程子龍，劉 朋，劉思當

(1.山東農業(yè)大學 動物科技學院，山東 泰安 271000)

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山東地區(qū)規(guī)?；鋈N常見疫病的流行病學研究

程子龍1，劉 朋1，劉思當

(1.山東農業(yè)大學 動物科技學院，山東 泰安 271000)

[目的]為弄清山東地區(qū)規(guī)?；鋈N常見疫病的流行病學特點。[方法]2015年1月到2015年6月從山東省部分地區(qū)20個規(guī)?；鲭S機采集420份血清樣品，包括種牛血清41份、奶牛血清278份、肉牛血清101份，利用ELISA方法檢測牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎及牛副結核病三種常見疫病抗體水平，20個牛場均未免疫上述三種傳染病疫苗。檢測[結果]表明，在山東地區(qū)牛場中，這三種傳染病普遍存在感染，其中病毒性腹瀉病毒抗體場陽性率為65%，個體平均陽性率為52.62%；牛傳染性鼻氣管炎病毒gE抗體場陽性率為55%，個體平均陽性率為23.33%；牛副結核分支桿菌抗體場陽性率為10%，個體平均陽性率為2.14%。[結論]通過本次流行病學調查，進一步了解三種常見傳染病在山東地區(qū)不同類型牛場的流行情況，對山東地區(qū)牛場疫情預測及疫病防控起到一定的指導作用。

山東；牛病毒性腹瀉；牛傳染性鼻氣管炎；牛副結核??；流行病學調查

牛病毒性腹瀉(Bovine viral diarrhea，BVD)，又稱黏膜病，是由牛病毒性腹瀉病毒引起的以發(fā)熱、黏膜糜爛、潰瘍、白細胞減少、腹瀉、持續(xù)感染、咳嗽、流產(chǎn)為主要特征的牛的急性、熱性、接觸性傳染病[1]。除侵害牛以外，BVDV還能感染羊、鹿、牦牛等反芻動物以及豬[2]，宿主比較廣泛。目前該病在世界范圍內廣泛流行，BVDV是造成全球奶牛、肉牛養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟損失的主要病原體[3]，也是牛源生物制品(如血清等)的重要污染物。在我國將BVD定為三類動物疫病，世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為須申報的動物疫病及國際動物胚胎交流病原名錄三類疫病。

牛傳染性鼻氣管炎(Infectious bovine rhinotracheitis, IBR)又稱“壞死性鼻炎”或“紅鼻病”，是由牛傳染性鼻氣管炎病毒引起牛的一種急性、熱性、接觸性傳染病[4]，主要表現(xiàn)為呼吸道黏膜發(fā)炎、呼吸困難、流鼻涕等癥狀，可引起膿皰性陰道炎、龜頭炎、結膜炎、幼牛腦膜腦炎、乳房炎、奶牛流產(chǎn)、產(chǎn)奶量下降等[5]。IBRV具有廣泛的組織嗜性，可引起牛的呼吸系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)疾病[6]，在臨床上常呈隱性感染，持續(xù)性排毒，同時也可削弱機體的抵抗力，世界衛(wèi)生組織(OIE)將該病列為B類動物疫病，也是我國進出口動物必檢病之一。

牛副結核病(Bovine Paratuberculosis)是由副結核分支桿菌(Mycobacterium aviumsubspecies. Paratuberculosis, MAP)引起的以牛、羊等反芻動物為主的慢性消耗性傳染病，以慢性增生性、卡他性腸炎為特征，病畜進行性消瘦[7][8]，間歇性或持續(xù)性下痢，剖檢腸黏膜腦回樣增厚，腸黏膜固有層有大量淋巴細胞、巨噬細胞、上皮樣細胞及多核巨細胞浸潤[27]。可通過病畜傳染給人類或其他動物。本病在全球范圍內廣泛流行，嚴重影響著養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展和人類健康。

