王　葳　劉冬麗　李維熙　王文靜*　吳建敏

1.云南中醫(yī)學院中藥學院，云南　昆明　650500；2.昆明市兒童醫(yī)院，云南　昆明　650034

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蒲地藍消炎片中黃芩苷的含量測定

王葳1劉冬麗1李維熙1王文靜1*吳建敏2

1.云南中醫(yī)學院中藥學院，云南昆明650500；2.昆明市兒童醫(yī)院，云南昆明650034

【摘要】目的：探討蒲地藍消炎片中黃芩苷的含量測定方法。方法：利用高效液相色譜法對蒲地藍消炎片中黃芩苷的含量測定進行測定。結(jié)果：黃芩苷的線性范圍為0.422～16.88μg，R2=0.9999,加樣回收率為95.03%～101.1%(RSD=1.99%)。結(jié)論：建立的方法更簡便、準確、易控，可用于蒲地藍片中黃芩苷的含量測定。

【關(guān)鍵詞】蒲地藍消炎片；黃芩；黃芩苷；HPLC

蒲地藍消炎片收載于中藥部頒標準中[1]，由黃芩、蒲公英、板藍根、苦地丁等四味中藥組成，具有清熱解毒、抗炎消腫的功效，臨床可用于癤腫、咽炎、扁桃腺炎等。黃芩是蒲地藍消炎片的主藥之一，具有清熱燥濕、瀉火解毒，止血的功效，其有效成分為黃芩苷等多種成分[2]?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃芩具有抗炎、保護腦缺血及心肌缺血再灌注損傷的神經(jīng)、抗寄生蟲等作用[3]。為控制該制劑的質(zhì)量，對組方中黃芩藥材的質(zhì)量情況進行檢測，并制定合理檢查標準。

蒲地藍消炎片在市場上銷售的生產(chǎn)廠家較多，但目前尚無統(tǒng)一的質(zhì)量控制方法。研究根據(jù)組方及《中國藥典》中黃芩藥材項下黃芩苷含量要求，依托云南白藥集團生產(chǎn)的多批蒲地藍消炎片樣品，對原有HPLC測定法進行了改進和提高，制訂蒲地藍消炎片中黃芩苷含量的測定方法，以控制制劑中黃芩藥材的投料量，從而保證藥物的質(zhì)量和療效。

1儀器與材料

1.1儀器Waters2695高效液相色譜儀(紫外檢測器)。

1.2材料黃芩苷對照品(批號：110715-201318，中國藥品生物制品檢定所)；蒲地藍消炎片(云南白藥集團股份有限公司)。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件Sunfire C18色譜柱 (4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相甲醇-0.5‰磷酸水溶液(43∶57)；流速1.0ml/min；柱溫30℃；進樣量20μl；檢測波長：280 nm[4-5]。

2.2對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對照品21.1mg，加甲醇溶解并定容至50 ml (0.422 mg/ml)，即得。

2.3供試品溶液的制備取重量差異項下本品10片，除去包衣，精密稱定，研細，混勻，取約0.5g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，稱重，超聲處理(功率180w、頻率53kHz)60min，放置至室溫，用70%甲醇補足減失的重量。搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4陰性供試品溶液取按處方制備方法制備缺黃芩的陰性對照樣品2g，按供試品溶液的制備方法制備，即得。

2.5專屬性考察按照“2.1”條件進樣，結(jié)果表明供試品的色譜圖中，有一個色譜峰與對照品色譜峰的保留時間一致，空白樣品的色譜圖中在與對照品相同保留時間(±5%)位置上沒有吸收峰，說明該制劑中的其它藥物及輔料對黃芩苷的含量測定沒有干擾，用本法測定黃芩的含量專屬性較強、靈敏度高。見圖1。

2.6線性關(guān)系考察分別精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0ml，稀釋并定容至10ml，注入液相色譜儀，按照“2.1”的色譜條件進行分析。以峰面積Y對進樣量X回歸處理，得回歸方程為Y=3311222.6X+ 38811.9 (R2=0.9999)，黃芩苷在0.422～16.88μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.7精密度實驗分別精密吸取黃芩苷對照品溶液、供試品(ZAB1302) 溶液各20μl，連續(xù)進樣6次，按“2.1”色譜條件測定峰面積，結(jié)果對照品峰面積RSD0.33%，供試品峰面積RSD0.37%，結(jié)果表明精密度良好。

