李婷婷，郭媛，張建寧，劉天驕，李俊，張運(yùn)

?

艾賽布考抑制兔動(dòng)脈粥樣硬化的作用及可能機(jī)制

李婷婷，郭媛，張建寧，劉天驕，李俊，張運(yùn)

摘要

目的：艾賽布考是普羅布考代謝穩(wěn)定的衍生物，具有抗氧化、抗炎、抗增殖特性。本研究旨在探討艾賽布考對(duì)高膽固醇血癥兔腹主動(dòng)脈損傷后動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的影響。

方法：45只雄性新西蘭兔隨機(jī)分為對(duì)照組、艾賽布考組、普羅布考組3組，每組15只，分別給予高脂飲食（對(duì)照組），高脂飲食+1%艾賽布考（艾賽布考組）或1%普羅布考（普羅布考組），2周后，行腹主動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷術(shù)，繼續(xù)藥物干預(yù)10周。12周末，行血管內(nèi)超聲評(píng)價(jià)三組兔腹主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積和斑塊負(fù)荷；通過(guò)免疫組織化學(xué)法觀察斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞的含量，免疫組織化學(xué)法、實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)分別檢測(cè)斑塊組織內(nèi)炎癥因子細(xì)胞間黏附分子-1、單核細(xì)胞趨化蛋白-1、基質(zhì)金屬蛋白酶-9蛋白及信使核糖核酸的表達(dá)。

結(jié)果：與對(duì)照組相比，艾賽布考組兔血中低密度脂蛋白膽固醇及氧化應(yīng)激水平顯著降低，腹主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞含量及炎癥因子表達(dá)也降低，斑塊面積及斑塊負(fù)荷顯著減少（P均＜0.01）。與普羅布考組相比，艾賽布考組兔腹主動(dòng)脈斑塊面積及斑塊負(fù)荷降低更加顯著，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。

結(jié)論：艾賽布考通過(guò)調(diào)脂、抗炎、抗氧化作用，抑制內(nèi)膜損傷后動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展。

關(guān)鍵詞動(dòng)脈粥樣硬化；高脂血癥；動(dòng)脈損傷；氧化性應(yīng)激

作者單位：250012山東省濟(jì)南市，山東大學(xué)齊魯醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科（李婷婷、李?。?，心內(nèi)科（郭媛、劉天驕、張運(yùn)），重癥監(jiān)護(hù)室（張建寧）

Effect and Possible Mechanism of Elsibucol Inhibiting Atherosclerosis in Experimental Rabbits

LI Ting-ting，GUO Yuan，ZHANG Jian-ning，LIU Tian-jiao，LI Jun，ZHANG Yun.
Department of Geriatrics，Shandong University Qilu Hospital，Jinan （250012），Shandong，China

Abstract

Objective：Elsibucol is a metabolically stable derivative of probucol with the properties of anti-oxidation，anti-inflammation and anti-proliferation.We want to explore the effect of elsibucol on abdominal aorta injury in hypercholesterolemia rabbits.

Methods：A total of 45 male New Zealand rabbits were divided into 3 groups：Control group，the rabbits were fed by high cholesterol diet，Elsibucol group，the rabbits received high cholesterol diet with 1% elsibucol and Probucol group，the rabbits received high cholesterol diet with 1% probucol.n=15 in each group.All animals were treated for 2 weeks followed by the procedure of abdominal aortic balloon injury and then，drug therapy was continued for 10 weeks.The area and load of atherosclerosis in abdominal aorta were evaluated by IVUS，the amount of macrophages in plaque were observed by immunohistochemistry，mRNA and protein expressions of MCP-1，MMP-9 were examined by RT-PCR and immunohistochemistry.

Results：Compared with Control group，Elsibucol group showed decreased blood LDL-C and oxidative stress，decreased amount of macrophages and lower expression of inflammatory factors in atherosclerosis plaque，reduced plaque area and load，all P＜0.01.Compared with Probucol group，Elsibucol group presented even lower plaque area and load，all P＜0.01.

