張素真，趙旭輝，孫春秀，李書君

（邢臺(tái)市人民醫(yī)院，1.檢驗(yàn)科，2.神經(jīng)外科，河北　邢臺(tái)　054031）

ProGRP與NSE及其聯(lián)合應(yīng)用在小細(xì)胞肺癌診斷中的意義

張素真1，趙旭輝2，孫春秀1，李書君1

（邢臺(tái)市人民醫(yī)院，1.檢驗(yàn)科，2.神經(jīng)外科，河北邢臺(tái)054031）

目的 探討proGRP與NSE及其聯(lián)合應(yīng)用在小細(xì)胞肺癌診斷中的意義。方法 回顧性分析2014年5月至2015年1月在我院經(jīng)病理明確診斷的小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌組）、非小細(xì)胞肺癌（非小細(xì)胞肺癌組）、肺部良性疾?。ǚ尾苛夹约膊〗M）患者，及健康體檢者的proGRP與NSE水平。比較各組不同性別和不同年齡者proGRP與NSE的陽性率，并對其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；繪制proGRP和NSE及其聯(lián)合檢測在小細(xì)胞肺癌診斷中的ROC曲線，并計(jì)算曲線下面積。結(jié)果 各組內(nèi)proGRP與NSE陽性率的性別和年齡的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；小細(xì)胞肺癌組proGRP陽性率高于其余各組（P＜0.01）；小細(xì)胞肺癌組和非小細(xì)胞肺癌組NSE陽性率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；小細(xì)胞肺癌無論是局限期還是廣泛期proGRP與NSE水平均高于其余各組（P＜0.01）。結(jié)論 proGRP和NSE均可用于小細(xì)胞肺癌的診斷，且proGRP要優(yōu)于NSE。兩者水平的高低還可用于小細(xì)胞肺癌的臨床分期。proGRP與NSE聯(lián)合檢測可以提高小細(xì)胞肺癌的診斷效能。

小細(xì)胞肺癌； 非小細(xì)胞肺癌； 胃泌素釋放肽前體； 神經(jīng)元特異性烯醇化酶； 電化學(xué)發(fā)光

DOI：10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.04.015

收稿日期：2016-01-15；修回日期：2016-02-22

通訊作者：張素真。E-mail：susensun@sohu.com

隨著吸煙人群的增多和城市工業(yè)化造成的空氣與環(huán)境指標(biāo)的日趨下降，使肺癌的發(fā)病率與死亡率逐年上升，位于全球惡性腫瘤發(fā)病率與死亡率之首［1］。肺癌分為小細(xì)胞肺癌（SCLC）和非小細(xì)胞肺癌（NSCLC），SCLC又可分為：單純性小細(xì)胞肺癌、混合性癌（即小細(xì)胞癌與鱗或腺癌的混合型）［2］。雖然SCLC僅占肺癌的15%～20%，但SCLS卻是一種惡性程度更高、病因更為復(fù)雜的腫瘤，具有快速和侵襲性生長的特點(diǎn)，易發(fā)生廣泛性壞死和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。電子計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）可以篩查發(fā)現(xiàn)早期NSCLC，但是對篩查SCLC并不理想。因?yàn)橛跋駥W(xué)手段很難發(fā)現(xiàn)小的、散在腫瘤病灶上的SCLC?；顧z雖然可以對SCLC和NSCLC進(jìn)行確診，但并非所有的患者都可以進(jìn)行活檢，即使可以進(jìn)行活檢，很多病例也取不到最終的惡性組織［3］。腫瘤標(biāo)志物檢測作為組織病理學(xué)和影像學(xué)檢查的有力補(bǔ)充，能為肺癌患者的診斷與鑒別診斷提供重要的參考價(jià)值［4］。美國臨床生物化學(xué)學(xué)會(huì)（NACB）在《肺癌標(biāo)志物臨床指南》中推薦胃泌素釋放肽前體（proGRP）用于SCLC鑒別診斷、SCLC術(shù)后監(jiān)測、晚期SCLC化療的監(jiān)測和早期復(fù)發(fā)的監(jiān)測?！吨袊l(fā)性肺癌診療規(guī)范（2011年版）》在影像學(xué)檢查和組織病理學(xué)檢查的基礎(chǔ)上，增加了肺癌相關(guān)標(biāo)志物的檢測。本文通過對2014年5月至2015年1月在邢臺(tái)市人民醫(yī)院住院治療的肺癌患者血清proGRP與NSE的檢測，探討proGRP與NSE及其聯(lián)合應(yīng)用在小細(xì)胞肺癌診斷中的意義。

