張　穎，陳華翰，李春美,2*

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)　食品科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，湖北　武漢　430070;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)

教育部環(huán)境食品學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北　武漢　430070)

番茄中類胡蘿卜素及其順式異構(gòu)體的HPLC分析

張穎1，陳華翰1，李春美1,2*

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，湖北武漢430070;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)

教育部環(huán)境食品學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢430070)

摘要：建立了一種能同時(shí)快速分離、定性番茄中3種類胡蘿卜素及其異構(gòu)體的高效液相色譜(HPLC)方法。采用正己烷-乙醇(3∶4)對(duì)樣品進(jìn)行提取，甲基叔丁基醚+0.05%三乙胺-乙腈+0.05%三乙胺為流動(dòng)相梯度洗脫，以Carotenoid C30柱(250 mm×4.6 mm i.d.，5 μm)進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)為475 nm。結(jié)果表明，在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下，番茄中有11種類胡蘿卜素得到了良好分離，包括3種全反式異構(gòu)體和8種順式異構(gòu)體。葉黃素、β-胡蘿卜素、番茄紅素分別在0.1～5.0，0.1～20，0.1～100 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均在0.99以上，檢出限(LOD)分別為0.13，0.12，0.56 μg/g，定量下限(LOQ)分別為0.43，0.41，1.88 μg/g;日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.2%～5.3%，日間RSD為1.9%～7.5%，回收率分別為(88.9±6.1)%～(91.7±3.6)%,(92.3±4.3)%～(94.1±6.3)%，(102.6±4.2)%～(107.1±3.4)%。該方法具有分析時(shí)間短、靈敏度高、分離完全等優(yōu)點(diǎn)，適用于番茄中類胡蘿卜素及其順式異構(gòu)體的分析測(cè)定。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法;類胡蘿卜素;順式異構(gòu)體;番茄

番茄由于富含類胡蘿卜素、抗壞血酸、酚類物質(zhì)等多種抗氧化成分而深受世人喜愛。番茄及其制品對(duì)身體健康有諸多益處，尤其是對(duì)癌癥、心血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病具有明顯的抑制作用[1-3]。在番茄含有的所有抗氧化物質(zhì)中，類胡蘿卜素最受關(guān)注。類胡蘿卜素不僅是維生素A合成的前體物質(zhì)，還是番茄抗氧化能力的主要貢獻(xiàn)物質(zhì)。番茄中的類胡蘿卜素主要以番茄紅素、β-胡蘿卜素、葉黃素的形式存在，三者在番茄中的含量依次減少。番茄紅素分子中有11個(gè)共軛雙鍵，1個(gè)番茄紅素分子可清除數(shù)千個(gè)單線態(tài)氧，在類胡蘿卜素中抗氧化性最高[4]。

由于類胡蘿卜素對(duì)光、氧氣和溫度非常敏感，易發(fā)生異構(gòu)化，加之在植物中的存在形式具有多樣性，給其純化分析帶來很大困難，因此，發(fā)展更精確、快速的分析技術(shù)具有重要意義。食品中類胡蘿卜素的常用分析方法有高效液相色譜法[5-6]、分光光度法[7]、薄層色譜法[8]等。分光光度法僅適用于測(cè)定單一類胡蘿卜素的量或估算混合物中總類胡蘿卜素含量，不能對(duì)混合物中各類胡蘿卜素分別定性定量;薄層色譜法可對(duì)混合物中的類胡蘿卜素進(jìn)行分離，但定量很不準(zhǔn)確，且分析時(shí)間長(zhǎng)，重復(fù)性差;相比而言，高效液相色譜法具有分離效果好、選擇性高、檢測(cè)靈敏度高、分離速度快等[9-10]非常明顯的優(yōu)點(diǎn)。高靈敏度的HPLC可以測(cè)出樣品中極少量的雜質(zhì)、痕量類胡蘿卜素和幾何異構(gòu)體[11]。高效液相色譜法通常配合使用C18柱，但C18柱對(duì)類胡蘿卜素順式異構(gòu)體的分離效果較差。有文獻(xiàn)報(bào)道指出用C30柱代替C18柱對(duì)類胡蘿卜素順反異構(gòu)體具有更好的分離效果[12]。但現(xiàn)有的方法存在基線漂移、洗脫不完全、耗費(fèi)時(shí)間和試劑[4,6,13]等諸多缺陷。因此，建立一種能使番茄中類胡蘿卜素及其順反異構(gòu)體快速完全分離、定量準(zhǔn)確的方法十分必要。

