張曉莉　綜述　姚元慶　審校

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人類白細胞抗原-G與移植免疫

張曉莉1,2綜述姚元慶1審校

人類白細胞抗原-G；移植免疫；免疫耐受

人類白細胞抗原-G(human leucocyte antigen G，HLA-G)屬于非經(jīng)典的主要組織相容性復(fù)合物Ⅰ類分子(major histocompatibility complex，MHC-Ⅰ)，在妊娠期作為免疫耐受分子表達于胎盤滋養(yǎng)層細胞，促進母胎免疫耐受。近年來研究表明HLA-G在移植免疫中發(fā)揮重要作用，HLA-G通過多種途徑參與免疫調(diào)控，誘導(dǎo)移植免疫耐受。筆者就HLA-G抑制移植免疫排斥的機制、功能及臨床意義做一綜述。

HLA-G位于人體第6號染色體MHC I類基因6p21.3,由8個外顯子、7個內(nèi)含子組成。HLA-G轉(zhuǎn)錄后形成7種亞型，分別為HLA-G1-7，其中HLA-G1-G4是膜結(jié)合型，HLA-G5-G7是可溶性。HLA-G選擇性的表達于母胎界面的胎盤滋養(yǎng)層細胞,與妊娠子宮NK細胞表面抑制性受體ILT-2和(KIR)2DL4結(jié)合，傳遞免疫抑制信號，保護滋養(yǎng)層細胞免受母體NK細胞的殺傷，促進母胎免疫耐受[1]。隨著研究發(fā)現(xiàn)，HLA-G也限制性地表達于移植、腫瘤、感染性疾病等病理情況下的器官及組織，并作為一個免疫耐受分子有利于移植免疫耐受，促進腫瘤細胞、感染病毒細胞的免疫逃逸。HLA-G通過與免疫細胞、細胞因子、微環(huán)境相互作用誘導(dǎo)移植免疫耐受，實現(xiàn)免疫抑制功能。

1　HLA-G抑制移植免疫排斥的機制

主要器官移植已經(jīng)成為終末期器官衰竭的有效治療手段，其目的就是延長患者生命、維持器官功能并使移植物長期存活。近二十年，隨著移植技術(shù)的進步，增添了很多非主要(提高生命質(zhì)量)的器官(組織)移植項目。如手、手臂、喉及臉和子宮移植。2014年10月瑞典Brannstr?m博士和他的團隊[2，3]宣布了世界首例子宮移植術(shù)后活產(chǎn)，使子宮因素(UFI)不孕得到了有效治療，也為移植醫(yī)學(xué)的進步增添了一項新成果。無論是主要或非主要器官移植，減少免疫排斥是移植成敗的關(guān)鍵， HLA-G作為一個免疫耐受分子可能有利于人同種異體移植接受[4]。HLA-G抑制移植免疫排斥的機制是作為配體與T淋巴細胞和NK細胞，(單核/巨噬/樹突狀)抗原提呈(APC)細胞相關(guān)的3個抑制性受體ILT-2(LILRB1/CD85j)、ILT-4(LILRB2/CD85d)、(KIR)2DL4(CD158d)[5]相互作用抑制免疫應(yīng)答，發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)：(1)抑制NK細胞和細胞毒性T細胞的溶細胞功能,HLA-G 與NK 細胞表面ILT-2、KIR受體相互作用，抑制NK 細胞免疫突觸的形成，使NK細胞對靶細胞的殺傷率降低[6]；(2)誘導(dǎo)CD8+T細胞的凋亡及細胞毒作用；(3)抑制同種異體CD4+T細胞的增殖；(4)抑制樹突狀細胞DC的成熟[7]。HLA-G還可促進細胞因子Th2的分泌，分泌大量的IL-4、IL-10等細胞因子，使Th1/Th2向Th2轉(zhuǎn)化，誘導(dǎo)移植免疫耐受。在小鼠異種皮膚移植模型中，HLA-G可促進IL-4、IL-10等Th2類細胞因子釋放，并抑制B細胞分泌抗體，從而介導(dǎo)小鼠對異種皮膚免疫耐受，使移植物存活時間明顯延長[8]。

