，棄上清液，每孔加DMSO 150 μL，作用10 min并微振蕩后，在酶標(biāo)儀上檢測(cè)490 nm波長(zhǎng)吸光度值(A)。重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次。按下列公式計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率：(1-實(shí)驗(yàn)組A值/對(duì)照組A值)×100%[1]。

1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MT40細(xì)胞中CD71的表達(dá) 將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的MT40細(xì)胞接種于12孔培養(yǎng)板中，每孔細(xì)胞密度5×105/mL，加培養(yǎng)液至體積2 mL，培養(yǎng)12 h。按分組分別給予相應(yīng)藥物。繼續(xù)培養(yǎng)16 h后消化，分別收集于離心管中(細(xì)胞密度達(dá)5×106/mL)，制備單細(xì)胞懸液，洗滌，固定，4℃過(guò)夜，CD71-PE染色、避光孵育30 min，上機(jī)檢測(cè)。

1.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.3.1 動(dòng)物模型建立 傳代培養(yǎng)MT40細(xì)胞，收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，以無(wú)菌生理鹽水調(diào)整細(xì)胞密度至5×106/mL，制成細(xì)胞懸液，將MT40乳腺癌細(xì)胞懸液注入小鼠背部皮下，每只0.5 mL，待腫塊長(zhǎng)至直徑0.8 cm左右時(shí)開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。本組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ湍[瘤接種成功率為63.3%(19/30)。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組 荷瘤鼠稱(chēng)重后隨機(jī)分3組，每組6只。青蒿素實(shí)驗(yàn)組：青蒿素懸液150 mg/kg灌胃，每日2次，連續(xù)給藥10 d；陰性對(duì)照組：喂服相同量生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組：絲裂霉素3.0 mg/kg灌胃，每日2次，連續(xù)給藥10 d。末次給藥24 h后頸椎脫臼處死動(dòng)物。

1.3.3 觀(guān)察指標(biāo) ①腫瘤生長(zhǎng)：每天測(cè)量瘤體最大徑(A)、最小徑(B)，計(jì)算腫瘤體積(V=1/2×A×B2)，制作腫瘤生長(zhǎng)曲線(xiàn)；處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后剪開(kāi)腫瘤部位，剝離瘤塊，用濾紙吸凈其上液體，測(cè)量瘤體質(zhì)量。②腫瘤組織細(xì)胞凋亡率：腫瘤組織經(jīng)過(guò)固定、洗滌、脫水、透明、透蠟、包埋、切片后，用TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡，操作步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，陽(yáng)性為細(xì)胞核呈棕褐色的細(xì)胞，每張切片隨機(jī)取5個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比。③CD71檢測(cè)：操作步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，用PBS替代第一抗體作為陰性對(duì)照。光鏡下細(xì)胞膜呈黃色至棕色染色為陽(yáng)性，細(xì)胞膜無(wú)色而細(xì)胞核藍(lán)染為陰性。每張切片隨機(jī)取5個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 青蒿素對(duì)MT40細(xì)胞增殖的抑制作用

不同濃度的青蒿素作用后均對(duì)MT40細(xì)胞增殖產(chǎn)生了抑制作用(F=4 256.57，P<0.01)，在50～200 μmol/L濃度范圍內(nèi)，抑制作用隨著青蒿素濃度的升高明顯增強(qiáng)，見(jiàn)表1。

組別抑制率(%)50μmol/L青蒿素組16.32±0.12*100μmol/L青蒿素組28.13±0.28150μmol/L青蒿素組44.36±0.23*200μmol/L青蒿素組54.32±0.41*陽(yáng)性對(duì)照組28.22±0.54