1 材料與方法

1.1 樣品來源與檢測試劑盒

采集的血清樣品來自山東地區(qū)20個規(guī)?；觯渲邪?個種牛場的41份血清、12個奶牛場的278份血清、6個肉牛場的101份血清，共計420份血清樣品。采集的20個規(guī)?；鼍疵庖吲２《拘愿篂a、牛傳染性鼻氣管炎、牛副結核病等三種疫病疫苗。

牛病毒性腹瀉病毒抗體檢測試劑盒、牛傳染性鼻氣管炎病毒gE抗體檢測試劑盒、牛副結核病分枝桿菌抗體檢測試劑盒均購于美國IDEXX公司。

1.2 方法

牛病毒性腹瀉-黏膜病、牛傳染性鼻氣管炎、牛副結核病分支桿菌的抗體檢測均按照IDEXX ELISA試劑盒的說明書進行操作。

2 實驗結果及分析

對采集的41份種牛血清、278份奶牛血清、101份肉牛血清樣品，利用上述方法進行檢測，檢測結果表明，牛病毒性腹瀉病毒抗體場陽性率為65%，個體平均陽性率為52.62%，檢測結果見表1；牛傳染性鼻氣管炎病毒gE抗體場陽性率為55%，個體平均陽性率為23.33%，檢測結果見表2；牛副結核分支桿菌抗體場陽性率為10%，個體平均陽性率為2.14%，檢測結果見表3。雖然在不同牛場都能檢出這三種傳染病，但是這三種傳染病抗體陽性率存在差別，牛病毒性腹瀉病毒抗體陽性率普遍較高，而牛副結核分支桿菌抗體陽性率最低。

表1 牛病毒性腹瀉抗體檢測結果

表2 牛傳染性鼻氣管炎gE抗體檢測結果

表3 牛副結核分支桿菌抗體檢測結果

圖1 不同牛場三種常見疫病抗體陽性率對比

2.1 牛病毒性腹瀉抗體陽性率分析

從檢測結果來看，不同牛群牛病毒性腹瀉抗體場陽性率和個體陽性率都很高，種牛場、奶牛場、肉牛場場陽性率分別達到100%、75%、33.33%，個體陽性率為73.17%、56.12%、34.65%，說明種牛場、奶牛場、肉牛場普遍存在BVDV感染現(xiàn)象，這可能與BVDV持續(xù)性感染(PI)的特點有關。BVDV可以在PI牛體內存活數(shù)月甚至終身，不表現(xiàn)臨床癥狀或出現(xiàn)與免疫病理有關的癥狀，PI牛自身不產(chǎn)生中和抗體，可持續(xù)、反復不定地向外界排毒[9]，導致BVDV在牛群內散播，從而導致牛群高感染狀態(tài)。

從三種牛群類型來看，種牛場陽性率最高，而肉牛場陽性率相對較低。這可能與肉牛飼喂周期相對較短、種牛飼喂周期較長有關，較長的飼喂周期可導致種牛群感染的機率顯著增加，因此種牛群抗體陽性率較高。

從1980年我國首次報道分離到BVDV以來，陸續(xù)多個省份檢出BVD陽性抗體，并且陽性率很高。邱昌慶等1998年報道山東省肉牛場BVD抗體陽性率為59.6%[10]；楊得勝等2008年報道福建省2006、2007、2008三年規(guī)?；鯞VD抗體平均陽性率在80%以上[11]；陳備娟、王煒、菅復春、李樹博、鄧明亮、王淑娟、童欽等人在2010～2012年做的流行病學調查顯示，BVD血清抗體奶牛陽性率最低為58.6%、最高為69.1%，肉牛陽性率最低為31.39%、最高為56.5%，牦牛陽性率為30.08%[9][12-17]。李智勇等2014年對內蒙古地區(qū)奶牛場調查結果顯示，BVD血清抗體陽性率為88.9%[18]；2014年岳瑞超等報道山東省濟南市、濟寧市及萊西市牛BVD血清抗體平均陽性率為38.3%[19]。而此次我們的調查結果顯示種牛場、奶牛場、肉牛場個體陽性率分別為73.17%、56.12%、34.65%，平均陽性率為52.62%，低于內蒙古地區(qū)，與其他省份基本一致。以上數(shù)據(jù)說明BVD在我國已經(jīng)廣泛流行，多呈亞臨床型或隱性感染，雖然沒有引起明顯的臨床癥狀，但是會造成產(chǎn)奶量降低、肢蹄病發(fā)病率升高，能增加其他疾病的易感性[20]，從而造成巨大的間接損失，應引起足夠重視。

