肖　昌 譯自 All About Feed， Pathogens ＆amp; prevention（2015），特刊∶22～23夏俊花　校 張 濤 制圖表

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減少豬沙門(mén)氏桿菌感染的組合策略

肖昌 譯自 All About Feed， Pathogens ＆amp; prevention（2015），特刊∶22～23夏俊花校 張 濤 制圖表

長(zhǎng)期以來(lái)，抗生素已成為應(yīng)對(duì)豬沙門(mén)氏桿菌病的首選策略。但是，由于抗生素耐藥性的問(wèn)題，目前許多國(guó)家不再希望采取這一策略。對(duì)抗生素替代物的需求由此應(yīng)運(yùn)而生，包含多種天然組分的產(chǎn)品可能使尋找抗生素替代物的征程邁出了一大步。

鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌是養(yǎng)豬業(yè)面臨的巨大挑戰(zhàn)之一，因?yàn)槠涫桥c豬肉有關(guān)的人沙門(mén)氏桿菌病的病因。因此，當(dāng)力圖減少屠宰生產(chǎn)線上沙門(mén)氏桿菌數(shù)量、并由此消除動(dòng)物胴體在加工過(guò)程中受到污染的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，在生產(chǎn)早期進(jìn)行干預(yù)是符合邏輯的。

但是，在農(nóng)場(chǎng)水平上，由于細(xì)菌會(huì)對(duì)多種藥物產(chǎn)生耐藥性，將抗生素作為預(yù)防和治療的手段已被禁止或限制。尤其是DT104型，它是豬群中一種很常見(jiàn)的沙門(mén)氏菌，已對(duì)多種抗生素產(chǎn)生了耐藥性。因此，飼料添加劑行業(yè)正在開(kāi)發(fā)出一些具有抗菌功能的產(chǎn)品，其中的中鏈甘油酯和精油最具應(yīng)用前景，已在體內(nèi)和體外試驗(yàn)中證實(shí)其具有穩(wěn)定的功效。

1　己酸和香芹酚的體外試驗(yàn)

1.1中鏈脂肪酶

圖1　中鏈脂肪酸和香芹酚對(duì)腸炎沙門(mén)氏桿菌的體外抗菌作用

盡管已經(jīng)知道中鏈脂肪酸具有抗菌作用，然而并非所有的中鏈脂肪酸都有相同的作用，因?yàn)槟承┘?xì)菌對(duì)具有特定碳鏈長(zhǎng)度的脂肪酸敏感。例如，己酸（C6）對(duì)沙門(mén)氏桿菌具有強(qiáng)烈的抗菌作用。Aveve的體外試驗(yàn)結(jié)果表明，在pH 5和pH 7的條件下，己酸的最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）分別低于0.063％和0.125％（圖1）。在pH 7的條件下，辛酸（C8）和癸酸（C10）的MIC和MBC至少為己酸的兩倍，達(dá)0.250％。在該試驗(yàn)中，十二烷酸（C12）并未顯示出任何抑菌或殺菌作用。己酸顯示出更強(qiáng)烈的抗沙門(mén)氏桿菌效果與文獻(xiàn)資料和研究數(shù)據(jù)相一致。

1.2植物提取物

芳香族化合物對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的多種生理學(xué)過(guò)程具有積極的影響，但并不是所有的芳香族化合物都有相同的作用。香芹酚——牛至的主要活性成分，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性細(xì)菌均具有非常有效的抗菌作用。在Aveve的試驗(yàn)中，香芹酚在pH 5和pH 7條件下的MIC和MBC均遠(yuǎn)低于中鏈脂肪酸的MIC和MBC值。由于其具有較高的pKa值（10），因此未解離的香芹酚分子（有活性的抗菌化合物形式）將大量存在于動(dòng)物的胃腸道中。這些分子具有兩種作用：第一是改變細(xì)菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，使其具有較高的通透性；第二是改變細(xì)胞膜內(nèi)外質(zhì)子梯度。此外，體外試驗(yàn)也表明，pH對(duì)抗菌活性有更明顯的影響（圖1）。在pH 5的條件下，香芹酚的MIC和MBC均小于0.000 63％；而在pH 7的條件下，香芹酚的MIC為0.01％，MBC大于0.01％。其原因是在pH 7的條件下，沙門(mén)氏桿菌的活性較強(qiáng)，這一pH正是該沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)的最適pH。

2　體內(nèi)試驗(yàn)

