陳升，劉愛群，劉立義，陳小妮，葉新青，陳航言（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院內(nèi)鏡中心，廣西南寧530021）

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超聲支氣管鏡引導(dǎo)下針吸活檢術(shù)結(jié)合免疫組化及基因?qū)W檢測(cè)在肺癌診治中的應(yīng)用*

陳升，劉愛群，劉立義，陳小妮，葉新青，陳航言
（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院內(nèi)鏡中心，廣西南寧530021）

摘要：目的 評(píng)價(jià)超聲支氣管鏡引導(dǎo)下針吸活檢術(shù)（EBUS-TBNA）結(jié)合免疫組化技術(shù)和基因?qū)W檢測(cè)在肺癌的診斷及治療中的應(yīng)用價(jià)值。方法 回顧性分析從2013年5月-2015年10月共55例初診的臨床診斷縱隔占位或疑為肺癌伴縱膈或肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，為明確診斷行EBUS-TBNA檢查，必要時(shí)聯(lián)合免疫組化檢測(cè)進(jìn)一步完善診斷及分型，并對(duì)部分肺癌患者行表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）或間變性淋巴瘤激酶（ALK）檢測(cè)以明確分子分型從而為靶向治療提供依據(jù)。結(jié)果 55例患者中，經(jīng)EBUS-TBNA確診為肺癌37例，肺轉(zhuǎn)移癌3例，軟組織肉瘤1例，轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)腺癌1例，淋巴瘤1例，結(jié)核病4例，慢性炎癥1例，7例經(jīng)EBUS-TBNA未能明確診斷。EBUS-TBNA在該組肺癌診斷中的敏感性及準(zhǔn)確性分別為92.5%（37/40）和94.5%（52/55）。29 例EBUS-TBNA組織標(biāo)本依賴免疫組化檢測(cè)證實(shí)為肺癌且得到明確分型，其中17例肺腺癌，6例肺鱗癌，6例小細(xì)胞肺癌。6例EBUS-TBNA組織標(biāo)本行EGFR基因檢測(cè)，其中1例同時(shí)行ALK基因檢測(cè)，基因檢測(cè)結(jié)果示EGFR基因突變型4例，ALK基因無(wú)融合1例。所有病例無(wú)1例嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生。結(jié)論 EBUS-TBNA診斷肺癌具有良好價(jià)值，且安全性較好，結(jié)合免疫組織組化檢測(cè)及基因突變檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷及指導(dǎo)治療有突出的價(jià)值。

關(guān)鍵詞：超聲支氣管鏡；超聲支氣管鏡引導(dǎo)下針吸活檢術(shù)；免疫組化；基因檢測(cè)

肺癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，早期癥狀不典型，患者就診時(shí)多數(shù)已出現(xiàn)縱隔或肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。早期及準(zhǔn)確的診斷是肺癌患者選擇最佳治療方案和預(yù)后的關(guān)鍵［1］。對(duì)于確診肺癌常規(guī)的檢查手段，如經(jīng)支氣管鏡活檢及經(jīng)CT引導(dǎo)下經(jīng)胸肺活檢，它們分別適用于表現(xiàn)為肺內(nèi)病變的中央型肺癌及部分周圍型肺癌，但對(duì)于管腔內(nèi)黏膜未見明顯腫瘤侵犯的肺內(nèi)占位性病變或僅伴單純縱隔或肺門淋巴結(jié)腫大的疑診肺癌，以上兩種手段非常有限，此時(shí)需要對(duì)縱隔或肺門淋巴結(jié)進(jìn)行活檢。經(jīng)支氣管超聲支氣管鏡針吸活檢（endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration，EBUS-TBNA）作為一種微創(chuàng)而安全的檢查方法已成為肺癌的診斷和分期的重要手段［2］。多個(gè)研究表明，對(duì)于縱隔及肺門淋巴結(jié)腫大病變的診斷，EBUS-TBNA較普通的其他檢查方法如縱隔鏡、常規(guī)經(jīng)支氣管針吸活檢（transbronchial needle aspiration，TBNA）及經(jīng)超聲胃鏡引導(dǎo)下針吸活檢（endoscopic ultrasound-guided fine needleaspiration，EUS-FNA）具有更高的診斷價(jià)值［3］。