2.2 牛傳染性鼻氣管炎gE抗體陽性率分析

種牛場、奶牛場和肉牛場IBRVgE抗體場陽性率分別為50%、50%、66.67%，個體陽性率分別為26.83%、17.63%、37.62%，雖然場陽性率較高，但是個體陽性率相對較低，說明本病波及的牛場范圍較大，陽性牛群中個體陽性率并不是很高。

2007年～2013年張鵬飛、顏邦芬、賀曉龍、徐曉琴、王煒、李樹博、王單晶等人采用ELISA或者血清中和試驗方法分別對全國各地區(qū)牛血清進行IBRV抗體檢測，陽性率最低為31.3%、陽性率最高為50.67%[9,15,21-25]；而2014年李智勇等報道內蒙古地區(qū)奶牛血清IBRV抗體平均陽性率高達75.7%[26]；2014年岳瑞超等報道的山東省濟南市、濟寧市及萊西市牛血清IBRV抗體平均陽性率為27%[19]；我們此次的流行病學調查結果顯示山東地區(qū)牛血清IBRV抗體個體平均陽性率為23.33%，略低于岳瑞超等人2014年報道的結果，從上面數(shù)據(jù)來看，山東地區(qū)總體陽性率低于我國其它地區(qū)，但是波及的牛場范圍較廣，存在普遍感染現(xiàn)象。

2.3 牛副結核病分支桿菌抗體陽性率分析

種牛場、奶牛場、肉牛場副結核病分支桿菌抗體場陽性率分別為50%、8.33%、0，個體陽性率分別為9.76%、1.8%、0，不同牛場陽性率差別較大，種牛場陽性率高于奶牛場、肉牛場，并且在抽檢的的肉牛場里，沒有檢測出副結核分支桿菌抗體陽性牛，僅在抽檢的12個奶牛場中1個檢出5份牛副結核分支桿菌抗體陽性牛。由于副結核病感染前期主要以細胞免疫為主，后期則出現(xiàn)體液免疫，因此使用ELISA方法很難檢出感染副結核分支桿菌前期的牛，根據(jù)有關研究報道，兩歲以前的牛很難利用ELISA方法檢出是否感染副結核分支桿菌。奶牛場、肉牛場牛的年齡相對較小，抽檢的牛場本身陽性率不高，因此在肉牛場未檢出副結核分支桿菌抗體，在奶牛場副結核分支桿菌抗體陽性率很低。2005～2015年十年間，全國各地區(qū)牛血清副結核分支桿菌抗體陽性率在2.8%～18%[26-33]，我們調查的平均陽性率為2.14%，與之前調查的結果基本相符。雖然在山東地區(qū)肉牛場沒有檢出副結核分支桿菌抗體陽性牛，但是周邊地區(qū)副結核陽性率相對較高，因此山東地區(qū)感染副結核病的壓力比較大，山東地區(qū)牛場應做好生物安全措施，防止疫病傳入。

2.4 三種疫病在不同牛場中陽性率對比分析

從圖一可以看出，在三種牛場中BVDV抗體陽性率都在較高水平，副結核分支桿菌抗體陽性率普遍較低；種牛場三種疫病抗體陽性率普遍較高，屬于高感染率牛群；肉牛IBRV抗體陽性率較高，與肉牛呼吸道疾病高發(fā)相吻合，可能與流動性較大有一定關系；這三種疫病在奶牛場普遍存在感染，奶牛場應盡早采取凈化措施。

