microRNA在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及意義

姚樂(lè)綜述李勝棉審校

作者單位：050017 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院

關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝癌;microRNA特異表達(dá)

原發(fā)性肝癌(primary hepatic carcinoma，PHC，以下簡(jiǎn)稱肝癌)是全球最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，據(jù)國(guó)際癌癥研究中心(IARC)統(tǒng)計(jì)，2012年全球肝癌發(fā)病人數(shù)為78.2萬(wàn)，其中中國(guó)肝癌發(fā)病人數(shù)約39.4萬(wàn)(50%)，死亡38.3萬(wàn)[1-2]，死亡/發(fā)病比(M：I)在97%左右，嚴(yán)重威脅著人們的健康及生命。

原發(fā)性肝癌的病因已基本明確，在中國(guó)，乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒是原發(fā)性肝癌的主要病因。但原發(fā)性肝癌的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，知之甚少，且缺乏有效的治療手段。絕大多數(shù)肝癌患者確診時(shí)一般已屬晚期，根治性手術(shù)的復(fù)發(fā)率亦高達(dá)21.8%。因此，尋找有效的生物學(xué)標(biāo)志物，有利于原發(fā)性肝癌的早期診斷及治療，并可以有效控制疾病進(jìn)展及降低死亡率。目前仍缺少有效的降低肝癌死亡率的普查方案。長(zhǎng)期以來(lái)血清AFP水平仍是臨床診斷原發(fā)性肝癌最常用的腫瘤標(biāo)志物，其靈敏性及特異性分別為60%～80%和70%～90%，且在直徑<3 cm的小肝癌或早期肝癌的診斷方面具有較高的假陽(yáng)性率。還有一些實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)可用于肝癌的診斷，如α-L-巖藻糖苷酶(AFU)、磷脂酰肌醇(GPC3)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、AFP mRNA、GGT mRNA、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)基因等。盡管如此，大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物在診斷的特異性及敏感性方面仍不甚令人滿意。因此，許多學(xué)者一直在努力研究以求發(fā)現(xiàn)新的肝癌腫瘤標(biāo)志物，從而提高肝癌早期診出率，實(shí)現(xiàn)肝癌早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。雖然microRNA作用目前尚未研究清楚，但其參與原發(fā)性肝癌發(fā)生、發(fā)展已逐漸明確，因而成為近些年原發(fā)性肝癌研究的熱點(diǎn)。陸續(xù)發(fā)現(xiàn)的microRNA在原發(fā)性肝癌中的異常表達(dá)同樣加深了對(duì)于這一腫瘤的認(rèn)識(shí)。因此microRNA也可作為腫瘤標(biāo)志物用于原發(fā)性肝癌診斷和預(yù)后判斷，也可用于原發(fā)性肝癌高危人群監(jiān)測(cè)，并有望在原發(fā)性肝癌診斷，尤其是早期診斷方面取得突破性進(jìn)展，成為原發(fā)性肝癌分子治療靶點(diǎn)。

1　MicroRNA

1.1　簡(jiǎn)介

microRNA(miRNA)是一類內(nèi)生的、含20～24個(gè)核苷酸的小RNA，大多數(shù)miRNA基因在基因組中主要以單拷貝、多拷貝或基因簇(cluster)的形式存在，在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮多種重要的調(diào)節(jié)作用,如參與調(diào)控動(dòng)植物中轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)。每個(gè)miRNA可以有許多個(gè)靶基因，而同一個(gè)基因也可以被多個(gè)miRNA調(diào)節(jié)。這種錯(cuò)綜復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)既可以通過(guò)多個(gè)靶基因的表達(dá)被1個(gè)miRNA調(diào)控，也可以通過(guò)某個(gè)靶基因的表達(dá)被幾個(gè)miRNA組合起來(lái)精細(xì)調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)。

microRNA存在多種形式，由最原始的pri-miRNA發(fā)展至成熟的miRNA需要3步：首先，miRNA在細(xì)胞核中生成最原始的轉(zhuǎn)錄片段—長(zhǎng)度為300～1 000個(gè)堿基的pri-miRNAs；pri-miRNAs經(jīng)過(guò)RNA內(nèi)切酶Ⅲ Drosha的剪切及一系列復(fù)雜過(guò)程加工后，成為長(zhǎng)度為70~90個(gè)堿基的pre-miRNAs，即microRNA前體；然后pre-miRNAs被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中,在這里Dicer酶將pre-miRNA剪切成為長(zhǎng)為20~24 nt的成熟miRNA。