材料和方法

1 材料

1.1標(biāo)本來源 回顧性分析2014年5月至2015年1月期間在邢臺(tái)市人民醫(yī)院住院的具有明確病理診斷的肺癌患者252例，其中小細(xì)胞肺癌48例（男性30例，女性18例；年齡分布為32～75歲，其中32～50歲13例，51～75歲35例），非小細(xì)胞肺癌204例（男性129例，女性75例；年齡分布為31～72歲，其中31～50歲69例，51～72歲135例）；患有肺部良性疾病的患者65例（男性33例，女性32例；年齡分布為30～68歲，其中30～50歲33例，51～68 歲32例），其中包括肺炎患者55例（男性31例，女性24例；年齡分布為32～65歲，其中32～50歲29例，51～65歲26例），其他肺病患者10例（其中男性2例，女性8例；年齡分布為30～68歲，其中30～50歲4例，51～65歲6例）；健康體檢人群138例（男性86例，女性52例；年齡分布為30～71歲，其中30～50歲88例，51～65歲50例）為正常對照組。

1.2樣本處理 空腹采集促凝血2.5 mL，3500r/min離心10 min，備用。

2 方法

2.1病例資料的臨床分期 依據(jù)美國退伍軍人醫(yī)院肺癌研究小組制定的SCLC分期系統(tǒng)對小細(xì)胞肺癌進(jìn)行分期，其中局限期病例17例，廣泛期病例31例；依據(jù)TNM分期對非小細(xì)胞肺癌進(jìn)行分期，其中原位期20例，早期29例，中期102例，肺癌中晚期42例，肺癌晚期11例。

2.2proGRP與NSE的測定 羅氏Cobas e601電化學(xué)發(fā)光分析儀及其公司提供的配套proGRP與NSE測定試劑盒、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。由專業(yè)人員在儀器狀態(tài)穩(wěn)定條件下嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室儀器與項(xiàng)目操作規(guī)程進(jìn)行操作，定標(biāo)通過后，將proGRP與NSE高、低兩個(gè)水平的質(zhì)控品與當(dāng)天標(biāo)本進(jìn)行上機(jī)檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后首先分析質(zhì)控是否有效，如質(zhì)控有效則檢測結(jié)果可用，如質(zhì)控?zé)o效則查找原因，排除無效的原因后對當(dāng)天標(biāo)本重新進(jìn)行檢測。其中proGRP的cut off值69.2pg/mL，NSE的cut off值為16.3ng/mL。

2.3繪制ROC曲線 通過繪制proGRP和NSE及其聯(lián)合檢測在小細(xì)胞肺癌診斷中的ROC （receiver operating characteristic curve）曲線，并計(jì)算曲線下面積（AUC：area under curve），以判斷proGRP與NSE及其聯(lián)合檢測在小細(xì)胞肺癌診斷中價(jià)值。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用spss 17.0軟件分別對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)各實(shí)驗(yàn)組不同性別和不同年齡人群proGRP與NSE陽性率，率的比較用卡方檢驗(yàn)（以P＜0.01表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。統(tǒng)計(jì)各實(shí)驗(yàn)組proGRP與NSE的中位數(shù)和四分位數(shù)。先對多組資料做 Kruskal-Walls檢驗(yàn)（以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義），再做兩兩組之間的Mann-Whitney U檢驗(yàn)（以P＜0.01表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。

結(jié) 果

1 各實(shí)驗(yàn)組不同性別和不同年齡人群proGRP 與NSE的陽性率

各組內(nèi)proGRP與NSE陽性率的性別和年齡的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；肺良性疾病組和正常對照組間proGRP與NSE陽性率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；非小細(xì)胞肺癌組和肺良性疾病組、正常對照組間proGRP陽性率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；非小細(xì)胞肺癌組和肺良性疾病組、正常對照組間NSE陽性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；小細(xì)胞肺癌組與其他各組間proGRP陽性率的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；小細(xì)胞肺癌組和正常對照組、肺良性疾病組間NSE陽性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；小細(xì)胞肺癌組和非小細(xì)胞肺癌組NSE陽性率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）。

