劉愛(ài)東，劉　揚(yáng)，唐　慧

(1. 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院,河北 唐山 063000;2. 唐山職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)校區(qū), 河北 唐山 063000)

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胃腺癌中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)及相關(guān)性研究

劉愛(ài)東1，劉揚(yáng)2，唐慧1

(1. 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院,河北 唐山 063000;2. 唐山職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)校區(qū), 河北 唐山 063000)

[摘要]目的檢測(cè)胃腺癌中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)特點(diǎn)，探討二者在不同臨床特征中表達(dá)的意義。方法以95例胃腺癌作為觀察組，以70例非腫瘤的胃黏膜組織作為對(duì)照組，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)2組中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)。結(jié)果觀察組中PYGOPUS2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)和Ki67表達(dá)密切相關(guān)(P均<0.05)。PYGOPUS2的表達(dá)與腫瘤的直徑和分化程度密切相關(guān)(P均<0.05)，而PTEN的表達(dá)與腫瘤的直徑和分化程度無(wú)明顯相關(guān)性。線性相關(guān)分析顯示PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)未見(jiàn)明顯相關(guān)性。生存分析顯示PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)與預(yù)后相關(guān)(P均<0.05)。結(jié)論胃腺癌組織中PYGOPUS2高表達(dá)、PTEN低表達(dá)對(duì)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展均有一定促進(jìn)作用，PYGOPUS2和PTEN之間未見(jiàn)明顯協(xié)同作用。術(shù)后聯(lián)合檢測(cè)PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)對(duì)判斷胃腺癌的預(yù)后有一定價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]胃腺癌；PYGOPUS2；PTEN；預(yù)后

胃腺癌臨床常見(jiàn)，病變進(jìn)展中多種蛋白表達(dá)失調(diào)，蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)通路多樣。PYGOPUS2蛋白是WNT信號(hào)通路下游的新功能蛋白，主要通過(guò)結(jié)合游離的β-catenin，使其大量聚集在胞漿，并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，引起靶點(diǎn)的異?；罨痆1]，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的形成。PTEN具有磷酸酯酶活性，目前認(rèn)為PTEN是腫瘤形成的抑制基因，能通過(guò)脫磷酸化作用調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的通路，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和發(fā)育[2-3]。本研究通過(guò)檢測(cè)胃腺癌中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)情況，探討其相關(guān)性及對(duì)預(yù)后判斷的價(jià)值，以期為臨床提供幫助。

1臨床資料

1.1一般資料選擇2006年1—12月行胃腺癌大部分切除的患者作為觀察組，留取患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織。病例納入均符合WHO中的具體標(biāo)準(zhǔn)。共觀察95例，其中男54例，女41例；年齡42～79(60.6±5.9)歲。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者38例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者57例；高分化39例，中分化35例，低分化21例，患者術(shù)前均無(wú)放、化療史。選擇上述標(biāo)本中距腫瘤邊緣大于3 cm非癌胃黏膜組織70例作為對(duì)照組，其中男39例，女31例；年齡43～76(59.5±5.8)歲。

1.2PYGOPUS2和PTEN蛋白的檢測(cè)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)組織中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)，操作由同一技師完成，嚴(yán)格按說(shuō)明書操作，做好質(zhì)量控制。PYGOPUS2的陽(yáng)性部位是細(xì)胞核，PTEN的陽(yáng)性部位是細(xì)胞質(zhì)，每張切片選擇10個(gè)400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽(yáng)性表達(dá)率，以陽(yáng)性細(xì)胞≥25%定為陽(yáng)性，以陽(yáng)性細(xì)胞<25%定為陰性。計(jì)算組間陽(yáng)性率的差別。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SAS 6.12進(jìn)行分析，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析和生存分析方法處理數(shù)據(jù)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.12組PYGOPUS2和PTEN蛋白表達(dá)陽(yáng)性率比較觀察組PYGOPUS2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　2組PYGOPUS2和PTEN蛋白表達(dá)

2.2觀察組中不同臨床特征患者PYGOPUS2和PTEN蛋白表達(dá)情況比較觀察組中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)和Ki67表達(dá)密切相關(guān)。PYGOPUS2與腫瘤的直徑和分化程度密切相關(guān)，而PTEN與腫瘤的直徑和分化程度無(wú)明顯相關(guān)性。見(jiàn)表2。

2.3觀察組中PYGOPUS2和PTEN表達(dá)的相關(guān)性分析對(duì)觀察組中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)進(jìn)行線性相關(guān)性分析，結(jié)果顯示PYGOPUS2和PTEN之間未見(jiàn)明顯相關(guān)性(P=0.165 4)。

