李銀河

(湖北省中西醫(yī)結合醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 湖北 武漢, 430015)

?

卵巢上皮性癌患者化療前后血清uPA含量的變化及其對預后的影響

李銀河

(湖北省中西醫(yī)結合醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 湖北 武漢, 430015)

摘要：目的探討尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)水平變化對卵巢上皮性癌患者化療效果評價以及預后的影響。方法選取卵巢上皮性癌患者64例為觀察組，健康體檢者50例為對照組，觀察2組血清uPA水平差異，并通過COX風險模型分析影響無瘤生存時間(PFS)和總生存時間(OS)相關因素。結果觀察組患者化療前uPA含量明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；化療6次后，觀察組uPA含量明顯低于化療前，卻明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。不同手術分期(Ⅰ～Ⅱ與Ⅲ～Ⅳ)、殘留病灶不同直徑(≥2 cm與<2 cm)、有無淋巴結轉移(有與無)患者卵巢癌化療前后血清uPA含量差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而不同病理類型(漿液性癌與非漿液性癌)、病理分化程度(高分化與中低分化)患者化療前后血清uPA含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。淋巴結轉移和化療前uPA含量≥1.28 μg/L是引起PFS和OS的獨立影響因素。結論化療前血清uPA含量可以作為卵巢上皮性癌嚴重程度以及患者預后的評價指標。

關鍵詞:尿激酶型纖溶酶原激活物; 卵巢上皮性癌; 化療; 卵巢腫瘤

尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)作為細胞外基質降解過程中的蛋白水解酶類，參與機體內的眾多生理以及病理的過程，特別是腫瘤的轉移以及浸潤過程也同樣與uPA息息相關[1]。卵巢癌在婦科惡性腫瘤中居第2位，然而致死率卻居首位，由于其起病隱匿以及對多種化療藥物的耐藥性，使得其治療效果和患者化療后生存質量并不理想[2]。目前，臨床上對卵巢癌化療主張規(guī)范化和個體化，而各種腫瘤標志物也作為化療效果預判而得到廣泛的關注和研究。即便如此，對卵巢癌規(guī)范化治療效果卻始終未得到明顯改觀，5年生存率仍在30%左右[3]。本研究選用尿激酶型纖溶酶原激活物作為研究對象，觀察其在卵巢上皮性癌患者化療前后水平變化，通過對患者生存因素進行分析，以探討uPA作為卵巢上皮性癌治療的獨立預后因素可行性。

1資料與方法

1.1一般資料

選取本院2010年3月—2013年3月在本院進行治療的卵巢上皮性癌患者64例為觀察組，年齡35～72歲，平均年齡(54.8±12.4)歲，其中漿液性癌51例，黏液性癌3例，透明細胞癌5例，子宮內膜性癌5例；手術病理分期: Ⅰ～Ⅱ期29例，Ⅲ～Ⅳ期35例，存在淋巴結轉移患者22例，無淋巴結轉移患者42例，高分化患者13例，低分化患者51例；所有患者均行紫杉醇聯(lián)合鉑類化療藥物進行至少6個療程的化療。選用健康體檢者50例為對照組，年齡32～75歲，平均年齡(55.4±14.8)歲。所有患者均無任何糖尿病、高血壓、心臟病病史，并且在入院后未服用任何激素類藥物，2組患者年齡差異無統(tǒng)計學意義。

1.2研究方法

所有患者在化療前、化療6次后各取清晨空腹靜脈血4 mL置于抗凝管中，健康對照組受檢者采用清晨空腹靜脈血4 mL置于抗凝管中，將待測血液在離心管內以3 000 r/min離心10 min, 取上清置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。uPA檢測采用ELISA法，試劑盒購自武漢博士德生物有限公司，具體操作按說明書進行。應用80型酶聯(lián)儀于450 am波長處測定其吸光度(A)值。標準曲線的建立及結果判斷：以標準品uPA的濃度為橫坐標，以其相應的A值為縱坐標，繪制標準品線性回歸曲線，求得血清uPA含量。

1.3統(tǒng)計學方法

應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析，正態(tài)分布的各統(tǒng)計指標均以均數(shù)±標準差表示，兩組組間數(shù)值比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，計量資料用百分比或者率表示，影響無瘤生存時間(PFS)和總生存時間(OS)相關因素分析采用COX回歸分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義

2結果

2.1觀察組患者化療前后血清uPA含量與對照組對比

觀察組患者化療前uPA含量為(1.31±0.21)，明顯高于對照組的(0.58±0.15), 差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01); 化療6次后，觀察組uPA含量為(1.04±0.18), 明顯低于化療前，卻仍然高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2不同腫瘤特征患者化療前后uPA含量對比

不同手術分期(Ⅰ～Ⅱ與Ⅲ～Ⅳ)、殘留病灶不同直徑(≥2 cm與<2 cm)、有無淋巴結轉移(有與無)患者卵巢癌化療前、后血清uPA含量差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05); 而不同病理類型(漿液性癌與非漿液性癌)、病理分化程度(高分化與中低分化)患者化療前、后血清uPA含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　不同腫瘤特征患者化療前后uPA含量對比

