陳　麗

(廣西壯族自治區(qū)百色市人民醫(yī)院檢驗科，廣西百色 533000)

·臨床研究·

不同年齡段帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化探討

陳麗

(廣西壯族自治區(qū)百色市人民醫(yī)院檢驗科，廣西百色 533000)

摘要:目的探討和研究不同年齡段帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況，提高臨床對帶狀皰疹的治療效果。方法遵照隨機(jī)數(shù)字表的方法選取64例于2014年1月至2015年1月于該院就診的帶狀皰疹患者作為研究對象并設(shè)為試驗組，同時按照相同方法選取同時間段該院56例健康體檢者作為研究對象并設(shè)為對照組，應(yīng)用流式細(xì)胞儀分別檢測兩組患者的T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+) 數(shù)量，比較兩組患者的免疫功能差異以及不同年齡段間的差異。結(jié)果試驗組患者的CD3+、CD4+、CD8+數(shù)量和對照組相比差異顯著，且試驗組患者的CD4+/CD8+比值明顯低于對照組，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；試驗組各年齡段患者之間T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+) 數(shù)量存在差異，而以老年組和青年組差異最顯著，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論帶狀皰疹患者細(xì)胞免疫功能發(fā)生顯著變化，其中以老年人細(xì)胞免疫功能降低最顯著，在治療過程中檢測患者T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量，有助于了解患者免疫功能，使治療針對性更強。

關(guān)鍵詞:帶狀皰疹；T淋巴細(xì)胞亞群；檢測

帶狀皰疹的發(fā)生和患者感染水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)密切相關(guān)，屬于臨床常見的感染性疾病之一，其中以老年人和體質(zhì)較弱者發(fā)病率最高，患者如果治療不徹底或者不及時，可能并發(fā)持續(xù)數(shù)月甚至更長時間的皰疹后遺神經(jīng)痛，給患者的工作和生活帶來巨大困擾，同時也增加了醫(yī)療資源的負(fù)擔(dān)。T淋巴細(xì)胞屬于機(jī)體中極為重要的細(xì)胞群之一，其相互間協(xié)同發(fā)揮作用并保持在平衡狀態(tài)，以維持免疫功能，但當(dāng)機(jī)體內(nèi)不同淋巴細(xì)胞亞群的細(xì)胞數(shù)量和功能發(fā)生改變時，會造成患者體內(nèi)免疫功能紊亂，并誘發(fā)一系列的病理改變，容易造成機(jī)體遭受細(xì)菌和病毒的入侵[1-3]。且臨床數(shù)據(jù)證實帶狀皰疹患者體內(nèi)的細(xì)胞免疫功能存在異常，尤其是在細(xì)胞免疫應(yīng)答方面。為了進(jìn)一步了解帶狀皰疹發(fā)病和機(jī)體免疫功能的相互聯(lián)系，對64例于2014年1月至2015年1來本院就診的帶狀皰疹患者的T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量進(jìn)行檢測，探討不同年齡段帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況。現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料遵照隨機(jī)數(shù)字表法，選取64例于2014年1月至2015年1月來本院就診的帶狀皰疹患者作為研究對象并設(shè)為試驗組，同時按照相同方法選取同時間段本院56例健康體檢人群作為研究對象并設(shè)為對照組。所有患者臨床癥狀典型；患者年齡為20～75歲，平均(58.5±8.3)歲；患病時間1～8 d,平均(2.5±0.8)d。根據(jù)患者年齡不同分為青年組(<40歲)、中年組(40～60歲)、老年組(>60歲)。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2治療方法所有入組的患者均于清晨抽取空腹靜脈血5 mL,檢測方法選取單克隆抗體雙色直接熒光標(biāo)記法。應(yīng)用5 μL熒光標(biāo)記單克隆抗體加入到50 μL的枸櫞酸鈉抗凝全血中，標(biāo)記成功后在室溫的條件下給予避光處理15 min，加入溶血素300 μL混勻室溫60 min至完全溶血，加入鞘液300 μL混勻室溫平衡20 min，再加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)熒光微球后應(yīng)用美國Beckman公司提供的FC500型流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測，每個試管采集細(xì)胞數(shù)目不低于5 000個，應(yīng)用CXP軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，同時計算不同淋巴細(xì)胞門內(nèi)各細(xì)胞的陽性率。注意每次檢測之前都要應(yīng)用質(zhì)控?zé)晒馕⑶虮O(jiān)測光路和流路是否正常，以保證所有儀器工作正常。通過對淋巴細(xì)胞群對前向散射光(FSC)和側(cè)向散射光(SSC)信號設(shè)門，在雙參數(shù)細(xì)胞點狀圖上計算各淋巴細(xì)胞所占的百分比。

