王慶玉

(盤錦市中心醫(yī)院 血管外科，遼寧 盤錦124000)

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胃癌組織中MIF與miR-451的表達及其臨床意義

王慶玉

(盤錦市中心醫(yī)院 血管外科，遼寧 盤錦124000)

摘要：目的研究胃癌組織中MIF與miR-451的表達及臨床意義。方法選取60例胃癌患者的腫瘤組織(觀察組)及其癌旁組織標本(對照組)，采用RT-PCR方法檢測胃癌組織和癌旁組織中MIF和miR-451的表達水平，并分析其與臨床病理的關(guān)系。結(jié)果RT-PCR結(jié)果顯示，胃癌患者的腫瘤組織標本中MIF表達水平顯著高于對照組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miR-451表達水平顯著低于對照組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。比較胃癌中MIF與miR-451的表達與臨床病理因素關(guān)系可知，MIF與miR-451的表達與患者的性別、年齡及遠處轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)，而與腫瘤分化程度、TNM分期、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)胃癌組MIF與miR-451表達具有顯著負相關(guān)性(r=-0.697,P=0.012)。結(jié)論胃癌組織中MIF的表達顯著升高，而miR-451的表達顯著下降，且具有明顯的相關(guān)性，可以作為重要的輔助指標對臨床胃癌的診斷、治療和預后判斷進行指導。

關(guān)鍵詞：胃癌；MIF；miR-451；表達

(ChinJLabDiagn,2016,20:0375)

胃癌是最常見的癌癥之一，也是導致癌癥死亡的第二大疾病，由于早期患者的臨床癥狀不明顯，且缺乏特異性的檢查指標，多數(shù)患者確診時已經(jīng)處于晚期，術(shù)后胃癌復發(fā)率高達60%[1，2]。研究表明，巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migrationinhibitory factor，MIF)與炎癥和免疫反應有著密切的關(guān)系，在細胞的生長和分化中起著十分重要的作用[3]。miRNA可以對細胞的增殖、凋亡以及分化等多種重要的生物學過程進行調(diào)控，并且在多種腫瘤組織中異常表達[4]。本研究檢測了胃癌及相應癌旁組織中MIF和miR-451的表達情況及相關(guān)性，探討其在胃癌的診斷、治療、預后判斷中的作用，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年8月至2015年6月我院收治的60例胃癌患者的腫瘤組織石蠟標本。術(shù)前，所有患者均未接受放療、化療治療，術(shù)后均經(jīng)過組織病理檢查證實，均未同時患有其他系統(tǒng)惡性腫瘤。其中男性38例，女性22例；年齡36-78歲，平均(55.4±12.6)歲。另外選取上述胃癌患者的癌旁組織作為對照組，癌旁組織病理標本位置距離腫瘤邊緣在5 cm以上，經(jīng)HE染色確診為非癌組織。

1.2方法

1.2.1試劑Trizol試劑、SuperScript.Ⅲ First-Strand Synthesis System，均由美國Invitrogen公司生產(chǎn)；Revert Aidrm First Strand cDNA Synthesis Kit(由美國MBI公司生產(chǎn))；SybrGreen PCR Master Mix(2X)(由美國ABI公司生產(chǎn))；引物由上海生工生物工程公司合成。

1.2.2檢測方法采用RT-PCR方法檢測，MIF以β-actin 為內(nèi)參，miR-451以U6為內(nèi)參，實驗步驟具體如下：①收集標本，石蠟切片，HE染色后閱片；②二甲苯脫蠟，梯度乙醇(100%、90%、80%、70%、50%)去除殘留的二甲苯；③嚴格按照試劑盒的步驟提取脫蠟后組織中的總RNA；④分別按照miRNA及MIF反轉(zhuǎn)錄試劑說明書合成cDNA第一鏈，合成的cDNA置于-20℃保存；⑤分別按照miRNA及MIF PCR試劑說明書將合成的cDNA進行RT-PCR檢測；采用2-ΔΔCt方法表示miR-451及MIF的相對表達量。

1.3統(tǒng)計學方法

2結(jié)果

2.1觀察組及對照組MIF與miR-451表達情況

RT-PCR結(jié)果顯示，胃癌患者的腫瘤組織標本中MIF表達水平顯著高于對照組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；miR-451表達水平顯著低于對照組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1　觀察組及對照組MIF與miR-451表達情況

2.2胃癌組織中MIF和miR-451的表達與臨床病理的關(guān)系

比較胃癌中MIF和miR-451的表達與臨床病理因素關(guān)系可知，MIF和miR-451的表達與患者的性別、年齡及遠處轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)，而與腫瘤分化程度、TNM分期、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05),見表2。

表2　胃癌組織中MIF與miR-451的表達與臨床病理的關(guān)系

2.3胃癌組織中MIF與miR-451表達的關(guān)系

胃癌組織中MIF的相對表達為(1.516±0.142)，miR-451的相對表達為(0.297±0.104)，經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)胃癌組MIF與miR-451表達具有顯著負相關(guān)性(r=-0.697,P=0.012)。

