劉丹，董艷娟，周冬翠，邢建麗，何躍，張法軍

(陸軍總醫(yī)院,a 干三科，b 干一科,北京 100700)

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·論著·

慢性腦供血不足患者認(rèn)知功能與S100β蛋白、同型半胱氨酸水平的相關(guān)性

劉丹a，董艷娟a，周冬翠b，邢建麗a，何躍a，張法軍a

(陸軍總醫(yī)院,a 干三科，b 干一科,北京 100700)

目的探討S100β蛋白、同型半胱氨酸(Hcy)水平與慢性腦供血不足 (CCCI) 患者認(rèn)知功能水平的相關(guān)性。 方法選擇48例CCCI患者作為CCCI組，46例健康體檢者作為健康對(duì)照組，對(duì)CCCI組和健康對(duì)照組進(jìn)行綜合檢測評(píng)分，認(rèn)知功能水平檢測采用蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表(MoCA)，并進(jìn)行血液指標(biāo)S100β蛋白及Hcy檢測。結(jié)果CCCI組患者認(rèn)知功能障礙發(fā)生率為72.91%(35/48)，明顯高于健康對(duì)照組的發(fā)生率21.73%(10/46)(P<0.01)。CCCI組S100β蛋白、Hcy含量均高于健康對(duì)照組(P<0.05)。CCCI組S100β蛋白、Hcy含量與MoCA評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；S100β蛋白、Hcy未見明顯線性相關(guān)(P>0.05)。 結(jié)論CCCI組患者認(rèn)知功能障礙發(fā)生率高；S100β蛋白、Hcy可能參與CCCI的發(fā)生和發(fā)展；S100β蛋白、Hcy可能是影響CCCI患者認(rèn)知功能的2個(gè)相互獨(dú)立的因素。

腦缺血; 認(rèn)知障礙; 半胱氨酸; S100蛋白質(zhì)類; 危險(xiǎn)因素

慢性腦供血不足(CCCI)常見于老年患者，多繼發(fā)于高血壓、糖尿病、血脂異常等疾病。大量臨床證據(jù)顯示[1-2]，慢性腦供血不足是短暫性腦缺血發(fā)作、缺血性腦卒中、癡呆的高危因素或病理基礎(chǔ)。因CCCI發(fā)病具有隱襲性、早期癥狀輕微、主要依賴患者主訴進(jìn)行診斷而不易被早期發(fā)現(xiàn)。如對(duì)其不采取及時(shí)、有效干預(yù)措施，病情可能繼續(xù)進(jìn)展，引發(fā)更嚴(yán)重的臨床事件。本研究采用蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表(MoCA)對(duì)CCCI患者進(jìn)行綜合檢測評(píng)分，并檢測血液指標(biāo)S100β蛋白、同型半胱氨酸(Hcy)，試圖找到一種或多種檢測指標(biāo)對(duì)CCCI患者進(jìn)行初步評(píng)估，以期為CCCI的早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)提供確切依據(jù)。

1　 對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象選取2009年1月至2011年1月在我院住院或在門診體檢中發(fā)現(xiàn)的CCCI患者48例作為CCCI組：男22例，女16例；年齡60～84歲，平均(72.5±6.1)歲；受教育年限4～17年，平均(7.1±2.5)年。采用2000年日本卒中會(huì)議確定的CCCI診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他疾病引起頭暈、頭痛、頭沉等自覺癥狀；②其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或損傷者；③嚴(yán)重心、肝、肺、腎、造血系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者；④存在可能影響認(rèn)知功能測定結(jié)果的因素：嚴(yán)重語言或視聽覺障礙、精神病史、情感障礙、服用抗焦慮、抗抑郁藥物等。選擇同期在本院進(jìn)行健康體檢者46例作為對(duì)照組：男24例，女12例；年齡60～78歲，平均(70.4±7.8)歲；受教育年限3～17年，平均(7.5±2.1)年；神經(jīng)系統(tǒng)檢查無明顯異常；頭顱CT/MRI無器質(zhì)性腦改變。兩組患者均簽署知情同意書，研究方案經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。2組性別、年齡、受教育年限比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2臨床評(píng)估所有受試者均經(jīng)詳細(xì)臨床評(píng)估及體格檢查，采用MoCA(北京版)，由受過專業(yè)培訓(xùn)的神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師在安靜的房間內(nèi)進(jìn)行測驗(yàn)，所有患者均一次性完成。MoCA量表包括7項(xiàng)測驗(yàn)共30分：定向、視空間與執(zhí)行功能、命名、記憶(包括瞬時(shí)記憶及近記憶)、注意力、語言(包括復(fù)述與流暢性)、抽象概括，分別檢測認(rèn)知的定向、執(zhí)行功能、記憶等不同方面?？偡帧?6分為有認(rèn)知功能障礙；受教育年限<12年，測定分加1分以校正教育偏差。

