隋 超 閆益波 申 超 岳 磊 焦福林 吳志娟 胡廣英 任毅菲

（山西省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，山西太原 030032）

豬病防控

豬藍耳病滅活苗和弱毒苗免疫效果的對比研究

隋 超 閆益波 申 超 岳 磊 焦福林 吳志娟 胡廣英 任毅菲

（山西省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，山西太原 030032）

本文通過觀察免疫豬藍耳病滅活苗與弱毒苗后母豬和仔豬抗體水平的變化，比較兩種疫苗的免疫抗體消長規(guī)律。實驗?zāi)肛i和仔豬都分為4個組，1組、2組、3組、4組各免疫一次滅活苗、兩次滅活苗、一次弱毒苗、兩次弱毒苗。在計劃時間采集血清，檢測試驗豬的抗體水平。由試驗結(jié)果可知，弱毒苗的免疫效果略優(yōu)于滅活苗，同種疫苗免疫兩次的效果優(yōu)于免疫一次的效果；弱毒苗的抗體峰值出現(xiàn)的比滅活苗早，但抗體維持時間略短。滅活苗適用于一般豬場的免疫防治工作，而弱毒苗更適用于急性突發(fā)的豬藍耳病的防治。

豬藍耳病；滅活苗；弱毒苗；抗體水平

豬藍耳?。≒RRS）是一種高度接觸性的傳染病，很容易在地方蔓延，在國內(nèi)外時有暴發(fā)，對養(yǎng)豬業(yè)的影響巨大。目前沒有有效的藥物能徹底根治豬藍耳病[1]，只能靠預(yù)防為主。豬藍耳病病毒（PRRSV）的感染只針對豬，以妊娠母豬和1月齡以內(nèi)的仔豬最為易感[2]。PRRSV對患病豬和帶毒豬的感染和影響能持續(xù)一段時間[3]。感染PRRSV的豬群常具有不同的臨床反應(yīng)和癥狀，患病豬有的表現(xiàn)為皮膚變色，包括豬耳頂部發(fā)藍，腹部和陰部呈深紫色；有的豬只呼吸困難并伴有咳嗽。而一旦有臨床發(fā)病癥狀出現(xiàn)，又極易和其他疾病的病毒混合感染，這就使臨床診斷變得復(fù)雜難定[4]。為了驗證滅活苗與弱毒苗對豬藍耳病的免疫效果，本研究設(shè)計以下試驗進行比較，從而為現(xiàn)階段選擇豬藍耳病疫苗提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗耗材

美國愛德士生物有限公司生產(chǎn)的豬藍耳病病毒ELISA抗體檢測試劑盒及一次性采血器等。

1.1.2 試驗用疫苗

哈爾濱維科生物有限公司生產(chǎn)的經(jīng)典PRRS滅活苗（CH-1R）；南農(nóng)高科技股份有限公司生產(chǎn)的經(jīng)典PRRS弱毒苗（R98株）。

1.1.3 試驗豬

試驗前在豬場選定一處單獨的飼喂場地作為試驗區(qū)，并提前將試驗區(qū)消毒殺菌，為試驗的開展做好準備。

對試驗豬群做好其他疫苗的免疫工作。試驗前對挑選的公豬與母豬都提前完成多殺性巴氏桿菌、鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬支原體、圓環(huán)病毒2型、偽狂犬病毒、流感病毒和豬瘟病毒的疫苗免疫，免疫過程中也會避開PRRS疫苗的免疫時間。

挑選出20頭PRRSV抗體檢測為陰性，生育過2胎次，年齡、體重相近的母豬。在母豬所產(chǎn)仔豬中，挑選20頭體重相近、PRRSV抗體檢測為陰性的仔豬。

1.2 方法

1.2.1 試驗分組

20頭母豬隨機分為4組。20頭仔豬根據(jù)母本剪耳號后依然分為4組。

1.2.2 免疫方法

母豬1組受精后20天免疫1次滅活苗（2頭份/頭）。母豬2組產(chǎn)前2周免疫1次滅活苗，受精后20天免疫1次滅活苗（均為2頭份/頭）。母豬3組受精后20天注射1次弱毒苗（1頭份/頭）。母豬4組產(chǎn)前2周免疫1次弱毒苗，受精后20天免疫1次弱毒苗（均為1頭份/頭）。