2結(jié)果

2.1試驗組和對照組患者T淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果對比研究發(fā)現(xiàn)，試驗組患者的CD3+、CD4+、CD8+數(shù)量和對照組相比差異顯著，且試驗組患者的CD4+/CD8+比值明顯低于對照組，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1　　試驗組和對照組T淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果對比±s)

2.2試驗組不同年齡段患者T淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果對比研究發(fā)現(xiàn)，試驗組各年齡段患者之間T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+) 數(shù)量存在差異，而以老年組和青年組差異最顯著，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2　　試驗組不同年齡段患者T淋巴細(xì)胞亞群

3討論

帶狀皰疹和患者感染VZV密切相關(guān)，而VZV在體內(nèi)播散的強度和患者免疫系統(tǒng)對VZV的反應(yīng)速度和能力有關(guān)[4]。現(xiàn)階段普遍認(rèn)為機(jī)體對VZV產(chǎn)生的特異性免疫屬于細(xì)胞免疫。通常情況下，T細(xì)胞亞群的數(shù)量、功能以及它們之間的相互作用協(xié)同維持機(jī)體正常的免疫功能[5-6]。而帶狀皰疹患者在細(xì)胞免疫應(yīng)答中以特異性細(xì)胞免疫抑制為主。隨著流式細(xì)胞儀技術(shù)在臨床的推廣和應(yīng)用，通過此技術(shù)能夠通過T細(xì)胞亞群的數(shù)量來評判患者的機(jī)體免疫功能，有利于臨床研究帶狀皰疹病毒的發(fā)病機(jī)制[7-10]。我國目前在不斷的進(jìn)行類似的研究，且取得一定的研究成果，即帶狀皰疹病毒患者的T淋巴細(xì)胞亞群和CD4+/CD8+比值與正常人相比顯著降低[11]，而本研究顯示，試驗組患者的CD4+/CD8+比值明顯低于對照組，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這說明帶狀皰疹患者體內(nèi)的T細(xì)胞亞群數(shù)量確實會發(fā)生一定的變化，且同時伴有特異性的T細(xì)胞免疫抑制。

本研究同時顯示試驗組各年齡段患者之間T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+) 數(shù)量存在差異，而以老年組和對照組差異最顯著，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這說明在不同年齡段的患者中其T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+) 數(shù)量也有一定的差異。老年人在感染VZV后其機(jī)體免疫力會顯著減低，罹患帶狀皰疹的概率更高，而由于年輕人機(jī)體抵抗力較強，因此其臨床發(fā)病率會顯著較低[12-13]。這和日常門診接診的帶狀皰疹患者以老年人為主是相符合的，同時也說明了為什么帶狀皰疹老年患者的癥狀明顯重于年輕患者，且年輕患者預(yù)后較好。據(jù)國內(nèi)外研究數(shù)據(jù)顯示，年輕患者的T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量和正常人之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),這表明年輕人感染帶狀皰疹病毒后其誘發(fā)的細(xì)胞免疫抑制強度較弱，但這仍需要在以后的研究中去證實。臨床研究還顯示帶狀皰疹的發(fā)生和性別無關(guān)，這提示男性和女性在臨床上罹患帶狀皰疹的概率相等，這也是此次未設(shè)立對照的原因。雖然如此，但是由于統(tǒng)計學(xué)處理過程中可能會存在一定的誤差，因此對上述統(tǒng)計結(jié)果仍需要加大樣本量來進(jìn)一步驗證。

