凝膠滲透色譜-氣相色譜-質(zhì)譜法測定食用植物油中120種農(nóng)藥殘留量

王首忠 李 強 廊坊出入境檢驗檢疫局 田益玲 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)

本實驗建立了氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS），同時測定植物油中120種農(nóng)藥的多殘留分析方法。樣品用正己烷溶解，乙腈萃取，凝膠滲透色譜（GPC）凈化，GC-MS測定，外標(biāo)法定量。方法定量下限檢出限（S/N≥10）為0.005～0.100 mg/kg，在加標(biāo)水平為0.05 mg/kg時，方法回收率為67.1%～120%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD在20%以內(nèi)。

植物油；農(nóng)藥殘留；凝膠滲透色譜；氣相色譜-質(zhì)譜

農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的廣泛使用提高了農(nóng)作物產(chǎn)量，但其殘留對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量造成的危害也日益嚴(yán)重。在油料作物上大量使用的農(nóng)藥易轉(zhuǎn)移到植物油中，給植物油造成極大的危害[1-2]。對食用植物油中的農(nóng)藥殘留進行檢測，必須除去其高含量的油脂，否則檢測結(jié)果受基體干擾大，還會污染檢測儀器，降低其使用壽命，因此樣品前處理十分關(guān)鍵[3]。

固相萃取法是目前較為常用的前處理方法之一[4-7]，但其操作較為繁瑣，且對農(nóng)藥的萃取具有選擇性，測定多種類型的農(nóng)藥殘留時，需采用不同的處理方法，大大增加了檢測時間和費用。食用植物油的主要成分是不飽和脂肪酸的甘油酯，相對分子質(zhì)量一般在800以上，而有機農(nóng)藥一般為小分子，因此可采用凝膠滲透色譜（GPC）將殘留農(nóng)藥與油脂基體分離[8]。本文利用GPC對120種農(nóng)藥殘留從食用植物油基體中分離，實現(xiàn)了多種類型農(nóng)藥殘留的提取和凈化，用自動快速濃縮儀濃縮后采用GC-MS同步測定。

1 實驗部分

1.1 主要儀器和試劑

安捷倫7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；7683自動進樣器，EI源（美國Aglient）；色譜柱：DB-1701毛細(xì)管柱，30 m×0.25 mm×0.25 μm；4000 r/min離心機（德國Sigma）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（德國DR）；所用溶劑和試劑均為分析純或色譜純。

1.2 樣品前處理

提取：稱取1 g（精確至0.01 g）大豆油至125 mL分液漏斗中，加入正己烷20 mL，搖動分液漏斗使其溶解，再加入乙腈20 mL，劇烈振蕩2 min，靜置分層，收集下層乙腈過無水硫酸鈉層至雞心瓶中，40 ℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，待凈化。

凈化：用乙腈清洗雞心瓶，轉(zhuǎn)移至刻度試管中并定容至2 mL，加入C18和PSA粉末各0.5 g，渦旋2次，每次10 s，2000 r/min離心1 min，上清液過濾膜上機。

1.3 色譜-質(zhì)譜條件

載氣為氦氣（純度99.999%），恒流模式，流速為1.0 mL/min，進樣口溫度260 ℃，進樣量1 μL，不分流進樣，色譜-質(zhì)譜接口溫度為280℃，離子源溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃，離子化方式EI，電子能量70 eV，色譜質(zhì)升溫程序：40 ℃保持1 min，然后以30 ℃/min程序升溫至130 ℃，再以5 ℃ /min升溫至250℃，再以10 ℃ /min升溫至300 ℃，保持5min。

1.4 GPC條件

凈化柱：400 mm×25 mm， 內(nèi)裝BIO-BeadsS-X3填料或相當(dāng)者；紫外檢測波長：254 nm；流動相：V（環(huán)己烷）∶V（乙酸乙酯）=1∶1；流速：4.5 mL/min；進樣量：5 mL；開始收集時間：24 min；結(jié)束收集時間：48 min。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