與各自相對應臨床分型相比，*P<0.05。

2.3影響無瘤生存時間和總生存時間相關因素單因素分析

對可能影響患者無瘤生存時間和總生存時間的癌癥家族史、不同手術分期(Ⅰ～Ⅱ與Ⅲ～Ⅳ)、殘留病灶不同直徑(≥2 cm與<2 cm)、有無淋巴結轉移(有與無)、不同病理類型(漿液性癌與非漿液性癌)、病理分化程度(高分化與中低分化)、化療前以及化療后uPA含量進行單因素COX分析得出，殘留病灶直徑≥2 cm、淋巴結轉移、化療前uPA含量≥1.28 μg/L與影響無瘤生存時間和總生存時間相關。見表2。

表2　影響無瘤生存時間和總生存時間相關因素單因素分析

2.4影響無瘤生存時間和總生存時間相關因素多因素分析

對上述可能引起PFS和OS的單因素進行多因素分析得出，淋巴結轉移和化療前uPA含量≥1.28 μg/L是引起PFS和OS的獨立影響因素。見表3。

表3　影響無瘤生存時間和總生存時間相關因素多因素分析

3討論

腫瘤轉移過程包含一系列細胞外基質被破壞和基底膜的降解在內的變化，而uPA參與的纖溶酶原激活系統(tǒng)在腫瘤遷移過程中起著至關重要的作用。uPA一方面能夠特異激活纖溶酶原，使其轉變?yōu)槔w溶酶，從而對腫瘤細胞外基質和基底膜成分中的纖維連接蛋白、纖維蛋白、蛋白多糖等進行降解[4]；另一方面，uPA還能夠激活基質金屬蛋白酶，使細胞外基質中的彈性蛋白和膠原得到降解，最終使腫瘤細胞容易穿過基底膜進行轉移和侵襲[5]。有研究[6]發(fā)現(xiàn)，在卵巢腫瘤組織中能夠發(fā)現(xiàn)大量uPA，并且從癌中心到邊緣逐次遞減，說明uPA參與了腫瘤組織發(fā)展過程。本研究同樣發(fā)現(xiàn)，在卵巢上皮性癌患者血液中，uPA同樣明顯高于健康體檢者，即使經(jīng)過化療治療，uPA的含量明顯下降，但仍然高于健康人，說明uPA與卵巢上皮性癌息息相關。一方面uPA能夠促進腫瘤發(fā)展和向外侵襲，這與uPA激活纖溶酶對基底膜降解以及刺激信號通路促使腫瘤內血管生成有關；另一方面，腫瘤還會通過刺激細胞分泌生長激素而促使uPA生成，形成惡性循環(huán)[7]。

本研究還發(fā)現(xiàn)，不同手術分期(Ⅰ～Ⅱ與Ⅲ～Ⅳ)、殘留病灶不同直徑(≥2 cm與<2 cm)、有無淋巴結轉移(有與無)患者卵巢癌化療前、后血清uPA含量差異有統(tǒng)計學意義，說明uPA水平與這3個因素有關，其中手術分期和淋巴結是否出現(xiàn)轉移預示著腫瘤的嚴重程度，較高水平的uPA代表著腫瘤發(fā)展越大，同樣也產(chǎn)生更多的uPA。而術后殘留病灶越大，uPA水平同樣越高，說明uPA不僅能夠作為癌癥嚴重程度的評估指標，而且能夠作為治療評估以及治療效果的參考指標。有研究[8]通過對腫瘤體積測量以及uPA水平進行相關分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤體積縮小的百分比與uPA水平下降百分比呈顯著正相關，并且出現(xiàn)淋巴結轉移的患者血液中uPA水平更高，同樣論證了本研究觀點。

對影響無瘤生存時間和總生存時間的因素上，目前國際上報道不一。有學者[9]認為出現(xiàn)淋巴結轉移預示著腫瘤的生物學行為發(fā)生了改變，對這類患者進行治療后普遍的生存質量下降。也有研究[10]將單純淋巴結陽性的患者劃為ⅢC期，其5年生存率達到76%, 提示淋巴結轉移與卵巢癌的預后無關。也有研究[11]通過COX比例風險模型對86例原發(fā)性卵巢上皮癌患者進行前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織內的uPA和其抑制物PAI-1是患者預后的獨立影響因素，并且與治療后體內殘留的病灶體積無關。其還發(fā)現(xiàn)，當uPA水平>5.5 ng/mg, PAI-1水平>18.8 ng/mg時，患者生存率是明顯下降的。本研究發(fā)現(xiàn)，無論是單因素生存曲線還是多因素COX模型，淋巴結轉移和化療前血清uPA含量≥1.28 μg/L是影響患者無瘤生存時間和總生存時間的因素，提示二者可以作為評估患者預后的獨立因素。

綜上所述，化療前血清uPA含量可以作為卵巢上皮性癌嚴重程度以及治療效果的評價指標。但是本研究仍存在一定的不足，一是所研究的樣本數(shù)較少，二是不同于其他直接通過腫瘤組織測定uPA含量的研究。本研究選用的是患者血清，在uPA含量上存在生物學意義上的差別，需要進一步觀察。

參考文獻

[1]Bepler G, Olaussen K A, Vataire A L, et al. ERCC1 and RRM1 in the international adjuvant lung trial by automated quantitative in situ analysis[J]. Am J Pathol, 2011, 17(8): 69.

