■劉大欽　覃成毅　丁晨晨　陳　將　梁夢迪　陳　濤　王學(xué)梅

（海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，海南?？?70228）

黑籽雀稗與香蕉秸稈混合比例對混合青貯飼料品質(zhì)的影響

■劉大欽覃成毅丁晨晨陳將梁夢迪陳濤王學(xué)梅

（海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，海南?？?70228）

試驗以開發(fā)香蕉秸稈飼料資源為目的，探討了香蕉秸稈與黑籽雀稗按一定比例混合青貯的效果，研究了混合青貯對青貯原料的發(fā)酵品質(zhì)和其營養(yǎng)成分的影響。將收割后的黑籽雀稗和香蕉秸稈進行一定程度風(fēng)干萎蔫，切碎成1～3 cm小段，分別按照100%黑籽雀稗、100%香蕉秸稈、75%香蕉秸稈+25%黑籽雀稗、50%黑籽雀稗+50%香蕉秸稈的比例設(shè)置4個處理，每個處理設(shè)3個重復(fù)，經(jīng)過35 d青貯發(fā)酵處理后，對青貯飼料進行感官評定及試驗室檢測。結(jié)果表明：黑籽雀稗單獨青貯感官評定最優(yōu)，混合青貯處理稍次之，香蕉秸稈單青貯處理較低，但各處理青貯飼料感官鑒定均為優(yōu)級。隨著黑籽雀稗比例增加混合青貯飼料的pH值升高但乳酸菌菌落數(shù)降低（P＜0.05），各組乳酸和乙酸含量均低于香蕉秸稈單獨處理（P＜0.05）。各處理組均檢測出丁酸，但含量極低，對青貯品質(zhì)影響不大；香蕉秸稈單獨青貯初水分含量顯著高于黑籽雀稗單獨青貯（P＜0.05），隨著黑籽雀稗比例增加初水含量降低；各處理碳水化合物含量差異顯著（P＜0.05），而干物質(zhì)、粗纖維、NDF、ADF等含量差異不顯著（P＞0.05）。綜合感官評定與實驗室檢測結(jié)果可知，黑籽雀稗與香蕉秸稈混合可以降低香蕉秸稈水分含量，減少營養(yǎng)成分流失，有效提高香蕉秸稈青貯品質(zhì)，黑籽雀稗混合青貯比例達到50%時青貯效果最好。香蕉秸稈單獨青貯時最好經(jīng)過萎蔫失水或與水分含量低的原料混合青貯，以提高青貯品質(zhì)。

香蕉秸桿；黑籽雀稗；混合青貯；營養(yǎng)價值

香蕉（Musa paradisiacea var sapientum），芭蕉科植物，是多年生常綠大型草本單子葉植物，分布于熱帶、亞熱帶地區(qū)，在我國栽培面積較大，是僅次于蘋果、柑桔、梨的第四大宗水果［1］。據(jù)報道，收香蕉后每畝香蕉莖葉產(chǎn)量達8～11 t，我國每年產(chǎn)香蕉莖葉4 400萬噸以上［2］。香蕉莖葉具有產(chǎn)量高、生物量大、營養(yǎng)豐富等特點，適合作為飼料原料。而黑籽雀稗（Paspalum atratum）屬于多年生禾本科雀稗屬，是重要的栽培牧草，喜熱帶潮濕氣候，適應(yīng)性強，耐酸瘦土壤，耐澇并一定程度耐旱，適口性好［3］，是畜禽良好的青飼料來源，其碳水化合物含量高，易于青貯加工，廣泛分布于亞熱帶及熱帶地區(qū)，極有推廣價值［4］。

本試驗對香蕉秸稈和黑籽雀稗按照比例進行混合青貯，通過對青貯飼料進行感官、發(fā)酵品質(zhì)及常規(guī)養(yǎng)分測定的研究，旨在為香蕉秸稈青貯加工提供技術(shù)支持，為開發(fā)秸稈飼料資源提供可行性方向。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗原料

香蕉秸稈和黑籽雀稗均由海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院校內(nèi)實驗基地提供。

1.1.2培養(yǎng)基配置

乳酸菌培養(yǎng)基（MRS培養(yǎng)基）：取牛肉蛋白粉10 g、魚肉汁10 g、酵母浸膏5 g、葡萄糖20 g、醋酸鈉5 g、檸檬酸二銨2 g、吐溫80 0.1 g、硫酸鎂0.58 g、硫酸錳0.28 g、蒸溜水1 000 ml，用高壓鍋在121℃滅菌15 min，調(diào)節(jié)pH值至6.2～6.4。

