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(成都市婦女兒童中心醫(yī)院，四川成都 610091)

·臨床研究·

川崎病患兒外周血淋巴細(xì)胞亞群變化及臨床意義

祝絢，王雪梅，劉成桂，曹登成

(成都市婦女兒童中心醫(yī)院，四川成都 610091)

摘要:目的通過(guò)檢測(cè)川崎病(KD)患兒不同階段外周血中淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值的變化，分析其臨床意義。方法采用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)31例KD急性期(急性期組)，30例KD恢復(fù)期患兒(恢復(fù)期組)和35例健康兒童(對(duì)照組)外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+和CD56+水平，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果急性期組CD3+、CD4+、CD8+明顯低于對(duì)照組，CD19+明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；恢復(fù)期組CD3+、CD8+明顯低于對(duì)照組，CD19+明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；恢復(fù)期組CD3+、CD8+明顯高于急性期，CD19+明顯低于急性期，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CD4+/CD8+和CD56+在三組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群對(duì)評(píng)估KD患兒免疫狀況、診斷和治療具有重要的臨床價(jià)值。

關(guān)鍵詞:川崎??；淋巴細(xì)胞亞群；流式細(xì)胞術(shù)

川崎病(KD)是一種急性、自限性全身血管炎性疾病，1967年首次被日本川崎富所報(bào)道，好發(fā)于6個(gè)月至5歲的嬰幼兒，臨床表現(xiàn)為高燒、皮疹、淋巴結(jié)腫大和結(jié)膜充血，其發(fā)病機(jī)制尚不明確[1]。川崎病可引起免疫紊亂，累及冠狀動(dòng)脈，誘發(fā)心血管疾病和后天性心臟病等嚴(yán)重后遺癥，是導(dǎo)致嬰幼兒死亡的重要因素之一。隨著發(fā)病率的日益增長(zhǎng)，長(zhǎng)期以來(lái)KD缺乏特異、有效的診斷方法[2]。本文通過(guò)對(duì)KD患兒急性期、恢復(fù)期外周血淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定，并和正常兒童進(jìn)行比較，評(píng)估KD患兒免疫功能變化，為臨床對(duì)KD診斷、治療和預(yù)后提供一定幫助。

1資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2014年12月本院兒科收治的KD患兒61例，其中男39例，女22例，年齡5個(gè)月至8歲，平均(4.1±1.3)歲。采用2002年日本川崎病研究委員會(huì)第5次修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，按病程將61例KD患兒分為急性期組(病程10 d內(nèi)未經(jīng)治療)和恢復(fù)期組(病程21～28 d)，急性期組31例，恢復(fù)期組30例；對(duì)照組35例為同期門(mén)診健康體檢兒童，兩組性別和年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法分別于急性期和治療恢復(fù)期檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群。

1.3儀器和試劑采用美國(guó)BECKMAN COULTER公司CYTOMICS FC 500流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+、CD19+和CD56+水平。試劑盒由美國(guó)BECKMAN COULTER公司提供，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行。

2結(jié)果

研究結(jié)果顯示，急性期組CD3+、CD4+、CD8+明顯低于對(duì)照組，CD19+明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；恢復(fù)期組CD3+、CD8+明顯低于對(duì)照組，CD19+明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；恢復(fù)期組CD3+、CD8+明顯高于急性期，CD19+明顯低于急性期，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CD4+/CD8+和CD56+在三組中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1　　外周血細(xì)胞亞群比較±s)

*：P<0.05，與對(duì)照組比較；△：P<0.05，與急性期組比較。

3討論

川崎病是一種以高燒、皮疹、黏膜炎、淋巴結(jié)腫大伴冠狀動(dòng)脈損害和免疫紊亂為特征的嬰幼兒急性血管炎，可誘發(fā)冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張、心肌炎、后天性心臟病等嚴(yán)重并發(fā)癥，是威脅嬰幼兒健康的重要疾病之一。日本和美國(guó)做了大量流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，但其發(fā)病機(jī)制至今尚未清楚，也沒(méi)有特異性的檢測(cè)手段[2,4]，這對(duì)KD患兒的疾病診斷、病程評(píng)估、治療和預(yù)后造成一定困擾。

