孫 雪，沈國順，趙一霏，李 帥，郭士琪，董 燁，劉麗霞

(沈陽農(nóng)業(yè)大學畜牧獸醫(yī)學院，遼寧沈陽 110866)

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豬繁殖與呼吸綜合征疫苗對豬血液指標的影響

孫 雪，沈國順，趙一霏，李 帥，郭士琪，董 燁，劉麗霞*

(沈陽農(nóng)業(yè)大學畜牧獸醫(yī)學院，遼寧沈陽 110866)

為確定豬繁殖與呼吸綜合征疫苗對豬血液指標的影響，制定科學有效的疫苗免疫程序，選取42頭未免健康斷奶仔豬，隨機分為4組，對照組(A組)、弱毒苗免疫組(B組)、滅活苗免疫組(C組)和弱毒苗+滅活苗聯(lián)合免疫組(D組)。分別于免疫前、免疫后14、28、42、56、70 d以前腔靜脈采血進行血常規(guī)分析。結(jié)果顯示，免疫后，D組白細胞數(shù)始終高于B組，并于免疫42 d后顯著高于其他3組(P<0.01)；免疫28 d后，D組淋巴細胞數(shù)顯著高于B組(P<0.01)；各組紅細胞數(shù)、血紅蛋白濃度、中性粒細胞數(shù)及中值細胞數(shù)均呈現(xiàn)緩慢上升趨勢，且D組的高于其他3組(P>0.05)。表明同時免疫弱毒苗+滅活苗能夠更好的刺激豬血液細胞增殖。

豬繁殖與呼吸綜合征；疫苗；淋巴細胞；白細胞

豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起，在世界范圍內(nèi)流行，不同年齡、品種和性別的豬均可感染，以妊娠母豬和1月齡以內(nèi)的仔豬最易感[1]，臨床主要引起仔豬呼吸障礙和懷孕母豬繁殖障礙，主要表現(xiàn)為流產(chǎn)、木乃伊胎和死胎[2]。該病于19世紀80年代末出現(xiàn)在美國，我國最早于1991年在臺灣出現(xiàn)該病，1996年首次報道該病，2006年暴發(fā)高致病性PRRS(HP-PRRSV)。PRRSV主要感染豬肺泡巨噬細胞(PAMs)[3]，影響 PRRSV的遞呈和清除，使動物體免疫力下降，引發(fā)免疫抑制，并誘發(fā)繼發(fā)感染，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。該病免疫預防仍是最有效的途徑之一[4-5],但疫苗使用過程中也存在一定的問題，防控效果不是很理想[6]，在外源感染方面疫苗效力不夠，且PRRSV疫苗株已經(jīng)被分離，表明疫苗可能會引起豬的疾病[7]。近年來許多研究者致力于新型疫苗的開發(fā)，包括病毒重組載體疫苗、DNA疫苗和植物制備的亞單位疫苗[8-10]。本試驗通過對不同PRRS疫苗免疫后豬血液指標的影響進行研究，旨在探索該病最佳的免疫程序，為PRRS的有效防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用動物與疫苗 35日齡未免疫健康斷奶仔豬42頭，由沈陽農(nóng)業(yè)大學科研豬場提供，平均體重8.87 kg。PRRS弱毒疫苗由勃林格殷格翰動物保健(美國)有限公司生產(chǎn)；高致病性PRRS滅活疫苗(NVDC-JXA1株)由杭州薦量獸用生物制品有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 主要儀器 Uritest-3000型全自動血細胞分析儀。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計 將42頭未免疫健康斷奶仔豬隨機分為A、B、C、D 4組，A為對照組，B～D為試驗組且各設(shè)一個重復，A組(6)肌注生理鹽水2 mL/頭份 ；B1組(6)、B2組(6)肌注PRRS弱毒疫2 mL/頭份 ；C1組(6)、C2組(6)肌注PRRS滅活疫苗2 mL/頭份 ；D1組(6)、D2組(6)肌注PRRS弱毒+PRRS滅活疫苗弱毒疫苗，1 mL/頭份+滅活疫苗1 mL/頭份 ；均為35日齡首免，首免28 d后加強免疫。分別于免疫前、免疫后14、28、42、56、70 d時對所有試驗豬前腔靜脈采血，采用全自動血液細胞分析儀對白細胞數(shù)(WBC)、紅細胞數(shù)(RBC)、淋巴細胞數(shù)(LY)、中性粒細胞數(shù)(GR)、血紅蛋白濃度(HGB)、中值細胞數(shù)(MID)等指標進行測定。

2 結(jié)果

2.1 疫苗免疫對豬血液白細胞數(shù)的影響

免疫后14 d，B組白細胞數(shù)顯著低于其他3組(P<0.05)；免疫后28 d，D組顯著高于A、C組(P<0.05)，與B組差異性不顯著；免疫后42 d，B組的顯著低于C組(P<0.01)；免疫后56 d和70 d，D組的均顯著高于A、B、C 3組(P<0.01)(圖1)。