仔豬1組14日齡免疫1次滅活苗（0.5頭份/頭）。仔豬2組14日齡肌肉注射1次滅活苗（0.25頭份/頭），35天加強免疫，即再肌肉注射1次滅活苗（0.5頭份/頭）。仔豬3組14日齡免疫1次弱毒苗（0.5頭份/頭）。仔豬4組14日齡肌肉注射1次弱毒苗（0.25頭份/頭），35天再肌肉注射1次弱毒苗（0.5頭份/頭）。

1.2.3 血樣采集

母豬1組、3組于免疫前采血，以保證該母豬PRRSV抗體是陰性，在免疫后分別于14、21、35、49、70、91、112天時采血；母豬2組、4組在首次免疫前采血，保證母豬免疫前為PRRSV抗體陰性豬，在二次免疫前也采血，檢測抗體水平，二免后于14、21、35、49、70、91、112天時采血。

在仔豬出生后第7、14、35、42、49、70、90、120日齡分別采集血樣。

1.2.4 檢測方法

采用美國愛德士生物有限公司生產(chǎn)的豬藍耳病病毒ELISA抗體檢測試劑盒，按照說明書進行血清樣本檢測。

1.3 計算結(jié)果

PRRS陽性對照平均值（PC∶PRRS）減去陰性對照平均值（NC∶PRRS）必須≥0.150；NHC陽性孔對照平均值（PC∶PRRS）必須≤0.120，NHC陰性對照平均值（NC∶PRRS）必須≤0.250；另外，陰性對照平均值（NC）必須≤0.150，試驗方能有效。

樣本/陽性對照比率的計算（S/P）∶S/P=〔（樣本A650nm∶PRRS）－（樣本A650nm∶NHC）〕÷〔（PC∶PRRS）－（PC∶NHC）〕。

1.4 結(jié)果判定

如果S/P值≥0.40，樣品應(yīng)被判定為PRRS抗體陽性。如果S/P值＜0.40，樣品應(yīng)被判定為PRRS抗體陰性。

1.5 統(tǒng)計方法

本實驗采用SPSS 18軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗?zāi)肛i的結(jié)果

2.1.1 母豬的PRRSV抗體水平

表1 4個組母豬免疫后不同時期的PRRSV抗體情況（A650nm）

從表1可以看出，所有母豬免疫后，抗體均逐漸升高，1組、2組和3組的抗體水平在35天時達到峰值，4組的抗體水平在21天時達到峰值，而后4個組的抗體水平均逐漸衰減，至112天時達到最低。另外整個試驗期，4個組的母豬抗體水平表現(xiàn)為：4組＞2組＞3組＞1組。2.1.2母豬免疫后的產(chǎn)子情況

圖1 4個組母豬的死胎率、弱仔率、死亡率、發(fā)病率比較

由圖1知，4個組母豬的死胎率相比為1組＞2組＞3組＞4組，弱仔率為2組＞3組＞4組＞1組，死亡率為2組＞3組＞1組＞4組，發(fā)病率為1組＞2組＞4組＞3組，其中母豬4組的死胎率和死亡率為零。

2.2 試驗仔豬的結(jié)果

從表2可以看出，1組仔豬的免疫抗體水平在70日齡達到峰值，2組仔豬的免疫抗體在90日齡時達到峰值，1組和2組仔豬都是在120日齡時抗體值最低，3組仔豬的免疫抗體水平在35日齡時達到峰值，4組仔豬的免疫抗體水平在49日齡時達到峰值，3組和4組仔豬則是在90日齡時抗體值最低。