表1　各實(shí)驗(yàn)組不同性別人群proGRP與　NSE的陽性率

表2　各實(shí)驗(yàn)組不同年齡人群　proGRP與　NSE的陽性率

2 各實(shí)驗(yàn)組proGRP與NSE的血清水平

肺良性疾病組與正常對照組間proGRP和NSE水平的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；非小細(xì)胞肺癌組與正常對照組、肺良性疾病組間proGRP水平的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01），非小細(xì)胞肺癌組與正常對照組、肺良性疾病組間NSE水平的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；小細(xì)胞肺癌組無論是局限期還是廣泛期和正常對照組、肺良性疾病組、非小細(xì)胞肺癌組間proGRP與NSE水平的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；小細(xì)胞肺癌組局限期和廣泛期proGRP與NSE水平的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表3　各實(shí)驗(yàn)組血清　proGRP與　NSE水平的中位數(shù)和四分位數(shù)

3 繪制proGRP和NSE及其聯(lián)合檢測在小細(xì)胞肺癌診斷中的ROC曲線

在小細(xì)胞肺癌的診斷中proGRP和NSE聯(lián)合檢測曲線下的面積0.980（P＜0.05）＞proGRP曲線下的面積0.953（P＜0.05）＞NSE曲線下的面積0.864 （P＜0.05）。

討 論

本研究檢測了正常對照組、肺良性疾病組、非小細(xì)胞肺癌組和小細(xì)胞肺癌組（包括局限期和廣泛期）人群血清proGRP和NSE的水平，分性別和年齡比較了這兩個(gè)指標(biāo)在不同組別的陽性率，同時(shí)比較了proGRP和NSE在各組間的水平差異，并且繪制proGRP和NSE及其聯(lián)合檢測的ROC曲線并得到了曲線下面積，以便探討proGRP和NSE及其聯(lián)合檢測在小細(xì)胞肺癌診斷中的意義。

目前，臨床常用的肺癌腫瘤標(biāo)志物包括：癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19的可溶性片段（CYFRA21-1）、鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原（SCC）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）和胃泌素釋放肽前體（proGRP）。其中，CEA主要應(yīng)用于腺癌和大細(xì)胞癌，CYERA21-1主要用于腺癌和鱗癌，SCC主要用于鱗癌，而 NSE和proGRP則是用于SCLC的特異性標(biāo)志物［5］。

烯醇化酶是一種哺乳動(dòng)物組織中普遍存在的糖酵解酶，NSE為其中同工酶之一。神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和神經(jīng)源性腫瘤中含有大量NSE［6］。小細(xì)胞肺癌是一種起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的腫瘤，因此NSE是其重要標(biāo)志物。作為SCLC重要的腫瘤標(biāo)志物之一，NSE存在著諸多局限性：對早期局限期SCLC敏感性低；在其他惡性腫瘤患者中，也可出現(xiàn)NSE值異常升高；不能使用血漿進(jìn)行檢測，因?yàn)榧t細(xì)胞和血小板含有NSE，溶血樣本容易出現(xiàn)假陽性等。

胃泌素釋放肽（GRP）屬于胃腸激素，主要刺激胃的G細(xì)胞分泌胃泌素、參與平滑肌細(xì)胞的收縮、促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用［4］。SCLC患者往往存在高水平GRP的表達(dá)和分泌，但GRP半衰期只有2 min，穩(wěn)定性差，難以檢測。作為GRP的前體proGRP的半衰期更長、更穩(wěn)定，可通過血清或血漿樣本檢測，反映GRP的水平。proGRP在正常上皮中不表達(dá)或表達(dá)非常低，在良性肺疾病和上皮來源的腫瘤中有低水平的表達(dá)［7］。研究表明，如設(shè)定proGRP的判斷界值為30 pg/mL，在對各種實(shí)體瘤，如肺癌、乳腺癌、宮頸癌、結(jié)直腸癌、肝癌、胰腺癌、腎細(xì)胞癌和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤內(nèi)的proGRP進(jìn)行檢測，proGRP在 SCLC中顯著升高至66%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于在其他腫瘤內(nèi)的表達(dá)，證明其對SCLC有較好的特異性［8-9］。

本研究顯示各組內(nèi)proGRP與NSE陽性率的性別和年齡的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）；非小細(xì)胞肺癌組和肺良性疾病組、正常對照組間NSE陽性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），非小細(xì)胞肺癌組和小細(xì)胞肺癌組NSE的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01），說明雖然NSE陽性率的高低不能用于小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌的鑒別診斷，但是可以用于肺良性疾病和惡性疾病的鑒別診斷；小細(xì)胞肺癌組與其他各組間proGRP陽性率的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），證實(shí)proGRP陽性率的高低不僅可以用于肺良性與惡性疾病的鑒別診斷還可以用于小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌的鑒別診斷。