F=4 256.57，P<0.01；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，*P<0.05

2.2 青蒿素對(duì)MT40細(xì)胞CD71表達(dá)的抑制作用

流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組MT40細(xì)胞CD71表達(dá)見(jiàn)圖1。各組CD71表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=17.56，P<0.01)。陰性對(duì)照組與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組與50 μmol/L青蒿素組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而與其他各青蒿素組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；青蒿素各實(shí)驗(yàn)組兩兩比較，除了50 μmol/L與100 μmol/L組、150 μmol/L與200 μmol/L青蒿素組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)外，其他各組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明100 μmol/L及以上濃度青蒿素可以明顯抑制細(xì)胞膜CD71的表達(dá)。見(jiàn)表2。

組別CD71表達(dá)率(%)陰性對(duì)照組62.92±2.48陽(yáng)性對(duì)照組60.24±3.2450μmol/L青蒿素組54.43±2.15100μmol/L青蒿素組46.32±2.14*150μmol/L青蒿素組37.22±1.98*200μmol/L青蒿素組30.75±2.87*

F=17.56，P<0.01；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，*P<0.05

圖1 各組細(xì)胞CD71表達(dá)的流式細(xì)胞圖Fig.1 Detection of CD71 expression of each group by flow cytometry

2.3 青蒿素對(duì)移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，絲裂霉素陽(yáng)性對(duì)照組荷瘤小鼠飲食量明顯減少，且出現(xiàn)毛色粗糙灰暗等現(xiàn)象，而其他各組正常；各組荷瘤小鼠皮下移植腫瘤體積隨時(shí)間延長(zhǎng)繼續(xù)增大，陰性對(duì)照組腫瘤體積增大明顯，與陰性對(duì)照組相比，青蒿素實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組荷瘤鼠腫瘤體積增長(zhǎng)均受到抑制。各組最終瘤體體積為：陰性對(duì)照組(3.42±0.35)cm3，青蒿素實(shí)驗(yàn)組(2.09±0.31)cm3，陽(yáng)性對(duì)照組(2.02±0.22)cm3，青蒿素實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.437，P<0.05)，青蒿素實(shí)驗(yàn)組與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(t=3.493，P<0.05)。各實(shí)驗(yàn)組瘤體倍增時(shí)間為：陰性對(duì)照組2.77 d，青蒿素實(shí)驗(yàn)組3.45 d，陽(yáng)性對(duì)照組3.44 d。腫瘤生長(zhǎng)曲線(xiàn)見(jiàn)圖2。

圖2 各組腫瘤生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖Fig.2 Tumor growth curve of each group

2.4 青蒿素對(duì)腫瘤組織細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用

凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞核固縮，細(xì)胞核變圓，TUNEL染色為細(xì)胞核染為棕黃色(見(jiàn)圖3)。陰性對(duì)照組可見(jiàn)零星細(xì)胞凋亡，凋亡率為(1.22±0.33)%，青蒿素實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組可見(jiàn)較多細(xì)胞凋亡，青蒿素實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率為(21.23±4.56)%，陽(yáng)性對(duì)照組為(17.42±1.23)%，3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=14.72，P<0.05)；青蒿素實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.193，P<0.05)，而與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.140，P>0.05)。

圖3 各實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織凋亡(TUNEL染色，×400)Fig.3 Tumor cell apoptosis of each group(TUNEL staining，×400)

2.5 青蒿素對(duì)腫瘤組織CD71表達(dá)的抑制作用

CD71的表達(dá)主要分布在細(xì)胞膜，胞質(zhì)內(nèi)也有一定的表達(dá)(圖4)。CD71表達(dá)陽(yáng)性率，陰性對(duì)照組為(77.81±4.33)%，陽(yáng)性對(duì)照組為(70.42±5.23)%，青蒿素實(shí)驗(yàn)組為(40.23±4.56)%，3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=15.64，P<0.05)。青蒿素實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.371，P<0.05)，與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.338，P<0.05)。

圖4 各實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織CD71表達(dá)(免疫組化染色，×400)Fig.4 Tumor CD71 expression of each group(immunohistochemical staining，×400)