Conclusion：Elsibucol inhibits the progress of atherosclerosis in experimental rabbits via regulating blood lipids，antiinflammation and anti-oxidation.

Key wordsAtherosclerosis； Hyperlipidemias； Artery injuries； Oxidative stress

（Chinese Circulation Journal，2016，31：449.）

動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是目前對(duì)人類健康影響最嚴(yán)重、最常見(jiàn)的慢性病之一，是冠心病、腦血管病和血栓栓塞性疾病等缺血性心腦血管病的主要病理基礎(chǔ)［1］。到目前為止，AS 的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，以致臨床缺乏有效的防治藥物［2］。大量的基礎(chǔ)和臨床研究表明，AS的發(fā)生可能為脂質(zhì)代謝紊亂、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、平滑肌細(xì)胞激活等多種機(jī)制相互作用的結(jié)果。因此，深入探討AS的發(fā)病機(jī)制，尋找能夠同時(shí)作用于AS進(jìn)程中多種因素的新的治療策略，對(duì)AS的防治具有重要意義。

普羅布考（丙丁酚）是美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局唯一認(rèn)證的抗氧化藥物，作為調(diào)血脂藥于1977年首先在美國(guó)上市，近年發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、降脂外的其他作用，如抗炎癥、抑制平滑肌細(xì)胞增殖等［3］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，普羅布考可抑制球囊損傷后豬冠狀動(dòng)脈及大鼠、兔頸動(dòng)脈新生內(nèi)膜增殖［4-6］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，普羅布考能夠抑制頸AS斑塊的進(jìn)展［7］，抑制冠狀動(dòng)脈成形術(shù)后再狹窄［8］。本課題組前期研究通過(guò)建立兔AS易損斑塊模型，發(fā)現(xiàn)普羅布考能夠降低斑塊內(nèi)炎癥反應(yīng)及平滑肌細(xì)胞凋亡，抑制AS進(jìn)展，增強(qiáng)斑塊穩(wěn)定性［9］。然而，因其降低高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、延長(zhǎng) QT 間期的不良反應(yīng)，普羅布考在臨床的長(zhǎng)期應(yīng)用受到限制［3，10］。艾賽布考（AGI-1096）是普羅布考代謝穩(wěn)定的衍生物［11］，其對(duì)普羅布考的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，保留了普羅布考的抗氧化特性，而對(duì)HDL-C和QT間期沒(méi)有不良影響［12］。艾賽布考最初被用于抑制器官移植排斥反應(yīng)，其在體外被證明具有抗炎、抗增殖作用，從而抑制主動(dòng)脈移植模型的血管病變［13］。本研究利用高脂喂養(yǎng)+球囊損傷腹主動(dòng)脈建立兔AS模型，觀察艾賽布考對(duì)血管損傷后粥樣硬化斑塊形成的影響，并闡明其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性純種新西蘭大白兔45只，體重1.6～2.0 kg，購(gòu)于山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。

主要試劑與儀器：普羅布考（北京諾華醫(yī)藥公司贈(zèng)送）；艾賽布考（Astellas Pharma，日本）；超氧化物岐化酶（SOD）試劑盒、丙二醛試劑盒（南京建成生物工程研究所產(chǎn)品）；氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒（美國(guó)A﹠D 公司產(chǎn)品）；小鼠抗兔巨噬細(xì)胞單克隆抗體（RAM11，丹麥 DAKO 公司產(chǎn)品）；鏈霉親和素/過(guò)氧化物酶（SP）試劑盒和二氨基聯(lián)苯胺染色試劑（購(gòu)自北京中杉生物試劑有限公司）；核糖核酸（RNA）提取試劑 TRIZOL（購(gòu)自美國(guó) Invitrogen 公司）；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒及 SYBR 實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RTPCR）Kit DRR045S（美國(guó) Promega 公司和 Takara 大連寶生物工程有限公司產(chǎn)品）。美國(guó)波士頓Galaxy血管內(nèi)超聲（IVUS），探頭頻率為40 MHz。