1.2　特征

miRNA負(fù)性調(diào)節(jié)靶mRNA的功能主要是通過(guò)與靶mRNA的3'非翻譯區(qū)(3'UTR區(qū))完全或不完全的堿基互補(bǔ)結(jié)合來(lái)抑制靶mRNA轉(zhuǎn)錄后翻譯或使靶mRNA降解，從而影響基因的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。miRNA的5'端的第2～8個(gè)核苷酸與靶mRNA的3'非翻譯區(qū)的完全匹配決定了miRNA的特異性，所以這幾個(gè)核苷酸序列被稱作“種子序列”。

miRNA具有以下4個(gè)明顯特征：①miRNA在真核生物中普遍存在，它自身并不具有蛋白質(zhì)編碼基因(ORF)及開(kāi)放閱讀框架；②成熟的miRNA為單鏈結(jié)構(gòu)，5'端有一磷酸基團(tuán)，3'端為羥基；③一般的長(zhǎng)度為20～24個(gè)堿基，但在3'端長(zhǎng)度可以有1～2個(gè)堿基的變化；④在不相同的物種之間miRNA具有極高的保守性，表達(dá)具有嚴(yán)格的組織特異性和時(shí)空性。

由于miRNAs具有的普遍性和多樣性，提示miRNAs具有多種生物學(xué)功能。越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，在調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡、腫瘤發(fā)生、激素分泌、脂肪代謝等方面miRNAs都發(fā)揮重要的作用。

1.3　功能

miRNA與靶基因轉(zhuǎn)錄體序列互補(bǔ)的程度決定了其對(duì)靶mRNA的作用，主要有3種作用方式：第1種是靶基因的mRNA被miRNA切斷-miRNA與靶基因mRNA的3'非翻譯區(qū)完全互補(bǔ)結(jié)合，然后切斷靶mRNA，這種功能和作用方式與siRNA十分相似。大部分miRNA在植物中以這一方式行使作用，靶基因mRNA被切斷后，加上多個(gè)U后無(wú)poly(A)的分子3'端被很快降解，相反在一定時(shí)間內(nèi)含poly(A)的分子可穩(wěn)定存在(如擬南芥miR-171)。第2種是抑制靶基因mRNA的翻譯——通過(guò)與靶基因mRNA的3 '非翻譯區(qū)不完全互補(bǔ)結(jié)合，從而阻滯翻譯，但并不影響靶mRNA的穩(wěn)定性，目前發(fā)現(xiàn)的種類最多的miRNA是以這種作用方式存在于動(dòng)物中(如線蟲lin-4)。但在植物中miRNA極少通過(guò)這種作用方式來(lái)調(diào)控靶基因。第3種是同時(shí)擁有上述2種作用方式-結(jié)合抑制：miRNA與靶基因mRNA進(jìn)行堿基完全互補(bǔ)結(jié)合時(shí)，直接靶向切斷靶mRNA；但與靶基因mRNA進(jìn)行不完全堿基互補(bǔ)結(jié)合時(shí)，可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。

2　microRNA與原發(fā)性肝癌

在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，microRNA既可作為癌基因，也可作為抑癌基因來(lái)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡和分化，起到促進(jìn)或抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用，且越來(lái)越多的證據(jù)顯示異常表達(dá)的microRNA與腫瘤發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系。