圖1 免疫后白細胞數(shù)變化

2.2 疫苗免疫對血液淋巴細胞數(shù)的影響

免疫后14 d，C組淋巴細胞數(shù)最高，但各組間差異性不顯著(P>0.05)；免疫后28 d，B、C、D 3組的均顯著高于A組(P<0.01)；42 d時，B組顯著低于C、D兩組(P<0.01)；免疫后56 d和70 d，D組顯著高于A、B、C 3組(P<0.01)(圖2)。

圖2 免疫后淋巴細胞數(shù)變化

2.3 疫苗免疫后對紅細胞數(shù)的影響

各組紅細胞數(shù)均緩慢上升。免疫14 d后D組紅細胞數(shù)高于其他3組(P>0.05)，免疫42 d后，A組高于B組(P>0.05)，試驗組(B、C、D組)紅細胞數(shù)與對照組紅細胞數(shù)(A組)無顯著性差異(P>0.05)(圖3)。

2.4 疫苗免疫對血紅蛋白濃度的影響

各組血紅蛋白濃度均緩慢上升。免疫14 d后D組血紅蛋白濃度高于其他3組(P>0.05)，70 d時，D組的低于B組，試驗組(B、C、D組)血紅蛋白濃度與對照組(A組)血紅蛋白濃度無顯著性差異(P>0.05)(圖4)。

2.5 疫苗免疫后對中性粒細胞數(shù)影響

各組中性粒細胞數(shù)均緩慢上升。免疫后D組中性粒細胞數(shù)高于其他3組(P>0.05)，70 d時，B組的高于D組(P>0.05)。免疫后試驗組(B、C、D組)中性粒細胞數(shù)高于對照組(A組)中性粒細胞數(shù)，但差異不顯著(P>0.05)(圖5)。

圖3 免疫后紅細胞數(shù)變化

圖4 免疫后血紅蛋白濃度變化

圖5 免疫后中性粒細胞數(shù)變化

2.6 疫苗免疫對中值細胞數(shù)影響

免疫14 d后D組中值細胞數(shù)高于其他3組(P>0.05)。70 d時，D組的高于A組和C組，但差異不顯著(P>0.05)(圖6)。

圖6 免疫后中值細胞數(shù)變化

3 討論

PRRS已成為危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的疫病之一[11]。為防控該病，除快速準確的診斷外，做好仔豬的免疫接種也是預防該病最重要的途徑之一。血液是機體抵御感染的第一道防線，起主要作用的是血液中白細胞，如巨噬細胞和淋巴細胞[12]。它們通過吞噬和產(chǎn)生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。本研究首免后，D組白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)始終高于A組和B組，且免疫后42 d白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)顯著高于其他3組(P<0.01)，表明同時免疫豬藍耳病滅活苗和弱毒苗組，能夠更好的刺激機體白細胞的增殖與分化。在免疫28 d后，弱毒苗免疫組(B組)白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)均顯著低于C組和D組(P<0.01)，且免疫后42 d時B組淋巴細胞數(shù)與免疫后28 d時相比顯著下降(P<0.05)。這可能是接種PRRSV活疫苗毒力偏強所致，因為免疫滅活苗組(C組)白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)變化不明顯(P>0.05)。免疫后試驗組(B、C、D組)的紅細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù)、中值細胞數(shù)及血紅蛋白濃度與A組無明顯差異(P>0.05)，表明PRRS疫苗免疫并沒有對豬機體造成損傷，這與張韜[13]的報道一致。本研究中D組的白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)等血液指標高于B組和C組，表明PRRS弱毒苗和滅活苗同時免疫能夠更有效地刺激機體免疫細胞的增殖。

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Effect of PRRS Vaccines on Blood Indexes in Swine

SUN Xue,SHEN Guo-Shun,ZHAO Yi-Fei,LI Shuai,GUO Shi-Qi,DONG Ye,lIU Li-Xia

(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang，Liaoning,110161,China)

In order to determine the effect of the different vaccines of PRRS on blood indexes in swine,to make more scientific and effective immune programs of PRRS,42 healthy and weaned piglets were randomly divided into 4 groups,control group(group A ),immunization of attenuated vaccine in group B,immunization of inactivated vaccine in group C,immunization of attenuated and inactivated vaccines in group D.Blood samples were taken from cranialvenacavaon the 14th,28th,42th,56th,70th day after immunization for blood analysis.The results showed:the average number of leukocytes of group D in the 70th day was significantly higher than that of group B (P<0.01),after 42th day the average number of leukocytes of group D was significantly higher than that of other groups(P<0.01); after immunization 28th day,lymphocyte count of group D was significantly higher than that of group B (P<0.01); the number of erythrocytes and hemoglobin concentration,the neutrocytes and median cells in each group showed a slow upward trend, and the values in group D was higher than that in other three groups (P>0.05).It showed that the immunization of attenuated vaccines and inactivated could better stimulate the porcine blood cell proliferation.

PRRS；vaccine；lymphocyte；leukocyte

2016-05-08

遼寧省農(nóng)業(yè)公關(guān)及產(chǎn)業(yè)化項目(2014202004)

孫 雪(1991-)，女，遼寧盤錦人，碩士，主要從事預防免疫研究。*通訊作者

S852.659.6

B

1007-5038(2016)11-0123-03