一般情況下，用脂溶性溶劑提取植物油中的農(nóng)藥殘留效率較高，但同時也會帶來較多雜質(zhì)，給凈化帶來困難。乙腈中可溶入油成分較少，有利于凈化，所以本實驗選擇乙腈作為提取溶劑。

2.2 樣品凈化

目前的文獻報道中，對含油脂較多的樣品的凈化方式一般為柱凈化和GPC凈化?；谵r(nóng)藥多殘留中常使用固相萃取柱，本實驗曾嘗試采用Al2O3-NH2-Carb串聯(lián)柱和C18-PSA串聯(lián)柱對脂肪樣品進行凈化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)凈化不完全、干擾較大、且易污染儀器。試用GPC凈化方式，實驗分別選擇了21、22、23、24 min和25 min 5種收集時間，用脂肪樣品進行凈化分析，確定GPC開始收集和結(jié)束收集時間分別為24 min和48 min。實驗結(jié)果證明GPC的凈化效果好，干擾小，本底值低，因此本實驗使用GPC對樣品進行凈化。

2.3 方法的檢出限、回收率和精密度

以大豆油為主要樣品，進行加標(biāo)回收試驗，以信噪比（S/N≥10）確定方法的定量下限。表1中，添加水平為0.05 mg/kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差＜15%，回收率在61%～115%之間。120種農(nóng)藥的檢出限和定量限見表1，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液總離子流色譜圖如圖1所示。對回收率情況進行分析，回收率偏低的有：甲胺磷（由于分子極性強，處理時被吸附，導(dǎo)致部分損失）、敵敵畏及聯(lián)苯（由于極性強，處理過程中也有部分損失）。從整體情況看，本方法可實現(xiàn)植物油中120種農(nóng)藥的快速測定和分析。

續(xù)表1

續(xù)表1

圖1 120種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液總離子流色譜圖

[1]侯博,陽檢,吳林海.農(nóng)藥殘留對農(nóng)產(chǎn)品安全的影響及農(nóng)戶對農(nóng)藥殘留的認(rèn)知與影響因素的文獻綜述[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(4):2098-2101,2129

[2]Saito Y, Kodama S, Matsunaga A, et al. Multiresidue determination of pesticides in agricultural products by gas chromatography/mass spectrometry with large volume injection[J]. Journal of Aoac International, 2004,87(6):1356-1367.

[3]Gelsomino A, Petrovi?ová B, Tiburtini S, et al. Multiresidue analysis of pesticides in fruits and vegetables by gel permeation chromatography followed by gas chromatography with electron-capture and mass spectrometric detection[J].Journal of Chromatography A, 1997,782(1):105-122.

[4]Gennaro MC, Marengo E, Gianotti V, et al. New strategies for the determination of phenylurea pesticides by gas chromatography with hot splitless inlet systems[J].Journal of Chromatography A, 2001, 910(1):79-86.

[5]Lehotay SJ, De KA, Hiemstra M, et al. Validation of a fast and easy method for the determination of residues from 229 pesticide in fruits and vegetables using gas and liquid chromatography and mass spectrometric detection[J].Journal of Aoac International, 2005, 88(88):595-614.

[6]林竹光,陳美瑜,張莉莉,等.氣相色譜-負(fù)離子化學(xué)源質(zhì)譜法分析牛奶飲品和奶粉中19種有機磷農(nóng)藥殘留[J].分析測試學(xué)報,2007,26(3):331-334.

[7]黃惠玲,張薇君,丁慧瑛.氣相色譜-質(zhì)譜大體積進樣法測定蔬菜、水果中17種農(nóng)藥殘留[J].分析測試學(xué)報,2006,25(4):81-83.

[8]蘇建峰,林立峰,鐘茂生，等.山藥中146種農(nóng)藥殘留的氣相色譜-質(zhì)譜分析方法快速研究[J].藥物分析雜質(zhì),2010,30(2):339-345.

河北出入境檢驗檢疫局自助立項科技項目（編號：2013K029）。