黃存敏

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DCP聯(lián)合AFP對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

黃存敏

524400廣東廣東省廉江市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

【摘要】目的探討脫-γ-羧基凝血酶原(DCP)聯(lián)合AFP對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值。方法選取2013年6月至2014年9月在我院治療的100例原發(fā)性肝癌、48例消化系統(tǒng)腫瘤、53例繼發(fā)性肝癌、49例慢性肝病、69例其他肝臟疾病患者作為研究組，并選擇同期在我院體檢的62名正常志愿者作為對照組，均使用化學(xué)發(fā)光法對全部研究對象的血清DCP和AFP濃度進(jìn)行檢測，使用ROC曲線描述研究對象特征，得出原發(fā)性肝癌的最佳診斷值。結(jié)果①相較于消化系統(tǒng)腫瘤、繼發(fā)性肝癌、慢性肝病、其他肝病疾病患者以及正常對照組，原發(fā)性肝癌患者的陽性率顯著提升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)；消化系統(tǒng)腫瘤、慢性肝病、其他肝臟疾病患者及正常對照組之間的陽性率差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.051)；②ROC曲線顯示，DCP診斷原發(fā)性肝癌的最佳臨界值為45.6 mAU/mL，其靈敏度為73.3%、特異度為87.1%；③聯(lián)合DCP、AFP的檢測結(jié)果陽性率與診斷金標(biāo)準(zhǔn)一致，其特異度、靈敏度、Kappa值可分別高達(dá)90.24%，91.30%，0.815，明顯優(yōu)于單項(xiàng)診斷；④在所有研究對象的相關(guān)分析中，r=0.062，P=0.227，表明DCP和AFP無相關(guān)性；在原發(fā)性肝癌患者，r=0.022，P=0.669，表明DCP和AFP無相關(guān)性。結(jié)論DCP檢測診斷原發(fā)性肝癌具有較優(yōu)的效果，聯(lián)合DCP和AFP可有效提高原發(fā)性肝癌的診斷效果，有助于患者的早期發(fā)現(xiàn)和治療。

【關(guān)鍵詞】原發(fā)性肝癌；脫-γ-羧基凝血酶原；甲胎蛋白；靈敏度；特異度

原發(fā)性肝癌是一種常見的惡性腫瘤，由肝內(nèi)膽管細(xì)胞或肝細(xì)胞發(fā)生。原發(fā)性肝癌的致死率非常高，是世界癌癥致死的第3大常見原因，在我國的發(fā)病率非常高，在消化系統(tǒng)中居于第3位[1]。肝癌直徑(d)在原發(fā)性肝癌患者術(shù)后5年生存率中扮演著十分關(guān)鍵的角色，當(dāng)d<2 cm時(shí)，患者術(shù)后5年生存率可達(dá)100%，而患者5年生存率隨肝癌直徑的增加而下降，d每增加1 cm便下降20%[2]。故有研究[3]稱早期肝癌的發(fā)現(xiàn)、診斷、治療，即二級預(yù)防，是使患者長期生存最重要的方法。診斷原發(fā)性肝癌最常用的血清學(xué)標(biāo)志物是甲胎蛋白(αFP或AFP)，但由于其特異性、靈敏度以及陽性預(yù)測值都比較低，常常會導(dǎo)致許多漏診和誤診，診斷效果不如人意。脫-γ-羧基凝血酶原(DCP)是最近研發(fā)的一種診斷原發(fā)性肝癌具有較高陽性率、特異性和靈敏度均較強(qiáng)的血清學(xué)標(biāo)志物，可明顯降低漏診率和誤診率[4]。DCP相對于正常的凝血酶原而言，具有比較不同的特性，在其γ-羧基谷氨酸中一個(gè)或多個(gè)谷氨酸殘基無法完全羧化為γ-羧基谷氨酸，因而導(dǎo)致其無法發(fā)揮正常的凝血功能。若患者體內(nèi)缺乏維生素K或服用其拮抗劑后，非羧化形式的凝血原酶便會釋放進(jìn)入血液中。有文獻(xiàn)顯示[5]，DCP水平在原發(fā)性肝癌患者中具有顯著升高的特點(diǎn)，因而可作為該病的血清學(xué)標(biāo)志物。為探討DCP聯(lián)合AFP對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值，本研究選取2013年6月至2014年9月在我院治療的100例原發(fā)性肝癌、48例消化系統(tǒng)腫瘤、53例繼發(fā)性肝癌、49例慢性肝病、69例其他肝臟疾病患者作為研究組，并選擇62名正常志愿者作為對照組，對比其血清DCP和AFP濃度并計(jì)算DCP對原發(fā)性肝癌的最佳診斷值，結(jié)果報(bào)道如下。