1.1.3儀器與設(shè)備

LC-20AD型高效液相色譜（島津公司，日本）、Venusil XBP色譜柱、電熱式恒溫烘箱、粉碎機、電爐、電子天平、消煮爐、凱氏定氮儀、高溫電爐、消煮管等。

1.1.4藥品與試劑

乙酸、丁酸、丙酸、丁二酸標樣均為美國Sigma公司生產(chǎn)，試驗用甲醇、牛肉蛋白粉、魚肉汁、酵母浸膏、葡萄糖、醋酸鈉、檸檬酸二銨、吐溫80、硫酸鎂、硫酸錳等試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2試驗方法

1.2.1試驗設(shè)計

試驗采用完全隨機區(qū)組設(shè)計，試驗分為4個處理，分別為100%香蕉秸稈（Ⅰ組）、100%黑籽雀稗（Ⅱ組）、75%香蕉秸稈+25%黑籽雀稗（Ⅲ組）及50%香蕉秸稈+50%黑籽雀稗（Ⅳ組）進行青貯，每個處理有3個重復(fù)。青貯5周后采樣進行品質(zhì)評定。

1.2.2青貯飼料的制作與樣品采集

試驗采用常規(guī)青貯法進行青貯，青貯期為5周。將剛收割的香蕉秸稈和黑籽雀稗經(jīng)過一定時間風(fēng)干萎蔫后，切成1.5～3 cm的小段，按照比例混勻后裝入青貯塑料瓶內(nèi)，壓實，封嚴，青貯5周后取樣，進行青貯品質(zhì)評定，取樣時首先除去上層發(fā)霉的青貯料，然后將青貯飼料混合均勻。

1.2.3青貯飼料感官評定

青貯飼料感官評定采用德國農(nóng)業(yè)協(xié)會（DLG）感官青貯評分標準及等級進行評定。根據(jù)氣味、質(zhì)地、色澤3項進行評分，氣味評定4個等級，為0～14分；色澤評分3個等級，為0～2分；質(zhì)地評分4個等級，為0～4分，然后綜合3項得分，評定為優(yōu)（20～16分）、可（15～10分）、中（9～5分）、下（4～0分）4個等級。具體評定標準和等級見表1。

表1　德國DLG感官青貯評分標準及等級評定

1.2.4乳酸菌培養(yǎng)與計數(shù)

無菌條件下在3個平行樣中各稱取10 g青貯飼料樣品，分別置于裝有90 ml滅菌生理鹽水的錐形瓶中震蕩5 min后，浸泡2 h做成10-1的均勻稀釋液。然后用1 ml滅菌移液槍吸取10-1稀釋液1 ml，注入含有9 ml滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖試管混勻，做成10-2的稀釋液，依次稀釋成為10-4、10-5和10-6。然后分別吸取1 000 μl稀釋液，滴在MRS培養(yǎng)基平板上，用涂布棒涂勻，每個稀釋倍數(shù)3個重復(fù)，于37℃厭氧培養(yǎng)72 h后選取菌落數(shù)目在30～300的平板進行菌落計數(shù)。同時用稀釋液作空白對照，以區(qū)別操作過程中是否有污染。

1.2.5pH值的測定

青貯瓶開封后稱取混合均勻青貯飼料35 g青貯飼料放入錐形瓶中，加入70 ml去離子水，用保鮮膜密封后，放入冰箱中在4℃下浸提24 h，然后取出錐形瓶用雙層紗布和濾紙進行榨取和過濾，取濾液用酸度計測定pH值。

1.2.6有機酸測定

①樣品處理

準確稱取剪碎的新鮮青貯飼料樣品25 g于具塞三角瓶中，加入225 ml超純水，于4℃冰箱中浸提24 h，用快速定量濾紙過濾，于EP管內(nèi)-20℃保存?zhèn)錅y。上樣前用直徑0.45 μm合成纖維素酯膜過濾。

②有機酸檢測

采用LC-20AD型高效液相色譜進行，色譜條件為Venusil XBP C18（5 μm，100A，4.6×250 nm），流速1.0 ml/min，檢測波長217 nm，柱溫25℃，進樣量10 μl；流動相：0.2 mol/l磷酸鹽緩沖液（pH值2.8）：甲醇= 60：40。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)采用SAS軟件GLM進行方差分析，采用鄧肯氏進行多重比較，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。試驗結(jié)果以“平均值±標準差”表示。