兔AS模型的建立及藥物干預(yù)：45只新西蘭兔飼養(yǎng)觀察2周后，隨機(jī)分為對(duì)照組、艾賽布考組、普羅布考組，每組15只，高脂對(duì)照組給予高脂飼料（1%膽固醇，5%豬油，100 g/d）喂養(yǎng)，艾賽布考組、普羅布考組在高脂飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上分別給予1% w/w（1 g/d） 艾賽布考和1% w/w（1 g/d）普羅布考［9，14］，持續(xù)12周。高脂喂養(yǎng)2周后行腹主動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷術(shù)。戊巴比妥鈉（3%，30 mg/kg） 麻醉動(dòng)物后，穿刺右股動(dòng)脈，沿0.014導(dǎo) 絲 將 內(nèi) 徑3.5 mm、長(zhǎng)15 mm的球囊導(dǎo)管送入腹主動(dòng)脈約20 cm，8個(gè)大氣壓充盈球囊并緩慢回拉球囊平切口處，反復(fù)回拉3次，以造成腹主動(dòng)脈內(nèi)膜損傷。

IVUS檢查：于12周末動(dòng)物處死前行IVUS檢查，操作如下：常規(guī)應(yīng)用4 F穿刺針穿刺左股動(dòng)脈，在0.014英寸導(dǎo)引鋼絲及擴(kuò)張管輔助下，插入5 F鞘管，固定，立即按100 U/kg給予肝素靜注抗凝，沿導(dǎo)引鋼絲在體表血管超聲的引導(dǎo)下，插入IVUS探頭導(dǎo)管，通過(guò)左股動(dòng)脈至主動(dòng)脈弓，然后以0.5 mm/s的速度回撤探頭導(dǎo)管并記錄圖像，錄像供脫機(jī)分析和存檔。測(cè)量指標(biāo)：血管外彈力膜面積（EEMA）、管腔面積（LA）、斑塊面積（PA），按照公式計(jì)算斑塊負(fù)荷（PB）。

生化檢測(cè)血脂水平及氧化指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)?zāi)┛崭钩槿?shí)驗(yàn)兔耳中動(dòng)脈血液，應(yīng)用自動(dòng)生化分析儀（Roche Hitachi 917，日本）檢測(cè)血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、HDL-C水平，并計(jì)算低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，由本院檢驗(yàn)科專人質(zhì)控完成；夾心ELISA測(cè)定血清 ox-LDL含量；用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)總 SOD 活性；硫代巴比妥酸反應(yīng)法測(cè)定血清丙二醛含量。操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

免疫組織化學(xué)檢測(cè)兔腹主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞及炎癥因子：分離動(dòng)物腹主動(dòng)脈，制成4 μm厚的石蠟切片，抗原修復(fù)，3% H2O2處理10 min，5%正常山羊血清封閉，室溫孵育20 min后，滴加適當(dāng)稀釋的巨噬細(xì)胞（RAM11）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）一抗工作液，4℃過(guò)夜，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗室溫1 h，二氨基聯(lián)苯胺顯色，陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色。采用 Image-Pro Plus 5.0圖像分析軟件測(cè)量斑塊內(nèi)陽(yáng)性染色面積及陽(yáng)性染色面積占內(nèi)膜面積的比例。每個(gè)樣本取4～5 張切片的平均值。