然而，EBUS-TBNA一般為細(xì)針在負(fù)壓狀態(tài)下穿刺活檢，所得標(biāo)本量較支氣管鏡活檢、縱隔鏡更少［4］，且?；煊休^多血液，所得組織信息量少，單從形態(tài)學(xué)進(jìn)行確診及組織分型較為困難，在一定程度上加大了診斷的難度。近年來(lái)免疫組化及基因檢測(cè)手段的普及為肺癌的診斷及組織和分子分型提供了一種有效的方法［5-7］。本研究通過(guò)EBUS-TBNA獲取組織標(biāo)本行免疫組化及基因檢測(cè)技術(shù)，能提供更為精確的組織及基因分型，從而指導(dǎo)患者的治療及評(píng)估預(yù)后，對(duì)肺癌的進(jìn)一步診斷和治療提供有意義的參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧分析2013年5月-2015年10月在廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院經(jīng)影像學(xué)（CT或PET/CT）發(fā)現(xiàn)縱隔占位或疑為肺癌伴縱隔或肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，且經(jīng)常規(guī)支氣管鏡活檢未能明確診斷的年齡在28～82（55.2±11.5）歲的55例患者行EBUS-TBNA以明確診斷。所有患者診斷最終以活檢穿刺（EBUS-TBNA、鎖骨上淋巴結(jié)穿刺、CT引導(dǎo)下腫物穿刺）及手術(shù)的病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)證實(shí)，未能獲得病理及細(xì)胞學(xué)確診者，通過(guò)大于6個(gè)月臨床隨訪驗(yàn)證。

1.2 儀器

奧林巴斯BF-UC-260FW，奧林巴斯NA-201SX-4022細(xì)胞學(xué)穿刺針。超聲主機(jī)ME1。所有患者超聲檢查及穿刺過(guò)程中均應(yīng)用利多卡因聯(lián)合丙泊酚或肌松藥全身麻醉并常規(guī)行心電監(jiān)護(hù)。

1.3 方法

1.3.1 穿刺部位 根據(jù)影像學(xué)檢查結(jié)果擇點(diǎn)定位。見圖1。

圖1 CT檢查結(jié)果

1.3.2 穿刺過(guò)程根據(jù)超聲支氣管鏡（endobroncheal ultrasonography，EBUS）下確定病灶，采用彩色多普勒觀察病灶內(nèi)部及周圍的血流，選擇合適的穿刺路徑，然后用22G穿刺針連同針芯插入內(nèi)鏡工作管道，固定好穿刺針，依據(jù)病灶大小，確定進(jìn)針長(zhǎng)度，快速將穿刺針插入病灶內(nèi)，連接負(fù)壓注射器，保持負(fù)壓5～15 ml，在病灶中反復(fù)提抽15～20次，穿刺2～5次。見圖2。

1.3.3 標(biāo)本的處理 穿刺組織行細(xì)胞學(xué)涂片（圖3A）并立即置于無(wú)水酒精中固定，行HE染色。使用穿刺針將獲取的組織條連同血液一同推到一盛有標(biāo)本液的標(biāo)本盒中（圖3B），充分震蕩后靜置，待標(biāo)本中有形成分沉淀后，將上層液體送液基細(xì)胞學(xué)檢查（圖3A），剩余的固體組織條取出置于小紙片上，然后包裹好后放入10%福爾馬林中固定，石臘包埋，行組織病理學(xué)檢查，必要時(shí)行免疫組織化學(xué)檢測(cè)（immunohistochemistry，IHC），其中IHC抗體選取甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1（thyoid transciiption factor-1，TTF-1）、CK7、CK5/6、P63、Syn、CD56、Ki-67，實(shí)際情況根據(jù)病史及已測(cè)免疫組化指標(biāo)結(jié)果加做部分抗體，采用免疫組化二步法染色步驟，具體細(xì)節(jié)參照試劑說(shuō)明?？贵w及試劑盒均購(gòu)于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。組織分型為腺癌病例選擇行表皮生長(zhǎng)因子受體（epithelial growth factor receptor，EGFR）檢測(cè)，再結(jié)合病理醫(yī)生評(píng)估組織標(biāo)本條件，部分標(biāo)本行EGFR基因檢測(cè)，并采用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)技術(shù)。試劑盒為凱杰的therascreen EGFR（Scorpion ARMS）。

圖2 穿刺過(guò)程

圖3 標(biāo)本的處理

1.4 隨訪及療效評(píng)價(jià)