川崎病的早診斷、早治療對(duì)減少川崎病及其并發(fā)癥具有重要意義。雖然川崎病的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但很多研究都顯示KD發(fā)病與淋巴細(xì)胞感染密切相關(guān)。近年研究發(fā)現(xiàn)，病毒、細(xì)菌、超抗原、遺傳因素等都可能參與了KD的病理機(jī)制[1]。Burns等[4]認(rèn)為，KD患兒的血管炎和免疫紊亂可能與親淋巴細(xì)胞性病毒同時(shí)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴樣細(xì)胞存在親和性有關(guān)。通過(guò)檢測(cè)KD患兒和健康兒童外周血單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)的上清液顆粒部分發(fā)現(xiàn)，KD患兒的外周血單個(gè)核細(xì)胞上清液顆粒部分有逆轉(zhuǎn)錄病毒活化，而這種逆轉(zhuǎn)錄病毒的活化傳達(dá)到固定的T細(xì)胞系，從而證明了KD與淋巴細(xì)胞的外源感染有關(guān)。丙種球蛋白是目前治療KD的主要方法之一[2]，其作用機(jī)制可能與延緩了淋巴細(xì)胞的凋亡時(shí)間，降低了淋巴細(xì)胞凋亡比例和DNA片段有關(guān)，提示KD與自身免疫性疾病和無(wú)功能淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)[5]。而Lee等[6]的研究表明，免疫球蛋白和阿司匹林聯(lián)合治療組的患者比單獨(dú)用阿司匹林治療組的患者CD4+、CD8+和T細(xì)胞總數(shù)上升更明顯，B細(xì)胞下降更明顯，認(rèn)為丙種球蛋白對(duì)KD患兒的治療可修復(fù)T、B細(xì)胞的紊亂，特別是B細(xì)胞的紊亂。因此，外周血淋巴細(xì)胞水平變化與KD患兒病程發(fā)展密切相關(guān)，不容忽視。

淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)功能中最重要的細(xì)胞群，是反映機(jī)體免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)。當(dāng)淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異?；蜃兓瘯r(shí)，就會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫紊系統(tǒng)亂并產(chǎn)生病理變化，尤其是T淋巴細(xì)胞以及T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+的數(shù)量和相對(duì)比值的變化在免疫系統(tǒng)中占主導(dǎo)地位[7]。本研究結(jié)果顯示，KD急性期與恢復(fù)期CD3+、CD8+明顯低于正常組，CD19+明顯高于對(duì)照組。CD3+的降低說(shuō)明了T淋巴細(xì)胞總數(shù)的減少導(dǎo)致了KD患兒T細(xì)胞的異常，免疫應(yīng)答使機(jī)體免疫系統(tǒng)處于失衡狀態(tài)，特別是CD8+的明顯減少，提示作為T(mén)s細(xì)胞減少可能導(dǎo)致機(jī)體免疫系統(tǒng)的過(guò)度激活，引起細(xì)胞免疫的紊亂。另一方面，Th細(xì)胞和Ts比例在機(jī)體正常情況下維持一個(gè)相對(duì)平衡狀態(tài)，一旦這個(gè)平衡打破，機(jī)體免疫系統(tǒng)也會(huì)出現(xiàn)紊亂。雖然三組中CD4+/CD8+的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但在急性期CD4+是明顯低于正常組，到了恢復(fù)期CD4+與正常組并無(wú)差別，說(shuō)明CD4+降低的速度相對(duì)CD8+速度慢，說(shuō)明Th細(xì)胞相對(duì)Ts細(xì)胞增加，B細(xì)胞的激活又依賴于Th細(xì)胞和Ts細(xì)胞的調(diào)節(jié)，CD19+的明顯增高可能與Ts的減少伴有Th的增加有關(guān)，從而造成B細(xì)胞抑制降低，活化增加，導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)，并產(chǎn)生大量抗體，使得患兒的體液免疫發(fā)生紊亂。此外，處于恢復(fù)期的患兒CD3+、CD8+明顯高于急性期，CD4+恢復(fù)到正常，CD19+也明顯降低，說(shuō)明細(xì)胞免疫和體液免疫的紊亂無(wú)論在T淋巴細(xì)胞總數(shù)，還是Th/Ts細(xì)胞的比例以及B淋巴細(xì)胞的總數(shù)在恢復(fù)期都處于一個(gè)逐漸修復(fù)平衡的狀態(tài)，這對(duì)病程的判斷和治療有重要意義。

綜上所述，動(dòng)態(tài)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群對(duì)對(duì)評(píng)估患兒的免疫狀況、病理進(jìn)程、療效和預(yù)后有一定的幫助。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.039

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)10-1393-03

(收稿日期：2016-01-23)