楊　光　　李　建佳木斯大學附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，黑龍江佳木斯　154000

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血清RANTES在子宮內(nèi)膜異位癥臨床診斷中的價值

楊光李建▲
佳木斯大學附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，黑龍江佳木斯154000

[摘要]目的檢測子宮內(nèi)膜異位癥患者血清中RANTES的水平，探討其在子宮內(nèi)膜異位癥臨床診斷中的價值。方法選取2015年3～9月于我院行手術治療的卵巢巧克力囊腫和卵巢囊腫患者各30例，應用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）和放射免疫分析法分別檢測血清中RANTES及CA125的含量。結果卵巢巧克力囊腫患者血清中RANTES和CA-125水平顯著高于卵巢囊腫患者（P＜0.05），CA125比較血清中RANTES診斷卵巢巧克力囊腫的敏感性和特異性分別為60.0％和100.0％。RANTES和CA125聯(lián)合診斷卵巢巧克力囊腫的敏感性和特異性均為86.7％。結論卵巢巧克力囊腫患者血清中RANTES水平顯著升高，血清中RANTES具有子宮內(nèi)膜異位癥診斷標記物的潛能，與CA125聯(lián)合檢測可提高子宮內(nèi)膜異位癥臨床無創(chuàng)診斷的敏感性和特異性。

[關鍵詞]RANTES；CA125；血清；子宮內(nèi)膜異位癥

子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EM）是育齡期女性常見的婦科疾病之一，發(fā)病率約6％～10％[1]，近年呈上升趨勢，其病變特征是具有生長功能的子宮內(nèi)膜組織（腺體和間質）出現(xiàn)在子宮腔以外的其他部位。主要癥狀為痛經(jīng)、盆腔痛、性交痛、排便困難等，患者出現(xiàn)盆腔痛、不孕或二者并存的機率高可達35％～50％。EM病因尚未闡明，目前被廣泛接受的一種學說是經(jīng)血逆流學說。免疫炎性因素，孕激素及其受體，COX[2]等成為近年來子宮內(nèi)膜異位研究領域的熱點。由于EM患者的癥狀缺乏特異性，需行腹腔鏡檢查才能確診，使得患者自出現(xiàn)癥狀到獲得明確診斷的時間平均延遲6.7年，使得患者生活質量明顯下降[3]。因此，早期損傷小，敏感性和特異性高，可行性強的診斷方法可使患者極大受益。

調(diào)節(jié)活化正常T細胞表達與分泌的趨化因子（regulated upon activation normal T cell expressed and se creted，RANTES）是由T細胞等多種細胞產(chǎn)生的全能趨化因子，子宮內(nèi)膜間質細胞也可分泌RANTES[4]。RANTES基因定位17q11.2-q12染色體，啟動子區(qū)包含兩個典型的NF-κB結合位點，其蛋白是一種分子量為8 ku的小分子蛋白[5]。既往研究發(fā)現(xiàn)：子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜組織中的RANTES的濃度均顯著增加[6，7]，RANTES可趨化巨噬細胞、T細胞等多種炎細胞于炎癥部位，后者可分泌IL-1、TNF-a、IFN-γ等多種細胞因子，這些細胞因子又可促進RANTES的表達[8]，共同參與和調(diào)節(jié)機體的免疫應答，導致局部炎癥反應，小血管新生，促進異位內(nèi)膜細胞的存活和種植，為子宮內(nèi)膜異位癥的形成提供適宜的微環(huán)境。本研究通過測定卵巢巧克力囊腫血清中RANTES和CA125的水平，初步探討RANTES是否具備子宮內(nèi)膜異位癥血清診斷標記物的潛能，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2015年3～9月于我院行手術治療的卵巢巧克力囊腫和卵巢囊腫患者各30例（對照組），均經(jīng)術后病理結果證實，年齡20～48歲，平均年齡分別為（32.4±9.5）歲和（35.1±9.7）歲，所有患者無婦科內(nèi)分泌疾病、生殖系統(tǒng)炎癥、免疫系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤病史，術前3個月無甾體類激素、抗生素、免疫功能抑制劑等用藥史。兩組患者平均年齡差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2標本采集