2　結(jié)果

2.1感官評定

香蕉秸稈和黑籽雀稗不同比例混合青貯對感官評定結(jié)果的影響見表2。由表2可知，試驗中所有處理的青貯飼料感官評定結(jié)果均為優(yōu)等，但100%黑籽雀稗在感官評定為最優(yōu)，評定分值達到20分，即第Ⅲ和第Ⅳ組與混合青貯兩個處理隨著黑籽雀稗比例增加品質(zhì)提高，而香蕉秸稈單獨青貯感官評定分值最低，為18分。因此可知，黑籽雀稗與香蕉秸稈混合青貯可有效地提升香蕉秸稈青貯感官品質(zhì)，并且隨著黑籽雀稗比例增加青貯飼料感官品質(zhì)提高。

表2 青貯飼料感官評定

2.2pH值、乳酸菌與有機酸

香蕉秸稈和黑籽雀稗不同比例混合青貯對青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響見表3。青貯飼料pH值隨著香蕉秸稈在青貯料中成分增加而降低，黑籽雀稗單獨青貯pH值最高，達到4.95，極顯著高于香蕉秸稈和黑籽雀稗的混合處理組，即第Ⅲ和第Ⅳ組（P＜0.01），香蕉秸稈單獨青貯的pH值最低，為3.49，極顯著低于其他處理組（P＜0.01），第Ⅲ組與第Ⅳ組間差異不顯著（P＞0.05）。香蕉秸稈單獨青貯時乳酸菌菌落數(shù)最少，極顯著低于其它處理（P＜0.01），隨著香蕉秸稈比例的增加乳酸菌菌落數(shù)遞減。黑籽雀稗單獨青貯乳酸含量最低，并與其他處理組相比差異極顯著（P＜0.01），而其他處理組間差異不顯著（P＞0.05）。青貯飼料乙酸含量在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組處理間差異不顯著（P＞0.05），50%香蕉秸稈+50%黑籽雀稗混合處理組極顯著高于其它處理組（P＜0.01）。黑籽雀稗單青貯處理組、香蕉秸稈組單青貯處理組與50%香蕉秸稈+50%黑籽雀稗混貯組間丁酸含量差異不顯著（P＞0.05），但75%香蕉秸稈與25%黑籽雀稗混貯組丁酸含量顯著高于黑籽雀稗獨貯組和香蕉秸稈獨貯組（P＜0.05）。

表3　青貯飼料pH值、乳酸菌和有機酸（鮮樣基礎(chǔ)）

2.3營養(yǎng)物質(zhì)

2.3.1香蕉秸稈和黑籽雀稗原料營養(yǎng)成分

表4　青貯原料營養(yǎng)成分含量（風(fēng)干基礎(chǔ)）（%）

由表4可知，香蕉秸稈原料初水分含量較高，達到87.4%，黑籽雀稗原料初水分含量為68.3%，兩者混合青貯可均和水含量，有效提升原料可青貯性。黑籽雀稗原料粗蛋白質(zhì)含量比香蕉秸稈高54.47%。香蕉秸稈和黑籽雀稗原料兩者的干物質(zhì)、粗纖維、中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）含量相差不大。黑籽雀稗可溶性碳水化合物含量高達8.0%，高于香蕉秸稈，為青貯過程乳酸菌發(fā)酵提供基質(zhì)。

2.3.2青貯飼料常規(guī)養(yǎng)分

由表5可知，青貯飼料初水分含量在各處理間隨著黑籽雀稗在青貯料中成分增加而降低，青貯黑籽雀稗處理組初水分含量顯著低于其它各處理（0.01＜P＜0.05）。初水分含量的降低可降低營養(yǎng)成分的流失，提升了青貯品質(zhì)。青貯飼料干物質(zhì)在各處理間差異不顯著（P＞0.05）。青貯黑籽雀稗處理組粗蛋白質(zhì)含量顯著高于其它各處理組（P＜0.01），混合青貯處理組間差異不顯著（P＞0.05），即Ⅲ、Ⅳ處理組。青貯飼料粗纖維水平在各處理組間差異不顯著（P＞0.05），但也隨著香蕉秸稈在青貯料中成分增加而略微增加。中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）含量在各處理組間差異不顯著（P＞0.05）。各處理間可溶性碳水化合物含量差異顯著（0.01＜P＜0.05），Ⅰ組、Ⅱ組與Ⅲ組、Ⅳ組相比差異極顯著（P＜0.01），Ⅲ組和Ⅳ組間差異顯著（P＜0.05）。