3討論

MIF是于20世紀60年代被發(fā)現(xiàn)的，是一種來源于T淋巴細胞的細胞因子，可以抑制巨噬細胞向血管外的游走。Meyer-Siegler等[4]在對前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，在存在遠處轉(zhuǎn)移的前列腺癌組織中，MIF的表達明顯升高。近年來，大量的國內(nèi)外研究顯示[5-7]，在肝癌、大腸癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌以及膀胱癌等多種惡性腫瘤中，MIF均有過度表達。MicroRNA (miRNA)是一類長約20-25個核苷酸的非編碼的單鏈RNA分子，可以通過與靶mRNA互補配對，促進目標mRNA的降解，或是使得蛋白翻譯受到抑制，在細胞增殖、分化、凋亡、基因調(diào)控、免疫應答以及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用[8]，也與血液系統(tǒng)、心血管、神經(jīng)發(fā)育等過程有著十分密切的聯(lián)系[9]。目前，圍繞胃癌mRNA研究較多的還有miR-21、miR-27a以及miR-146a等[10]。

本研究采用RT-PCR方法檢測了胃癌標本以及癌旁組織標本中MIF與miR-451的表達水平，結(jié)果表明，胃癌的病理標本中MIF表達水平均顯著高于對照組(P<0.05)；miR-451表達水平均顯著低于對照組(P<0.05)。通過比較胃癌中MIF與miR-451 的表達與其臨床病理關(guān)系可知，MIF與miR-451的表達與患者的腫瘤分化程度、TNM分期、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)(P<0.05)。馬寧[11]用RT-PCR方法研究了30例胃癌組織中MIF與miR-451的表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織中的MIF的表達明顯升高，而miR-451的表達明顯降低，兩者的表達均與胃癌的組織類型、TNM 分期、浸潤深度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，這與本研究的結(jié)果較一致。

本研究經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，胃癌組MIF與miR-451表達具有顯著負相關(guān)性(P<0.05)。MIF是一種獨特的、可以促進惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的細胞因子，在腫瘤發(fā)展中可能起著雙重的作用，既可以通過自分泌途徑對炎癥細胞的殺瘤活性進行調(diào)節(jié)，又可以通過旁分泌途徑促進腫瘤細胞的增殖和轉(zhuǎn)移[12]。腫瘤的血管新生過程需要多種促血管生長因子的調(diào)控，比如白細胞介素(IL)、組織生長因子等。MIF可以控制促血管生長因子的分泌，參與到惡性腫瘤的血管生成的過程中[13]。miR-451可能具有抑癌基因樣作用，而MIF可能是miR-451的作用靶點之一。研究表明，胃癌細胞中外源過表達miR-451可以使得MIF蛋白的表達下調(diào)，表明miR-451的表達下調(diào)部分可能是由于MIF的表達上調(diào)所導致的[14-15]。

總之，MIF和miR-451與胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程有著十分密切的關(guān)系。雖然在胃癌發(fā)展過程中MIF和miR-451表達的具體分子機制以及其作用尚未完全闡明，但結(jié)果表明，其異常的表達與腫瘤細胞的增殖、分化、浸潤以及轉(zhuǎn)移相關(guān)，可以為胃癌的診斷、治療以及預后預測提供重要的參考價值。

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Expression and clinical significance of miR-451 and MIF in gastric cancer

WANGQing-yu.

(Departmentofvascularsurgery，CentralHospitalofPanjinCity,Panjin124000，China)

Abstract:ObjectiveTo study the expression and clinical significance of miR-451 and MIF in gastric cancer tissues.Methods60 cases of gastric cancer patients with tumor tissue (observation group) and its adjacent tissue specimens (control group) was selected.The RT-PCR method was used to detect the expression level of miR-451 and MIF in gastric cancer tissues and adjacent tissues.Its relationship with clinical pathology was observed.ResultsRT-PCR results showed that the expression level of MIF in tumor tissues was significantly higher than that in control group (P<0.05).The expression level of miR-451 was significantly lower than that in control group (P<0.05).Compared the expression of miR-451 and MIF in gastric cancer,the expression of and MIF was associated with miR-451(P>0.05).Which was associated with tumor differentiation,TNM stage,invasion depth and lymph node metastasis (<0.05 P).Spearman rank correlation analysis showed that the expression of miR-451 and MIF in gastric cancer group had significantly negative correlation(r=-0.697,P=0.012).ConclusionThe expression of MIF in gastric cancer tissues is significantly increased,while the expression of miR-451 was significantly decreased,and it had significant correlation,which can be used as an important assistant index for diagnosis,treatment and prognosis of gastric cancer.

Key words:gastric cancer;MIF;miR-451;expression

(收稿日期：2015-10-11)

文獻標識碼：A

中圖分類號：R375.2

文章編號：1007-4287(2016)03-0375-03