本文通過對(duì)HPLC流動(dòng)相、洗脫程序等條件的篩選優(yōu)化，建立了一種能快速同時(shí)分離番茄中3種類胡蘿卜素及其異構(gòu)體的HPLC方法。

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1試劑與儀器

全反式葉黃素、全反式β-胡蘿卜素和全反式番茄紅素(純度>90%，95%和98%)購(gòu)自上海源葉生物技術(shù)公司;甲醇、乙腈、三乙胺(TEA)和甲基叔丁基醚(MTBE)均為色譜純,購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司;正己烷、丙酮、乙醇、乙酸乙酯和二氯甲烷等其余試劑均為分析純。

Carotenoid C30色譜柱(250 mm×4.6 mm i.d.，粒度5 μm) ;Waters e2695型高效液相色譜儀;Waters 2998型PDA檢測(cè)器;DLSB-5PO型低溫冷卻循環(huán)泵;SBS-100型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器;HJ-3型磁力攪拌器;HJS 880型打漿機(jī)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1類胡蘿卜素的提取新鮮番茄打漿，取10 g 番茄勻漿于容器中，加入100 mL提取溶劑，用鋁箔避光。磁力攪拌30 min，加入15 mL雙蒸水以加速不同極性溶劑分層。取上層有機(jī)相溶液旋干，殘?jiān)?0 mL二氯甲烷-正己烷(1∶9)復(fù)溶。過0.2 μm有機(jī)濾膜，進(jìn)行液相色譜分析。

1.2.2類胡蘿卜素的HPLC分析流動(dòng)相：A為MTBE+0.05% TEA，B為乙腈+0.05% TEA。梯度洗脫條件：0～8 min，0%～55%A;8～25 min，55%A;25～30 min，55%～0%A。流速為1 mL/min，進(jìn)樣量為20 μL，檢測(cè)波長(zhǎng)為475 nm。

樣品中類胡蘿卜素全反式異構(gòu)體的定性主要通過與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和UV吸收光譜進(jìn)行對(duì)比來鑒別。順式異構(gòu)體主要基于文獻(xiàn)報(bào)道中各類順式異構(gòu)體的特征吸收光譜和Q值(Q值=A順式峰/A最大吸收峰)進(jìn)行定性[5,14]。

1.2.3標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制與標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制將全反式β-胡蘿卜素、葉黃素和全反式番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品分別配成濃度為20，20，100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，前兩者用二氯甲烷-正己烷(1∶9)溶解，后者用二氯甲烷溶解。再分別用正己烷將全反式葉黃素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋至0.1，0.3，0.5，1.0，3.0，5.0 μg/mL，全反式β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋至0.1，0.5，2.0，5.0，10，20 μg/mL，由于番茄中番茄紅素全反式異構(gòu)體和順式異構(gòu)體在含量上有很大差別[4]，因此將全反式番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成兩種濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，分別為0.1，0.2，0.4，0.8，1.6，3.2 μg/mL和10，20，40，60，80，100 μg/mL。

1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用IBM SPSS Statistics 19軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，顯著性采用單因素方差分析。P<0.05表示具有顯著性差異。