資料和方法

一、一般資料

選取2013年6月至2014年9月在我院住院治療并均病理學(xué)診斷證實(shí)的100例原發(fā)性肝癌患者，其中男性87例，女性13例，年齡29～78歲，平均年齡(58.2±2.8)歲。以《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》(2011版)作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)。研究對象按TNM分期主要為Ⅲ、Ⅳ期。選擇同期在我院治療的48例消化系統(tǒng)腫瘤、53例繼發(fā)性肝癌、49例慢性肝病、69例其他肝臟疾病患者作為研究組；以及在我院體檢的62名正常志愿者作為對照組，其中男性32名，女性30名，年齡24～82歲，平均年齡(56.7±3.3)歲，均符合3大常規(guī)便、血、尿，肝膽胰B超及血生化檢查肝功能正常。

二、方法

對所有研究對象抽取空腹靜脈血，分離血清。采用化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析法對各對象血清中的DCP、AFP濃度進(jìn)行檢測。儀器采用德國SIEMENS IMMULITE2000型全自動免疫分析儀；AFP、DCP原裝配套試劑盒(L2K系列)；異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)原配校準(zhǔn)液(L2K系列)，以試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)作為DCP的陽性判斷，即DCP≥27.8 mAU/mL，則DCP陽性。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將所有數(shù)據(jù)錄入SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用中位數(shù)表示DCP水平(偏態(tài)分布)，以秩和檢驗(yàn)對組間比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。繪制DCP的受試者工作特征(ROC)曲線，并對DCP的靈敏度、特異性、原發(fā)性肝癌最佳診斷值進(jìn)行計(jì)算。以直線和Pearson相關(guān)分析對數(shù)據(jù)間的相關(guān)性進(jìn)行分析。若P<0.05，則差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、各組研究對象的血清DCP濃度和陽性率比較

相較于消化系統(tǒng)腫瘤、繼發(fā)性肝癌、慢性肝病、其他肝臟疾病患者以及正常對照組，原發(fā)性肝癌患者的陽性率顯著提升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)；消化系統(tǒng)腫瘤、慢性肝病、其他肝臟疾病患者以及正常對照組之間的陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.051)。如表1所示。

二、DCP診斷原發(fā)性肝癌的最佳臨界值

分別將正常對照組與其他5組作為對照，繪制DCP的ROC曲線，其曲線下面積分別為 0.824和 0.822，當(dāng)約登指數(shù)最大時(shí)可得DCP診斷原發(fā)性肝癌的臨界值為43.0和45.6 mAU/mL，其靈敏度分別為73.1%和73.3%，特異度分別為99.7%和87.1%。因此DCP診斷原發(fā)性肝癌的最佳臨界值為45.6 mAU/mL。

三、DCP、AFP單項(xiàng)以及聯(lián)合對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

(一)DCP檢測結(jié)果與診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷結(jié)果比較

DCP診斷原發(fā)性肝癌的結(jié)果中有39例不符合診斷金標(biāo)準(zhǔn)的診斷結(jié)果，有19例DCP檢測結(jié)果呈陰性，經(jīng)診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷為陽性；20例DCP檢測結(jié)果呈陽性，經(jīng)診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷為陰性。DCP的靈敏度、特異度、Kappa值分別為80.20%、93.21%、0.734。

(二)AFP檢測結(jié)果與診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷結(jié)果比較

AFP診斷原發(fā)性肝癌的結(jié)果中有31例不符合診斷金標(biāo)準(zhǔn)的診斷結(jié)果，有11例AFP檢測結(jié)果呈陰性，經(jīng)診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷為陽性；20例AFP檢測結(jié)果呈陽性，經(jīng)診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷為陰性。AFP的靈敏度、特異度、Kappa值分別為81.65%、95.06%、0.776。

(三)聯(lián)合DCP、AFP檢測結(jié)果與診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷結(jié)果比較

聯(lián)合DCP、AFP檢測結(jié)果中陽性率與診斷金標(biāo)準(zhǔn)一致，其特異度、靈敏度、Kappa值可分別高達(dá)90.24%，91.30%，0.815，明顯優(yōu)于單項(xiàng)診斷。

四、 DCP與AFP的相關(guān)分析

將所有共381例研究對象與116例原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行DCP和AFP的相關(guān)分析。在所有研究對象的相關(guān)分析中，r=0.062，P=0.227，表明DCP和AFP無相關(guān)性；在原發(fā)性肝癌患者中，r=0.022，P=0.669，表明DCP和AFP無相關(guān)性。

表1　各組研究對象的血清DCP濃度和陽性率比較 (n，%)

注：各組與原發(fā)性肝癌組患者陽性率的比較，aP<0.001。消化系統(tǒng)腫瘤、慢性肝病、其他肝臟疾病患者以及正常對照組之間陽性率的比較，bP=0.051

討論

原發(fā)性肝癌是一種死亡率特別高的常見癌癥，治愈率極低，但在早期的治療中仍可能治愈[6]。血清AFP常被用作檢測肝細(xì)胞癌的血清學(xué)標(biāo)志物，在臨床檢測原發(fā)性肝癌中運(yùn)用比較廣泛，但其對于原發(fā)性肝癌的早期診斷的特異性和靈敏度不是很高，容易導(dǎo)致漏診和誤診[1]。在HCV相關(guān)肝癌的檢測試驗(yàn)中，僅運(yùn)用AFP作為檢測標(biāo)志物顯然不夠充分。