原發(fā)性肝癌研究者多年來(lái)通過(guò)多種技術(shù)檢測(cè)出一系列與原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后相關(guān)的miRNA。這些miRNA 在原發(fā)性肝癌中表達(dá)上調(diào)，執(zhí)行癌基因的功能，被稱為“腫瘤miRNA”(OncomiRs)。另一部分miRNA則執(zhí)行抑癌基因的功能。Murakami等[3]利用基因芯片技術(shù)首先發(fā)現(xiàn)了miRNA在肝細(xì)胞癌和非肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)差異。通過(guò)對(duì)24例肝細(xì)胞癌組織及22例癌旁組織miRNA表達(dá)譜的分析，在肝細(xì)胞癌組織中發(fā)現(xiàn)pre-miR-18、miR-18和miR-224表達(dá)明顯上調(diào)，而miR-199a-3p、miR-195、miR-199a、miR-200a 和miR-125a則表達(dá)下調(diào)。Varnholt 等[4]利用實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)技術(shù)檢測(cè)52例丙肝陽(yáng)性的原發(fā)性肝癌患者，通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)癌組織較癌旁組織中miR-10a、miR-100和miR-122的表達(dá)量高5倍以上，相反miR-145和miR-198的表達(dá)量則出現(xiàn)5倍以上的下調(diào)，在肝癌組織中miR-9、miR-15a、Let-79則表達(dá)上調(diào)。Huang等[5]的研究發(fā)現(xiàn)在非肝炎病毒相關(guān)的原發(fā)性肝癌及癌旁組織中，僅在癌旁組織中表達(dá)的6個(gè)miRNA分別為：miR-20b、miR-23a、miR-198、miR-513、miR-518b、miR-525，僅在肝癌組織中表達(dá)的18個(gè)miRNA分別為：miR-34a、miR-146、miR-146a、miR-221、miR-523、miR-526a等。Ladeiro 等[6]發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞癌組織及良性腫瘤中，miR-10b、miR-21 和miR-222在肝細(xì)胞癌組織中表達(dá)上調(diào)，而miR-200c和miR-203在肝臟良性腫瘤組織中表達(dá)下調(diào)，所以可以通過(guò)檢查這些miRNA的差異表達(dá)來(lái)鑒別診斷肝臟良性腫瘤與肝細(xì)胞癌。鄧治亮等[7]利用microRNA芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)了在原發(fā)性肝癌早期復(fù)發(fā)組和非早期復(fù)發(fā)組的miRNA表達(dá)差異，即在早期復(fù)發(fā)組中miR-144、miR-451、miR-486-5P和miR-602較非早期復(fù)發(fā)組表達(dá)上調(diào)，miR-551b、miR-93、miR-502-3P表達(dá)相對(duì)下調(diào)。宋曉等[8]通過(guò)基因芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)在高轉(zhuǎn)移性肝細(xì)胞癌中癌組織中的miR-20b、miR-22、miR-27b、miR-29a、miR-30e、miR-151-3p、miR-193b、miR-200a、miR-221、miR-222、miR-361-3p、miR-423-5p和miR-425較相對(duì)應(yīng)癌旁組織表達(dá)上調(diào)，其中miR-27b上調(diào)表達(dá)最明顯；miR-572、miR-638、miR-671-5p、miR-762、miR-1224-5p、miR-1305、miR-3137、miR-3679-5p和miR-4257表達(dá)相對(duì)下調(diào)，其中miR-572表達(dá)下調(diào)最明顯。對(duì)差異表達(dá)的microRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)，通過(guò)KEGG通路和GO分析表明，這些失調(diào)的miRNAs在細(xì)胞分化、細(xì)胞侵襲、細(xì)胞凋亡和MAPK 信號(hào)通路等方面發(fā)揮著十分重要的作用。