所以患者均于術前采集空腹靜脈血5 mL置于無菌管中，在1000×g重力下離心20 min，上清液保存于-80℃冰箱中以備檢測。

1.3方法

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定血清中RANTES蛋白的水平，ELISA試劑盒購自Cloud-Clone公司，操作嚴格按試劑盒說明書進行。血清CA125水平由我院檢驗科采用放射免疫分析法測定。

1.4數(shù)據(jù)處理

兩組患者血清RANTES和CA-125水平的若呈非正態(tài)分布，各組均數(shù)采用中位數(shù)（M）和四分位距（Ql～Qu）表示，獨立樣本比較采用秩和檢驗，若為正態(tài)分布，統(tǒng)計描述采用（±s）表示，獨立樣本比較采用t檢驗。ROC曲線（receiver operating characteristic curve）描述RANTES和RANTES聯(lián)合CA-125診斷卵巢巧克力囊腫的特性。采用SPSS17.0軟件對結果進行分析，檢驗水準為α=0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1兩組患者血清RANTES和CA-125的水平比較血清中RANTES和CA-125的測定結果經(jīng)正態(tài)性檢驗后符合正態(tài)性分布，結果采用±s表示。與卵巢囊腫患者相比，卵巢巧克力囊腫患者血清RANTES 和CA-125的水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義（t= 2.7572，P＜0.010；t=3.2669，P＜0.005）。見表1。

表1　兩組患者血清RANTES和CA－125的水平比較（±s）

表1　兩組患者血清RANTES和CA－125的水平比較（±s）

RANTES（pg/mL）CA-125（U/mL）巧囊組囊腫組巧囊組囊腫組30 30 30 30 4.11±1.24 3.14±0.54 46.80±29.93 22.25±14.13 2.7572 3.2669 ＜0.010 ＜0.005因子　　分組　n　±s t值　P

2.2RANTES單獨或聯(lián)合CA125預測EM的臨床價值

運用ROC曲線描述血清RANTES對卵巢巧克力囊腫臨床診斷的價值，曲線結果顯示血清中RANTES診斷卵巢巧克力囊腫的敏感性60.0％，特異性100.0％，AUC為0.787（95％CI：0.61～0.96），通過AUC篩選出血清中用于預測卵巢巧克力囊腫的RANTES最佳臨界值是3.91 pg/mL，陽性預測值78.0％，陰性預測值71.4％。見表2。

2.3RANTES與CA125聯(lián)合預測卵巢巧克力囊腫的價值

血清中RANTES與CA125聯(lián)合預測卵巢巧克力囊腫的敏感性和特異性均為86.7％，陽性預測值80.0％，陰性預測值86.7％。見表2。

表2　RANTES與CA125聯(lián)合預測卵巢巧克力囊腫的價值

3　討論

子宮內(nèi)膜異位癥形成的病理生理過程中涉及三個關鍵步驟：粘附、侵襲、血管形成，這三個過程均伴有免疫炎性因子的參與，故近年來免疫炎性因素成為子宮內(nèi)膜異位癥研究領域的熱點之一。RANTES受體為CCR家族，T細胞、單核-巨噬細胞、嗜酸性粒細胞、血管內(nèi)皮細胞等均可表達CCR受體，通過與其相應受體結合，RANTES趨化免疫炎性細胞至炎癥病灶并活化T細胞，在炎癥反應中扮演著重要角色。既往部分研究表明子宮內(nèi)膜異位癥患者在內(nèi)膜、異位內(nèi)膜、腹腔液、血清中RANTES的水平顯著高于非子宮內(nèi)膜異位癥患者并與疾病的嚴重程度相關，差異具有統(tǒng)計學意義[6，9，10，11，12]。部分研究結果卻顯示子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液、血清中RANTES的水平與對照組相比并無明顯變化，差異無統(tǒng)計學意義[13，14]，因此，對于RANTES是否具備子宮內(nèi)膜異位癥血清診斷生物標記物的潛能，目前尚缺乏相關臨床證據(jù)[15，16]。本研究結果顯示卵巢巧克力囊腫患者血清RANTES和CA-125的水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義，與Khorram等的研究結果一致。RANTES的AUC為0.787（95％CI：0.61～0.96），故RANTES有望成為子宮內(nèi)膜異位癥臨床診斷的一種血清生物標記物。RANTES與CA125聯(lián)合預測卵巢巧克力囊腫的敏感性和特異性為86.7％，提高了子宮內(nèi)膜異位癥臨床無創(chuàng)診斷的敏感性和特異性。但本研究中納入的樣本數(shù)量小，且研究對象僅為卵巢巧克力囊腫患者，未設置健康對照組，因此所獲得的數(shù)據(jù)存在一定局限性。RANTES單獨或與其他生物標記物聯(lián)合診斷子宮內(nèi)膜異位癥的臨床價值，仍需要更多設計嚴謹，樣本量大，多中心協(xié)作的臨床研究進一步驗證。