DCP是一種缺乏凝結(jié)活性的異常凝血酶原，可由缺乏維生素K或服用維生素K拮抗劑后產(chǎn)生[7]。研究表明[8]，肝細(xì)胞癌患者中血清DCP較正常者明顯提高，對于診斷肝細(xì)胞癌患者具有高度特異性和靈敏度。由于DCP 屬于去羧基凝血酶原，即γ-谷氨酸殘基無羧基這一與鈣結(jié)合的功能區(qū)，以此失去了凝血酶原的功能。大多數(shù)肝細(xì)胞癌患者血清中都存在DCP，維生素?zé)o法將全部DCP清除。文獻(xiàn)顯示[9-10]，維生素K缺乏或維生素K拮抗劑具有促進(jìn)釋放凝血酶原非羧化形式的作用，從而提高DCP的濃度。近年，臨床上多采用化學(xué)發(fā)光法代替酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對DCP進(jìn)行測定，其靈敏度和特異性明顯提高，我國目前正積極引進(jìn)化學(xué)發(fā)光法對DCP進(jìn)行檢測。

本研究顯示[11]，使用化學(xué)發(fā)光法可測得原發(fā)性肝癌患者中DCP的陽性率明顯高于消化系統(tǒng)腫瘤、繼發(fā)性肝癌、慢性肝病、其他肝臟疾病患者以及正常對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)，基本符合以往發(fā)表的文獻(xiàn)結(jié)論[12-13]；消化系統(tǒng)腫瘤、慢性肝病、其他肝臟疾病患者以及正常對照組之間的陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.051)。目前尚未明確DCP陽性存在于其他疾病的原因，在使用DCP進(jìn)行單項(xiàng)診斷時(shí)，其靈敏度、特異度、Kappa值分別為80.20%、93.21%、0.734，具有較優(yōu)的診斷效果。

本研究中，當(dāng)約登指數(shù)最大時(shí)可得DCP診斷原發(fā)性肝癌的最佳臨界值為45.6 mAU/mL，其靈敏度為73.3%，特異度為87.1%。當(dāng)患者DCP超過其診斷原發(fā)性肝癌的最佳臨界值，即>45.6 mAU/mL時(shí)，則很有可能為原發(fā)性肝癌，但由于其他疾病的患者DCP也會由于其他不明原因而出現(xiàn)升高的情況，故無法排除繼發(fā)性肝癌和缺乏維生素K的患者。本研究發(fā)現(xiàn)，有少量原發(fā)性肝癌患者血清DCP濃度相對較低，但無法明確原因，聯(lián)合DCP和其他腫瘤標(biāo)志物，尤其是AFP,可有效提高對原發(fā)性肝癌的檢出率。本研究結(jié)果，AFP診斷原發(fā)性肝癌有31例不符合診斷金標(biāo)準(zhǔn)的診斷結(jié)果，有11例AFP檢測結(jié)果呈陰性，經(jīng)診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷為陽性；20例AFP檢測結(jié)果呈陽性，經(jīng)診斷金標(biāo)準(zhǔn)診斷為陰性。AFP的靈敏度、特異度、Kappa值分別為81.65%、95.06%、0.776，具有比較高的靈敏度和特異性。

研究指出[14]，DCP和AFP雖然并無關(guān)聯(lián)，但在肝細(xì)胞癌的檢測中起到互補(bǔ)的效果。本研究中，在所有研究對象的相關(guān)分析中，r=0.062，P=0.227，表明DCP和AFP無相關(guān)性；在原發(fā)性肝癌患者中，r=0.022，P=0.669，表明DCP和AFP無相關(guān)性。文獻(xiàn)顯示[7]，聯(lián)合DCP與AFP可在早期有效檢測出慢性HBV感染患者肝細(xì)胞癌，其靈敏度大大提高，表現(xiàn)出相輔相成的特點(diǎn)。本研究也顯示，聯(lián)合DCP、AFP檢測結(jié)果的陽性率與診斷金標(biāo)準(zhǔn)一致，其特異度、靈敏度、Kappa值可分別高達(dá)90.24%，91.30%，0.815，確診率明顯優(yōu)于單項(xiàng)診斷。

總之，DCP在原發(fā)性肝癌的診斷各項(xiàng)研究中，其特異性和靈敏度略有差異[1,5,11]。本研究表明，使用DCP檢測原發(fā)性肝癌，可具有較優(yōu)的靈敏度和特異性，且比較符合診斷金標(biāo)準(zhǔn)的診斷結(jié)果。但本研究選取的樣本量具有局限性，對于原發(fā)性肝癌的分組也不夠細(xì)致，略粗淺，因此對于DCP在原發(fā)性肝癌診斷價(jià)值的研究仍需要進(jìn)一步探討。

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(本文編輯：賴榮陶)

(收稿日期：2016-01-30)

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