EBUS-TBNA組織病理學(xué)、細(xì)胞涂片及液基細(xì)胞學(xué)3項(xiàng)中1項(xiàng)及1項(xiàng)以上見到惡性腫瘤細(xì)胞，均判斷總結(jié)果為陽(yáng)性。標(biāo)本中判斷為高度可疑惡性腫瘤細(xì)胞，則結(jié)合臨床及影像學(xué)隨訪高度懷疑惡性腫瘤或者已通過(guò)其他途徑在細(xì)胞學(xué)及組織學(xué)確診為惡性，判斷結(jié)果為陽(yáng)性，否則判斷結(jié)果為陰性。多部位淋巴結(jié)穿刺檢查的患者其任何一部位穿刺結(jié)果陽(yáng)性均判斷為總結(jié)果陽(yáng)性，全部部位穿刺結(jié)果均陰性，則判定為總結(jié)果陰性。

2 結(jié)果

2.1 穿刺結(jié)果

55例患者，48例經(jīng)EBUS-TBNA穿刺活檢后確診，其中肺癌37例，非肺癌病例11例（轉(zhuǎn)移性肺癌3例，軟組織肉瘤1例，轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)腺癌1例，淋巴瘤1例，結(jié)核病4例，慢性炎癥1例）。7例經(jīng)EBUS-TBNA未能明確診斷者，其中6例經(jīng)縱膈鏡、鎖骨上淋巴結(jié)穿刺、CT引導(dǎo)下腫物穿刺活檢確診（其中肺癌3例，良性囊腫1例，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤1例，惡性間皮瘤1例），另外1例經(jīng)隨訪6個(gè)月示診斷性抗結(jié)核治療后復(fù)查CT提示縱隔淋巴結(jié)縮小，癥狀好轉(zhuǎn)，證實(shí)為結(jié)核病。EBUS-TBNA在本組肺癌診斷中的敏感性和準(zhǔn)確性分別為92.5%（37/40）和94.5%［（37+15）/55）］。見表1。

表1 EBUS-TBNA診斷結(jié)果與最終結(jié)果的比較 例

2.2 免疫組化結(jié)果

37例患者行EBUS-TBNA標(biāo)本免疫組化檢測(cè)，29例肺癌患者明確分型，其中肺腺癌17例，肺鱗癌6例，小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）6例。以腺癌為例：肺腺癌細(xì)胞對(duì)CK7（圖4A），EGFR檢測(cè)陽(yáng)性（圖4B），Ki-67高表達(dá)（圖4C），TTF-1陽(yáng)性表達(dá)率高（圖4D）；肺鱗癌細(xì)胞對(duì)CK5/6、p63陽(yáng)性表達(dá)率高，SCLC細(xì)胞對(duì)Syn、CD56陽(yáng)性表達(dá)率高，且Ki-67高表達(dá)。此外，3例肺轉(zhuǎn)移癌中，1例既往存在子宮內(nèi)膜癌病史，經(jīng)EBUS-TBNA見異形細(xì)胞團(tuán)，免疫組化結(jié)果：CK廣譜（+），CK7（+），TTF-1（-），CK5/6（+），Syn（-），CgA（-），結(jié)合病史最終診斷為子宮內(nèi)膜腺樣腺癌；1例CT發(fā)現(xiàn)肝占位及縱隔和鎖骨上多發(fā)淋巴結(jié)腫大，經(jīng)EBUS-TBNA見癌細(xì)胞，免疫組化結(jié)果：CKpan（+），CK18（+），CK19（+），CK20 （-），Hepatocyte（+），TTF-1（-），NapsinA（-），Vimentin、CD5、CD3、CD20、CD30、ALK、TDT、CD1a均陰性，Ki-67約15.0%（+），免疫組化結(jié)果排除胸腺癌、間變大細(xì)胞淋巴瘤及霍奇金淋巴瘤，綜合影像學(xué)結(jié)果診斷為肝細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移；1例既往存在左乳癌病史，經(jīng)EBUS-TBNA見腺癌細(xì)胞，免疫組化結(jié)果：ER （+，30%中等），HER-2（3+），結(jié)合病史最終診斷為乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌轉(zhuǎn)移。另有1例軟組織肉瘤，經(jīng)EBUS-TBNA見異形細(xì)胞散在分布，形態(tài)欠清，考慮惡性腫瘤，免疫組化結(jié)果：EGFR（++），Vimentin（+），Syn（-），CKpan（-），LCA（-）及其他指標(biāo)（-），最終明確診斷為軟組織肉瘤。余4例肺癌病例經(jīng)免疫組化檢測(cè)未能明確分型。見表2。