表5　青貯飼料營養(yǎng)成分含量（風(fēng)干基礎(chǔ)）（%）

3　討論

3.1青貯飼料感官評定

青貯飼料品質(zhì)的好壞對家畜的采食量和生產(chǎn)性能有著重要的影響。感官鑒定法是評定青貯飼料品質(zhì)的重要手段，具有簡便、迅速、直觀［5］的優(yōu)點。依據(jù)德國DLG感官青貯評分標準進行等級評定，結(jié)果表明，所有處理組青貯飼料的氣味、顏色、質(zhì)地和結(jié)構(gòu)等方面品質(zhì)都在優(yōu)等評定范圍內(nèi)。其中，黑籽雀稗單青貯處理評分最高，不同比例混合青貯處理稍次，香蕉秸稈評分最低。不同比例混合青貯處理中，隨著黑籽雀稗比例增加，感官評定結(jié)果等級越高。由此可知，黑籽雀稗可有效提高混合青貯飼料的感官品質(zhì)。

3.2青貯飼料pH值、乳酸菌和有機酸

對于一般青貯而言，pH值是反映青貯飼料品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標值，pH值越低青貯品質(zhì)越好［6］。一般pH值在4.2以下的青貯飼料質(zhì)量是優(yōu)等，4.2～4.5之間是良好，4.6～5.0是一般，5.0以上是劣等［7-8］。本次試驗結(jié)果表明，100%青貯黑籽雀稗組別pH值偏高在良好之間，而混合組別和100%香蕉秸稈皆優(yōu)等。感官評定中黑籽雀稗單青貯處理評分最高，而pH值卻偏高，這是因為黑籽雀稗水分含量低，乳酸菌等微生物被抑制，乳酸產(chǎn)量降低，從而導(dǎo)致pH值偏高。

乳酸菌是能將葡萄糖等碳水化合物在厭氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生大量乳酸的細菌總稱［9］。在常規(guī)青貯過程中乳酸菌利用可溶性碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，乳酸積累可降低青貯飼料pH值，控制青貯發(fā)酵過程［10］，提高乳酸含量，從而縮短發(fā)酵時間并且能夠提高飼料品質(zhì)，所以乳酸菌數(shù)量尤為重要。本試驗混合青貯處理組隨著香蕉秸稈比例的增加乳酸菌數(shù)量顯著下降，當(dāng)香蕉秸稈單獨青貯時，乳酸菌數(shù)量最低，這一結(jié)果是因為香蕉秸稈水分含量高，單獨青貯時pH值下降快，抑制乳酸菌增殖。有機酸含量檢測中單青貯黑籽雀稗處理組乳酸含量極顯著低于其它各處理組（P＜0.01），其原因是黑籽雀稗水分含量低，乳酸菌增殖較慢，乳酸、乙酸等有機酸產(chǎn)量不高，對乳酸菌抑制能力減弱?；旌锨噘A處理組中隨著黑籽雀稗比例增加乳酸增加，乙酸含量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組間差異不顯著（P＞0.05），50%香蕉秸稈與50%黑籽雀稗混合青貯處理極顯著高于其它三組（P＜0.01）。丁酸含量越高說明青貯飼料品質(zhì)腐敗程度越高，各處理組丁酸含量都極低，對青貯飼料品質(zhì)無影響。乳酸菌、pH值及有機酸是青貯飼料的重要指標，三者互為因果，相互影響。綜上可知黑籽雀稗與香蕉秸稈混合青貯能有效的提升青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)。

3.3青貯飼料營養(yǎng)成分

青貯原料水分和水溶性碳水化合物是影響青貯的主要成分。優(yōu)質(zhì)青貯的含水量不宜過高，青貯原料水分含量過高不僅影響發(fā)酵品質(zhì)，甚至造成汁液滲出及養(yǎng)分的損失［11］。青貯原料含水率的降低能減少青貯中蛋白質(zhì)、干物質(zhì)等的損失，相對提高營養(yǎng)成分含量［12］，有效增加家畜采食干物質(zhì)的攝取量，這對提高養(yǎng)殖效益具有積極意義［13］。Ward等［14］指出的常規(guī)青貯適宜水分范圍68%～75%，本試驗青貯香蕉秸稈原料含水量高達87.4%，而黑籽雀稗水分含量較低，二者混合青貯時隨著黑籽雀稗的比例增加青貯飼料含水量降低，青貯品質(zhì)提高。

