劉 燕，陶月英，陳 積，陳澤慧，胡姍姍，錢(qián) 英，田應(yīng)彪

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 藥劑科，貴州 遵義 563099；3.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，貴州 遵義 563099；4.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 藥物臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，貴州 遵義 563009)

技術(shù)與方法

膽石六號(hào)顆粒劑成型工藝研究

劉 燕1，陶月英1，陳 積1，陳澤慧3，胡姍姍4，錢(qián) 英2，田應(yīng)彪2

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 藥劑科，貴州 遵義 563099；3.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，貴州 遵義 563099；4.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 藥物臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，貴州 遵義 563009)

目的 優(yōu)選膽石六號(hào)顆粒的成型工藝。方法 以顆粒劑的成型率、吸濕率、流動(dòng)性為考察指標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)確定輔料種類(lèi)，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化輔料量、輔料配比及潤(rùn)濕劑乙醇體積分?jǐn)?shù)等成型工藝參數(shù)。結(jié)果 正交試驗(yàn)優(yōu)選的最佳成型工藝為輔料配比糊精∶甘露醇為2∶1，主藥與輔料配比為1∶2，潤(rùn)濕劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)80%。結(jié)論 正交試驗(yàn)法優(yōu)選得到的膽石六號(hào)顆粒成型工藝穩(wěn)定可行，其具有流動(dòng)性好、抗吸濕性強(qiáng)、合格率高的特征，為該制劑的生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

膽石六號(hào)顆粒；成型工藝；正交試驗(yàn)

膽囊炎、膽結(jié)石是常見(jiàn)的膽道系統(tǒng)疾病，位居腹部外科疾病中的第二位，其發(fā)病率僅次于急性闌尾炎[1]，目前，本病的治療主要采用手術(shù)治療和藥物治療，由于手術(shù)治療的適應(yīng)癥受到患者身體狀況、術(shù)后綜合癥的限制，而中醫(yī)藥的治療在術(shù)前準(zhǔn)備和術(shù)后恢復(fù)都發(fā)揮了積極的療效。膽石六號(hào)顆粒處方為遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院的臨床經(jīng)驗(yàn)方，由金錢(qián)草、木香、虎杖、大黃、梔子、延胡索、芒硝、枳殼8味中藥組成，其方中金錢(qián)草疏肝利膽、利濕退黃為君藥，木香、延胡索行氣止痛，大黃泄下為其臣藥，虎杖、芒硝、枳殼瀉下通腑、梔子清熱利濕，助金錢(qián)草利濕退黃，為佐藥。該復(fù)方制劑具有消炎、利膽、解熱的功效，主要用于治療膽囊炎、肝膽系統(tǒng)結(jié)石。該方以湯劑形式在臨床應(yīng)用多年，療效確切[2-3]，長(zhǎng)期用藥較安全[4]，且具有保護(hù)肝功能的潛在作用[5],但湯劑存在服用量大、易發(fā)霉、不便攜帶等問(wèn)題，擬將其開(kāi)發(fā)為利于患者服用，載藥量大的中藥顆粒劑。本復(fù)方的提取、純化、干燥等工藝前期已經(jīng)完成，本實(shí)驗(yàn)采用正交試驗(yàn)法對(duì)其成型工藝進(jìn)行優(yōu)化，以顆粒劑的成型率、吸濕率和流動(dòng)性的綜合評(píng)分為指標(biāo)，對(duì)混合輔料比例、浸輔比和乙醇體積分?jǐn)?shù)進(jìn)行篩選，為該制劑的開(kāi)發(fā)和利用提供參考，現(xiàn)將該復(fù)方的成型性工藝研究報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 101-4電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；ME204E萬(wàn)分之一電子天平(梅勒特—托利多儀器上海有限公司)；標(biāo)準(zhǔn)藥典篩，膽石六號(hào)浸膏粉(自制，批號(hào)20160820)；可溶性淀粉、糊精、溴化鈉、氯化鉀、碳酸鉀、乙酸鉀、硝酸鋁、亞硝酸鈉、氯化鈉、氯化鎂(均購(gòu)自成都市科龍化工試劑廠)；甘露醇(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；水為蒸餾水，乙醇為分析純。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 顆粒劑的制備按處方量稱(chēng)取金錢(qián)草、木香、大黃、梔子等藥材，以12倍量的水煎煮3次，每次1 h，提取液合并，過(guò)濾，80 ℃減壓濃縮至相對(duì)密度1.05～1.10(70～80 ℃)的清膏。清膏加95%的乙醇使含醇量達(dá)50%，于4 ℃下靜置18 h，取出，過(guò)濾，上清液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.25(70～80 ℃)的稠膏。稠膏置60 ℃烘箱中干燥后，粉碎，過(guò)80目篩，得浸膏粉。浸膏粉與輔料按一定比例混勻，以體積分?jǐn)?shù)80%的乙醇為潤(rùn)濕劑制軟材，14目篩制粒，60 ℃干燥，整理，即得。

