糧油食品中黃曲霉素檢測(cè)方法及比較

黃桂軍 廣西壯族自治區(qū)糧油質(zhì)量檢驗(yàn)站

黃曲霉素具有較強(qiáng)的致癌性，是一種劇毒的真菌霉素，在食品中廣泛存在，對(duì)人們的身體健康造成嚴(yán)重傷害，因此，需對(duì)其進(jìn)行高效、便捷的檢測(cè)并進(jìn)行分離，將其控制在允許的范圍內(nèi)。在國際上進(jìn)行食品檢測(cè)過程中，農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉素的含量的檢測(cè)是必須進(jìn)行檢測(cè)的指標(biāo)。因此，要不斷提升食品以及農(nóng)副產(chǎn)品中對(duì)黃曲霉素的檢測(cè)工作。本文在大量查閱有關(guān)資料的基礎(chǔ)上，簡要分析黃曲霉素對(duì)人們身體造成的傷害和常用的黃曲霉素檢測(cè)方法。

黃曲霉素造成的危害分析

黃曲霉素被認(rèn)為是致癌性最強(qiáng)的化學(xué)致癌物之一，在臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，黃曲霉素會(huì)導(dǎo)致禽類、靈長類和魚類等試驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性肝癌，主要的疾病表現(xiàn)為出現(xiàn)壞死、肝硬化、肝出血等病變。黃曲霉素對(duì)于生物體造成的危害同黃曲霉素直接阻止蛋白質(zhì)的合成直接相關(guān)，黃曲霉素中的雙呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)是對(duì)人體造成危害最為重要的結(jié)構(gòu)。胰蛋白酶、彈性蛋白酶和凝血酶等均屬于絲氨酸蛋白酶，可對(duì)部分細(xì)胞活動(dòng)產(chǎn)生直接或間接的調(diào)控作用。如血栓或癌癥形成時(shí)會(huì)出現(xiàn)一定的病理變化，主要是由這些酶及其潛在的調(diào)節(jié)分子間的微妙平衡變化導(dǎo)致的。實(shí)際上，通過外界分子導(dǎo)致這些酶造成錯(cuò)誤的調(diào)控也是導(dǎo)致出現(xiàn)病變的主要原因。黃曲霉素不僅僅會(huì)對(duì)肝臟造成危害，同時(shí)也會(huì)對(duì)人體其他系統(tǒng)造成危害，黃曲霉素如果暴露的話，可能會(huì)導(dǎo)致家禽胃腸道的前段出現(xiàn)炎癥病變。一些生物體在攝入一定的黃曲霉素后，易導(dǎo)致機(jī)體造血功能和血液的成分出現(xiàn)一定的變化。暴露的黃曲霉素還會(huì)導(dǎo)致有機(jī)體的免疫功能造成損害，進(jìn)而降低細(xì)胞和體液的免疫力。同時(shí)，黃曲霉素產(chǎn)生的毒性還會(huì)通過母體遺傳到子體中，進(jìn)而對(duì)子體在胚胎期的免疫系統(tǒng)發(fā)育造成危害，導(dǎo)致子體的免疫功能受到危害。

黃曲霉素檢測(cè)方法分析

酶聯(lián)免疫法

該方法又被稱之為酶聯(lián)免疫吸附法，主要是把可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上，同時(shí)進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性及定量方法。根據(jù)酶、免疫和升生化記數(shù)，將其應(yīng)用到黃曲霉素檢測(cè)分析，使用固相酶聯(lián)免疫吸附的相關(guān)原理，利用AFTB1抗原促使兩者同抗體之間可以進(jìn)行免疫競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，之后加上酶底物進(jìn)行顯色，顏色的深淺程度取決于酶標(biāo)和抗體抗原結(jié)合的量，樣品中AFTB1則多被抗體結(jié)合的酶標(biāo)AFTB1抗原較少，其表現(xiàn)為顏色總體較淺，如果較多，其顏色也會(huì)逐漸加深。

酶聯(lián)免疫法的優(yōu)點(diǎn)在于試驗(yàn)毒性較小，可在較短時(shí)間內(nèi)獲得檢測(cè)結(jié)果，其缺點(diǎn)在于試劑壽命較短，且重復(fù)率較低，要求使用低溫保存的形式，其假陽性的概率較高，因此，應(yīng)配備專用的酶標(biāo)儀，在基層檢測(cè)過程中存在有著較大難度，對(duì)于樣品的要求較嚴(yán)格。一般都會(huì)對(duì)需要的樣品，如脂肪含量和含鹽量較高的樣品等進(jìn)行較為合適的處理，這種方法一般應(yīng)用于初篩，對(duì)于其陽性結(jié)果需要進(jìn)行檢測(cè)，及時(shí)去除陰性結(jié)果。

液相色譜法

該方法將液體作為流動(dòng)相，通過使用高壓系統(tǒng)進(jìn)行輸液，把有著不同極性單一或混合溶劑等流動(dòng)相泵入裝入固定相的色譜柱，在柱中其成分逐漸被分離，進(jìn)入到檢測(cè)器進(jìn)行下一步的檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析工作。使用該方法的優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)下限較低、具有較快的檢測(cè)速度、定性準(zhǔn)確。檢測(cè)應(yīng)在20 min內(nèi)完成所有實(shí)驗(yàn)，才可較為準(zhǔn)確地將黃曲霉素分離出來，其檢測(cè)限一般會(huì)達(dá)到0.5 μg/kg，國家對(duì)于糧油食品的濃度要求較低。其存在的缺點(diǎn)主要有配套儀器價(jià)格較高，對(duì)于樣品的要求也較高。

熒光光度法

使用該方進(jìn)行檢測(cè)的主要過程中為試樣先經(jīng)過甲醇提取，提取后經(jīng)過濾、稀釋，濾液通過包含黃曲霉素的特殊抗體免疫親和柱進(jìn)行凈化，黃曲霉素鍵合在免疫親和小柱的抗體上，使用蒸餾水及時(shí)去除柱上的雜質(zhì)，將甲醇作為目標(biāo)化合物脫洗下來，加顯色劑，在熒光光度計(jì)中測(cè)定樣品中黃曲霉素的實(shí)際含量。該方法的主要優(yōu)勢(shì)在于健康、綠色，對(duì)檢測(cè)人員無大的危害，同時(shí)樣品檢測(cè)速度較快，具有較高的靈敏性，較為適合在一些大量樣品檢測(cè)中，同時(shí)定量準(zhǔn)確，其缺點(diǎn)在于檢測(cè)費(fèi)用較高，應(yīng)配備較高的專門設(shè)備，目前無法實(shí)現(xiàn)對(duì)單一的毒素檢測(cè)。

結(jié)語

隨著時(shí)代的發(fā)展，會(huì)有全新的檢測(cè)方法出現(xiàn)，與此同時(shí)也可進(jìn)行脫毒處理，這不僅可滿足分析測(cè)試的相關(guān)要求，也可降低浪費(fèi)，有著良好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。