2結(jié)果與討論

2.1番茄中類胡蘿卜素的提取

番茄中的類胡蘿卜素主要以番茄紅素、β-胡蘿卜素、葉黃素的形式存在，由于它們具有不同的極性、溶解性，因此，對(duì)番茄紅素有較高提取效率的溶劑可能不適用于對(duì)β-胡蘿卜素和葉黃素的提取。另外，不同空間結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素在同一溶劑系統(tǒng)中的溶解性也不同，如順式葉黃素溶于乙醇中，但全反式葉黃素則不溶解;順式番茄紅素異構(gòu)體的極性比全反式番茄紅素異構(gòu)體強(qiáng)[6,13,15]。因此，本實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)[4，12-13，16-17]，對(duì)比了正己烷-丙酮-乙醇(2∶1∶1)、正己烷-乙醇(3∶4)、正己烷-丙酮(3∶2) 、正己烷-丙酮-甲醇(1∶1∶1)、乙酸乙酯5種溶劑系統(tǒng)對(duì)番茄中類胡蘿卜素的提取效率。以類胡蘿卜素的提取量為指標(biāo)來衡量各個(gè)溶劑系統(tǒng)的提取效率。

圖1　不同溶劑對(duì)番茄中葉黃素、β-胡蘿卜素、番茄紅素的提取效率Fig.1　Extraction efficiencies of different solvent systems on lutein，β-carotene and lycopene from tomatoesdifferent letters in a group indicated the difference was statistically significant(P<0.05);same letters in a group indicated non-significance of difference(P>0.05)

如圖1所示，正己烷-乙醇(3∶4)對(duì)番茄紅素和β-胡蘿卜素的提取效率最高，其次是正己烷-丙酮-甲醇(1∶1∶1)和正己烷-丙酮-乙醇(2∶1∶1)。正己烷-丙酮(3∶2)和乙酸乙酯則表現(xiàn)出比較相近的低提取率。然而，正己烷-丙酮(3∶2)對(duì)葉黃素的提取效率最高，其次是乙酸乙酯，其他3種溶劑的提取率相對(duì)較低。由于葉黃素等含氧類胡蘿卜素的極性強(qiáng)于番茄紅素和β-胡蘿卜素等不含氧類胡蘿卜素，因此正己烷-丙酮(3∶2)和乙酸乙酯這類極性較強(qiáng)的溶劑系統(tǒng)對(duì)葉黃素表現(xiàn)出較高的提取效率。由于番茄中番茄紅素和β-胡蘿卜素的含量遠(yuǎn)高于葉黃素，因此選擇正己烷-乙醇(3∶4)作為最優(yōu)溶劑系統(tǒng)。

2.2液相洗脫條件

由于C30色譜柱的固定相具有更強(qiáng)的疏水性，因此對(duì)番茄紅素等類胡蘿卜素的空間異構(gòu)體截留能力更強(qiáng)，所以在反相液相色譜分析中常用的極性洗脫液會(huì)導(dǎo)致洗脫時(shí)間延長(zhǎng)。通過在流動(dòng)相中加入二氯甲烷等非極性溶劑，可以縮短保留時(shí)間。Lee等[18]應(yīng)用正丁醇-乙腈-二氯甲烷(30∶70∶10)洗脫系統(tǒng)將全反式番茄紅素的保留時(shí)間從250 min縮短至33 min。甲基叔丁基醚(MTBE)是一種比二氯甲烷具有更強(qiáng)疏水性的洗脫液，Huang等[13]使用MTBE-甲醇洗脫液系統(tǒng)使得番茄紅素、β-胡蘿卜素和葉黃素得到了良好的分離，但有些番茄紅素異構(gòu)體未被完全分離。

本實(shí)驗(yàn)選用MTBE作為流動(dòng)相A，不同比例的甲醇-乙腈(100∶0，50∶50，25∶75，0∶100)作為流動(dòng)相B，來篩選對(duì)類胡蘿卜素順式異構(gòu)體分離效果最好的洗脫系統(tǒng)。結(jié)果顯示，不同比例的甲醇-乙腈對(duì)類胡蘿卜素異構(gòu)體的分離效果有顯著差異。100%甲醇為流動(dòng)相時(shí)，12～25 min峰的分離效果很差;乙腈比例為50%時(shí)，洗脫時(shí)間有所縮短，但分離效果并未明顯改善;提高乙腈的比例至75%和100%時(shí)，分離效果明顯提高，且洗脫時(shí)間從32 min縮短至20 min。盡管甲醇-乙腈(25∶75)和乙腈(100%)的分離效果類似，但前者存在輕微的基線漂移，可能會(huì)導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性下降。因此，流動(dòng)相B選用乙腈(100%)。另外，由于TEA能加強(qiáng)類胡蘿卜素的響應(yīng)值，減少其在色譜柱中的降解[12]，因此，流動(dòng)相A和B中均加入0.05%的TEA。

