井鳳 劉峰 劉偉
摘要:超高壓技術在食品殺菌、保藏及某些加工過程中,而且在微生物菌種誘變具有巨大的應用潛力。近年來,人們開始將該技術應用到中藥有效成分的提取方面。本文就超高壓提取技術的原理、特點以及在中藥有效成分提取中的應用等方面進行闡述。
關鍵詞:超高壓;中藥有效成分;提取
中圖分類號:R284 文獻標識碼:A DOI:10.3969/j.issn.1003-8256.2016.04.008
超高壓技術(High Hydrostatic Pressure Technique)的研究始于1914年[1],在超高壓條件下,生物大分子的非共價鍵發(fā)生變化,使蛋白質變性以及酶失活等,而維生素、香精等小分子化合物是共價鍵結合,能夠完整保留。因此,該技術在國內外主要應用于食品業(yè),目的是為了防止食物的微生物污染、延長食品儲藏時間[2]。
中藥有效成分的提取分離是中藥生產過程中的關鍵環(huán)節(jié),其工藝特點、工藝流程的選擇和設備配置都直接關系到被提取有效成分的數(shù)量和質量,從而影響到產品質量的穩(wěn)定性和有效性等。因此探明中藥提取、分離技術的機制、優(yōu)化提取工藝參數(shù),明確應用前景等逐漸成為中藥生產和研究的重點內容。隨著我國中藥現(xiàn)代化進程的不斷推進,中藥提取分離新技術的基礎和應用研究十分活躍,并取得了長足的進步。傳統(tǒng)的中藥有效成分的提取方法有煎煮法、回流提取法、超聲輔助提取技術、超臨界流體萃取技術、微波輔助萃取技術,但這些方法由于大多數(shù)中藥有效成分含量低,難于富集,許多有效成分熱敏,易水解等因素,使得傳統(tǒng)分離與富集技術獲得的產品收率低,同時成本高、耗時長、工藝復雜、消耗溶劑多、能耗高、成本大、一些溶劑毒副作用較大等缺點[3]。超高壓技術作為一種新型的提取技術,具有快速、高效、環(huán)保、節(jié)能的技術特點,已逐漸應用于中藥有效成分的提取中,2004年吉林工業(yè)大學張守勤等[4]率先將該技術應用于中藥提取。本文將對超高壓提取的原理、特點以及在中藥提取中的應用等方面進行闡述。
1 超高壓技術基本原理和技術特點
超高壓提?。╱ltra-high pressure extraction technology, UHPE)的基本原理是在常溫條件下,對原料液施加 100-1000 MPa 的流體靜壓力,保壓一定時間后迅速卸除壓力,進而完成整個提取過程[5,6]。提取植物樣品的提取過程為兩個過程,一個是植物樣品浸潤、其中溶質溶解的過程,另一個是溶質與溶液之間的擴散過程。超高壓能夠快速、高效地提取天然產物有效成分,主要是超高壓能改變基質材料的組織結構,大大減小目標成分的擴散阻力,同時超高壓力差是目標成分擴散的傳質動力,其獨特的提取機理可以從升壓、保壓和卸壓3個階段加以說明:升壓階段使壓力在極短的時間內(一般小于1 min)由常壓升到幾百兆帕,而細胞內部的壓力卻很?。?個大氣壓),由于滲透壓差極大,在滲透過程中溶劑易形成湍流,使細胞邊界層變薄、細胞膜發(fā)生疏松、破碎等結構變化,增大固液接觸面積,減小有效成分由細胞內部向外擴散的傳質阻力。升壓階段引起壓力的快速變化,可以改變體系的體積,進而推動了化學平衡發(fā)生移動。快速滲透到細胞內部的溶劑與有效成分充分接觸,在較短的時間內實現(xiàn)有效成分溶解平衡,因此保壓階段一般在幾分鐘內完成。卸壓在幾秒內完成使組織細胞的壓力從幾百兆帕迅速減小為零,溶解了有效成分的溶液在超高反向壓力差的作用下形成強大的湍流。卸壓時間越短,細胞內流體擴散時產生的沖擊力越強,湍動效應越強,有效成分擴散的傳質阻力越小,溶解了有效成分的溶劑快速轉移到細胞外,達到快速、高效提取的目的。
基于超高壓技術的上述原理,與傳統(tǒng)的浸漬法、滲漉法、煎煮法、熱回流提取法、索氏提取法等常規(guī)提取方法,以及近年來研究和開發(fā)的超聲提取法、微波提取法、超臨界流體萃取法等方法相比,超高壓提取技術具有獨特的優(yōu)勢:提取時間短、能耗低、大分子物質溶出少、有效成分提取率高以及可避免熱效應引起的有效成分結構改變、損失和生理活性降低等,同時由于超高壓提取是在密閉環(huán)境中進行,沒有溶劑揮發(fā),不會造成環(huán)境污染。