3 討論

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，在我國(guó)占女性惡性腫瘤的7%～10%，其發(fā)病率還在逐年上升，嚴(yán)重威脅廣大婦女的身心健康[1]。隨著對(duì)乳腺癌生物學(xué)行為的深入研究，目前普遍認(rèn)為乳腺癌是一種全身性疾病。手術(shù)治療是乳腺癌治療的重要方法，手術(shù)結(jié)果對(duì)判斷預(yù)后有重要意義，手術(shù)治療的發(fā)展趨勢(shì)為手術(shù)范圍逐漸縮小，術(shù)后綜合輔助治療加強(qiáng)[2]。在乳腺癌綜合治療中，藥物治療占重要地位，臨床廣泛使用的化療藥物易產(chǎn)生顯著的毒副作用及耐藥性，尋找對(duì)乳腺癌高效，低副作用的治療方法具有重要意義。

青蒿素是我國(guó)科研工作者研制出的抗瘧藥，近年研究發(fā)現(xiàn)青蒿素對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有明顯殺傷作用，對(duì)耐藥性乳腺癌有耐藥逆轉(zhuǎn)作用[3-4]。其抗腫瘤的作用機(jī)制為藥物與腫瘤細(xì)胞內(nèi)鐵離子結(jié)合，引起分子內(nèi)過(guò)氧橋裂解產(chǎn)生活性自由基攻擊紅細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)，發(fā)揮氧化、細(xì)胞周期延遲、抗腫瘤血管生成、致癌基因改變和腫瘤抑制基因表達(dá)以及多重耐藥抗性作用，通過(guò)下調(diào)Bcl-2蛋白和上調(diào)Bax蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[5]。CD71為識(shí)別95 kD轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)，是一種介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)鐵攝取和調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)的Ⅱ型跨膜糖蛋白，與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，主要表達(dá)于增殖細(xì)胞膜，介導(dǎo)細(xì)胞對(duì)鐵的攝取[6]。在CD71介導(dǎo)下，鐵被細(xì)胞攝取，促進(jìn)DNA的合成、細(xì)胞增殖及細(xì)胞內(nèi)電子呼吸鏈傳遞有序進(jìn)行[7]，與無(wú)增殖活性細(xì)胞相比，增殖活躍的非腫瘤細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞CD71的表達(dá)明顯升高[8]。Leplletier等[9]研究表明，非何杰金瘤細(xì)胞CD71表達(dá)遠(yuǎn)高于正常B細(xì)胞。Dowlati等[10]研究顯示，肺癌組織CD71的表達(dá)與組織分化程度密切相關(guān)，低分化者CD71呈高表達(dá)，高分化者CD71呈低表達(dá)。Gomme等[11]認(rèn)為，CD71的表達(dá)與腫瘤基因被激活有關(guān)。大量研究表明，CD71在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)與TNM分期、腫瘤分化程度、細(xì)胞異型程度及核分裂計(jì)數(shù)等密切相關(guān)，可反映腫瘤細(xì)胞的增殖狀況，因此，降低腫瘤組織CD71的表達(dá)對(duì)腫瘤治療有重要意義。絲裂霉素為抗腫瘤抗生素，其機(jī)制為與腫瘤細(xì)胞DNA交聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生抗腫瘤作用，已應(yīng)用于臨床多種腫瘤的治療，也用于復(fù)發(fā)性乳腺癌的治療。本研究也證實(shí)絲裂霉素對(duì)乳腺癌MT40細(xì)胞具有明顯抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度青蒿素對(duì)乳腺癌MT40具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)作用，與陽(yáng)性對(duì)照組相比，50 μmol/L青蒿素組細(xì)胞增殖抑制率小于陽(yáng)性對(duì)照組，100 μmol/L青蒿素組細(xì)胞增殖抑制率與陽(yáng)性對(duì)照組相比，差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，150 μmol/L及200 μmol/L青蒿素組細(xì)胞增殖抑制率大于陽(yáng)性對(duì)照組，表明濃度越高，青蒿素對(duì)乳腺癌MT40細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用越強(qiáng)。本研究還發(fā)現(xiàn)，青蒿素在抑制MT40細(xì)胞增殖同時(shí)，還明顯降低MT40細(xì)胞CD71表達(dá)，在50～200 μmol/L濃度范圍內(nèi)，隨著濃度的升高，降低CD71表達(dá)作用越明顯，而絲裂霉素在抑制MT40細(xì)胞增殖作用同時(shí)，不具有降低MT40細(xì)胞CD71表達(dá)的作用，表明青蒿素對(duì)乳腺癌MT40細(xì)胞具有抑制增殖的同時(shí)，還具有改善臨床預(yù)后的能力。從這個(gè)角度來(lái)看，青蒿素對(duì)乳腺癌MT40細(xì)胞作用優(yōu)于絲裂霉素。