1.3標(biāo)本采集對(duì)測試者采集空腹靜脈血5 mL，置于促凝管內(nèi)，2～3 h內(nèi)離心，3000 r/min離心10 min，取上清液置于-70 ℃的冰箱內(nèi)保存，待S100β蛋白、Hcy測定。為避免影響測定結(jié)果，要求測試者血液檢測前2天未進(jìn)食大量高蛋白、高脂肪、高嘌呤食物及飲酒，采集標(biāo)本血樣過程中無溶血。

1.4測定方法S100β蛋白采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELIAS)測定，測定試劑采用北京泰福仕科技開發(fā)公司試劑盒。血清Hcy采用循環(huán)酶法，使用羅氏P800全自動(dòng)生化儀，試劑由羅氏診斷有限公司提供。嚴(yán)格按照儀器及試劑說明書進(jìn)行操作，質(zhì)控品隨樣本一同測定。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1認(rèn)知功能障礙的發(fā)生率在MoCA量表檢測中，CCCI組患者認(rèn)知功能障礙發(fā)生率為72.91% (35/48)，明顯高于對(duì)照組的發(fā)生率21.73% (10/46)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.01) 。

2.2S100β蛋白、Hcy含量CCCI組S100β蛋白、Hcy含量均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (均P<0.05)，見表1。

組別例數(shù)S100βHcy對(duì)照組460.22±0.1910.47±4.12CCCI組480.39±0.11a19.87±3.35a

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05

2.3CCCI組S100β蛋白、Hcy含量及MoCA評(píng)分三者之間的相互關(guān)系 S100β蛋白、Hcy含量與MoCA評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.326，r=-0.515)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05) ；S100β蛋白、Hcy無明顯線性相關(guān)(r=0.121)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)，見表2。

表2　CCCI組S100β蛋白、Hcy含量及MoCA評(píng)分之間的相互關(guān)系(r值)

注：經(jīng)Pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)，aP<0.05

3　討論

CCCI系因各種原因?qū)е麓竽X長期慢性缺血引發(fā)的一種病理狀態(tài)?；颊咄灶^暈、頭痛、頭部脹悶不適為主訴，可伴有視力模糊、四肢無力、麻木等，起病隱襲，臨床表現(xiàn)形式多樣，但客觀體征較少，影像學(xué)亦無明顯器質(zhì)性改變[4-5]。本研究結(jié)果表明，CCCI患者雖然無明顯的神經(jīng)系統(tǒng)體征，但認(rèn)知功能障礙發(fā)生率為72.91%(35/48)，明顯高于對(duì)照組的21.73%(10/46)，這也與萬鴻平等[6]研究結(jié)果一致，提示臨床對(duì)有頭暈、頭痛等相關(guān)癥狀的患者進(jìn)行MoCA評(píng)分，早期發(fā)現(xiàn)CCCI患者認(rèn)知功能障礙將有助于癡呆的防治。