無論是腫瘤的侵襲、轉移還是異位內(nèi)膜病灶的種植，微血管的新生都至關重要[17]。研究表明RANTES可直接作用于腫瘤細胞，促進腫瘤組織微血管生成和轉移，RANTES的促血管新生活性可能與其誘導MMP-9高表達相關[18]。EM患者腹腔液中高水平的RANTES通過其促血管形成活性，有助于子宮內(nèi)膜異位種植病灶血供的形成。我們知道VEGF在血管的新生中扮演著重要角色，在EM對異位內(nèi)膜細胞的吞噬及清除作用減弱，而分泌功能增強，活化的巨噬細胞可分泌VEGF促進微血管新生，此外，RANTES可能通過NF-kβ或PI3K/Akt信號通路[19]促進VEGF依賴性血管生成，因此，RANTES在異位內(nèi)膜種植病灶的血管形成中也起著重要作用。

RANTES作為多種細胞趨化因子，也是巨噬細胞的特異激活因子，RANTES可趨化大量的巨噬細胞于腹腔異位種植病灶周圍，活化的巨噬細胞分泌多種細胞因子（TNF-α、IL-1、IL-8、VEGF等），TNF-α、IL-1活化NF-kβ信號通路后可促進內(nèi)膜間質細胞分泌RANTES，在異位病灶處形成一個正反饋通路。此外腹腔液中高水平的RANTES還可抑制巨噬細胞對異位內(nèi)膜細胞的吞噬和清除作用，促進異位內(nèi)膜細胞的存活[20]，因此RANTES在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。腹腔液中高水平的RANTES循環(huán)入血，引起血液中RANTES的水平升高。

綜上所述，卵巢巧克力囊腫患者血清中RANTES的水平顯著升高，在子宮內(nèi)膜異位的臨床診斷中具有一定的價值，與CA125聯(lián)合檢測可提高子宮內(nèi)膜異位癥臨床診斷的敏感性和特異性，具備子宮內(nèi)膜異位癥診斷生物標記物的特性，或許可作為子宮內(nèi)膜異位癥臨床診斷的血清生物標記物之一。

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The clinical diagnosis value of serum RANTES on endometriosis

YANG Guang LI Jian
Department of Gynecology and Obstetrics, the First Affiliated Hospital of Jiamusi University, Jiamusi 154000, China

[Abstract]Objective To measurement the level of RANTES in serum of patients with endometriosis and investigate its clinical diagnosis value in endometriosis. Methods The enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）and radioimmunoassay were used to quantity the concentration of RANTES and CA125 in serum of patients with ovarian chocolate cyst（30 cases）and ovarian cyst（30 cases）, the data from the patients underwent surgery treatment from March to September 2015 in our hospital. Results The serum levels of CA-125 and RANTES were significantly higher than those of ovarian cysts in patients with ovarian chocolate cyst（P＜0.05）, the sensitivity and specificity of diagnosis of chocolate cyst were 60.0％and 100.0％. When RANTES combined with CA125, the sensitivity and specificity of diagnosis of ovarian chocolate cyst were 86.7％. Conclusion The level of RANTES in serum of patients with endometriosis is markedly increased, RANTES has the potential ability of diagnosis of endometriosis, as combined with CA125 could improve the sensitivity and specificity of clinical noninvasive diagnosis of endometriosis.

[Key words]RANTES; CA125; Serum; Endometriosis

收稿日期：（2015-10-08）

通訊作者▲

[中圖分類號]R711.7

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-9701（2016）01-0019-04