2 超高壓在中藥有效成分提取中的應用
2.1 黃酮類化合物的提取
2004年吉林工業(yè)大學[4]率先將該技術應用于中藥提取。Liu等利用超高壓技術,從朝鮮淫羊藿中提取淫羊藿總黃酮,并與回流提取進行比較,結果顯示以70%乙醇作為提取溶劑,超高壓下提取5 min總黃酮的提取率為9.67%,而回流提取4 h提取率僅為6.14% [7]。Li等采用超高壓技術從山楂葉中提取黃酮類化合物,選擇50%乙醇為提取溶劑、固定料液比1:45 (g/mL),控制溫度為60 ℃,在400 MPa高壓下提取3 min,實驗結果證明超高壓提取技術具有效率高、時間短、雜質少等優(yōu)點[8];而駱曉沛等采用超高壓技術對山楂果實中的總黃酮進行了提取研究,并同超聲波提取法、微波提取法、索氏提取法進行比較。超高壓提取山楂中總黃酮的最佳工藝:50%乙醇作為提取溶劑、料液比為1:40 (g/mL)、浸泡2 h、300 MPa高壓下提取3 min,在此工藝條件下總黃酮有最高的提取率為5.44%;采用索氏提取法提取3 h,提取率僅為5.12%;超聲波提取法的提取率為4.66%;微波提取法的提取率為3.76%,由此可以看出:超高壓提取法耗時極短、提取率高。另外,超高壓提取后的提取液十分澄清,而索氏提取法、超聲波提取法和微波提取法處理后的提取液都比較混濁,這說明超高壓提取法具有選擇性提取的特點,更加有利于山楂中黃酮類成分的進一步分離純化,實驗可操作性強[9]。其他相關文獻報道如下表所示。
2.2 皂苷類化合物的提取
Chen等利用超高壓法從人參中提取人參皂苷,通過對溶劑的濃度、料液比、提取壓強和提取時間的優(yōu)化,獲得最佳體系:70%乙醇作為提取溶劑、提取壓強200 MPa、提取時間5 min、料液比為1:50 (g/mL),在此工藝條件下,人參皂苷的提取率為4.42%,與傳統(tǒng)熱回流提取的提取率(4.33%)相比,提取率沒有明顯的提高但是時間顯著縮短,省時、節(jié)能[19];Zhang等也利用超高壓法成功從人參中提取人參皂苷[20, 21]。鄭群雄等采用超高壓提取法對山茱萸中總皂苷進行了研究,95%乙醇與藥材按1:15 (g/mL)混合,400 MPa高壓下提取8 min,最終總皂苷的提取率為17.60 mg/g,同微波提取法(45-65 ℃,20 min,提取得率為19.30 mg/g)和熱回流提取法(60-80 ℃下,6 h,提取得率為7.80 mg/g)相比,超高壓提取所耗時間最短,超高壓提取和微波提取得率相近,但是熱回流提取得率相對來說很低。超高壓提取過程在常溫下進行,保護了熱不穩(wěn)定成分的活性[22-25]。
2.3 多糖類化合物的提取
Zhu等利用超高壓技術進行了破壁提取靈芝孢子多糖的研究,發(fā)現(xiàn)該方法在降低提取
用的同時提高了靈芝孢子多糖提取得率[26]。謝銀軍等利用超高壓提取可破壞魚腥草的細胞,促進多糖溶出。采用超高壓提取魚腥草中多糖的優(yōu)化工藝條件為固液比1:20g/mL,超高壓處理壓力320Mpa、超高壓處理時間4.5 min,多糖得率可達5.850%,該方法時間短,多糖得率高,是提取魚腥草多糖的適宜方法[27]。
2.4 生物堿類
寧志剛[28]等采用超高壓提取烏頭原堿,工藝條件為:乙醇浸泡2h,壓力為 600MPa,料液比為1:10,時間為5min。以烏頭原堿的提取率為指標,超高壓提取5min的收率為5.21mg/g藥材,熱回流提取6h的收率為1.06mg/g藥材,煎煮法提取1h的收率為0.76mg/g藥材。即超高壓耗時分別為熱回流的1/72、煎煮法的1/14,而提取率分別為熱回流的5倍、煎煮法的7倍??梢?,超高壓法克服了傳統(tǒng)提取法耗時長、效率低的缺點。
2.5 其他化合物的提取
席軍等利用超高壓提取法從茶葉中提取茶多酚等茶內物質,并與傳統(tǒng)的提取方法相比較,取得了令人滿意的實驗結果[29-31]。Zhu等利用超高壓技術實現(xiàn)對八角蓮中木脂素的提取研究[32],Corrales等利用超高壓技術提取葡萄皮中花色素[33]。
3 超高壓技術存在的問題