圖4 EBUS-TBNA活檢組織免疫組織化學(xué)染色

表2 免疫組化指標(biāo)在各類型肺癌的表達(dá)情況 例（%）

2.3 基因檢測(cè)結(jié)果

EBUS-TBNA穿刺病理結(jié)果為腺癌病例19例，行EGFR檢測(cè)6例，且同時(shí)行間變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）融合基因檢測(cè)1例，基因檢測(cè)結(jié)果示4例均為21外顯子L858R突變型（圖5），2例為EGFR野生型，1例ALK基因未見融合。

2.4 患者轉(zhuǎn)歸

經(jīng)EBUS-TBNA確診的43例惡性腫瘤，6例SCLC患者中5例先接受化療，化療療效明顯，后部分行同步放化療，1例放棄治療；19例肺腺癌患者，4例基因檢測(cè)結(jié)果為EGFR基因突變型患者，2例直接行靶向治療，其中1例患者1個(gè)月后復(fù)查CT評(píng)價(jià)療效為部分緩解（圖6），1例先化療，疾病進(jìn)展后再行靶向治療，1例因經(jīng)濟(jì)原因放棄治療，另外15例其中1例為早期肺癌，行胸腔鏡下腫物及肺葉切除術(shù)，10例序貫化放療，4例放棄治療；6例肺鱗癌患者中3例行序貫化放療，1例化療，2例放棄治療；4例未分型肺癌患者中1例接受化療，3例放棄治療；2例非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）患者均放棄治療；3例轉(zhuǎn)移性肺癌患者中1例子宮內(nèi)膜樣癌并肺轉(zhuǎn)移者及1例乳腺癌并縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者均行肺或縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶放療，放療后轉(zhuǎn)移灶縮小，1例肝癌并肺轉(zhuǎn)移放棄治療。1例原發(fā)灶不明轉(zhuǎn)移性腺癌及1例軟組織肉瘤患者均放棄治療；1例彌漫大B淋巴瘤患者接受8周期聯(lián)合化療后病灶明顯縮小，評(píng)價(jià)療效為部分緩解。

圖5 EBUS-TBNA活檢標(biāo)本EGFR基因檢測(cè)

圖6 靶向治療1個(gè)月后復(fù)查CT

3 討論

在本研究中，通過(guò)對(duì)55例初診的臨床診斷縱隔占位或疑為肺癌伴肺門或縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，為明確診斷行EBUS-TBNA檢查，EBUS-TBNA獲取組織常規(guī)行細(xì)胞學(xué)涂片及組織病理檢查，結(jié)果示EBUS-TBNA在肺癌診斷中的敏感度為92.5% （37/40），準(zhǔn)確性為94.5%（52/55）。37例EBUS-TBNA標(biāo)本行免疫組化檢測(cè)，29例EBUS-TBNA組織標(biāo)本依賴免疫組化檢測(cè)證實(shí)為肺癌且得到明確分型，其中17例肺腺癌，6例肺鱗癌，6例小細(xì)胞肺癌。6例EBUS-TBNA組織標(biāo)本行EGFR基因檢測(cè)，1例行ALK基因檢測(cè)，其中EGFR基因突變型4例，ALK基因無(wú)融合1例。臨床醫(yī)生根據(jù)EBUS-TBNA診斷結(jié)果及組織病理和基因分型制定相應(yīng)治療方案。以上結(jié)果證實(shí)了EBUS-TBNA是診斷肺癌的一種有效且安全的診斷方法，結(jié)合免疫組化技術(shù)及基因檢測(cè)技術(shù)可進(jìn)一步明確診斷及明確組織病理和分子分型，從而指導(dǎo)治療和評(píng)價(jià)預(yù)后。

EBUS-TBNA作為一種微創(chuàng)檢查，對(duì)縱隔及肺門腫物定性診斷及肺癌分期診斷以較高的敏感性、特異度、準(zhǔn)確性及并發(fā)癥少的優(yōu)勢(shì)已得到臨床廣泛證實(shí)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者爭(zhēng)相報(bào)道了EBUS-TBNA在肺癌或縱隔淋巴結(jié)分期中的應(yīng)用情況［8-10］，其對(duì)肺癌的診斷敏感度達(dá)88.0%～93.0%，特異度達(dá)100.0%［11］。近來(lái)一個(gè)開放、多中心、隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，EBUS-TBNA不僅較常規(guī)檢查方法具有更高的診斷價(jià)值，同時(shí)還明顯縮短診斷時(shí)間與最終決定時(shí)間的窗口期，文中還推薦該技術(shù)應(yīng)作為疑診肺癌患者的首要診斷方法［12］。