綜上所述，用于同時(shí)分離和測(cè)定類胡蘿卜素順反異構(gòu)體的HPLC分析條件如“1.2.2”所示。

2.3HPLC方法學(xué)驗(yàn)證

將“1.2.3”中配制的不同濃度梯度的全反式葉黃素標(biāo)準(zhǔn)溶液、全反式β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)溶液和全反式番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行HPLC分析，以濃度(X，μg/mL)為橫坐標(biāo)，峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，得到回歸方程如表1所示。結(jié)果表明，葉黃素、β-胡蘿卜素、番茄紅素的濃度分別在0.1～5.0，0.1～20，0.1～100 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，三者的檢出限(LOD，S/N=3，n=11)分別為0.13，0.12，0.56 μg/g，定量下限(LOQ，S/N=10，n=11)分別為0.43，0.41，1.88 μg/g。類胡蘿卜素的反式與順式異構(gòu)體消光系數(shù)幾乎相同[4]，因此全反式異構(gòu)體的標(biāo)準(zhǔn)曲線也適用于順式異構(gòu)體。

表1　HPLC方法對(duì)番茄中類胡蘿卜素的線性關(guān)系、檢出限、定量下限及精密度

a.low concentration of all-trans-lycopene(0.1-3.2 μg/mL,6-point);b.high concentration of all-trans-lycopene(10-100 μg/mL,6-point)

分別對(duì)3 μg/mL葉黃素，10 μg/mLβ-胡蘿卜素，1.5 μg/mL和50 μg/mL番茄紅素進(jìn)行日內(nèi)(Intra-)與日間(Inter-)精密度測(cè)定。日內(nèi)精密度采用同一濃度的樣品在一天內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣6次，以6次峰面積的值計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD);日間精密度采用同一濃度的樣品每天進(jìn)樣6次，連續(xù)3 d，以18次峰面積的值計(jì)算RSD。 3種類胡蘿卜素的日內(nèi)RSD分別為5.3%，4.2%，1.2%，3.7%，日間RSD分別為7.5%，6.5%，1.9%，5.2%，說明本方法有較高的精密度。

分別將不同劑量的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品(0.400，0.800 mg)、β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品(0.032，0.064 mg)、葉黃素標(biāo)準(zhǔn)品(0.004，0.008 mg)加入番茄樣品中，所有樣品均采用相同的提取方法，之后用HPLC進(jìn)行加標(biāo)回收率檢驗(yàn)。如表2所示，番茄紅素的回收率為(102.6±4.2)%～(107.1±3.4)%，β-胡蘿卜素為(92.3±4.3)%～(94.1±6.3)%，葉黃素為(88.9±6.1)%～(91.7±3.6)%，表明該方法具有較高的準(zhǔn)確度。

表2　HPLC方法對(duì)番茄紅素、β-胡蘿卜素、葉黃素的加標(biāo)回收率

2.4番茄中類胡蘿卜素異構(gòu)體的分析

番茄中類胡蘿卜素及其異構(gòu)體的液相色譜圖如圖2所示，共檢測(cè)出11種類胡蘿卜素，色譜數(shù)據(jù)見表3。所有色譜峰的k值(容量因子)均在10以內(nèi)，表明流動(dòng)相的溶劑強(qiáng)度在合適范圍內(nèi)[6]。所有色譜峰的α值(分離因子)大于1，說明流動(dòng)相對(duì)樣品中目標(biāo)物質(zhì)具有良好的選擇性[5]。

圖2　番茄中類胡蘿卜素的液相色譜圖Fig.2　HPLC chromatogram of carotenoids of tomatoesthe peak number denoted is the same as that in Table 3