表2 4個組仔豬的PRRSV抗體情況（A650nm）

3 小結(jié)和分析

試驗證明，經(jīng)兩次弱毒苗免疫的母豬4組抗體峰值出現(xiàn)最早，在21天。一次弱毒苗免疫的母豬3組與兩次滅活苗免疫的母豬2組免疫效果相似，抗體峰值都出現(xiàn)在35天。何新群等就證明弱毒苗免疫豬后20～35天左右出現(xiàn)抗體峰值，本研究的結(jié)果與此相一致[3]。免疫一次滅活苗的母豬1組抗體峰值出現(xiàn)最晚，在49天。而后4個組抗體水平逐漸衰減，至112天最低，但也為陽性，即在整個生產(chǎn)周期，母豬都可以抵抗PRRSV相關(guān)毒株的感染。整個試驗期，母豬4組的抗體水平最佳，母豬2組的抗體水平又高于其他2個組，說明經(jīng)兩次疫苗免疫的效果較好，并且經(jīng)兩次弱毒苗免疫的效果最好。但是4個組母豬抗體水平差異不顯著，只能從表1中顯示免疫效果的差別。另外，比較試驗?zāi)肛i的死胎率、弱仔率、死亡率、發(fā)病率，也是母豬4組的最低，說明經(jīng)兩次弱毒苗免疫的效果較好。免疫弱毒苗的仔豬3、4組的抗體峰值比免疫滅活苗的1、2組抗體峰值出現(xiàn)早，但抗體衰減速度快。由此可知，免疫PRRS弱毒苗的母豬及仔豬的效果要遠遠優(yōu)于PRRS滅活苗的效果。而同種疫苗的免疫也是兩次免疫的效果要好于一次。

曹斌[1]、曹晉蓉[6]等學者均認為，弱毒苗的免疫效果要優(yōu)于滅活苗，本次試驗結(jié)論也證明了這一點。但是，曹斌、曹晉蓉等學者同時主張滅活苗安全性好，不存在散毒和毒力返強的危險，但滅活苗存在免疫劑量大，免疫次數(shù)多，產(chǎn)生免疫所需的時間較長等缺點。

相比之下，弱毒苗的免疫效果好，免疫力堅強，免疫期長，而此次試驗結(jié)果則是弱毒苗免疫抗體維持時間要短于滅活苗，這點與相關(guān)文獻的報道不符。由于試驗只在一個豬場進行，且試驗對象范圍狹小，所以結(jié)論可能存在一些誤差，但依然有一定的參考價值。

對于未來豬場豬藍耳病的防控，可以采取以下措施：未發(fā)病豬場加強豬場管理，全面貫徹各項防疫程序，做好消毒措施，堅持引種后配種前的疫苗免疫，提高豬群免疫力，可適當在飼料中添加有益的中草藥成分。發(fā)病豬場要先確定PRRS病毒株型，根據(jù)病情的急緩選擇弱毒苗或滅活苗，并確定疫苗接種的劑量，必要時可聯(lián)系相關(guān)科技部門尋求技術(shù)幫助。

[1]曹斌,王海燕,周廣生,等.不同類型豬藍耳病疫苗的體液免疫效果比較[J].中國動物檢疫,2010(8):51-52.

[2]姚敬明,孟帆,吳忻等.豬繁殖與呼吸綜合征母源抗體和免疫抗體的消長規(guī)律研究[J].中國畜牧獸醫(yī),2010,37(4):206-208.

[3]何信群,閏福棟.豬繁殖與呼吸綜合征病毒弱毒株活疫苗抗體應(yīng)答水平的觀察[J].中國獸藥雜志,2003,37(11):24-26.

[4]Evans M,Medley G,Green L.Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)in GB pig herds:farm characteristics associated with heterogeneity in seroprevalence[J]. BMC Veterinary Research,2008(4):48-62.

[5]孟帆,姚敬明,吳忻.豬群暴發(fā)豬瘟與藍耳病混合感染的診斷與防制[J].山西農(nóng)業(yè)科學,2010,38(6):66-68.

[6]曹晉蓉,占松鶴,王非,等.不同類型豬藍耳病疫苗的免疫探討[J].中國動物檢疫,2009,26(9):56-57.

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