3　差異表達(dá)的microRNA在原發(fā)性肝癌中的作用

越來(lái)越多的研究表明存在特異性表達(dá)的microRNA在原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展、診斷、靶向治療及預(yù)后等方面具有重要作用。Furut等[9]發(fā)現(xiàn)miR-124在原發(fā)性肝癌中表達(dá)降低，且可作用于CDK6，通過(guò)導(dǎo)致肝癌細(xì)胞發(fā)生甲基化使 細(xì)胞周期停滯于G1/S期。An FF等[10]證實(shí)let-7g通過(guò)上調(diào)p16(INK4A)及下調(diào)c-Myc來(lái)阻滯肝癌細(xì)胞分化。miR-221位于X染色體上，在原發(fā)性肝癌組織中表達(dá)上調(diào)，其過(guò)表達(dá)可導(dǎo)致抑癌基因p27(Kip1)表達(dá)下調(diào)，從而促進(jìn)原發(fā)性肝癌的發(fā)生。也有研究顯示miR-221能通過(guò)抑制PPP2R2A和抑癌基因TIMP-3的表達(dá)，進(jìn)而激活A(yù)KT通路來(lái)促進(jìn)HCC細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。Li等[11]利用實(shí)時(shí)定量技術(shù)檢測(cè)46例肝癌患者血清,發(fā)現(xiàn)miRNA-221表達(dá)程度與腫瘤分期、大小呈明顯正相關(guān)，且miRNA-221低表達(dá)者的生存率明顯高于miRNA-221高表達(dá)患者。黃曉卉等[12]通過(guò)基因芯片技術(shù)及實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)了36例原發(fā)性肝癌組織中microRNA表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn) miR-338-3P在肝癌組織中表達(dá)下調(diào)，且與腫瘤分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及門脈瘤栓密切相關(guān)，提示其可作為診斷肝癌的生物學(xué)標(biāo)志物。Li等[13]對(duì)肝細(xì)胞癌患者血清進(jìn)行microRNA表達(dá)譜研究發(fā)現(xiàn)miR-375在肝癌診斷方面靈敏度和特異性可達(dá)100%及96%，為肝癌的診斷提供了新的更準(zhǔn)確的血清學(xué)標(biāo)志物。

3.1　miR-29

miR-29基因位于人7q32和1q32,因其在多種腫瘤組織，如肝癌、乳腺癌、胃癌、肺癌等表達(dá)下調(diào)而被認(rèn)為是1種抑癌基因，但卻在結(jié)腸癌等中表達(dá)上調(diào)。Parpart等[14]發(fā)現(xiàn)將肝細(xì)胞癌患者以AFP水平分組，miR-29家族表達(dá)水平與AFP呈負(fù)相關(guān)，AFP可抑制miR-29的表達(dá)，miR-29a可負(fù)向調(diào)控DNMT3A、DNMT3B的表達(dá)，且c-MYC 與miR-29a/b-1的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物相關(guān)。錢其軍等[15]研究表明miR-29b在肝癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，并與DNMT3A、DNMT3B的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，繼而指出miR-29b也可在轉(zhuǎn)錄水平負(fù)向調(diào)控DNMT3A、DNMT3B的表達(dá)，他們又通過(guò)進(jìn)一步研究闡明可利用miR-29b對(duì)DNMT 3A和DNMT3B 的負(fù)向調(diào)控作用阻斷DNMT3A 和DNMT3B 對(duì)一些抑癌基因的異常甲基化,從而使抑癌基因在腫瘤細(xì)胞中正常表達(dá),進(jìn)而成為一種有效的腫瘤輔助治療手段。

3.2　miR-25

miR-25是miR-106b-25中的一員，位于7q22.1，在多種腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)，如卵巢癌、胃癌、結(jié)腸癌。Kim等[16]研究證實(shí)，miR-25在胃癌組織中較癌旁組織表達(dá)量高，且與腫瘤浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Zhang等[17]發(fā)現(xiàn)miR-25在卵巢癌組織中的表達(dá)較癌旁組織明顯上調(diào)，miR-25上調(diào)表達(dá)可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖，證實(shí)miR-25可抑制卵巢癌細(xì)胞凋亡，解除miR-25介導(dǎo)的內(nèi)源性凋亡途徑后，許多凋亡蛋白例如Bim,Bax和 caspase-3將表達(dá)上調(diào)。Su等[18]通過(guò)PT-PCR檢測(cè)131例肝細(xì)胞癌及相應(yīng)癌旁組織，發(fā)現(xiàn)miR-25在肝細(xì)胞癌組織較癌旁正常組織表達(dá)上調(diào)，并與肝細(xì)胞癌TNM分期、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，且高表達(dá)miR-25的肝細(xì)胞癌患者生存期也較短，進(jìn)而證明miR-25是肝細(xì)胞癌不良預(yù)后的生物學(xué)標(biāo)志物。