PeakNo.CompoundRetentiontime(min)Kαλ(nm)in-lineaλ(nm)reportedQ-ratiofoundQ-ratioreported1All-trans-lutein(全反式葉黃素)9.591.311.31(1,2)g420,443,475444,470213,15-cis-β-Carotene(13,15-順式-β-胡蘿卜素)11.321.721.31(1,2)342,436,465437,4580.140.16b313-cis-β-Carotene(13-順式-β-胡蘿卜素)11.471.761.02(2,3)337,454,4474770.300.32b,c4All-trans-β-carotene(全反式β-胡蘿卜素)11.961.881.06(3,4)453,479453,47759-cis-β-Carotene(9-順式-β-胡蘿卜素)12.391.981.05(4,5)346,447,475344,444,4700.090.10b,d613-cis-Lycopene(13-順式-番茄紅素)13.252.191.10(5,6)359,472360,437,463,4940.550.55e715-cis-Lycopene(15-順式-番茄紅素)13.712.301.05(6,7)359,441,466,496360,437,466,4940.600.61d,f85,5'-cis-Lycopene(5,5'-順式-番茄紅素)14.332.451.06(7,8)337,444,470362,444,470,5020.060.06e95-cis-Lycopene(5-順式-番茄紅素)15.482.731.11(8,9)360,445,472,504362,444,470,5020.060.06e109-cis-Lycopene(9-順式-番茄紅素)16.212.901.06(9,10)359,442,467,499360,438,464,4940.130.12e11All-trans-lycopene(全反式番茄紅素)20.133.851.32(10,11)361,447,472,504362,444,470,5020.060.06e

a.a gradient mobile phase of methyl tert-butyl ether containing 0.05% of TEA and acetonitrile containing 0.05% of TEA;b.a mobile phase of methanol-methylene chloride(99∶1);c.a gradient mobile phase of methanol-isopropanol(99∶1) and methylene chloride;d.a gradient mobile phase of 1-butanol-acetonitrile(30∶70) and methylene chloride;e.a mobile phase ofn-hexane-n-ethyl diisopropylamine(99.85∶0.15);f.a gradient mobile phase of methanol∶water methyl tert-butyl ether∶water(83∶15∶2) and methanol∶methyl tert-butyl ether∶water(8∶90∶2);g.numbers in parentheses represented values between two peaks

通過與各自標(biāo)準(zhǔn)品的UV吸收光譜和保留時(shí)間進(jìn)行對(duì)比，其中峰1,4,11被分別鑒定為全反式葉黃素、全反式β-胡蘿卜素和全反式番茄紅素。順式異構(gòu)體的判定遵循以下原則[4-5,14]：番茄紅素的單順式異構(gòu)體與其全反式結(jié)構(gòu)相比會(huì)發(fā)生約4 nm的藍(lán)移效應(yīng)，雙鍵順式異構(gòu)體比單鍵順式異構(gòu)體的藍(lán)移效應(yīng)更強(qiáng);居于鏈中間位置的順式異構(gòu)體，如13或15-順式-β-胡蘿卜素在340 nm左右會(huì)有強(qiáng)吸收峰;通過Q值鑒定異構(gòu)體，不同的異構(gòu)體具有特定的Q值。峰2與全反式-β-胡蘿卜素相比，發(fā)生了一個(gè)18 nm的強(qiáng)烈藍(lán)移，其Q值計(jì)算為0.14，與Chen等[14]鑒定的13,15-順式-β-胡蘿卜素Q值一致，因此初步判定峰2為13,15-順式-β-胡蘿卜素。峰3，5分別鑒定為13-順式-β-胡蘿卜素和9-順式-β-胡蘿卜素，因?yàn)橹魑辗宓乃{(lán)移和Q值(0.30,0.09)與前人鑒定的這兩種順式異構(gòu)體的Q值(0.32,0.10)一致[4-5,14]。同樣，峰6，7，8，10與全反式番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品相比，其主吸收峰均發(fā)生了一定程度的藍(lán)移(2，6，2，5 nm)，Q值(0.55，0.6，0.06，0.13)也符合文獻(xiàn)報(bào)道的13-順式-番茄紅素、15-順式-番茄紅素、5,5′-順式-番茄紅素和9-順式-番茄紅素的Q值(0.55，0.61，0.06，0.12)[4]，因此被分別判定為以上物質(zhì)。峰9的吸收光譜和全反式番茄紅素相似，因此其Q值與全反式番茄紅素Q值均為0.06左右，但從峰9較低的含量及其液相保留時(shí)間推測(cè)該峰并不是全反式番茄紅素，參照Lee等[6]與Chen等[14]對(duì)該峰的判定，初步判定該峰為5-順式-番茄紅素。