RT-PCR檢測(cè)斑塊內(nèi)ICAM、MMP-9和MCP-1信使核糖核酸（mRNA）的表達(dá)：分別抽提3組腹主動(dòng)脈組織總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)定其A260/ A280，計(jì)算RNA純度。根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒的要求逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，Light Cycler擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增，通過(guò)檢測(cè)PCR反應(yīng)液中SYBR GreenⅠ的熒光信號(hào)強(qiáng)度來(lái)實(shí)時(shí)定量 PCR反應(yīng)。所有引物均參照Gene-bank提供的序列，用Primer 5.0合成，由上海生物工程公司合成。MMP-9的引物序列：上游5'-TGTGTCTTCCCCTTCGTCTTCC-3'，下游5'-GCCCCACTTCTTGTCGCTG T-3'；ICAM 的引物序列：上游5'-AACCGG AAGGTGTATGAACTG-3'，下游 5'-GGAGGTGTTCTCAAACAGCTC-3'；MCP-1 的引物序列：上游 5'-CAGCCAGATGCCGTGAA-3'，下游5'-CGGTCACCCTTC TCCAACT-3'；甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）的引物序列：上游 5'-GAGCTGAACGGGAAACTCA C-3'，下游5'-TTGGGTTGTGGAATAAGAGGT-3'。通過(guò)計(jì)算機(jī)中分析軟件得出PCR產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出目的基因與內(nèi)參基因GAPDH擴(kuò)增產(chǎn)物的濃度比，用以表示目的基因的相對(duì)表達(dá)量。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用單因素方差分析（ANOVA），組間兩兩比較采用最小顯著差異t（LSD-t）檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組兔血脂水平比較（表1）：與對(duì)照組相比，艾賽布考組兔TC及 LDL-C水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01），普羅布考組TC及LDL-C有所降低，但差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。三組間TG水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，普羅布考組HDL-C水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而艾賽布考組HDL-C水平有所降低，但差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1　三組兔血脂水平比較（mmol/L，±s，n=15）

表1　三組兔血脂水平比較（mmol/L，±s，n=15）

注：TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇。與對(duì)照組比較*P＜0.01

組別　TC　TG　HDL-C　LDL-C對(duì)照組　28.35±5.24　3.21±0.60　1.98±0.40　24.32±5.02艾賽布考組　17.07±3.89*　2.98±0.51　1.89±0.42　14.12±4.24*普羅布考組　23.78±5.51　3.44±0.68　1.15±0.28*20.87±4.89

三組兔血清 SOD、丙二醛及ox-LDL水平（表2）：與對(duì)照組比較，艾賽布考組及普羅布考組兔血清SOD活性升高，血清丙二醛和ox-LDL含量降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。

表2　三組兔血清 SOD、丙二醛及 ox-LDL水平比較（±s，n=15）

表2　三組兔血清 SOD、丙二醛及 ox-LDL水平比較（±s，n=15）

注：SOD：超氧化物岐化酶；ox-LDL：氧化型低密度脂蛋白。與對(duì)照組比較*P＜0.01

組別　SOD （kU/L）　丙二醛 （μmol/L）ox-LDL （μg/L）對(duì)照組　76.25±12.31　8.08±1.23　158.38±18.41艾賽布考組　128.36±13.24*　4.90±0.83*　94.60±14.51*普羅布考組　115.40±14.37*　4.25±0.95*　103.76±15.83*

IVUS測(cè)量三組兔腹主動(dòng)脈斑塊面積、斑塊負(fù)荷（表3、圖1）：定量IVUS分析表明，與對(duì)照組相比，艾賽布考組及普羅布考組兔病變血管的外彈力膜面積、斑塊面積及斑塊負(fù)荷顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。與普羅布考相比，艾賽布考組兔腹主動(dòng)脈斑塊面積及斑塊負(fù)荷降低更加顯著，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。

