鄒偉++張譯尹

【摘要】 目的 探討膀胱癌組織中c-Met的表達及意義。方法 選取60例膀胱癌組織病理標本（觀察組）與60例正常膀胱組織病理標本（對照組）， 均進行c-Met表達的免疫組化實驗分析。結果 c-Met在觀察組中的陽性表達率為60.0%（36/60）， 明顯高于對照組的6.7%（4/60）（P<0.05）。在60例膀胱癌組織中， c-Met在不同病理分級、臨床分期與淋巴結轉(zhuǎn)移組織中的陽性表達率比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 c-Met在膀胱癌中呈現(xiàn)高表達狀況， 能反映膀胱癌組織的病理分級、臨床分期與淋巴結轉(zhuǎn)移情況， 具有很好的分析價值。

【關鍵詞】 c-Met；膀胱癌；免疫組化；淋巴結轉(zhuǎn)移；臨床分期

【Abstract】 Objective To investigate expression and significance of c-Met in bladder cancer tissue. Methods There were 60 pathological samples of bladder cancer tissue （observation group） and 60 samples of normal bladder tissue （control group）. Immunohistochemistry analysis was made on all c-Met expression. Results The positive expression rate of c-Met was much higher in the observation group as 60.0% （36/60） than the control group as 6.7% （4/60） （P<0.05）. Among the 60 bladder cancer tissue cases， positive expression rates in different pathological grades， clinical stages， and lymphatic metastasis tissues had statistical significance （P<0.05）. Conclusion High expression of c-Met in bladder cancer can reveal pathological grades， clinical stages， and lymphatic metastasis tissues condition. It contains high value for analysis.

【Key words】 c-Met； Bladder cancer； Immunohistochemistry； Lymphatic metastasis； Clinical stages

膀胱癌是當前常見的惡性腫瘤， 嚴重威脅著人類的健康， 現(xiàn)代研究表明膀胱癌的發(fā)生和進展與基因的表達差異有關[1]。c-Met是編碼肝細胞生長因子的酪氨酸激酶受體蛋白的基因， 即與酪氨酸激酶受體（RTK）相關的原癌基因。本文具體探討了膀胱癌組織中c-Met的表達及意義， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇本院2010年5月～2014年5月病理科收集與保存的60例膀胱癌組織病理標本（觀察組）與60例正常膀胱組織病理標本（對照組）。納入標準：病程<3年；均未接受放療、化療；年齡≥18周歲；醫(yī)院倫理委員會批準。對照組中男33例， 女27例；年齡最小19歲， 最大79歲， 平均年齡（53.13±8.62）歲。觀察組中男34例， 女26例；年齡最小19歲， 最大78歲， 平均年齡（53.66±8.11）歲。病理分級根據(jù)2004年世界衛(wèi)生組織的分級標準， 低級別42例， 高級別18例；臨床分期根據(jù)國際抗癌協(xié)會標準， T1～2期49例， T3～4期11例；區(qū)域淋巴結轉(zhuǎn)移：N0（無淋巴結轉(zhuǎn)移）45例， N1（單個淋巴結轉(zhuǎn)移， 最大直徑≤2 cm）10例， N2（單個淋巴結轉(zhuǎn)移， 2 cm<最大直徑≤5 cm或者多個淋巴結轉(zhuǎn)移， 無一最大直徑>5 cm）5例。兩組患者性別、年齡等一般資料比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 免疫組化方法 采用c-Met蛋白兔抗人單克隆抗體工作液（北京中杉生物工程有限公司）， 實驗步驟嚴格按試劑說明書進行（SP-9001免疫組化檢測試劑盒）。兩組的標本經(jīng)10%福爾馬林固定， 常規(guī)進行石蠟包埋， 然后石蠟塊進行4 μm連續(xù)切片， 消除內(nèi)源性過氧化物酶活性， 應用高壓鍋抗原修復， 然后加入c-Met蛋白單克隆抗體的一抗， 4℃放置于室溫約30 min， PBS液連續(xù)洗滌3次；滴加二抗， 37℃放置10 min， PBS液再次洗滌3次。DAB顯色3～5 min， 蘇木素復染細胞核， 封片觀察。