流式細(xì)胞儀檢測帶狀皰疹作為研究細(xì)胞免疫的重要方法之一，充分證明了細(xì)胞免疫抑制是造成帶狀皰疹發(fā)病的重要因素之一[14]。測定T細(xì)胞亞群有助于臨床對帶狀皰疹的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后做出正確判斷[15]。但是細(xì)胞免疫應(yīng)答在帶狀皰疹的發(fā)病中不是獨立環(huán)節(jié)，受多方面因素的共同影響，目前國外重點在研究CD4+T細(xì)胞和VZV的相互影響上。這些都證明帶狀皰疹的細(xì)胞免疫機(jī)制是十分復(fù)雜的，仍需要臨床進(jìn)一步研究和探討。

參考文獻(xiàn)

[1]劉慧松，王英，陳付強，等．神經(jīng)阻滯治療對老年帶狀皰疹預(yù)后及其T淋巴細(xì)胞亞群的影響[J]．中國醫(yī)藥指南，2012，10(31)：10-11．

[2]孫曉燕，張美芳，馬小萍，等．住院患者發(fā)生帶狀皰疹87例臨床分析[J]．中國皮膚性病學(xué)雜志，2012，26(1)：36-37．

[3]劉軍超，謝平，陳付強，等．神經(jīng)阻滯治療老年帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛及其對免疫功能的影響[J]．中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2012，18(11)：698-700．

[4]Iglar K,Kopp A,Glazier RH.Herpes zoster as a marker of underlying malignancy[J].Open Med,2013,7(2):e68-73.

[5]Haiqi H,Yong Z,Yi L.Transcriptional regulation of Foxp3 in regulatory T cells[J].Immunobiology,2011,216(6):678-685.

[6]徐雅琴，曹淑梅，于倩，等．51例帶狀皰疹患者外周血淋巴細(xì)胞亞群分析[J]．中國實驗診斷學(xué)，2014，18(4)：656-657．

[7]Choi WS,Noh JY,Huh JY,et al.Disease burden of herpes zoster in Korea[J].J Clin Virol,2010,47(4):325-329.

[8]Littman DR,Rudensky AY.Th17 and regulatory T cells in mediating and restraining inflammation[J].Cell,2010,140(6):845-858.

[9]Beres A,Komorowski R,Mihara M,et al.Instability of Foxp3 expression limits the ability of induced regulatory T cells to mitigate graft versus host disease[J].Clin Cancer Res,2011,17(12):3969-3983.

[10]Wammes LJ,Hamid F,Wiria AE,et al.Regulatory T cells in human geohelminth infection suppress immune responses to BCG and Plasmodium falciparum[J].Eur J Immunol,2010,40(2):437-442.

[11]常敏，陳付強，時飛，等．老年帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛患者外周血CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的檢測[J]．中國皮膚性病學(xué)雜志，2014，28(5)：457-460．

[12]張?zhí)K瑞，牛莉婭，毛俊濤，等．T淋巴細(xì)胞亞群水平與帶狀皰疹病情發(fā)展的相關(guān)性分析[J]．臨床合理用藥雜志，2014，7(12A)：131-132．

[13]鐘世玉，張美芳．T細(xì)胞免疫在帶狀皰疹發(fā)病及治療中的作用[J]．國際皮膚性病學(xué)雜志，2011，37(1)：10-13．

[14]周海林，蔣法興．197例帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的測定[J]．安徽醫(yī)學(xué)，2014，35(4)：485-487．

[15]韓科，龍福泉，陳忠英，等．帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的檢測及探討[J]．廣東醫(yī)學(xué)，2010，31(21)：2813-2814．

△通訊作者,E-mail：yangwenling@tjbc.org.cn。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.060

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)10-1431-02

(收稿日期：2016-01-10)