3結(jié)論

本文建立了一種可同時(shí)快速分析番茄中多種類胡蘿卜素及其異構(gòu)體的HPLC方法，以正己烷-乙醇(3∶4)作為最佳提取溶劑，甲基叔丁基醚+0.05%三乙胺為流動(dòng)相A，乙腈+0.05%三乙胺為流動(dòng)相B，C30柱進(jìn)行分離。該方法具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，可將洗脫時(shí)間縮短至30 min，能夠較好分離番茄中的11種類胡蘿卜素(3種全反式異構(gòu)體和8種順式異構(gòu)體)，從而為更加深入研究番茄中的類胡蘿卜素及其異構(gòu)體提供了一種可靠的基礎(chǔ)方法。

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Analysis of Carotenoids and Their Isomers in Tomatoes by HPLC Method

ZHANG Ying1，CHEN Hua-han1，LI Chun-mei1,2*

(1.College of Food Science and Technology，Huazhong Agricultural University，Wuhan430070，China;2.Key Laboratory of Environment Correlative Food Science，Huazhong Agricultural University，Ministry of Education，Wuhan430070，China)

Abstract：An analytical method was developed for the determination of carotenoids and their isomers in tomatoes by an improved high performance liquid chromatography(HPLC) method.Hexane-ethanol(3∶4) was chosen as the best solvent system for extracting carotenoids from tomatoes by stirring 30 min using a magnetic stirring apparatus.11 kinds of carotenoids including all-trans-forms of lycopene，β-carotene，lutein and 8 kinds of cis-isomers were completely separated in 30 min on a Carotenoid C30column(250 mm×4.6 mm i.d.，5 μm particle) using methyl tert-butyl ether(MTBE) containing 0.05% triethylamine(TEA) as mobile phase A and acetonitrile containing 0.05% TEA as mobile phase B by gradient elution.The flow rate was set at 1.0 mL/min，and the detection wavelength was 475 nm.For lutein，β-carotene and lycopene，the calibration curves were linear in the ranges of 0.1-5.0，0.1-20 and 0.1-100 μg/mL,respectively，with correlation coefficients more than 0.99.The limits of detection(LOD) were 0.13，0.12,0.56 μg/g，respectively，the limits of quantitation(LOQ) were 0.43，0.41,1.88 μg/g，respectively.The intra-day relative standard deviation(RSD) were in the range of 1.2%-5.3%，and the inter-day RSDs were 1.9%-7.5%.The recoveries were in the range of (88.9±6.1)%-(91.7±3.6)%，(92.3±4.3)%-(94.1±6.3)% and (102.6±4.2)%-(107.1±3.4)%，respectively.This HPLC method could be used to separate 11 types of carotenoids in tomatoes completely with a short time and high sensitivity.Key words：high performance liquid chromatography(HPLC);carotenoids;cis-isomers;tomato

收稿日期：2015-09-02;修回日期：2015-10-12

基金項(xiàng)目：中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金資助(2013PY094)

*通訊作者：李春美，博士，教授，研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)，Tel:027-87282111，E-mail：lichmyl@mail.hzau.edu.cn

doi:10.3969/j.issn.1004-4957.2016.04.013

中圖分類號(hào)：O657.72;O629.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào)：1004-4957(2016)04-0448-06