3.3　miR-124

miR-124是1種在中樞神經(jīng)系統(tǒng)高表達(dá)的microRNA，既往研究表明，miR-124通過(guò)參與細(xì)胞周期，細(xì)胞分化，細(xì)胞發(fā)育和遷移來(lái)調(diào)控多種靶蛋白表達(dá)。miR-124在多種腫瘤組織中如結(jié)腸癌、胃癌、肝癌等表達(dá)下調(diào)，并受DNA甲基化調(diào)控。Lu等[19]研究證實(shí)miR-124在肝癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，且過(guò)表達(dá)的miR-124可促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡，抑制肝癌細(xì)胞增殖。Lang等[20]證實(shí)高表達(dá)的miR-124通過(guò)阻滯G1期細(xì)胞來(lái)抑制肝癌細(xì)胞的增殖及腫瘤發(fā)生，并證實(shí)了 PIK3CA是其靶基因，miR-124的高表達(dá)可導(dǎo)致PIK3CA mRNA和蛋白水平表達(dá)下降。miR-124作為負(fù)調(diào)控及抑制腫瘤細(xì)胞因子在一定程度上通過(guò)抑制PIK3CA的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。Zeng等[21]證實(shí)miR-124在與丙肝相關(guān)的肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌中表達(dá)下調(diào)，高表達(dá)miR-124可抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移，且過(guò)表達(dá)的miR-124可降低SMYD3及其下游靶基因c-Myc和MMP9的蛋白表達(dá)水平，從而表明miR-124表達(dá)下調(diào)與膽管細(xì)胞癌的發(fā)生密切相關(guān)。

3.4　miR-182

Wang等[22]通過(guò)基因芯片技術(shù)在小鼠肝癌及癌旁組織中篩選出70個(gè)特異性表達(dá)的microRNA,其中miR-182在肝癌組織中表達(dá)顯著上調(diào)，且其可通過(guò)直接抑制Cebpa來(lái)調(diào)節(jié)小鼠肝癌組織中CEBPA/miR-122/IGF1R通路，而在人類組織中，miR-182可通過(guò)一保守位點(diǎn)來(lái)抑制Cebpa表達(dá)，由此證實(shí)miR-182在人類及小鼠肝癌組織中表達(dá)上調(diào)及其可作為肝癌診斷及治療的一個(gè)潛在的生物學(xué)標(biāo)志物。有研究證實(shí)，在中低度惡性MCF-7細(xì)胞中miR-182表達(dá)顯著高于高度惡性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231[23]；在肺癌中，miR-182在肺轉(zhuǎn)移癌中的表達(dá)低于原發(fā)性肺癌，提示miR-182可能抑制肺癌轉(zhuǎn)移[24]。但也有研究證實(shí)，miR-182在某些腫瘤中表達(dá)上調(diào)，如子宮內(nèi)膜癌組織、前列腺癌、結(jié)直腸癌、卵巢透明細(xì)胞癌。