以下所述的體內(nèi)試驗(yàn)是以添加劑的方式分兩步消除沙門(mén)氏桿菌陽(yáng)性畜群項(xiàng)目的一部分。研究人員首先考察了是否需要在會(huì)影響鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌排菌的日糧中添加商用產(chǎn)品——AveMix Plus以及其添加的水平，同時(shí)還在實(shí)驗(yàn)性感染的仔豬（帶菌豬模型）中評(píng)估了沙門(mén)氏桿菌的分布情況。所用的產(chǎn)品構(gòu)成策略是將中鏈甘油酯和具有特定碳鏈長(zhǎng)度的脂肪酸（己酸-C6和辛酸-C8）以及精選的牛至（Oregano）、百里香（Thyme）、辣椒（Chili Pepper）等芳香族化合物組合在一起，配制成復(fù)方飼料添加劑。正如上面所顯示，在其他作用上，兩種類(lèi)型的組分均具有很好的抗沙門(mén)氏桿菌作用，但復(fù)方飼料添加劑產(chǎn)生的效果大于其各組分各自效果的總和。關(guān)于其直接的抗菌活性，兩種類(lèi)型的活性組分聯(lián)合起來(lái)，通過(guò)破壞致病菌的細(xì)胞膜完整性，將使活性成分更容易進(jìn)入細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)中。

不同的相互作用部位，疏水性、分子大小和電荷上的差異，均可以解釋此額外的抗菌作用。然而，體內(nèi)模型更為復(fù)雜。重要的是所研究的飼料添加劑要在胃腸道中正確部位發(fā)揮作用。此策略是為了讓飼料添加劑在歷經(jīng)每一道生產(chǎn)工藝后仍保持活性同時(shí)在小腸中達(dá)到最大活性而專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)。因此，一方面，中鏈脂肪酸是以其酯的形式提供，以確保其能緩慢釋放；另一方面，該植物源性混合物制成以植物油基質(zhì)為包膜的產(chǎn)品方式使用。

3　試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)根據(jù)帶菌模型（Seeder Model）設(shè)計(jì)而成：在第6天，試驗(yàn)豬用鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌MB2486株感染，成為帶菌豬（Seeder Pigs，SPs）；然后，在第8天將這些帶菌仔豬（SPs）和非感染仔豬飼養(yǎng)在一起，接受攻毒（受攻毒豬：Challenged Pigs，CPs）。非感染（陰性對(duì)照組，NC）和感染（陽(yáng)性對(duì)照組，PC）的仔豬（SPs和CPs）飼喂沒(méi)有添加有機(jī)酸、Cu和Zn的基礎(chǔ)日糧。另外，該基礎(chǔ)日糧添加上述復(fù)方飼料添加劑，僅喂給一組受到感染的仔豬。正如預(yù)期的那樣，在仔豬階段結(jié)束時(shí)（第35天），由于感染了鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌，這些受感染仔豬的生產(chǎn)性能低于未感染仔豬：總增重減少了2.2kg。

飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）也出現(xiàn)了相似的不良影響，從1.50上升至1.64。受感染仔豬日糧中添加復(fù)方飼料添加劑后，其生產(chǎn)性能受到了積極的影響，提高到非感染仔豬的水平：與飼料中沒(méi)有添加復(fù)方飼料添加劑的感染仔豬相比，總增重增加了24％，F(xiàn)CR降低了11％。在試驗(yàn)期結(jié)束時(shí)，對(duì)安樂(lè)死仔豬腸道消化糜的菌群組成進(jìn)行的分析表明，與陽(yáng)性對(duì)照組相比，盲腸和回腸菌群中的鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌MB2486株的平均含量減少（圖2）。與受感染仔豬（SPs）相比，非感染仔豬（CPs）腸道鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌MB2486株的平均數(shù)減少更多。而且，在回盲淋巴結(jié)和扁桃體樣本的鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌MB2486株陽(yáng)性百分比上發(fā)現(xiàn)了某些令人感興趣的減少。此外，此種類(lèi)型的減少現(xiàn)象在CPs中明顯可見(jiàn)。

第二步，該復(fù)方飼料添加劑在血清陽(yáng)性豬場(chǎng)的實(shí)際生產(chǎn)條件下進(jìn)行了測(cè)試。肥育豬的沙門(mén)氏桿菌污染水平顯著降低。

因此，可以認(rèn)為，AveMix Plus是減少養(yǎng)豬生產(chǎn)過(guò)程中沙門(mén)氏桿菌感染的一個(gè)有價(jià)值的工具。它可以間接地幫助屠宰場(chǎng)降低可導(dǎo)致人沙門(mén)氏菌病的胴體和肉品發(fā)生沙門(mén)氏菌污染的風(fēng)險(xiǎn)。

原題名：A combined strategy to reduce Salmonella in pigs（英文）

原作者：Leni Kuterna

S816

C

1001-0769（2016）08-0009-03