2　HLA-G抑制移植免疫排斥的功能

2.1HLA-G抑制T淋巴、NK細胞毒T淋巴細胞在移植免疫中占主導(dǎo)地位，阻止T細胞識別和移植物損傷是抑制移植免疫排斥反應(yīng)的主要任務(wù)。HLA-G通過與CD8+T細胞的抑制性受體ILT-2結(jié)合，抑制同種異體抗原-特異性CTL的反應(yīng)；HLA-G與CD8+結(jié)合可上調(diào)Fas配體的表達，激活Fas/FasL途徑促使CD8+T細胞的凋亡，可溶性HLA-G與ILT-2結(jié)合使細胞周期停止于G1期進而調(diào)控CD4+T細胞并抑制T淋巴細胞的增殖。HLA-G各亞型對細胞毒CD4+T細胞的增殖[9]有不同的影響：膜結(jié)合型HLA-G1促進幼稚T細胞輔助(TH)2細胞的極化[10]，而可溶性HLA-G5誘導(dǎo)腫瘤壞死因子(TNF)-α、干擾素(IFN)-γ，以及IL-10的產(chǎn)生,誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T-reg細胞的產(chǎn)生并伴有Th2因子的產(chǎn)生，誘導(dǎo)免疫耐受形成。 Kapasi等[11]將純化的HLA-G應(yīng)用到混合淋巴細胞中共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)HLA-G可以抑制CTL(CD8+T)淋巴細胞的細胞毒作用，其殺傷效果與應(yīng)用HLA-G的濃度有直接關(guān)系。Lila等[10]也進行了HLA-G在同種異基因移植的相關(guān)研究，認為可溶性HLA-G與混合淋巴共培養(yǎng)可以抑制CD4+T淋巴細胞的增殖反應(yīng)，并且通過添加87G單抗能夠阻斷HLA-G的抑制功能。研究證實，HLA-G1、HLA-G5均能有效抑制NK細胞對靶細胞的殺傷作用，這與作用于靶細胞的種屬無關(guān)。另外，Sasaki等[12]在異種移植研究中發(fā)現(xiàn)HLA-G能夠很好地抑制NK細胞進而保護豬內(nèi)皮細胞，對比7個不同人外周血NK細胞對靶細胞的殺傷率均顯著下降。

2.2HLA-G與樹突狀細胞樹突狀細胞(dendritic cell,DC)是重要的抗原提呈細胞，在移植免疫中發(fā)揮引導(dǎo)和調(diào)節(jié)作用，可導(dǎo)致移植受體的同種異體T細胞的激活或耐受。HLA-G與樹突細胞細胞膜表面受體ILT-4相互作用誘導(dǎo)耐受型樹突細胞(tolergenic DC)產(chǎn)生[13]，高分泌抑制性細胞因子IL-10，并誘導(dǎo)Treg產(chǎn)生，從而發(fā)揮長效免疫耐受作用。Ristich等[14]發(fā)現(xiàn)HLA-G與DC相互作用抑制T淋巴細胞通過，來源于單核細胞的DC和ILT-4轉(zhuǎn)基因小鼠實驗研究發(fā)現(xiàn)，HLA-G修飾DC細胞誘導(dǎo)抑制CD4+T和CD8+T的細胞毒，并通過與APC表面表達的ILT-4受體結(jié)合而直接作用于APC,抑制APC的成熟。最新研究發(fā)現(xiàn)，HLA-G也表達于抗原提呈-樹突狀細胞-10(DC-10)[15，16]，通過IL-10依賴性ILT4/HLA-G通路誘導(dǎo)T細胞無能。

3　HLA-G在臨床移植的意義

2000年，Lila等[17]在心臟移植受體中首次發(fā)現(xiàn)HLA-G，并證明HLA-G的陽性表達與移植免疫排斥呈負相關(guān)，之后通過對接受心臟[18]、肝臟、脾器官等更多移植受體的血清學(xué)監(jiān)測及病理活檢分析發(fā)現(xiàn)，HLA-G陽性表達的受體移植免疫排斥的發(fā)生率顯著降低，另外，自體抗體的滴度監(jiān)測可以更好地預(yù)測移植物的功能及存活率，為HLA-G應(yīng)用于臨床提供了證據(jù)。HLA-G與移植免疫耐受相關(guān)的臨床意義包括：(1)作為一個標記物預(yù)測、診斷移植免疫排斥[19]，并用于移植后移植物功能的評估，調(diào)整免疫抑制的應(yīng)用劑量減少其毒副作用；(2)使用HLA-G、衍生物、HLA-G誘導(dǎo)或間充質(zhì)干細胞治療、降低移植免疫排斥。HLA-G作為一個診斷、治療工具應(yīng)用于臨床是研究的最終目的[7]。Lila等[20]證明，在心臟移植受體的血漿及移植心臟的心肌細胞標本發(fā)現(xiàn)：HLA-G陽性表達患者急性移植排斥反應(yīng)明顯減少，并未見慢性排斥反應(yīng)發(fā)生 ，HLA-G在移植物宿主免疫耐受的誘導(dǎo)中起重要作用。Sheshgiri等[21]對67例心臟移植后的患者進行心肌活檢及免疫組化分析HLA-G的表達，根據(jù)移植排斥反應(yīng)輕重將移植受者分為兩組：A組29例未發(fā)生中、重度排斥反應(yīng)，B組38例發(fā)生重度排斥反應(yīng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：A組受體HLA-G陽性表達為86%，對比B組HLA-G陽性表達11%，HLA-G的陽性表達可以作為預(yù)測心臟移植中、重度排斥反應(yīng)低發(fā)生率的重要指標。

綜上所述，HLA-G作為免疫抑制分子可以應(yīng)用于各個醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，尤其在移植免疫學(xué)具有重要的意義，為臨床研究器官移植免疫耐受提供思路及方法，它不僅可以作為一個檢測指標預(yù)測移植免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生，未來也可以使用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將HLA-G作為一種治療手段應(yīng)用于移植受體。

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(2015-11-10收稿2016-01-10修回)

(責(zé)任編輯郭青)

張曉莉，碩士研究生，主治醫(yī)師。

1.100853北京，解放軍總醫(yī)院婦產(chǎn)科；2.100039北京，武警總醫(yī)院婦產(chǎn)科

姚元慶，E-mail:yqyao@126.com

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