超高壓提取技術雖然在提取方面有許多優(yōu)點, 但該技術仍然存在以下幾點不足:一是超高壓條件下雖然不會影響生物小分子的結構,但能夠影響蛋白質[34]、淀粉[35]等生物大分子的立體結構。因此,該技術在提取中不適于提取活性成分主要為蛋白質類的中藥,且當藥材中含有大量淀粉時,壓力過高可引起淀粉的糊化,從而阻礙有效成分溶入提取溶劑中;二是超高壓提取法需要特定的提取設備;三是目前超高壓提取法主要在單味藥提取中應用,在復方制劑的提取中的應用研究還未見報道;四是該提取技術應用研究還處于起步階段,提取工藝參數(shù)之間的協(xié)同效應等問題尚需做進一步的深入研究。
4 展望
綜上所述,超高壓技術與傳統(tǒng)技術相比,可以大大縮短提取時間、降低能耗、減少雜質成分的溶出,提高有效成分的收率,避免因熱效應引起的有效成分結構變化、損失以及生理活性的降低,有很好的應用前景。
參考文獻:
[1] 梁淑如, 趙國建, 吉慧明, 等. 超高壓技術在食品行業(yè)中的最新研究進展[J]. 食品研究與開發(fā),2006, 27(8):1.
[2] Arette M., Matser B. Advantages of high perssure steri lization on quality of food products[J]. Trends in food science and technology, 2004,15(2):79.
[3] 汪茂田, 謝培山, 王忠東, 等. 天然有機化合物提取分離與結構鑒定[M]. 北京:化學工業(yè)出版社, 2004:32-50.
[4] Zhang S. Q., Zhu J. J., Wang C. Z.. Novel high pressure extraction technology[J].International Journal of Pharmaceutics, 2004 (2): 471-474.
[5] 陳瑞戰(zhàn). 超高壓提取人參皂苷工藝及機理研究[D]. 長春, 吉林大學, 2005.
[6] 勵建榮, 韓曉祥. 超高壓提取桑葉蘆丁[J]. 分析化學, 2008, 36(3):365-368.
[7] Liu J. F., Chao J. B., Liu R.,et al. Cloud pointextraction as an advantageouspreconcentration approach for analysis of trace silver nanoparticles in environmental waters[J].Analytical Chemistry, 2009 (15): 6496-6502.
[8] Li H. W., Zhang S. Q., Dou J. P., et al. High hydrostatic pressure extraction offlavonoids from Haw thorn leaves[J].J. Jilin. Univ.: Eng. Technol. Ed., 2006 (3): 438-442.
[9] 駱曉沛, 張守勤, 張格, 等. 不同提取方法對山楂總黃酮含量的影響[J]. 農機化研究, 2008 (9): 145-146.
[10]樊振江, 于旺堂, 縱偉. 超高壓提取柿葉黃酮的研究[J]. 食品工程, 2008 (2): 46-48.
[11]計紅芳, 張令文, 張遠,等. 超高壓提取老鷹茶總黃酮的工藝優(yōu)化[J]. 食品科技, 2011 (6): 255-260.
[12]陳瑞戰(zhàn), 張守勤, 張永宏, 等. 超高壓提取丹參素的研究[J]. 農業(yè)工程學報,2008(24): 291-295.
[13]潘興橋, 李力, 荊旭慧, 等. 超高壓技術提取藍莓總黃酮的工藝研究[J]. 食品工業(yè), 2013 (34): 17-19.
[14]縱偉. 李曉超高壓法提取金銀花中總黃酮的研究[J]. 食品研究與開發(fā), 2009 (30): 65-67
[15]敬思群, 任志艷, 馬澤鑫, 等. 響應面法優(yōu)化超高壓提取金雞菊總黃酮工藝研究[J]. 食品科技, 2013 (38): 214-220.