3.5　miR-122

miR-122是1種在肝臟中特異表達(dá)的microRNA，占肝臟中microRNA的70%，并可調(diào)節(jié)肝臟發(fā)育。Gramantieri等[25]通過(guò)基因芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)miR-122在肝癌細(xì)胞系及肝癌組織中表達(dá)下調(diào)，進(jìn)一步證實(shí)miR-122可直接作用于cyclin G1,高表達(dá)的miR-122可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡及抑制腫瘤細(xì)胞增殖，在原發(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮抑癌基因的作用。Fornent等[26]證實(shí)miR-122通過(guò)直接作用于cyclin G1來(lái)抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，進(jìn)而影響p53的轉(zhuǎn)錄活性及穩(wěn)定性，降低肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。Shan等[27]證實(shí)miR-122可促進(jìn)丙肝病毒的復(fù)制，雖有研究表明miR-122在肝細(xì)胞癌組織中表達(dá)下調(diào)，但在丙肝相關(guān)的肝癌患者中miR-122卻表達(dá)上調(diào)，證實(shí)miR-122與丙肝病毒之間存在相互作用。眾多研究表明，miR-122有望成為原發(fā)性肝癌靶向治療的新靶點(diǎn)。

3.6　miR-106-25/miR-17-92基因簇

miR-17-92基因簇是第1個(gè)被發(fā)現(xiàn)在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮作用的基因簇，其在人類基因組中有2個(gè)“旁系同源”，分別為：miR-106b-25基因簇及miR-106a-363基因簇?；谄洹胺N子序列”可將miR-17-92基因簇分為4個(gè)家族，分別為miR-17,miR-92,miR-18,miR-19。有研究表明，高表達(dá)的miR-106-25基因簇、miR-17-92基因簇不僅在肝硬化的發(fā)生中發(fā)揮作用，而且其在肝硬化導(dǎo)致的肝癌中發(fā)揮重要作用。許多研究證實(shí)miR-17-92基因簇及miR-106b-25基因簇可在多種腫瘤中特異性表達(dá)，如B細(xì)胞淋巴瘤、乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌等。最早研究發(fā)現(xiàn)，pre-miR-18及miR-18,miR-17,miR-20,miR-93和miR-106可在肝癌組織中表達(dá)上調(diào)[3,28]，后續(xù)的研究已證明其它家族也具有相同的特性[5,29-31]。miR-17-92基因簇及miR-106b-25基因簇可編碼的肝臟病變包括慢性肝炎病毒感染、肝纖維化、肝硬化和肝細(xì)胞癌。盡管已有研究證實(shí)這2個(gè)基因簇可與抑癌基因PTEN和癌基因c-Myc相互作用，且參與肝細(xì)胞癌相關(guān)的信號(hào)通路(TGF-β和Wnt/β-catenin途徑)，但兩基因簇在肝癌中的作用仍需進(jìn)一步研究從而為肝癌的診斷、治療及評(píng)估預(yù)后提供新的方法。

綜合多項(xiàng)研究可得出：不同腫瘤組織中microRNA表達(dá)不完全相同，其原因可能為不同腫瘤中microRNA靶基因不完全相同，因?yàn)閙icroRNA的作用是由其下游靶基因的生物學(xué)效應(yīng)決定,同時(shí)microRNA的表達(dá)具有組織特異性及時(shí)空性，另外，實(shí)驗(yàn)樣本的不同和實(shí)驗(yàn)方法的不同也可造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異，所以需要大量樣本來(lái)進(jìn)一步研究。

綜上所述，microRNA在不同腫瘤中的表達(dá)情況不同，其可能在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮了腫瘤抑制或促進(jìn)作用，因而為進(jìn)一步探討腫瘤發(fā)生機(jī)制及治療提供了新的思路。雖然在細(xì)胞分化、組織發(fā)育、基因調(diào)節(jié)與疾病調(diào)控等方面對(duì)miRNA的研究已取得了較大的進(jìn)展，但目前對(duì)miRNA的研究仍一直處于初級(jí)階段,雖然大量的miRNA已被發(fā)現(xiàn)，但它們的功能和作用機(jī)制尚未完全清楚,極大地限制了對(duì)miRNA特異性靶基因的確定,使現(xiàn)有的研究報(bào)道中可能存在假陽(yáng)性結(jié)果。雖然通過(guò)沉默或上調(diào)表達(dá)可研究某些miRNA的功能,但對(duì)它們?nèi)绾螌?shí)現(xiàn)特異性表達(dá)以及如何協(xié)同調(diào)控靶基因的miRNA的認(rèn)識(shí)仍存在局限性。因此,關(guān)于miRNA在細(xì)胞分化、組織發(fā)育、基因調(diào)節(jié)和疾病調(diào)控中的作用,很多還處于假設(shè)推斷階段。當(dāng)下研究者的首要任務(wù)仍是不斷探索新的miRNA并闡明其功能和作用機(jī)制,相信通過(guò)對(duì)miRNA在動(dòng)物基因中調(diào)控功能和作用機(jī)制的深入研究，可為人類癌癥的治療帶來(lái)更多的福音。