肺癌傳統(tǒng)病理分型主要為NSCLC及SCLC。近年來(lái)肺癌的個(gè)體化治療進(jìn)展特別是肺癌的靶向治療，傳統(tǒng)組織分型面臨了挑戰(zhàn)，國(guó)際肺癌研究學(xué)會(huì)已提出了肺癌新的分型標(biāo)準(zhǔn)，NSCLC應(yīng)繼續(xù)分類為腺癌和鱗癌［13］。對(duì)于手術(shù)切除的大體標(biāo)本中鱗癌和腺癌的分型，免疫組化技術(shù)并不是至關(guān)重要的，然而對(duì)于活檢的小標(biāo)本通過(guò)形態(tài)學(xué)分型困難時(shí)需要通過(guò)一些免疫組化指標(biāo)如TTF-1、p63、CK5/6等進(jìn)一步將腺癌和鱗癌區(qū)分開來(lái)［5］。LOO等［14］對(duì)經(jīng)支氣管鏡活檢的44例石臘切片且診斷為未分型NSCLC使用免疫組化技術(shù)，結(jié)果顯示p63、TTF-1對(duì)腺癌及鱗癌分型診斷有重要意義。NAVANI等［7］等報(bào)道了對(duì)774例懷疑為NSCLC患者行EBUS-TBNA檢查，通過(guò)免疫組化技術(shù)相關(guān)指標(biāo)如CK5/6、p63、TTF-1明顯提高了分型診斷率，從而減少了NSCLC中無(wú)法分型的病例比例。本組55例，37例EBUS-TBNA標(biāo)本行免疫組化檢測(cè)，29例肺癌患者明確分型，其中肺腺癌17例，肺鱗癌6例，SCLC 6例，免疫組化結(jié)果示肺腺癌細(xì)胞對(duì)CK7、TTF-1陽(yáng)性表現(xiàn)出高表達(dá)率，肺鱗癌細(xì)胞對(duì)CK5/6、p63陽(yáng)性表現(xiàn)出高表達(dá)率，SCLC細(xì)胞對(duì)Syn、CD56陽(yáng)性表現(xiàn)出高表達(dá)率，這與以往相關(guān)報(bào)道相符［15］。

肺癌惡性程度高，確診時(shí)約40.0%即為不可切除Ⅳ期肺癌［16］，而NSCLC發(fā)病率約占所有肺癌發(fā)病率的85.0%，且NSCLC中腺癌所占比例較高，達(dá)總數(shù)的50.0%［17］。晚期肺癌常規(guī)的治療方式主要化療或放療，近年來(lái)對(duì)于肺腺癌的靶向治療特別是存在EGFR激活突變的患者行酪氨酸激酶抑制劑治療已經(jīng)改變了肺癌的治療模式，EGFR基因突變狀態(tài)可預(yù)測(cè)患者的治療和預(yù)后［18-19］。相對(duì)于療效差且毒副作用大的常規(guī)化療、放療，靶向治療明顯提高了療效且不良反應(yīng)少，針對(duì)存在EGFR突變的患者行靶向治療客觀反應(yīng)率達(dá)73.7%，抗EGFR靶向治療已被推薦為EGFR突變的晚期肺癌患者一線治療方案［20］。靶向藥物雖然療效好，但價(jià)格昂貴，能針對(duì)性的行靶向治療對(duì)于提高肺癌治療療效及為節(jié)約成本尤為重要，基因檢測(cè)極大的影響著肺癌患者的治療及預(yù)后。歐洲近期的一項(xiàng)共識(shí)［21］表明EGFR基因突變檢測(cè)組織應(yīng)該使用手術(shù)大體或活檢樣本，盡可能不使用細(xì)胞標(biāo)本，對(duì)于常規(guī)檢查方法無(wú)法獲取病理及失去手術(shù)機(jī)會(huì)的晚期患者，EBUS-TBNA可獲取活檢樣本從而行進(jìn)一步行基因檢測(cè)。NAKAJIMA等［22］于2007年首次報(bào)告了對(duì)NSCLC并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者使用EBUS-TBNA檢查并將穿刺樣本行EGFR檢測(cè)的研究，隨后各研究學(xué)者陸續(xù)報(bào)道的結(jié)果中都表明了EBUS-TBNA技術(shù)是獲取用于EGFR檢測(cè)標(biāo)本的一個(gè)可信度高的重要途徑，甚至檢測(cè)率與手術(shù)大體標(biāo)本無(wú)差異［4，18，23］。CASADIO等［23］報(bào)道了經(jīng)EBUS-TBNA獲取的組織行EGFR基因檢測(cè)與手術(shù)大標(biāo)本行EGFR基因檢測(cè)，兩者檢出結(jié)果中EGFR突變率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（16.9%與14.8%，P =0.450）。本文亦對(duì)6例EBUS-TBNA組織標(biāo)本行基因檢測(cè)，檢測(cè)可行性為100.0%。但是本文中行基因檢測(cè)病例數(shù)相對(duì)較少，分析原因有以下幾點(diǎn)：①肺癌中EGFR或ALK基因突變率較高的組織類型為腺癌，其他類型突變率極低，臨床上一般對(duì)確診為肺腺癌類型才推薦行基因檢測(cè)；②行基因檢測(cè)費(fèi)用較高，且靶向治療費(fèi)用較高，部分患者因經(jīng)濟(jì)原因不愿意行基因檢測(cè)；③EBUS-TBNA是通過(guò)細(xì)針在負(fù)壓狀態(tài)下抽吸組織，部分病理取材組織樣本不足或樣本質(zhì)量不達(dá)標(biāo)無(wú)法行基因檢測(cè)。