2.8穩(wěn)定性實驗分別取黃芩苷對照品溶液(0.014 mg/ml)、供試品(ZAB1302) 溶液，按“2.1”項下方法，于第0、2、4、6、8、24 h測定。黃芩苷對照品峰面積RSD0.40%，供試品溶液的峰面積RSD0.49%。結(jié)果表明黃芩苷對照品溶液和蒲地藍消炎片供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9重復性實驗取同一批蒲地藍消炎片(批號：ZAB1302)，按供試品溶液的制備方法制備6份供試品溶液，按“2.1”項下方法分別測定，以供試品中黃芩苷的含量計算，RSD0.78%。

2.10加樣回收率實驗分別取同一批已知含量的蒲地藍消炎片(批號：ZAB1302，黃芩苷15.38mg/片)9份，每份0.25g，精密稱定，精密加入黃芩苷對照品溶液適量(3個水平，每水平3份)，揮干甲醇，按“2.3”項下方法制備供試液，按“2.1”項下方法測定黃芩苷含量，以加入量計算，回收率在95.03%～101.1%，平均回收率為96.94%，RSD1.99%；結(jié)果見表1。

2.11樣品含量測定取蒲地藍消炎片10批，按“2.1”項下方法測定其中黃芩苷的含量，每批測定兩次，其結(jié)果見表2，每片黃芩苷含量在11.14～16.44mg之間。

表1　蒲地藍消炎片樣品加樣回收率試驗結(jié)果

表2　10批蒲地藍消炎片中黃芩苷含量測定結(jié)果

3討論

蒲地藍消炎片方中黃芩用量較大，根據(jù)《中國藥典》規(guī)定，其主要成分黃芩苷含量相對較高，故將黃芩苷作為該制劑質(zhì)量控制的含量指標。但復方中各藥材之間相互影響，含量測定方法、規(guī)定限量等需做相應的調(diào)整，并根據(jù)實際測定情況制訂相應的具有實用價值的標準。

選擇RP-HPLC法檢測波長時，取黃芩苷對照品溶液在190～800nm范圍內(nèi)測量，結(jié)果表明280 nm為最大吸收，且樣品中其它成分在此波長處對測定無干擾，靈敏度高，可準確測定黃芩苷，故測定波長選定280 nm[4]。

《中國藥典》規(guī)定黃芩中黃芩苷的限量檢查方法需要煎煮提取，但在復方中煎煮提取法損失較多，且耗時、繁瑣，經(jīng)過正交實驗我們選擇了超聲提取法，結(jié)果表明該法不僅簡便、易行，且準確度更高。而藥典中規(guī)定的黃芩苷限量檢查的RP-HPLC方法流動相為甲醇-水-磷酸 (47∶53∶0.2)，經(jīng)過試驗，選擇甲醇-0.5‰磷酸水溶液(43∶57)為流動相，改良后的條件更有利于保護色譜材料，且易于實現(xiàn)。

參考文獻

[1]WS3-B-0649-91，中國藥品部頒標準[S]，中藥分冊.

[2]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010．

[3]文敏，李雪，付守廷．黃芩苷藥理作用研究新進展[J]．沈陽藥科大學學報，2008，25(2)：158-162．

[4]邵禮梅，王云龍，李延雪．高效液相色譜法測定蒲地藍消炎片中黃芩苷與黃芩素含量[J]．中國藥業(yè)，2012，21(4)：37-38．

[5]靜國峰．HPLC測定蒲地藍消炎片中黃芩苷的含量[J]．中國中藥雜志，2008，33(15)：1919．

Determination of baicalin of Pudilanxiaoyan Tablet by HPLC

WANG Wei1LIU Dongli1LI Weixi1WANG Wenjing*WU Jianmin2

1.Yunnan university of Traditional Chinese Medicine, Kunming 650500, China;2.Kunming Children′s Hospital, Kunming 650228, China

Abstract:HPLC was used to determine the content of baicalin to control amount of Scutellaria baicalensis in the Pudilanxiaoyan Tabelet. The content of baicalin range between 0.422 to 16.88 μg, R2=0.9999, the recovery range from 95.03to 101.1%. The method is quick, sensitive and repeatable for determination of the content of baicilin of Pudilanxiaoyan Tablet.

Key words:Pudilanxiaoyan Tablet; Scutellaria baicalensis; baicalin; HPLC

(收稿日期：2015.11.20)

【中圖分類號】R284.1

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)03-0017-02

作者簡介：王葳，女，講師，研究方向：分析化學。E-mail：329999806@qq.com通信作者：王文靜，女，副教授，研究方向：中藥化學成分與質(zhì)量研究。E-mail：2027617008@qq.com