[16]李力, 譚偉. 超高壓提取葡萄籽總黃酮的研究[J]. 食品科技, 2012 (37): 219-222.
[17]郭文晶, 張守勤, 吳華, 等. 超高壓提取刺五加葉中總黃酮的研究[J]. 化學工程, 2007(35): 66-73.
[18]董海麗, 王謙. 枇杷葉總黃酮超高壓提取及抗氧化活性[J]. 中國農學通報, 2011 (5):489-492.
[19]Chen R. Z., Meng F. L., Zhang S. Q., et al. Effects of ultrahigh pressure extraction conditions on yields and antioxidant activity of ginsenoside from ginseng[J]. Separation and Purification Technology, 2009 (66): 340-346.
[20]Zhang S. Q., Chen R. Z.,Wang C. Z.. Experiment study on ultrahigh pressure extraction of Ginsenosides[J]. Journal of Food Engineering, 2007 (79): 1-5.
[21]Zhang S.Q., Chen R. Z., Wu H., et al. Ginsenoside extraction from Panax quinquefolium L. (American ginseng) root by using ultrahigh pressure[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2006 (41): 57-63.
[22]鄭群雄, 劉煌, 勵建榮. 山茱萸總皂苷超高壓提取工藝研究[J].食品科技,2011 (10): 183-186.
[23]陳瑞戰(zhàn), 張守勤,王長征, 等. 超高壓提取西洋參皂苷的工藝研究[J]. 農業(yè)工程學報, 2005 (1): 150-154.
[24]朱玲英, 唐雨德, 沈紅, 等. 超高壓處理對鮮人參微生物及人參皂苷含量的影響[J]. 中國中藥雜志, 2013 (38): 564-568.
[25]王迪, 耿巖玲, 王曉, 等. 超高壓輔助離子液體提取/HPLC分析牛蒡子中牛蒡苷與牛蒡苷元[J]. 分析測試學報, 2013 (32): 218-222.
[26]Zhu J. J., Zhang S. Q.,Wang C. Z.. Extracted polysaccharide of Ganoderma lucidumspores by broken-extracting method[J]. Transact. Chin. Soc. Agric. Machin., 2004 (3): 184-185.
[27] 謝銀軍,吳香梅,張培旗. 超高壓提取魚腥草多糖最佳工藝研究[J]. 中草藥, 2013(10): 153-155.
[28]寧志剛, 崔彥丹, 劉春梅, 等. 超高壓提取技術應用于烏頭注射液生產[J]. 吉林中醫(yī)藥, 2006 (11): 68-69.
[29]Xi J., Shen D. J. , Li Y. , et al. Comparison of in vitro antioxidant activities and bioactive components of green tea extracts by different extraction methods[J]. International Journal of Pharmaceutics, 2011 (408): 97-101.
[30] Xi J., Shen D. J., Li Y., et al. Microm echanism of ultrahigh pressure extraction of active ingredient s from green tea leaves[J]. Food Control, 2011 (22): 1473-1476.
[31] Xi J., Zhao S., Lu B. B., et al. Separation of major catechins from green tea by ultrahigh pressure extraction[J]. International Journal of Pharmaceutics, 2010 (386): 229-231.
[32]Zhu J. J., Zhang S. Q.,Wang C. Z.. Extracted polysaccharide of Ganoderma lucidum spores by broken-extracting method[J]. Transact. Chin. Soc. Agric. Machin., 2004 (3): 184-185.
[33]Corrales M., García A. F., Butz P., et al. Extraction of anthocyanins from grape skins assisted by high hydrostatic pressure[J]. Journal of Food Engineering, 2009 (90): 415-421.
[34] Lopez .R. High pressure-induced changes in milk proteins and possible application in dairy technology[J]. International dairy journal, 2006(10): 1119.
[35] Heoh D. N., Hemar Y., et al. Effect of high-pressure treatment on various starch-in-water suspensions[J]. Food Hydrocoids, 2008, 22(1):150-155.
(責任編輯:龍 蓉)
Abstract: High Hydrostatic Pressure not only can be applied in food sterilization, conserving and some processing, but also would play a important role in mutation breeding of microbe. Recently, people begin to apply it in Chinese tradition medicine extraction. This article outlines its basic principle, characteristics and application examples.
Keywords: High Hydrostatic Pressure; Active componments of Chinese Tradition Medicine; Extraction