王金鳳　聶建軍

摘 要：運(yùn)用液體菌種栽培技術(shù)，可以縮短白靈菇的制種時(shí)間，提高生產(chǎn)效率，本文淺析白靈菇液體菌種的制備及應(yīng)用，擬對(duì)白靈菇的生產(chǎn)栽培提供借鑒意義。

關(guān)鍵詞：白靈菇；液體菌種；應(yīng)用

中圖分類號(hào)：S646 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160432020

白靈菇分布于歐亞非內(nèi)陸荒漠半荒漠地區(qū)，生長(zhǎng)發(fā)育于春末夏初，是一種優(yōu)良的藥食兩用的大型肉質(zhì)傘菌，有“牤牛肝菌”、“西天白靈芝”等美稱。受栽培周期長(zhǎng)、只能出一潮菇、生物轉(zhuǎn)化率低等因素的制約，目前我國(guó)白靈菇的生產(chǎn)總量不足10萬(wàn)t，相對(duì)于世界消費(fèi)量已達(dá)2000萬(wàn)t且日益增長(zhǎng)的食用菌市場(chǎng)，白靈菇具有很大的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)潛力。

1 白靈菇液體菌種制備

1.1 實(shí)驗(yàn)菌株

采用河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院食藥用真菌研究所提供的母種，保持4℃以下低溫保存。

1.2 培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：葡萄糖2.0%，土豆15.0%，麥麩5.0%，瓊脂2.0%。將土豆切片和麥麩共煮沸20min，使用4層紗布進(jìn)行過(guò)濾，將葡萄糖和瓊脂投入濾液加水溶解，pH自然，0.1MPa，121℃滅菌20min。

液體培養(yǎng)基：豆餅粉1.0%，玉米粉2.0%，葡萄糖2.0%，酵母膏0.2%，KH2P04 0.1%，MgS04·7H2O 0.1%，pH自然，0.1MPa，121℃滅菌20min。

增稠劑：可以分別選用黃原膠、羧甲基纖維素、果膠、瓊脂等4種不會(huì)被菌絲分解的增稠劑調(diào)配液體培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)試驗(yàn)得知，濃度0.1%的黃原膠、濃度0.2%的羧甲基纖維素、濃度0.2%的果膠、濃度0.3%的瓊脂效果最好。

麥粒培養(yǎng)基：99%麥粒，l%石灰，1%石膏，KH2P04 0.1%，MgS04·7H2O0.1%。麥粒要求無(wú)霉變、無(wú)破損、無(wú)干癟，先用l%溫?zé)崾宜?2h，煮沸后小火加熱30min，直至麥粒熟透而不破皮為止，撈出晾曬表皮無(wú)水，按照配方攪拌裝入玻璃瓶（注射液瓶），裝至瓶肩部，塞好瓶塞，保持0.15Mpa，溫度121～126℃，持續(xù)2h消毒殺菌。

栽培袋培養(yǎng)基：棉籽皮87%，麩皮10%，石灰1%，石膏1%，KH2P040.5%，MgS04·7H2O0.5%。采用聚丙烯袋或聚乙烯袋，每袋填裝干料400g，保持壓力0.15Mpa，溫度121℃持續(xù)消毒殺菌2.5h。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備

電子天平；電熱恒溫培養(yǎng)箱；冰箱；P270型普通搖床；超凈工作臺(tái)；立式壓力蒸氣消毒器等。

1.4 培育方法

白靈菇母種制作：把母種培養(yǎng)基切成斜面放置在試管中，將活化后的白靈菇菌種接種到試管中的培養(yǎng)基斜面，在電熱恒溫培養(yǎng)箱中保持25℃，待菌絲長(zhǎng)滿試管，放入冰箱保持4℃保藏。

一、二級(jí)菌種培養(yǎng)：使用250mL三角形搖瓶稱量液體培養(yǎng)液100mL，放入lcm2活化24h的母種菌塊，設(shè)定搖床轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/min，保持恒溫25℃，培養(yǎng)96h。完成一級(jí)菌種培養(yǎng)。使用250mL三角形搖瓶稱量液體培養(yǎng)液200mL，投入一級(jí)菌種10mL，設(shè)定搖床轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/min，保持恒溫25℃，培養(yǎng)72h。完成二級(jí)菌種培養(yǎng)。

麥粒培養(yǎng)基的接種與培養(yǎng)：每個(gè)麥粒瓶接入10mL液體菌種，菌種接完后，在24℃黑暗的條件下培養(yǎng)，觀察萌發(fā)時(shí)間，菌絲覆蓋料面的時(shí)間，滿袋時(shí)間。

栽培袋培養(yǎng)基的接種與培養(yǎng)：每個(gè)栽培袋接入15mL液體菌種，菌種接完后，在24℃陰暗的條件下培養(yǎng)，觀察萌發(fā)時(shí)間，菌絲覆蓋料面的時(shí)間，滿袋時(shí)間。另外可以在每袋中放入40～50粒麥粒菌種作接種使用。

2 液體菌種與固體菌種生產(chǎn)周期比較

2.1 2種栽培模式的不同流程

傳統(tǒng)栽培模式：

母種→原種→麥粒培養(yǎng)基→栽培種→栽培袋→出菇

液體菌種栽培模式：母種→一級(jí)液體菌種→二級(jí)液體菌種→栽培袋→出菇；母種→一級(jí)液體菌種→二級(jí)液體菌種→麥粒培養(yǎng)基菌種→栽培袋→出菇。

2.2 不同栽培模式的生產(chǎn)時(shí)間

傳統(tǒng)栽培模式：由母種生產(chǎn)原種歷時(shí)15d，由原種接種麥粒培養(yǎng)基，菌種在麥粒培養(yǎng)基上生長(zhǎng)12d制得栽培種，由栽培種接到栽培袋菌料中，菌絲滿袋歷時(shí)35d，菌絲后熟歷時(shí)30d進(jìn)入出菇期，全過(guò)程需要92d。

液體菌種栽培模式：由母種到一級(jí)液體菌種歷時(shí)4d，由一級(jí)液體菌種到二級(jí)液體菌種歷時(shí)4d，由二級(jí)液體菌種直接接種栽培袋，直至菌絲滿袋歷時(shí)20d，菌絲后熟歷時(shí)30d進(jìn)入出菇期，全過(guò)程需要58d；由母種到一級(jí)液體菌種歷時(shí)4d，由一級(jí)液體菌種到二級(jí)液體菌種歷時(shí)4d，由二級(jí)液體菌種接種麥粒培養(yǎng)基到菌絲滿瓶歷時(shí)8d，由麥粒菌種接種栽培袋到菌絲滿袋歷時(shí)35d，菌絲后熟歷時(shí)30d進(jìn)入出菇期，全過(guò)程約需80d。

3 結(jié) 論

本文探討了白靈菇液體菌種的2種栽培模式，使用第一種模式，可以充分發(fā)揮白靈菇菌絲萌發(fā)快、分散性好、生長(zhǎng)旺盛的優(yōu)點(diǎn)，把栽培周期縮短37%；按照第二種模式，可以縮短10d以上?？傊后w菌種技術(shù)可以縮短白靈菇的生產(chǎn)周期，幫助種植戶節(jié)約生產(chǎn)成本，獲取更多的利益。

參考文獻(xiàn)

[1] 董玉蘭，李書生.白靈菇高活力液體菌種搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)件的優(yōu)化[J].北方園藝，2014（6）.