表3　三組兔血管內(nèi)超聲檢測(cè)指標(biāo)比較（±s，n=15）

表3　三組兔血管內(nèi)超聲檢測(cè)指標(biāo)比較（±s，n=15）

注：EEMA：外彈力膜面積；LA：管腔面積；PA：斑塊面積；PB：斑塊負(fù)荷。與對(duì)照組比較*P＜0.01；與普羅布考組比較△P＜0.01

組別　EEMA （mm2）LA （mm2）　PA （mm2）　PB （%）對(duì)照組　11.02±1.31　6.79±1.09　3.83±0.50　34.75±6.15艾賽布考組　8.89±1.24*　7.54±1.33　1.35±0.31*△　15.19±3.03*△普羅布考組　8.53±1.05*　6.57±1.37　1.96±0.37*　22.98±4.12*

圖1　血管內(nèi)超聲檢測(cè)下三組兔腹主動(dòng)脈斑塊形態(tài)

三組兔腹主動(dòng)脈斑塊中巨噬細(xì)胞含量比較（圖2）：與對(duì)照組［（33.45±5.77）%］相比，艾賽布考組［（10.02±2.56）%］及普羅布考組［（15.45±3.46）%］兔腹主動(dòng)脈斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞的含量均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。

圖2　免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)三組兔腹主動(dòng)脈斑塊中巨噬細(xì)胞含量（×400）

三組兔腹主動(dòng)脈斑塊中ICAM-1、MCP-1 和MMP-9表達(dá)水平比較（圖3）：免疫組織化學(xué)染色可見(jiàn)，對(duì)照組兔腹主動(dòng)脈粥樣斑塊內(nèi)有明顯的ICAM-1、MCP-1 和MMP-9的表達(dá)，主要存在于內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、泡沫細(xì)胞的細(xì)胞漿及細(xì)胞膜上。與對(duì)照組相比，艾賽布考組及普羅布考組兔腹主動(dòng)脈斑塊內(nèi)ICAM-1［依次為（24.61±3.89）%、（11.32±3.04）%、（13.47±3.22）%］、MCP-1［依次為（20.89±3.78）%、（9.45±2.55）%、（11.07±2.31）%］、MMP-9［依次為（30.72±5.60）%、（15.34±4.56）%、（12.97±4.21）%］陽(yáng)性染色強(qiáng)度及面積百分率顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。

圖3　免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)三組兔腹主動(dòng)脈斑塊中炎癥因子的表達(dá)（×400）

三組兔腹主動(dòng)脈斑塊內(nèi)ICAM、MMP-9 和MCP-1 mRNA表達(dá)比較（圖4）：與 對(duì) 照 組 相 比，艾賽布考組及普 羅 布 考 組 兔腹主動(dòng)脈 斑 塊 內(nèi)ICAM-1、MMP-9 和MCP-1 mRNA的表達(dá)量明顯降低（P均＜0.01）。

圖4　實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)三組兔腹主動(dòng)脈斑塊組織ICAM-1、MCP-1 和MMP-9 mRNA的表達(dá)（n=15）

3 討論

盡管近年血管介入技術(shù)飛速發(fā)展，血運(yùn)重建技術(shù)如冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)（CABG）和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療（PCI）在治療晚期冠狀動(dòng)脈粥樣硬化中常規(guī)應(yīng)用，但從根本上抑制AS進(jìn)程的方法仍非常有限。以降低LDL-C為治療基礎(chǔ)的他汀類藥物已經(jīng)證明能夠促進(jìn)AS病變的消退［15］，但是PROVE-IT研究發(fā)現(xiàn)，盡管接受強(qiáng)化他汀治療2年，納入的患者中仍有22.4%發(fā)生急性冠狀動(dòng)脈事件［16］。另外，他汀類藥物有肝酶升高、肌溶解等不良作用，限制其在部分患者的應(yīng)用［17］。因此，尋找能夠限制AS病變發(fā)生發(fā)展，甚至促使AS病變消退的治療新策略，仍然是臨床上亟待解決的問(wèn)題。艾賽布考是普羅布考代謝穩(wěn)定的衍生物，最初用于預(yù)防免疫介導(dǎo)的器官移植排斥，其具有抗炎和體外抗增殖特性，可防止移植物血管疾?。?6］。本研究發(fā)現(xiàn)，艾賽布考可降低AS模型兔血膽固醇含量，抑制腹主動(dòng)脈斑塊內(nèi)炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)，抑制AS發(fā)生、發(fā)展。