本研究顯示小細(xì)胞肺癌組無論是局限期還是廣泛期和正常對照組、非良性疾病組、非小細(xì)胞肺癌組間比較，proGRP與NSE水平的差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明血清proGRP和NSE水平高低在小細(xì)胞肺癌的診斷中具有一定的意義，這與以往報(bào)道一致［10-11］。同時(shí)說明proGRP和NSE水平高低不僅可用于肺良性疾病組和和肺惡性疾病的鑒別診斷，還可用于小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌的鑒別診斷，這與趙兵等［12］的報(bào)道一致。同時(shí)研究結(jié)果顯示非小細(xì)胞肺癌組與正常對照組、肺良性疾病組間proGRP水平的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01），非小細(xì)胞肺癌組和正常對照組、肺良性疾病組間NSE水平的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），可見血清NSE水平除了在小細(xì)胞肺癌時(shí)增高外，在非小細(xì)胞肺癌時(shí)也會(huì)不同程度的增高，而血清proGRP水平在非小細(xì)胞肺癌中不會(huì)增高，可見在小細(xì)胞肺癌的診斷中proGRP比NSE更特異。另外小細(xì)胞肺癌組局限期和廣泛期proGRP與NSE水平的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），則說明血清proGRP與NSE水平不僅可以用于小細(xì)胞肺癌的診斷還可用于小細(xì)胞肺癌的臨床分期。

本研究顯示在小細(xì)胞肺癌的診斷中proGRP曲線下的面積要大于NSE曲線下的面積，從而顯示在小細(xì)胞肺癌的診斷中proGRP要優(yōu)于NSE。同時(shí)研究結(jié)果表明proGRP與NSE聯(lián)合檢測曲線下的面積要大于proGRP和NSE單獨(dú)檢測，可見proGRP與NSE聯(lián)合檢測可以提高小細(xì)胞肺癌的診斷效能。

由此可見，血清NSE陽性不一定是小細(xì)胞肺癌，但是高水平的血清NSE卻和小細(xì)胞肺癌相關(guān)。而proGRP不論是人群陽性率還是血清水平均和小細(xì)胞肺癌相關(guān)?？梢妰烧呔捎糜谛〖?xì)胞肺癌的診斷，但是proGRP要優(yōu)于NSE。同時(shí)兩者水平的高低還可用于小細(xì)胞肺癌的臨床分期。proGRP與NSE聯(lián)合檢測可以提高小細(xì)胞肺癌的診斷效能。

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（潘子昂編輯）

Significance of ProGRP and NSE and Their Combined Application in Diagnosis of Small Cell Lung Cancer

ZHANG Su-zhen，ZHAO Xu-hui，SUN Chun-xiu，LI Shu-jun
（Laboratory Department of Xingtai People’s Hospital，Xingtai 054031，China）

Objective To explore the signification of proGRP and NSE and their combined application in the diagnosis of small cell lung cancer.Methods A retrospective study on the patients with small cell lung cancer （Small Cell Lung Cancer Group，SCLC），non small cell lung cancer（Non Small Cell Lung Cancer Group，NSCLC），benign lung diseases（Benign Lung Diseases Group）by clear diagnosis from 2014 May to 2015 January in Xingtai People's Hospital，and healthy people（Normal Control Group）was carried out.The proGRP and NSE in all groups were detected.The positive rates of proGRP and NSE of different genders and ages in all groups were compared and analyzed statistically.The ROC curves of proGRP and NSE and their combined application tests was drawn，and the areas under the ROC curve were calculated.Results The positive rate of proGRP and NSE in all groups had no gender and age differences（P＜0.01）；The positive rate of proGRP in SCLC Group was higher than the other groups（P＜0.01）.The positive rate of NSE between SCLC Group and NSCLC Group had no difference statistically（P＜0.01）；The levels of proGRP and NSE in SCLC Group both limited and extensive period were higher than those of other groups（P＜0.01）.Conclusion Both the proGRP and the NSE can be used for small cell lung cancer diagnosis，but proGRP is better than NSE.Both of them can be used in the clinical staging of small cell lung cancer.Combined application of proGRP and NSE can improve the diagnostic efficacy of small cell lung cancer.

Small cell lungcancer； Nonsmall cell lungcancer； proGRP； NSE；Electrochemical luminescence