1.2.2 評(píng)價(jià)指標(biāo)的測(cè)定按2015版《中國(guó)藥典》第4部規(guī)定及參考相關(guān)文獻(xiàn)[6-7]，以顆粒劑成型率、吸濕率和流動(dòng)性的綜合評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)其顆粒劑進(jìn)行考察。

成型率[8]：按2015年版《中國(guó)藥典》附錄IC法進(jìn)行測(cè)定，選用內(nèi)控指標(biāo)為10～80目的顆粒為合格顆粒。以合格顆粒量除以總顆粒量即為成型率。成型率(%)=能通過(guò)一號(hào)篩和不能通過(guò)五號(hào)篩的顆粒重/制得顆粒重×100%。

吸濕率的測(cè)定[9]：取制得的顆粒，在恒重的稱(chēng)量瓶中放入恒重的顆粒，精密稱(chēng)定，置于底部放有氯化鈉過(guò)飽和溶液的干燥器(相對(duì)濕度為75%)，48 h后取出，稱(chēng)其重量，計(jì)算吸濕率。吸濕百分率(%) =(吸濕后重量-吸濕前重量)/吸濕前重量×100%。

流動(dòng)性的測(cè)定[10-11]：以顆粒休止角進(jìn)行評(píng)價(jià)，采用固定漏斗法測(cè)定，用鐵架臺(tái)將3只漏斗固定且串聯(lián)放置，使其距離水平桌面放置的坐標(biāo)紙上適量高度處，使漏斗下口距坐標(biāo)紙的距離為H，小心將樣品顆粒沿最上面的漏斗壁緩緩倒入，直到最下面漏斗藥粉的圓錐尖端接觸到漏斗口為止，測(cè)量坐標(biāo)紙上推起的圓錐體底部半徑為R，計(jì)算出休止角(α=ArctgH/R)。

1.2.3 單因素試驗(yàn)考察輔料種類(lèi)的篩選：本實(shí)驗(yàn)選用中藥顆粒劑常用輔料[12](糊精、可溶性淀粉、甘露醇等)進(jìn)行篩選，按浸輔比1∶2進(jìn)行考察。在浸膏粉與各輔料混勻制粒時(shí)，都有粘網(wǎng)現(xiàn)象，而當(dāng)浸膏粉與混合輔料制粒時(shí)，能明顯改善此現(xiàn)象，且與糊精、甘露醇為輔料制粒時(shí)，其成型率高，吸濕率較小，故選糊精與甘露醇作為膽石六號(hào)顆粒的輔料。

乙醇體積分?jǐn)?shù)的篩選：以糊精、甘露醇為輔料，稱(chēng)取浸膏粉與混合輔料1∶2的比例5份混合均勻，加入一定量不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇為潤(rùn)濕劑制軟材，過(guò)14目篩，制粒，60 ℃烘干，整粒。觀察軟材性狀，過(guò)篩難易、顆粒性狀等情況，并以此為指標(biāo)考察乙醇不同體積分?jǐn)?shù)的制粒情況。發(fā)現(xiàn)50%、60%乙醇作為潤(rùn)濕劑時(shí)，軟材較濕黏，有少量結(jié)塊，過(guò)篩難，所制顆粒黏結(jié)成團(tuán)；70%乙醇為潤(rùn)濕劑時(shí)，軟材較黏，過(guò)篩難，所制顆粒黏結(jié)成團(tuán)，有少量條狀顆粒；以80%乙醇為潤(rùn)濕劑時(shí)，軟材握之成團(tuán)，壓之即散，過(guò)篩易，所制顆粒呈疏松小團(tuán)，觸之即散；以90%乙醇為潤(rùn)濕劑時(shí)，軟材干散，過(guò)篩易，所制顆粒細(xì)粉較多。以上結(jié)果可知，以80%乙醇為潤(rùn)濕劑時(shí)制粒效果最好，所以選擇80%乙醇為潤(rùn)濕劑。