2.4觀察組中PYGOPUS2和PTEN表達(dá)的生存分析本組患者隨訪時(shí)間為7～60個(gè)月，平均24.9個(gè)月。經(jīng)檢驗(yàn)，胃腺癌中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)均與患者預(yù)后相關(guān)(P均<0.05)，即PYGOPUS2高表達(dá)、PTEN低表達(dá)患者的預(yù)后差。見(jiàn)圖1及圖2。

3討論

胃腺癌是指來(lái)源于胃黏膜上皮細(xì)胞的腫瘤，中老年人多見(jiàn)，病變進(jìn)展較快，患者的預(yù)后較差。胃腺癌病變發(fā)展過(guò)程中可以出現(xiàn)多種基因和蛋白的表達(dá)失常[4]。PYGOPUS是在果蠅實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的蛋白，為β-catenin蛋白下游的一個(gè)新功能蛋白，其突變導(dǎo)致了WNT信號(hào)的缺失。它有2個(gè)同源蛋白，分別是PYGOPUS1和PYGOPUS2[5]。PYGOPUS2基因位于1號(hào)染色體q21.3位置，其編碼的產(chǎn)物為含有233個(gè)氨基酸的蛋白，PYGOPUS2蛋白包括兩個(gè)獨(dú)特的保守區(qū)域，分別是N端本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示觀察組中PYGOPUS2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組，提示PYGOPUS2具有癌基因的類似作用。PYGOPUS2在腫瘤中高表達(dá)，可以通過(guò)調(diào)高cyclinD1的表達(dá)水平，促進(jìn)細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，加速細(xì)胞增殖，并對(duì)細(xì)胞的分化形成明顯抑制作用，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)及腫瘤的進(jìn)展。PYGOPUS2也可能通過(guò)調(diào)節(jié)β-catenin的功能發(fā)揮生物學(xué)作用。PTEN失活需要兩個(gè)等位基因均喪失功能，通常表現(xiàn)為突變與雜合性缺失共存，PTEN表達(dá)丟失使抑癌基因?qū)δ[瘤形成的抑制作用減弱。結(jié)果顯示觀察組中PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)和Ki67表達(dá)密切相關(guān)，提示PYGOPUS2和PTEN的異常表達(dá)參與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管浸潤(rùn)的過(guò)程，同時(shí)兩者異常表達(dá)使細(xì)胞的增殖活性增強(qiáng)，細(xì)胞的失控性增生明顯，細(xì)胞分裂增強(qiáng)，細(xì)胞數(shù)量增多，細(xì)胞體積增大，腫瘤的惡性潛能增強(qiáng)。PYGOPUS2的高表達(dá)與腫瘤的直徑和分化程度密切相關(guān)，提示PYGOPUS2高表達(dá)可以使腫瘤的生長(zhǎng)更快，腫瘤細(xì)胞的分化程度更低，細(xì)胞更趨于幼稚。由于以上因素均與胃腺癌的預(yù)后相關(guān)，因此檢測(cè)上述兩種蛋白可能對(duì)判斷預(yù)后有重要價(jià)值，而生存分析直接證實(shí)了此結(jié)論，即兩者高表達(dá)的胃腺癌患者預(yù)后差。而聯(lián)合檢測(cè)PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)可以在一定程度上評(píng)估患者的預(yù)后。線性相關(guān)分析顯示PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)未見(jiàn)明顯相關(guān)性，提示PYGOPUS2和PTEN二者間未見(jiàn)明顯的協(xié)同作用。PYGOPUS2和PTEN的通路及作用方式可能不完全一致，而且二者結(jié)構(gòu)上不具有明顯的相結(jié)合的位點(diǎn)。

總之，胃腺癌組織中PYGOPUS2高表達(dá)、PTEN低表達(dá)對(duì)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展均有一定促進(jìn)作用，PYGOPUS2和PTEN之間未見(jiàn)明顯協(xié)同作用。術(shù)后聯(lián)合檢測(cè)PYGOPUS2和PTEN的表達(dá)對(duì)判斷胃腺癌的預(yù)后有一定價(jià)值。

表2　觀察組中不同臨床特征患者PYGOPUS2和PTEN

圖1　PYGOPUS2蛋白表達(dá)與胃腺癌預(yù)后的關(guān)系

圖2　PTEN蛋白表達(dá)與胃腺癌預(yù)后的關(guān)系

[參考文獻(xiàn)]

[1]Andrews PG,Lake BB,Popadiuk C,et al. Requirement of Pygopus 2 in breast cancer[J]. Int J Oncol,2007,30(2):357-363