迄今為止，大多數(shù)全身性應(yīng)用的常規(guī)藥物未能抑制AS或再狹窄，普羅布考是一個(gè)例外，其除具有降低膽固醇的作用外，還具有抗氧化、抗炎癥等特性，多項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)包括本課題組的前期研究表明，普羅布考能夠抑制AS進(jìn)展，臨床試驗(yàn)證實(shí)其能夠防止冠狀動(dòng)脈支架置入術(shù)后再狹窄。然而，因其降低HDL-C、延長(zhǎng)QT間期的副作用，普羅布考的臨床應(yīng)用受到限制。因此，研究人員對(duì)普羅布考的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，研制出新的衍生物，以保留普羅布考的抗氧化特性，去除對(duì)HDL-C和QT間期不良影響。本研究結(jié)果表明，艾賽布考能顯著抑制高膽固醇血癥兔動(dòng)脈損傷后斑塊的形成，且其作用比普羅布考更為有效。在降低TC和LDL-C水平方面，艾賽布考的作用比普羅布考更為顯著，且對(duì)HDL-C沒(méi)有顯著影響。這意味著艾賽布考具有潛在的臨床應(yīng)用前景，因?yàn)樵贏RISE研究中普羅布考的另一衍生物琥珀布考（succinobucol或AGI-1067）與升高的LDL-C水平相關(guān)，且對(duì)主要心血管終點(diǎn)無(wú)改善作用［18］。

除了其降低血膽固醇水平的作用，本研究發(fā)現(xiàn)，艾賽布考具有多方面的血管保護(hù)作用。有研究表明艾賽布考可以抑制體外H2O2刺激細(xì)胞的ROS形成［13］。同樣，我們的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，艾賽布考增加AS兔血SOD酶活力水平，降低丙二醛、ox-LDL含量，進(jìn)一步證明艾賽布考具有抗氧化特性。另外，與對(duì)照組相比，艾賽布考組斑塊組織內(nèi)ICAM-1、MCP-1、MMP-9 mRNA和蛋白水平顯著降低，提示其可通過(guò)其抗炎作用來(lái)抑制 AS 的進(jìn)展。與此結(jié)果一致的是，體外實(shí)驗(yàn)表明艾賽布考抑制人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞血管細(xì)胞黏附分子-1、E-選擇素和MCP-1的表達(dá)［13］。我們的研究結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，艾賽布考具有抗炎、抗氧化的血管保護(hù)作用。鑒于炎癥和氧化應(yīng)激在內(nèi)皮功能障礙和血管疾病發(fā)展中的重要地位［2］，我們的結(jié)果表明，艾賽布考可能成為抑制AS病變進(jìn)展的有力治療工具。

綜上所述，艾賽布考具有抗 AS進(jìn)展的作用，其效應(yīng)不僅歸功于降脂作用，還與其抗氧化、抗炎癥作用有關(guān)。與他汀類調(diào)脂藥不同，艾賽布考不會(huì)引起肌病和肝酶升高，且沒(méi)有普羅布考降低HDL-C、延長(zhǎng)QT間期的副作用，在AS的防治方面具有良好的臨床應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)

［1］Hansson GK.Inflammation，atherosclerosis，and coronary artery disease.N Engl J Med，2005，353：429-430.

［2］Ross R.The pathogenesis of atherosclerosis：a perspective for the 1 990s.Nature，1993，362：801-809.

［3］Yamashita S，Matsuzawa Y.Where are we with probucol：a new life for an old drug？ Atherosclerosis，2009，207：16-23.