可溶性碳水化合物是青貯飼料發(fā)酵過程中乳酸菌繁殖發(fā)酵的基質(zhì)，在原料中足夠的可溶性碳水化合物可確保乳酸菌快速大量地產(chǎn)生乳酸，促使pH值迅速下降，有效地抑制不良發(fā)酵，提高青貯的品質(zhì)和成功率［15］。原料中可溶性碳水化合物含量充足，青貯后可溶性碳水化物被大量消耗而明顯降低。粗蛋白質(zhì)是一項青貯飼料發(fā)酵是否良好的重要指標［16］，一般用氨態(tài)氮/粗蛋白來衡量［17］。從本研究結(jié)果可知，各處理組青貯后粗蛋白質(zhì)水平均低于原料，導(dǎo)致這一原因的產(chǎn)生應(yīng)該是青貯前期降解蛋白質(zhì)微生物活動導(dǎo)致粗蛋白質(zhì)降解［18-20］。本試驗各處理有機物、粗纖維、NDF、ADF等含量差異不顯著（P＞0.05）。從原料與各青貯處理的營養(yǎng)成分測定數(shù)據(jù)對比中可知，其它各營養(yǎng)成分含量變化不大，在青貯過程中營養(yǎng)成分的損失較小，有效地保存了飼草原料的營養(yǎng)價值，提高飼料青貯品質(zhì)。

綜合黑籽雀稗和香蕉秸稈混合青貯飼料感官指標及實驗室檢測結(jié)果可知，在香蕉秸稈中混入黑籽雀稗可以提高混合青貯的品質(zhì)，并且黑籽雀稗混合青貯比例達到50%時青貯效果最好。

4　結(jié)論

綜合本研究結(jié)果可知，黑籽雀稗與香蕉秸稈混合青貯可以降低香蕉秸稈水分含量，有效地提高香蕉秸稈青貯品質(zhì)，黑籽雀稗混合青貯比例達到50%時青貯效果最好。香蕉秸稈單獨青貯時最好經(jīng)過萎蔫失水或與水分含量低的原料混合青貯，以提高青貯品質(zhì)。

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（編輯：高雁，snowyan78@163.com）

Effect of different mixing ratio of banana stalk and sunspots nutans on quality of mixed silage

Liu Daqin，Qin Chengyi，Ding Chenchen，Chen Jiang，Liang Mengdi，Chen Tao，Wang Xuemei

This experiment is to exploit stalk feed resources，the results of different mixing ratio of banana stalk and sunspots nutans were recorded to explore the effects on ferment quality and nutrients.Harvested sunspots nutans and banana stalk were dired properly，chopped into 1～3 cm.Four treatment groups were set according to the propor- tion of sunspots nutans，100%sunspots nutans，100%stalks of bananas，75%of banana stalk+sunspot Brome and 50%sunspot Brome+50%banana stalk.Each treatment contains 3 replicates.After 35 days of fermentation，the sensory evaluation and laboratory test of silage were carried out.The results showed were observed among all groups（P＜0.05）；However，the content of dry matter，crude fiber，NDF，ADF did not have significant differences（P＞0.05）.The sensory evaluation score of sunspot brome is the best，the mixed silage treatment is lower，the banana stalk is the lowest，but all groups were excellent.The value of pH were elevated and the number of Lactobacillus were depressed with the promoting ratio of sunspots nutans（P＜0.05），the content of lactic acid and acetic acid is lower than the 100%banana stalk group（P＜0.05），butyric acid is barely few in all groups，no significant differences in fermentation quality due to the content；The content of water is reduced with the promoting ratio of sunspots nutants；With the sensory evaluation and laboratory tests，mixture of banana stalk and sunspots nutanscan reduce the water content and the loss of nutrients，improves the fermentation quality of banana stalk，with the best ratio of 50%.Fermenting the banana stalk should reduce the water content first or mix with other material which contains fewer water，to get better quality.

banana stalk；sunspots nutans；mixed silage；nutritional value

10.13302/j.cnki.fi.2016.05.007

S816.32

A

1001-991X（2016）05-0029-06

劉大欽，研究方向為動物生產(chǎn)。

王學(xué)梅，碩士，副教授。

2015-02-03

中西部高校提升綜合實力工作資金項目；卓越農(nóng)村人才教育培養(yǎng)計劃-復(fù)合應(yīng)用型項目