3 討論

3.1 山東地區(qū)種牛場、奶牛場、肉牛場均存在牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎、牛副結核病三種牛常見傳染病的感染。并且種牛場、奶牛場陽性率相對較高，山東周邊地區(qū)這三種疫病的感染率較高。因此各牛場應嚴格做好生物安全措施，不從疫區(qū)引牛，在引牛時應嚴格檢疫這三種疫病，防止引進陽性牛、持續(xù)性感染牛、隱性感染牛。另外牛場應定期對三種疫病進行檢疫、監(jiān)測，及時隔離或淘汰陽性牛、持續(xù)性感染牛。

3.2 BVD在三種疾病中陽性率最高，提示在山東地區(qū)的牛場中BVDV感染較重。感染BVDV的牛雖然很少表現(xiàn)典型的臨床癥狀，或臨床癥狀較輕，直接引起的死亡率不高，但BVD有持續(xù)感染、免疫耐受和免疫抑制等特點，可使乳房炎、肢蹄病、生殖道疾病的發(fā)病率大大提高，由此帶來的產(chǎn)奶量下降、牛奶質量降低、淘汰牛數(shù)量增加等間接損失巨大。病毒性腹瀉持續(xù)性感染的特點是造成BVD廣泛傳播的主要原因，因此檢出和消除PI牛是控制BVD的中心環(huán)節(jié)[9]。牛場應制定有效的BVD清除計劃，做好牛病毒性腹瀉病的監(jiān)測工作，逐步實現(xiàn)BVD的凈化。

3.3 牛副結核分支桿菌抗體陽性率較低，但由于牛副結核病ELISA檢測方法的缺陷，ELISA只適用于兩歲以上牛的檢測，牛副結核分支桿菌感染的青年牛不易檢出，因此并不代表牛場未存在牛副結核分支桿菌的感染，不能掉以輕心。

3.4 牛場應該提高飼養(yǎng)管理水平，飼喂優(yōu)質的飼草飼料，改善牛舍環(huán)境，保證牛群健康，增強牛的體質，提高牛的抵抗力。定期對牛舍、飼養(yǎng)工具進行消毒，及時清除牛舍內的糞尿，并做無害化處理，禁止非本場人員及車輛進入牛場，尤其是養(yǎng)殖區(qū)，切實做好生物安全措施，防止三種疫病的發(fā)生。

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Epidemiological Investigation of Three Common Diseases in Large Scale Cow Farms in Shandong Province

CHENG Zi-long1, LIU Peng1, LIU Si-dang1*

(CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShandongAgricultureUniversity,Tai'an,Shandong, 271000)

420 serum samples were randomly collected from 20 scale cow farms from some regions of Shandong province during January to June in 2015, which included 41 breeding cattle serum samples, 278 dairy cattle serum samples and 101 beef cattle serum samples. The antibody level of bovine viral diarrhea, infectious bovine rhinotracheitis and bovine paratuberculosis, which are three common diseases, were detected by ELISA and none of the 20 scale cow farms had been vaccinated with the three types of vaccines which are mentioned above. The results showed that the three types of infectious diseases above were widespread in cow farms in Shandong province. The positive rate of bovine viral diarrhea virus (BVDV) antibody was 65%, and the individual average positive rate was 52.62%.The positive rate of infectious bovine rhinotracheitis (IBR) antibody was 55%, and the individual average positive rate was 23.33%. The positive rate of MAP antibody was 10%, and the individual average positive rate was 2.14%. Through the epidemiological investigation, we could further understand the epidemic situation about the three types of common infectious diseases in large scale cow farms in Shandong province. It also played a guiding role in forecasting epidemic, preventing and controlling diseases of the cow farms in Shandong province.

Shandong; bovine viral diarrhea; infectious bovine rhinotracheitis; bovine paratuberculosis; epidemiological investigation

2015-07-20修改日期:2015-07-25

山東省牛產(chǎn)業(yè)技術體系資助(SDAIT-12-011-04)

程子龍(1991-)，男，山東聊城市人，在讀碩士，主要從事動物臨床病理學研究，E-mail：chengzilong2014@126.com

劉思當，教授，博士，博士生導師， E-mail：liusid@sdau.edu.cn

S823.2

A

1001-9111(2016)01-0044-05