綜上所述，青蒿素對(duì)乳腺癌MT40細(xì)胞在體外具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)作用，呈劑量依賴(lài)性，在體內(nèi)具有延長(zhǎng)腫瘤倍增時(shí)間、抑制生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用，并且下調(diào)腫瘤細(xì)胞及組織CD71的表達(dá)。青蒿素對(duì)乳腺癌MT40的抗腫瘤作用具有重要臨床意義，其可能通過(guò)下調(diào)腫瘤組織CD71的表達(dá)而發(fā)揮抑制腫瘤生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用，然而具體機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。

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(2016-06-28 收稿)

Effect of Artemisinin on Breast Cancer MT40 and CD71 Expression

Yu Heping，Cui Le，Wang Birongetal

DepartmentofThyroid-BreastSurgery,WuhanPuaiHospital，Wuhan430033，China

Objective To study the effect of Artemisinin on MT40 cells and the expression of CD71invitroandinvivo.Methods MTT assay was undertaken to detect inhibition of Artemisinin at different concentration on MT40 cells.Flow cytometry was used to detect effect of Artemisinin on CD71 expression.MT40 tumor-bearing mouse model was established.The tumor-bearing mice were divided into 3 groups：negative control group，Artemisinin group and positive control group.Tumor volume was measured，and growth curve was plotted.Cell apoptosis rate and CD71 expression were determined.Results Artemisinin of different concentration inhibited the proliferation of MT40 cells.The inhibition rate was(16.32±0.12)%，(28.13±0.28)%，(44.36 ±0.23)% and(54.32 ±0.41)% respectively for 50，100，150 and 200 μmol/L Artemisinin；the inhibition was in a dose-dependent manner.The CD71 expression of MT40 cells was inhibited by Artemisinin in different concentration.The positive expression rate of CD71 was (54.43±2.15)%，(46.32±2.14)%，(37.22±1.98)% and (30.75±2.87)%，respectively for Artemisinin of 50，100，150，200 μmol/L.Artemisinin over 100 μmol/L significantly inhibited the expression of CD71 of MT40 cells(P<0.05).Compared with negative control group，tumor growth was significantly suppressed in Artemisinin group and positive control(bothP<0.05).Apoptosis rate was significantly higher in Artemisinin group[(21.23±4.56)%]than in negative control group [(1.22±0.33)%,t=8.193，P<0.05]，and it was not significantly different between Artemisinin group and positive control group [(17.42±1.23)%，t=1.140，P>0.05].CD71 positive expression rate was(77.81±4.33)% in negative control group，(70.42±5.23)% in positive control group，and(40.23±4.56)% in Artemisinin group，with significant differences between Artemisinin group and negative control group(t=7.371，P<0.05)，and between Artemisinin group and positive control group (t=5.338，P<0.05).Conclusion Artemisinin can significantly inhibit growth of MT40 cells and induce apoptosis，which might be related with down-regulation of CD71 expression in tumor tissues.

Artemisinin； breast cancer； CD71； apoptosis

R737.9

10.3870/j.issn.1672-0741.2016.06.006

余和平，男，1973年生，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師，E-mail：yuheping12@163.com.cn