1.2.4 正交設(shè)計(jì)篩選最優(yōu)條件通過(guò)單因素試驗(yàn)及查閱相關(guān)文獻(xiàn)[13]，以混合輔料比例、浸膏粉與輔料比例、乙醇體積分?jǐn)?shù)為考察因素，以成型率、吸濕率及流動(dòng)性的綜合評(píng)分為指標(biāo)，試驗(yàn)安排(見(jiàn)表1)。

表1 膽石六號(hào)顆粒成型工藝L9(34)正交試驗(yàn)因素水平

水平ABC混合輔料比例(糊精∶甘露醇)浸輔比(浸膏粉∶輔料)乙醇體積分?jǐn)?shù)(%)11∶21∶175%21∶11∶1580%32∶11∶285%

2 結(jié)果

2.1 正交設(shè)計(jì)結(jié)果分析 通過(guò)表2直觀分析和表3方差分析的結(jié)果可知，正交實(shí)驗(yàn)各因素對(duì)膽石六號(hào)顆粒的影響順序?yàn)椋航o比>乙醇體積分?jǐn)?shù)>混合輔料比例，混合輔料比對(duì)該顆粒劑的成型影響不顯著，而浸輔比和乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)該顆粒劑的成型有顯著性影響，綜合考慮，最佳工藝為A1B3C2，即糊精∶甘露醇為1∶2，浸輔比為2，乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%。

表2 膽石六號(hào)顆粒成型工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

實(shí)驗(yàn)號(hào)因素ABC結(jié)果合格率(%)吸濕率(%)休止角(。)綜合評(píng)分111180616672678878221229458593281895503133935956628459574421291647212797893852239267704288989526231931668227229212731387277332749876183218712746275787069332919862325249615K1930208827089000K2903409069393677K3902739467090957R274764004677

綜合評(píng)分=成型率/最大成型率×40+最小吸濕率/吸濕率×30+最小流動(dòng)性/流動(dòng)性×30。

表3 方差分析

方差來(lái)源偏差平方和自由度F比F值P值A(chǔ)147312943719000>005B6264624013219000<005C3309822120319000<005誤差15602

2.2 優(yōu)化工藝驗(yàn)證 根據(jù)篩選所得的最佳成型工藝參數(shù)，進(jìn)行3批次驗(yàn)證(見(jiàn)表4)，發(fā)現(xiàn)顆粒成型率平均值為94.24(RSD=0.89%)，吸濕率平均值為8.23(RSD=1.78%)，休止角平均值為26.35(RSD=1.92%)，表明優(yōu)選的成型工藝穩(wěn)定合理、可行，可用于膽石六號(hào)顆粒劑的制備。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)

指標(biāo)123平均值RSD(%)成型率(%)9508934094239424089吸濕率(%)685666663672178休止角(。)2585263426862635192

RSD為相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2.3 顆粒臨界相對(duì)濕度的測(cè)定[14]取同一批顆粒7份，每份約0.5 g，置于恒重的稱(chēng)量瓶中，精密稱(chēng)定，打開(kāi)稱(chēng)量瓶蓋，分別放入7 種過(guò)飽和鹽溶液的干燥器中(醋酸鉀、氯化鎂、碳酸鉀、溴化鈉、氯化鈉、氯化鉀、硝酸鉀)，于25 ℃下放置 48 h，取出，稱(chēng)重，計(jì)算吸濕百分率[15-16]。然后作圖，以相對(duì)濕度(RH%)為橫坐標(biāo)(X)，吸濕量為縱坐標(biāo)(Y)，繪制吸濕曲線。結(jié)果顯示臨界相對(duì)濕度約為73%(見(jiàn)圖1)，結(jié)果表明，在制粒生產(chǎn)、分裝及貯存時(shí)，環(huán)境濕度應(yīng)控制在小于73%。