CCCI在嚴(yán)重?fù)p傷腦細(xì)胞的同時(shí)也破壞血腦屏障，使原本僅存在于中樞神經(jīng)組織內(nèi)的一些蛋白或酶類，從壞死或凋亡的腦細(xì)胞中釋放出來，通過被破壞的血腦屏障進(jìn)入血液，所以監(jiān)測患者血清中相關(guān)蛋白或酶類的濃度變化，能夠較可靠地反映腦損傷的嚴(yán)重程度，亦有可能對(duì)腦認(rèn)知損傷的治療及預(yù)后有一定的預(yù)測意義。而腦自身成分如S100β蛋白的測定可作為神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞損傷的直接預(yù)測因子，同時(shí)也是一種可提供腦損傷程度的定量指標(biāo)，尤其是能夠在臨床和影像檢查還未發(fā)現(xiàn)明顯異常的階段提供客觀依據(jù)。S100蛋白是一種鈣離子結(jié)合蛋白，由α、β兩種亞基組成，而S100β蛋白主要存在于腦中，約占96%，較其他亞型更具有活性，被認(rèn)為是腦內(nèi)特異蛋白[7]。本研究結(jié)果顯示，CCCI組S100β蛋白含量明顯高于對(duì)照組，提示S100β蛋白可能參與了CCCI的發(fā)生與發(fā)展，并且隨著S100β蛋白含量的增高，MoCA評(píng)分的分值有所下降，提示S100β蛋白水平越高患者認(rèn)知功能障礙越嚴(yán)重。也有研究發(fā)現(xiàn)此蛋白的水平變化不僅反映腦膠質(zhì)細(xì)胞損傷的嚴(yán)重程度，還可以調(diào)控神經(jīng)元與膠質(zhì)細(xì)胞的相互作用，S100β蛋白在腦出現(xiàn)缺血、缺氧時(shí)因神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞受到刺激后被大量激活、釋放入腦脊液中，再因血腦屏障受損而進(jìn)入血液，由此可看出人體內(nèi)S100β蛋白水平與腦組織灌注量具有密切關(guān)系[8]。Hcy是血和組織中的含硫氨基酸，在人體內(nèi)無法自行合成，只能從食物中的蛋氨酸在肝臟、肌肉和其他組織中脫甲基轉(zhuǎn)變而來。本研究結(jié)果顯示CCCI組Hcy含量明顯高于對(duì)照組，并且隨Hcy含量升高，MoCA評(píng)分呈下降趨勢，提示高水平Hcy可引起廣泛認(rèn)知功能的障礙，Hcy水平越高患者認(rèn)知功能障礙越嚴(yán)重。Hcy參與認(rèn)知功能障礙發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制尚不明確，目前研究認(rèn)為可能與以下機(jī)制有關(guān)：(1)高水平的Hcy被轉(zhuǎn)化成高水平的同型半胱氨酸，使β淀粉樣蛋白變性增強(qiáng)，促進(jìn)谷氨酸的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用，損傷神經(jīng)元，導(dǎo)致海馬神經(jīng)元凋亡，造成患者海馬體積的萎縮，引起患者學(xué)習(xí)、記憶及認(rèn)知功能的下降，Garcia等[9]研究也表明，Hcy水平升高與患者海馬體積的減小有關(guān)；(2)高水平Hcy妨礙神經(jīng)元的DNA修復(fù)功能，干擾神經(jīng)遞質(zhì)合成和磷脂甲基化，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)S-腺苷高半胱氨酸水平增高，腦組織中甲基化過程減慢，影響遞質(zhì)傳導(dǎo)，導(dǎo)致神經(jīng)元變性及認(rèn)知損害[10-12]。

本研究結(jié)果顯示CCCI患者S100β蛋白、Hcy含量無明顯線性相關(guān)，提示S100β蛋白、Hcy含量可能是影響CCCI患者認(rèn)知功能的2個(gè)相互獨(dú)立的因素。對(duì)有相關(guān)癥狀的患者進(jìn)行S100β蛋白和Hcy的聯(lián)合檢測，并進(jìn)行相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估如MoCA評(píng)分，早期診斷，早期干預(yù)，可能在一定程度上延緩CCCI患者的病情發(fā)展，提高CCCI患者的生存質(zhì)量。

[1]Tripathi M,Tripathi M,Sharma R,et al.Functional neuroimaging using F-18 FDG,PET/CT in amnestic mild cognitive impairment: a preliminary study[J].Indian J Nucl Med,2013,28(3):129-133.