［4］Schneider JE，Berk BC，Gravanis MB，et al.Probucol decreases neointimal formation in a swine model of coronary artery balloon injury.A possible role for antioxidants in restenosis.Circulation，1993，88：628-637.

［5］Ishizaka N，Kurokawa K，Taguchi J，et al.Inhibitory effect of a single local probucol administration on neointimal formation in ballooninjured rat carotid artery.Atherosclerosis，1995，118：53-56.

［6］Shinomiya M，Shirai K，Saito Y，et al.Inhibition of intimal thickening of the carotid artery of rabbits and of outgrowth of explants of aorta by probucol.Atherosclerosis，1992，97：143-148.

［7］Sawayama Y，Shimizu C，Maeda N，et al.Effects of probucol and pravastatin on common carotid atherosclerosis in patients with asymptomatic hypercholesterolemia.Fukuoka Atherosclerosis Trial （FAST）.J Am Coll Cardiol，2002，39：610-616.

［8］Tardif JC，Cote G，Lesperance J，et al.Probucol and multivitamins in the prevention of restenosis after coronary angioplasty.Multivitamins and Probucol Study Group.N Engl J Med，1997，337：365-372.

［9］Li T，Chen W，An F，et al.Probucol attenuates inflammation and increases stability of vulnerable atherosclerotic plaques in rabbits.Tohoku J Exp Med，2011，225：23-34.

［10］Klein L.QT-interval prolongation produced by probucol.Arch Intern Med，1981，141：1102-1103.

［11］Shizuya Y，Daisaku M，Yuji M.Did we abandon probucol too soon？Curr Opin Lipidol，2015，26：304-316.

［12］Meng CQ，Somers PK，Rachita CL，et al.Novel phenolic antioxidants as multifunctional inhibitors of inducible VCAM-1 expression for use in atherosclerosis.Bioorg Med Chem Lett，2002，12：2545-2548.

［13］Murata S，Sundell CL，Lijkwan MA，et al.Effects of AGI-1096，a novel antioxidant compound with anti-inflammatory and antiproliferative properties，on rodent allograft arteriosclerosis.Transplantation，2004，77：1494-1500.

［14］Wu BJ，Kathir K，Witting PK，et al.Antioxidants protect from atherosclerosis by a heme oxygenase-1 pathway that is independent of free radical scavenging.J Exp Med，2006，203：1117-1127.

［15］Arsenault BJ，Kritikou EA，Tardif JC.Regression of atherosclerosis.Curr Cardiol Rep，2012，14：443-449.

［16］Gibson CM，Pride YB，Hochberg CP，et al.Effect of intensive statin therapy on clinical outcomes among patients undergoing percutaneous coronary intervention for acute coronary syndrome.PCI-PROVE IT：A PROVE IT-TIMI 22 （Pravastatin or Atorvastatin Evaluation and Infection Therapy-Thrombolysis In Myocardial Infarction22）Substudy.J Am Coll Cardiol，2009，54：2290-2295.

［17］Alsheikh-Ali AA，Maddukuri PV，Han H，et al.Effect of the magnitude of lipid lowering on risk of elevated liver enzymes，rhabdomyolysis，and cancer：insights from large randomized statin trials.J Am Coll Cardiol，2007，50：409-418.

［18］Tardif JC，McMurray JJ，Klug E，et al.Effects of succinobucol （AGI-1067） after an acute coronary syndrome：a randomised，double-blind，placebo-controlled trial.Lancet，2008，371：1761-1768.

（編輯：朱柳媛）

作者簡(jiǎn)介：李婷婷碩士研究生主要從事冠心病基礎(chǔ)與臨床研究Email：shandonglitingting@163.com通訊作者：郭媛Email：guoyuan9092@ 163.com

中圖分類號(hào)：R541.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-3614（2016）05-0449-05

doi：10.3969/j.issn.1000-3614.2016.05.008

Corresponding Author：GUO Yuan，Email：guoyuan9092@ 163.com

收稿日期：（2015-09-30）