圖1 膽石六號(hào)顆粒吸濕平衡曲線

3 討論

本方提取物浸膏粉粘性較大且吸濕性高，故直接制粒有一定難度，因此輔料選擇關(guān)鍵在于降低其粘性與吸濕性。在單一輔料選擇時(shí)，發(fā)現(xiàn)甘露醇降低浸膏粉的吸濕性能力最強(qiáng)，但制粒時(shí)易出現(xiàn)過(guò)黏不易過(guò)篩現(xiàn)象，因此選擇成型性好的糊精、可溶性淀粉與甘露醇制成不同比例的混合輔料進(jìn)行考察，最終選擇糊精與甘露醇為輔料制粒。糊精被水潤(rùn)濕后，產(chǎn)生較強(qiáng)的粘性，使顆粒變得結(jié)實(shí)、圓整，二者所制顆粒成型性較好，溶解后無(wú)沉淀產(chǎn)生且顆粒溶解速度快，制出的顆粒均勻、美觀。甘露醇可用作口服嬌味劑及緩瀉劑[17]，且甘露醇還可能對(duì)胰島素的分泌有一定促進(jìn)作用[18]，與傳統(tǒng)顆粒劑相比，不含蔗糖，變成了無(wú)糖型顆粒劑，為糖尿病患者提供了方便。在考察潤(rùn)濕劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%時(shí)出現(xiàn)了由于軟材發(fā)黏而堵塞篩網(wǎng)的現(xiàn)象，而改用體積分?jǐn)?shù)為90%的乙醇為潤(rùn)濕劑時(shí)，制得的顆粒細(xì)粉較多，顆粒成型率低，故選用80%乙醇為潤(rùn)濕劑。

正交試驗(yàn)表明，最佳制粒工藝條件為 A1B3C2，即輔料用量為2倍，輔料糊精∶甘露醇為2∶1，80%乙醇為潤(rùn)濕劑。其中浸輔比和乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)顆粒的制備有顯著性差異，對(duì)優(yōu)選的工藝驗(yàn)證表明，該工藝合理適用，易于操作，制成的顆粒成型率高，吸濕性小，流動(dòng)性好，有助于分裝和增加貯存的穩(wěn)定性。該顆粒的臨界相對(duì)濕度約為73%，大生產(chǎn)中分裝顆粒時(shí)可參考此值對(duì)車(chē)間的相對(duì)濕度進(jìn)行控制，以避免吸濕致使產(chǎn)品的含水量過(guò)高而影響質(zhì)量。

固體制劑穩(wěn)定性較好，對(duì)于中藥制劑尤為重要，通過(guò)對(duì)本方進(jìn)行生產(chǎn)工藝研究，得到優(yōu)化處方。

將劑型制成顆粒劑，不僅方便患者長(zhǎng)期服用，且攜帶貯存方便，為膽石六號(hào)顆粒劑進(jìn)行質(zhì)量控制、穩(wěn)定性和藥效毒理學(xué)方面的研究提供參考。

[1] 遲寶榮.膽囊炎的研究現(xiàn)狀[J].臨床消化病雜志，2007，18(6):328-330.

[2] 易學(xué)東，羅亞文.膽石六號(hào)濃縮液在黃疸型肝炎44例1臨床分析[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，28(1):45-47.

[3] 唐詩(shī)厚，易學(xué)東，張信錄.膽石六號(hào)湯劑與濃縮劑的臨床療效觀察[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1996，19(4):299-301.

[4] 劉龍忠，李銘銘，李向鵬，等.膽石六號(hào)湯劑對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性的實(shí)驗(yàn)觀察[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2013，33(5):355-358.