1. 3 判定標準 c-Met蛋白陽性標注主要在腫瘤細胞膜和細胞漿內(nèi)呈現(xiàn)棕黃色或者棕褐色顆粒， 陽性細胞數(shù)>20%為陽性表達。實驗同時設陽性對照和陰性對照， 陰性對照選擇PBS代替一抗。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2. 1 c-Met陽性表達率比較 經(jīng)過判定， c-Met在觀察組中的陽性表達率為60.0%（36/60）， 明顯高于對照組的6.7%（4/60）， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2. 2 c-Met在膀胱癌中的表達與臨床病理特征的相關性 在60例膀胱癌組織中， c-Met在高級別的陽性表達率明顯高于低級別（P<0.05）；而在T3～4期的陽性表達率為81.8%， 明顯高于T1～2期的42.9%；而在5例N2淋巴結轉(zhuǎn)移中， 陽性表達率為76.5%（13/17）， 分別高于N0的20.0%與N1的50.0%， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

膀胱癌是較為常見的惡性腫瘤之一， 膀胱癌腫瘤切除后容易復發(fā)， 而且15.0%左右有惡性程度增加的趨勢， 為此需要積極探索膀胱癌特異性的腫瘤標志物及腫瘤發(fā)生發(fā)展的機制， 從而有效預防與防治膀胱癌。

人類的c-Met基因位于7號染色體上， c-Met基因編碼的蛋白是具有自身磷酸化活性的跨膜受體， 可以導致下游中間體和活化的信號轉(zhuǎn)導通路的自身磷酸化或磷酸化， 也可促進細胞運動， 導致內(nèi)皮細胞的遷移、上皮細胞分散和促進趨化性， 為此可能參與腫瘤轉(zhuǎn)移[2]。

研究證實c-Met信號通路的高表達對與膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展具有促進作用并通過上皮表型的惡性轉(zhuǎn)化導致癌變[3]。有學者用免疫組化法在膀胱癌組織中發(fā)現(xiàn)c-Met在膀胱癌中呈過度表達， 該信號傳導通路主要以自分泌方式激活， 為此在膀胱癌的發(fā)生與發(fā)展中可能起著重要作用[4]。本研究顯示在60例膀胱癌組織中， c-Met在不同病理分級、臨床分期與淋巴結轉(zhuǎn)移組織中的陽性表達率比較， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 表明膀胱癌臨床分期越晚， 淋巴結轉(zhuǎn)移越嚴重， c-Met的表達異常越明顯。

綜上所述， c-Met在膀胱癌中呈現(xiàn)高表達狀況， 能反應膀胱癌組織的病理分級、臨床分期與淋巴結轉(zhuǎn)移情況， 具有很好的分析價值。

參考文獻

[1]王璠.基因表達影響膀胱腫瘤發(fā)生和演進的機制及其診斷和判斷預后的價值.現(xiàn)代泌尿外科雜志， 2005， 10（4）：246-248.

[2]劉志華， 葉云林， 卞軍， 等.負性共刺激分子PD-L1在非肌層浸潤性膀胱癌的表達及其對術后膀胱灌注治療的影響.中山大學學報（醫(yī)學科學版）， 2015， 36（2）：221-226.

[3]龍俊任， 董自強， 熊飛， 等.膀胱癌組織中MACC1、c-Met表達變化及意義.山東醫(yī)藥， 2012， 52（18）：74-75.

[4]金鵬飛， 譚操， 毛平花， 等. PTEN蛋白在膀胱移行細胞腫瘤中的表達及臨床意義.浙江臨床醫(yī)學， 2015， 17（1）：12-13.

[收稿日期：2016-01-14]