[2]張秀華，李光來.慢性腦供血不足的研究進(jìn)展[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2007,5(3):249-251.

[3]近藤.無癥狀性腦血管病變の對(duì)應(yīng)頸動(dòng)脈病變の治療[J].日內(nèi)會(huì)雜志，2000,86(4):781-782.

[4]Bennett SA,Tenniswood M,Chen JH,et al.Chronic cerebral hypo perfusion elicits neuronal apoptosis and behavioral impairment[J].Neuroreport,1998,9(1):161-165.

[5]孫強(qiáng).慢性腦供血不足的基礎(chǔ)及臨床研究[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2009,2(6):756-760.

[6]萬鴻平，章軍建，汗長銀.慢性腦供血不足患者的認(rèn)知功能與腦血流變化[J].中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué),2007,16(1):27.

[7]Persson L,Hardemark HG,Gustafsson J,et al.S-100 protein and NSE in CSF and serum: markers of cell damage in human central nervous system[J].Stroke,1987,18(5):911-918.

[8]Abraha HD,Butterworth RJ,Bath PMW,et al.Serum S-100 protein,relationship to clinical outcome in acute stroke[J].Ann Clin Biochem,1997,34(4):366-370.

[9]Garcia A，Haron Y，Pulman K，et a1.Increases in homocysteine are related to worsening of stroop scores in healthy elderly persons：a prospective follow-up study[J].J Gerontol A Biol Sci Med Sci,2004(59):1323-1327.

[10] 龔杰，韓衛(wèi)全.急性腦梗死患者血清同型半胱氨酸、降鈣素原和白介素-6的動(dòng)態(tài)變化及相關(guān)性分析[J].中國臨床保健雜志,2014,17(4):416-417.

[11] 甘蓉，張玉虎，聶坤，等.帕金森病患者認(rèn)知障礙與血漿同型半胱氨酸水平的相關(guān)性研究[J].中華老年心腦血管病雜志，2012,14(3):231-232.

[12] 武云，張文慧，米娜瓦爾·胡加.高同型半胱氨酸與腦梗死再發(fā)的相關(guān)性研究[J].中國臨床保健雜志，2012,15(3):262-263.

Correlation of montreal cognitive assessment and S100β protein,homocysteine in patients of chronic cerebral circulation insufficiency with cognitive impairment

LiuDan*,DongYanjuan,ZhouDongcui,XingJianli,HeYue,ZhangFajun

(*ThirdDepartmentofCadreGeneralArmyGeneralHospital,Beijing100700,China)Correspondingauthor:ZhouDongcui,Email:zhoudongcui@sina.com

ObjectiveTo explore the correlation of montreal cognitive assessment (MoCA)and S100β protein、Homocysteine(Hcy)in patients of chronic cerebral circulation insufficiency (CCCl) with cognitive impairment.MethodsForty-eight patients with CCCl were as CCCl group，while 46 healthy subjects were as control group.The cognitive function and the level of S100β protein、Hcy were detected.ResultsThe incidence (72.91%, 35/48) of cognitive impairment of CCCl group was significantly higherthan control group (21.73%, 10/46)(P<0.01).The concentration of S100β protein and Hcy of CCCl group was higher than control group (P<0.05).The MoCA score of CCCl group was negative relationship with S100β protein and Hcy.No relationship was found between S100β protein and Hcy.ConclusionsPatients with CCCI have a higher incidence of cognitive impairment. S100β protein and Hcy are important risk factors of CCCl occurrence.S100β protein and Hcy maybe the separate risk factors of cognitive impairment.

Brain ischemia;Cognition disorders;Cysteine;S100 proteins;Risk factors

劉丹，主治醫(yī)師,Email:ltld2008@sina.cn

周冬翠,副主任技師，Email:zhoudongcui@sina.com

R735.7

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2016.04.008

2015-09-07)