參考文獻(xiàn)

[1]Liver Cancer Estimated Incidence，Mortality and Prevalence Worldwide in 2012[EB/OL]:http://globocan.iarc.fr/Pages/fact_sheets_population.aspx.

[2]Liver Cancer Estimated Incidence，Mortality and Prevalence China in 2012[EB/OL]:http://globocan.iarc.fr/Pages/fact_sheets_population.aspx.

[3]Murakami Y,Yasuda T,Saigo K,et al.Comprehensive analysis of microRNA expression patterns in hepatocellular carcinoma and non-tumorous tissues〔J〕.Oncogene,2006,25(17):2537-2545.

[4]Varnholt H,Drebber U,Schulze F,et al.MicroRNA gene expression profile of HCV-associated hepatocellular carcinoma〔J〕.Hepatology,2008,47(4):1223-1232.

[5]Huang YS,Dai Y,Yu XF,et al.Microarray analysis of microRNA expression in hepatocellular carcinoma and nontumorous tissues without viral hepatitis〔J〕.J Gastroenterol Hepatol,2008,23(1):87-94.

[6]Ladeiro Y,Couchy G,Balabaud C,et al.MicroRNA profiling in hepatocellular tumors is associated with clinical features and oncogene/tumor suppressor gene mutations〔J〕.Hepatology,2008,47(6):1955-1963.

[7]鄧治亮,孫建,區(qū)應(yīng)亮,等.原發(fā)性肝癌術(shù)后早期復(fù)發(fā)密切相關(guān)microRNA 的篩選及應(yīng)用〔J〕.中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2012,33(4):494-498.

[8]宋曉,蔡振旭.MicroRNAs的失調(diào)在高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞癌中的作用〔J〕.中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2013,7(22):10092-10097.

[9]Furut M,Ozawkie KI,Kanaka S,et al.miRNA-124 and miRNA-203 are epigenetically silenced tumor-suppressive Microfloras in hepatocellylar carcinoma〔J〕.Carcinogenesis,2010,31(5):766-776.

[10]An FF,Wang H,Chen YC,et al.Has-let-7g inhibits proliferation of hepatocellylar carcinoma cells by down-regulation of c-Myc and up-regulation of p16(INK4A)〔J〕.Int J Cancer,2010,128:319-331.

[11]Li J，Wang Y，Yu W，et al.Expression of serum miRNA-221 in human hepatocellylar carcinoma and its prognostic significance〔J〕.Biochem Biophys Res Common,201l,406(1):70-73.

[12]黃曉卉，陳連周，蘇喬，等.miR-338-3P在肝癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版),2011,5(6):465-470.

[13]Li LM,Hu ZB,Zhou ZX,et al.Serum miRNA profiles serve as novel biomarkers for HBV infection and diagnosis of HBV-positive hepatocarcinoma〔J〕.Cancer Res,2010,70(23)：9798-9807.

[14]Parpart S,Roessler S,Dong F,et al.Modulation of miR-29 expression by alpha-fetoprotein is linked to the hepatocellular carcinoma epigenome〔J〕.HEPATOLOGY,2014,60(3):872-883.

[15]呂賽群,金華君,錢其軍.miR-29對(duì)肝癌細(xì)胞中甲基化轉(zhuǎn)移酶表達(dá)的調(diào)控作用〔J〕.浙江理工大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(1):101-104.

