畬藥小香勾中總黃酮含量的測定

唐旭偉 景寧畬族自治縣食品藥品檢驗(yàn)檢測中心 沈松偉 景寧畬族自治縣農(nóng)業(yè)局

麗水市地處浙南山區(qū)，具有豐富的植物資源，民間用植物進(jìn)行營養(yǎng)保健的現(xiàn)象十分普遍。小香勾是一味常用的畬藥，具有除濕、健脾的作用，可用于治療疝氣、腹瀉、消化不良等，因其治療效果較好，被錄入《浙江省中藥炮制規(guī)范》。此外，小香勾還可食用，在食物烹飪中得到廣泛應(yīng)用，可發(fā)揮祛風(fēng)除濕、健胃消食的作用。在燒豬腳、雞等葷菜時(shí)，添加小香勾可增加清香，并且減小油膩性。

本文以野生全葉榕（小香勾）為研究對象，對全葉榕的測定條件進(jìn)行分析，并測定其總黃酮含量。采用鹽酸—鎂粉顯色法測定全葉榕中總黃酮含量，該方法具有簡便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，測得小香勾總黃酮含量為13.05 g/kg。測定結(jié)果表明，小香勾中總黃酮含量豐富，具有一定的保健功能。

材料與方法

材料與處理

新鮮全葉榕，采集于景寧縣東坑鎮(zhèn)徐垟村樹林，用純水洗凈后曬干，將根、莖、葉碾碎，并保證其可通過60目篩，進(jìn)行密閉保存?zhèn)溆?；將根、莖、葉按1∶1 ∶1的比例進(jìn)行混合，取2 g全葉榕混合樣進(jìn)行精密稱定，放入100 mL容量瓶中，加入90 mL 70%乙醇，超聲處理45 min，冷卻后，用乙醇稀釋到刻度線，搖勻后過濾，得到試品溶液。

檢測方法

采用鹽酸-鎂粉顯色法對全葉榕中總黃酮含量進(jìn)行測定，以蘆丁為參照。通過鹽酸-鎂粉反應(yīng)、三氯化鋁反應(yīng)、四氫化三硼鈉反應(yīng)檢測試品溶液總黃酮。

檢測條件

蘆丁溶液制備：稱取適量蘆丁，與乙醇混合，制成濃度不同的溶液， 分 別 為0.000、0.102、0.398、0.787 μg/mL和2.000 μg/mL。

1 波長選擇

取試品溶液、蘆丁溶液各2.0 mL，分別加入有鎂粉的具塞刻度試管中，置于15 ℃水中，緩慢加入3.0 mL濃鹽酸，搖勻后加乙醇，保證溶液量達(dá)到8 mL，搖勻后放入沸水中保溫，60 min后取出，冷卻至室溫，添加乙醇到10 mL，用純水做空白對照，于400～700 nm波長進(jìn)行吸光度測定。

2 鎂粉用量

鎂粉用量分別為50、100、150、200mg和250mg。

3 反應(yīng)時(shí)間選擇

取5份樣品溶液，每份2.0 mL，放入上述具塞刻度試管中，并按照上述操作執(zhí)行，于選定波長處進(jìn)行吸光度測定，反應(yīng)時(shí)間分別為20、40、60、80 min。

4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

取5份蘆丁溶液，每份2.0 mL，放入上述具塞刻度試管中，將試管置于約15 ℃水中，緩慢加入3.0 mL濃鹽酸，搖勻，添加乙醇到8 mL，搖勻后放入沸水中保溫60 min，取出，冷卻至室溫，加乙醇，保證溶液量達(dá)到10 mL，用純水做空白對照，測定吸光度。以蘆丁溶液濃度為縱坐標(biāo)，吸光度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。

結(jié)果

試品溶液總黃酮檢測結(jié)果

鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈紅色，三氯化鋁反應(yīng)呈黃色伴熒光，四氫化三硼鈉反應(yīng)呈紅色。

測定條件選擇

在526 nm波長處，試品溶液與蘆丁溶液的吸光度最大，在此范圍中，未顯色試品溶液的吸光度最小，因此，可選526 nm為測定波長。

1 反應(yīng)時(shí)間對吸光度的影響

吸光度最大的反應(yīng)時(shí)間是40 min，詳見表1。

表1 不同反應(yīng)時(shí)間對吸光度的影響

2 鎂粉用量對吸光度的影響

吸光度最大的鎂粉用量是100 mg，詳見表2。

表2 鎂粉用量對吸光度的影響

3 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=0.6635x+5E-06（R2=1），如圖1所示。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果

樣品總黃酮含量測定

當(dāng)反應(yīng)時(shí)間40 min、鎂粉用量100 mg、波長526 nm時(shí)，樣品溶液吸光度0.786，由回歸方程計(jì)算得知，樣品溶液總黃酮濃度是0.522 μg/mL，含量是13.05 g/kg。

結(jié)論

在民間用作小香勾的植物有3種，分別為?？崎艑僦参飾l葉榕、全葉榕和天仙果，土名為細(xì)葉牛乳繩、小葉牛奶繩、小攀坡。本文中選用全葉榕為研究對象，其屬于落葉小灌木，高度在0.5-1.5 m，全年可采收，挖取根及莖，洗凈切厚片，曬干或鮮用。榕屬植物富含黃酮類物質(zhì)，因?yàn)辄S酮類化合物種類較多，幾乎達(dá)到8 000余種，其中天然提取物也較多，在用分光光度法測定其總黃酮含量時(shí)，非常容易受到基質(zhì)影響，所以，在對不同提取物的總黃酮含量進(jìn)行測定的時(shí)候，必須結(jié)合實(shí)際情況，選擇適當(dāng)?shù)臏y定方法與條件，本檢測結(jié)果表明全葉榕總黃酮含量13.05 g/kg。全葉榕（小香勾）的黃酮含量比較高，因?yàn)辄S酮具有強(qiáng)化免疫、調(diào)血脂、抗氧化等作用，所以，全葉榕中含有的黃酮可能是其發(fā)揮保健作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。本文研究顯示，從藥用、營養(yǎng)保健角度分析，全葉榕開發(fā)價(jià)值較大，但有待進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)研究，以驗(yàn)證其藥用與營養(yǎng)保健價(jià)值。