[2]Zaitsu Y,Oki E,Ando K,et al. Loss of heterozygosity of PTEN(encoding phosphate and tensin homolog) associated with elevated HER2 expression is an adverse prognostic indicator in gastric cancer[J]. Oncology,2015,88(3):189-194

[3]Li Y,Cui J,Zhang CH,et al. High-expression of DJ-1 and loss of PTEN associated with tumor metastasis and correlated with poor prognosis of gastric carcinoma[J]. Int J Med Sci,2013,10(12):1689-1697

[4]Li M,Sun H,Song L,et al. Immunohistochemical expression of mTOR negatively correlates with PTEN expression in gastriccarcinoma[J]. Oncol Lett,2012,4(6):1213-1218

[5]王海東,杜天明,項(xiàng)永生,等. Wnt信號(hào)調(diào)控因子Pygo2在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義[J]. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志,2010,9(6):513-515

[6]袁圓陽(yáng),駱啟聰,李超,等. Pygo2轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立及表型的初步分析[J]. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2010,49(2):266-269

[7]Popadiuk CM,Xiong J,Wells MG,et al. Antisense suppression of pygopus2 results in growth arrest of epithelial ovarian cancer[J]. Clin Cancer Res,2006,12(7 Pt 1):2216-2223

[8]陳玉英,王海東,王占祥,等. Pygo2過(guò)表達(dá)促進(jìn)大鼠膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞增殖[J]. 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2012,41(5):413-415

[9]Zhang S,Li J,Liu P,et al. Pygopus-2 promotes invasion and metastasis of hepatic carcinoma cell by decreasing E-cadherin expression[J]. Oncotarget,2015,6(13):11074-11086

[10] Zhu X,Qin X,Fei M,et al. Loss and reduced expression of PTEN correlate with advanced-stage gastric carcinoma[J]. Exp Ther Med,2013,5(1):57-64

[11] Wen YG,Wang Q,Zhou CZ,et al. Mutation analysis of tumor suppressor gene PTEN in patients with gastric carcinomas and its impact on PI3K/AKT pathway[J]. Oncol Rep,2010,24(1):89-95

[12] Wang J,Zhang C,Chen K,et al. ERβ1 inversely correlates with PTEN/PI3K/AKT pathway and predicts a favorable prognosis in triple-negative breast cancer[J]. Breast Cancer Res Treat,2015,152(2):255-269

Study on expressions and relationship of PYGOPUS2 and PTEN in gastric adenocarcinoma

LIU Aidong1, LIU Yang2, TANG Hui1

(1. North China University of Science and Technology Affiliated Hospital, Tangshan 063000, Hebei, China; 2. Medical College of Tangshan Vocational and Technical College, Tangshan 063000, China)

Abstract:Objective It is to detect the expressions of PYGOPUS2 and PTEN in gastric adenocarcinoma, and investigate their significance on different clinical characteristic. Methods The study included 95 cases of gastric adenocarcinoma as observation group, 70 cases of normal gastric tissue as control group. The expressions of PYGOPUS2 and PTEN were detected by IHC methods and analyzed in two groups. Results In the observation group, the positive rate of PYGOPUS2 was significantly higher and the positive rate of PTEN was significantly lower than those in the control group (all P<0.05). The positive rate of PYGOPUS2 and PTEN were correlated with lymph node metastasis, vascular invasion and Ki67 expression (all P<0.05). The positive rate of PYGOPUS2 was correlated with tumor volume and differentiation (all P<0.05), but the positive rate of PTEN was not correlated with tumor volume and differentiation. There was not relationship between PYGOPUS2 and PTEN in gastric adenocarcinoma. The expressions of PYGOPUS2 and PTEN were correlated with prognosis in gastric adenocarcinoma (all P<0.05). Conclusion The higher-expression of PYGOPUS2, lower-expression of PTEN may promote the occurrence and development of gastric adenocarcinoma. There is no obvious synergy between PYGOPUS2 and PTEN in neoplasms. The joint detection of PYGOPUS2 and PTEN may be helpful to predict prognosis of gastric adenocarcinoma.

Key words:gastric adenocarcinoma; PYGOPUS2; PTEN; prognosis

[收稿日期]2015-07-31

[中圖分類號(hào)]R735.2

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)09-0923-03

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.09.004

[基金項(xiàng)目]河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究課題計(jì)劃項(xiàng)目(20150513)

[作者簡(jiǎn)介]劉愛(ài)東，男，副主任醫(yī)師，副教授，研究方向?yàn)槟[瘤分子病理學(xué)。