[16]Kim YK,Yu J,Han TS,et al.Functional links between clustered microRNAs:suppression of cell-cycle inhibitors by microRNA clusters in gastric cancer〔J〕.Nucleic Acids Res,2009,37(5):1672-1681.

[17]Zhang H,Zuo Z,Lu X,et al.MiR-25 regulates apoptosis by targeting Bim in human ovarian cancer〔J〕.Oncol Rep,2012,27(2):594-598.

[18]Su ZX,Zhao J,Rong ZH,et al.Upregulation of microRNA-25 associates with prognosis in hepatocellular carcinoma〔J〕.Diagn Pathol,2014,9:47.

[19]Lu Y,Yue X,Cui Y,et al.MicroRNA-124 suppresses growth of human hepatocellular carcinoma by targeting STAT3〔J〕.Biochemical and Biophysical Research Communications,2013,441(4):873-879.

[20]Lang Q,Ling C.MiR-124 suppresses cell proliferation in hepatocellular carcinoma by targeting PIK3CA〔J〕.Biochem Biophys Res Commun,2012,426(2):247-252.

[21]ZENG B,LI Z,CHEN R,et al.Epigenetic regulation of miR-124 by hepatitis C virus core protein promotes migration and invasion of intrahepatic cholangiocarcinoma cells by targeting SMYD3〔J〕.FEBS Lett,2012,586(19):3271-3278.

[22]Chenggang Wang,Ren Ren,Haolin Hu,et al.MiR-182 is up-regulated and targeting Cebpa in hepatocellular Carcinoma〔J〕.Chin J Cancer Res,2014,26(1):17-29.

[23]王慧,楊雪晴,吳正升,等.miR-182在人乳腺癌中的表達(dá)及意義〔J〕.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,46(11):1141-1143.

[24]周偉鶴,金子兵,陳惠,等.miR-182基因表達(dá)與肺癌的相關(guān)性的研究〔J〕.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2013,51(30):1-2,5.

[25]Gramantieri L,Ferracin M,Fornari F,et al.Cyclin G1 is target of miR-122,a microRNA frequently down-regulated in human hepatocellylar carcinoma〔J〕.Cancer Res,2007,67(13):6092-6299.

[26]Fornent F,Grampian L,Giannini C,et al.miR-122/Cyclin G1 interaction modulates p53 activity and affects doxorubicin sensitivity of human adenocarcinimata cell〔J〕.Cancer Res,2009,69(14):5761-5767.

[27]Shan Y,Zheng J,Lambrecht RW,et al.Reciprocal effect of microRNA-122 on expression of heme oxygenase-1 and hepatitis Cvirus genes in human hepatocytes〔J〕.Gastroenterology,2007,133(4):1166-1174.

[28]Li Y,Tan W,Neo TW,et al.Role of the miR-106b-25 microRNA cluster in hepatocellular carcinoma〔J〕.Cancer Sci,100(7):1234-1242.

[29]Chen L,Jiang M,Yuan W,et al.miR-17-5p as a novel prognostic marker for hepatocellular carcinoma.J Invest Surg〔J〕.J Invest Surg,2012,25(3):156-161.

[30]Shen G,Jia H,Tai Q,et al.miR-106b downregulates adenomatous p-

olyposis coli and promotes cell proliferation in human Hepatocellular carcinoma〔J〕.Carcinogenesis,2013,34(1):211-219.

[31]Yau WL,Lam CS,Ng L,et al.Over-expression of miR-106b promotes cell migration and metastasis in hepatocellular carcinoma by activating epithelial-mesenchymal transition process〔J〕.PLoS One,2013,8(3):e57882.

(編輯：甘艷)

·綜述與講座·

文章編號(hào)：1001-5930(2016)01-0165-04

中圖分類號(hào)：R735.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.01.050

通訊作者：李勝棉

收稿日期(2015-02-04修回日期 2015-05-13)