[5] 劉龍忠,陳澤慧,田應(yīng)彪，等.膽石六號(hào)湯劑的鎮(zhèn)痛作用及對(duì)肝功能的影響[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2011，31(13):1058-1060.

[6] 王勇.祛白顆粒成型工藝優(yōu)選[J].湖北中醫(yī)雜志，2015，37(7):69-70.

[7] 鄧桂明，何海，葛金文，等.連芩解毒顆粒成型工藝研究[J].中南藥學(xué)，2016，14(6):595-598.

[8] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.

[9] 尚雅文，龔慕辛，翟永松，等.星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)選糖腎寧顆粒的成型工藝[J].2015，21(16):14-18.

[10] 馬小琴，郭小紅，雷英瑛，等.紅景天顆粒成型工藝研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥顆粒，2016，23(1):45-47.

[11] 付美麗，嚴(yán)銘銘，邵帥，等.新扶正除疫顆粒劑的成型性工藝[J].中成藥，2016，38(3):692-694.

[12] 張毓，鐘曉明.中藥顆粒劑成型工藝的研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué)，2010，22(1):27-28.

[13] 張婧，楊紅梅，曹蕾，等.鼻敏顆粒成型工藝研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2016，12(5):30-32.

[14] 那溪元，劉毅，殷明陽(yáng)，等.麻杏止咳平喘顆粒劑成型工藝研究[J].中草藥，2016，47(5):767-770.

[15] 雷志丹，夏新華，楊建偉，等.地榆鞣質(zhì)提取工藝及吸濕性的研究[J].中國(guó)藥房，2015，26(1):93-95.

[16] 何蕾，馬慧萍，何曉英，等.雪蓮總黃酮膠囊的成型工藝優(yōu)選[J].中國(guó)藥房，2015，26(7):967-969.

[17] 彭琛.口服固體制劑藥用輔料的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2014，29(4):333-337.

[18] 熊學(xué)敏，曹玨，石揚(yáng)，等.南瓜多糖顆粒劑治療Ⅱ型糖尿病的臨床療效評(píng)價(jià)[J].中成藥，2001，23(7):29-31.

收稿2016-09-07;修回2016-11-27〗

(編輯：譚秀榮)

Study on forming technique of Gallstone VI Granules

LiuYan1,TaoYueying1,ChenJi1,ChenZehui3,HuShanshan4,QianYing2,TianYingbiao2

(1.Department of Pharmacy, School of Pharmacy, Zunyi Medical University,ZunyiGuizhou 563099, China; 2.Department of Pharmacy, Affiliated Hospital of Zunyi Medical University, Zunyi Guizhou 563099, China;3.Drug Clinical Trid Institntions,Affiliated Hospital of Zunyi Medical University,Zunyi Guizhou 563009,China;4.Department of Laboratory Medicine,Affiliated Hospital of Zunyi Medical University,Zunyi Guizhou 563009,China)

Objective To optimize molding process of Gallstone VI granules.Methods Usingmoldability, hygroscopicity, and fluidity as indexes, The best materials were selected by the use of orthogonal test parameters for added amount of materials, supplies, and the ratio of the volume fraction of ethanol wetting agent.Results By orthogonal test the optimum molding process as adjunct ratio of dextrin :mannitol was 2∶1, main drug:accessories was 1∶2, the wetting agent fraction was80% ethanol.Conclusion Gallstone VI granules obtained by orthogonal molding process arestable.The fluidity, anti-moisture absorption, and high pass rate are characteristics, which provide the experimental basis for the production of the formulation.

Gallstone VI granules; preparation process;orthogonal test

貴州省教育廳自然科學(xué)研究資助項(xiàng)目(NO：黔教合K字[2012]054)；貴州省科技廳資助課題資助項(xiàng)目(NO：黔科合SY字[2015]3028)；貴州省藥劑學(xué)研究生卓越人才培養(yǎng)計(jì)劃資助項(xiàng)目(NO：黔教研合ZYRC字[2014]019)。

田應(yīng)彪，男，主任藥師，碩士生導(dǎo)師，研究方向：新藥研發(fā)與臨床藥學(xué)，E-mail:tybczh@163.com。

R283.6

A

1000-2715(2016)06-0623-04