[2]趙春梅. 外周血調節(jié)性T細胞表達水平與卵巢上皮癌預后的相關性[J]實用臨床醫(yī)藥雜志, 2014, 18(11): 182.

[3]wu L, Dai Z Y, Qian Y H, et al. Diagnostic value of serum human epididymis protein 4(HE4)in ovarian carcinoma: a systematic review and metaanalysis[J]. Int J Gynecol Cancer, 2012, 22(7): 1106.

[4]Yue J, Zhang K, Chen J. Role of integrins in regulating proteases to mediate extracellular matrix remodeling[J]. Cancer Microenviron, 2012, 5(3): 275.

[5]Worley MJ, Welch WR, Berkowitz RS, et al. Endometriosis-associated ovarian cancer: a review of pathogenesis[J]. Int J Mol Sci, 2013, 14(3): 5367.

[6]Dorn J, Harbeck N, Kates R, et al. Impact of expression differences of kallikrein-related peptidases and of uPA and PAI-1 between primary tumor and omentum metastasis in advanced ovarian cancer[J]. Ann Oncol, 2011, 22(4): 877.

[7]Harbeck N, Schmitt M, Meisner C, et al. Ten-year analysis of the prospective multicentre Chemo-NO trial validates American Society of Clinical Oncology(ASCO)-recommended biomarkers uPA and PAI-1 for therapy decision making in node-negative breast cancer patients[J]. Eur J Cancer, 2013, 49(8): 1825.

[8]Bellelis P, Barbeiro D F, Rizzo L V, et al. Transcriptional changes in the expression of chemokines related to natural killer and T-regulatory cells in patients with deep infiltrative endometriosis[J]. Fertil Steril, 2013, 18(5): 4568.

[9]Zhang W, Ling D, Tan J, et al. Expression of urokinase plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor type-1 in ovarian cancer and its clinical significance[J]. Oncol Rep, 2013, 29(10): 637.

[10]黃綺丹, 黃鶴, 劉繼紅. ⅢC 期卵巢上皮性癌不同轉移模式的臨床分析[J]. 實用婦產(chǎn)科雜志, 2013, 29(12): 921.

[11]陳姝彤, 邰海鳳, 歐陽一芹, 等. 卵巢上皮性癌患者化療前后血清uPA含量的變化及其對預后的影響[J]. 中華婦產(chǎn)科雜志, 2014, 49(8): 626.

Changes of serum uPA level before and after chemotherapy in patients with ovarian epithelial cancer and its influence on prognosis

LI Yinhe

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,HubeiProvincialHospitalofIntegratedChineseandWesternMedicine,Wuhan,Hubei, 430015)

ABSTRACT:ObjectiveTo investigate the efficacy of urokinase type plasminogen activator (uPA) in chemotherapy for patients with epithelial ovarian cancer and to explore the prognostic factors. MethodsA total of 64 patients with ovarian epithelial cancer were selected as observation group, and 50 healthy volunteers were selected as control group. Difference of serum uPA level in the two groups was compared, and the related factors of the disease-free survival (PFS) and total survival time (OS) were analyzed by COX risk model. ResultsThe content of uPA in the observation group was significantly higher than that in the control group (P<0.01). The content of uPA after 6 times chemotherapy in the observation group was significantly lower than that before chemotherapy, but significantly higher than the control group (P<0.05). There were significant differences in serum uPA levels before and after chemotherapy in ovarian cancer patients with different operation stages (Ⅰ～Ⅱ and Ⅲ～Ⅳ), the different residual lesions of diameter (more than or equal to 2 cm and less than 2 cm) and lymph node metastasis (yes or no) (P<0.05), but there were no significant differences between patients with different pathological types (serous carcinoma and non serous carcinoma) and different pathologic degree (high differentiation and low differentiation) (P>0.05). The lymph node metastasis and content of uPA over 1.28 μg/L before chemotherapy were the independent impact factors of PFS and OS. ConclusionSerum uPA level before chemotherapy can be used as an evaluation index for ovarian epithelial cancer and the prognosis of patients.

KEYWORDS:urokinase type plasminogen activator; epithelial ovarian cancer; chemotherapy; ovarian tumor

收稿日期:2015-10-28

中圖分類號:R 737.31

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2016)03-062-04

DOI:10.7619/jcmp.201603019