綜上所述，EBUS-TBNA是一種有效且安全的診斷方法，對(duì)于影像學(xué)高度可疑肺癌的患者，如伴有縱隔或肺門腫大淋巴結(jié)，EBUS-TBNA可作為重要的診斷方法，且可結(jié)合免疫組化技術(shù)提高肺癌分型診斷，同時(shí)EBUS-TBNA技術(shù)取得的標(biāo)本可用于基因?qū)W突變檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果可以指導(dǎo)分子靶向治療，從而改善患者的預(yù)后。

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（吳靜 編輯）

Clinical value of EBUS-TBNA combining IHC and molecular testing in lung cancer*

Sheng Chen, Ai-qun Liu, Li-yi Liu, Xiao-ni Chen, Xin-qing YE, Hang-yan Chen
（Department of Endoscopy, Tumor Hospital Affiliated to Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi 530021, China）

Abstract:Objective To investigate the clinical value of endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration（EBUS-TBNA）combining immunohistochemisty（IHC）and molecular testing in lung cancer. Methods 55 patients with mediastinal, and/or hilar lymphadenopanthy, and/or mediastinal mass previously detected by CT or PET/CT scan and who underwent EBUS-TBNA from May 2013 and October 2015 was retrospectively reviewed. Additional immunohistological analysis was performed for establishing a reliable diagnosis when necessary. Some samples were tested for the EGFR and/or ALK mutations to provide suitable mutational genotyping for adenocarcinoma. Results Of the 55 patients, 37 primary lung cancer, 3 metastatic lung cancer, 1 soft tissue sarcoma, 1 lympoma, 1 metastatic lymph node adenocarcinoma, 4 tuberculosis and 1 reactive lymphadenitis was diagnosed by EBUS-TBNA, non-diagnosed in 7 cases. The sensitivity and diagnostic accuracy of EBUS-TBNA in the diagnosis of lung cancer were 92.5%（37/40）and 94.5%（52/55）, respectively. 29 samples were further confirmed and obtained definite type by Immunohistochemistry（IHC）, seventeen adenocarcinoma of lung, 6 lung squamous EBUS-TBNA carcinoma and 6 small cell lung cancer. 6 EBUS-TBNA samples from patients with adenocarcinoma of lung referred for EGFR testingwere analyzed, 4 patients were found to have EGFR gene mutations, ALK-negative 1 cases. The procedure was uneventful without complications. Conclusions EBUS-TBNA was a safe and effective method with high sensitivity and specificity in the diagnosis of lung cancer. Especially it combining with IHC and molecular testing have important clinical value in diagnosis and guiding the treatment strategy.

Keywords:endoscopic ultrasonography; EBUS-TBNA; IHC; molecular testing

中圖分類號(hào)：R734.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

收稿日期：2015-11-13

*基金項(xiàng)目：廣西衛(wèi)生廳自籌課題（No：2014583）；廣西醫(yī)療衛(wèi)生適宜技術(shù)研究與開發(fā)項(xiàng)目（No：S201515）

［通信作者］劉愛群，E-mail：liuaiqun_2004@163.com；Tel：0771-5310521

DOI:10.3969/j.issn.1007-1989.2016.05.002

文章編號(hào)：1007-1989（2016）05-0006-06