秦　曼　鄭　嫚　仲維娜

（黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院·哈爾濱　150036）

·綜述·

中醫(yī)藥治療單側(cè)輸尿管梗阻腎纖維化的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展*

秦曼鄭嫚仲維娜

（黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院·哈爾濱150036）

中醫(yī)藥治療慢性腎功能衰竭（CRF）的研究越來越多，且取得了確切療效，普遍認(rèn)為有廣闊發(fā)展前景。而腎間質(zhì)纖維化（RIF）是腎臟多種疾病發(fā)展至終末期腎功能衰竭的共同通路。抑制腎間質(zhì)纖維化是治療慢性腎衰的關(guān)鍵。

中醫(yī)藥單側(cè)輸尿管梗阻腎纖維化慢性腎功能衰竭（CRF）是由各種慢性腎臟病所致腎功能損害，不能維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定狀態(tài)而出現(xiàn)的一系列癥狀以及代謝紊亂的臨床綜合征，是多種腎臟疾病的最終歸宿。以其預(yù)后差，病死率高已成為嚴(yán)重危害人類健康和生命的常見病和多發(fā)病。目前除腎臟替代治療，尚無理想防治方法。腎間質(zhì)纖維化（RIF）是腎臟多種疾病發(fā)展至終末期腎功能衰竭的共同通路，而腎間質(zhì)纖維化的發(fā)病機(jī)制尚不明確。單側(cè)輸尿管梗阻（UUO）法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)可快速制作理想的腎臟細(xì)胞轉(zhuǎn)分化和腎間質(zhì)纖維化，為研究中醫(yī)藥治療的有效性提供給了實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。慢性腎衰屬于中醫(yī)的“水腫”“癃閉”“關(guān)格”“虛勞”“腎風(fēng)”“溺毒”等范疇，虛實(shí)夾雜的病機(jī)特點(diǎn)決定了治療用藥的靈活性和治療思路的廣泛性?，F(xiàn)將近5年UUO模型大鼠腎纖維化的中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展闡述如下。

1　單味中藥

1.1杜仲

有補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，安胎的作用。駱小娟等[1]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，杜仲能降低UUO大鼠BUN、Scr水平，減輕Masson染色的腎纖維化程度和陽性面積，抑制結(jié)締組織生長因子（CTGF）的表達(dá)，增強(qiáng)基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）表達(dá)進(jìn)而延緩腎間質(zhì)纖維化。與厄貝沙坦組功效相似。

1.2積雪草

具有清熱利濕，消腫解毒，活血療瘡的功效。劉浩飛等[2]應(yīng)用積雪草治療UUO大鼠，證實(shí)積雪草能夠降低BUN，減少CTGF、α-SMA、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的表達(dá)，增加肝細(xì)胞生長因子（HGF）表達(dá)而減緩腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展。大劑量組的療效優(yōu)于小劑量組，大劑量組與福辛普利組相似。

1.3腎茶

具有清熱去濕，排石利水的功效。王麗敏等[3]證實(shí)，腎茶治療UUO大鼠后，可能通過降低BUN、Scr的水平，下調(diào)Fas蛋白（Fas）、FasL蛋白（FasL）的表達(dá)來抑制UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化。

1.4溫莪術(shù)

有破血祛癖，行氣通經(jīng)，軟堅(jiān)散結(jié)和消積止痛的功效。劉張紅等[4]應(yīng)用溫莪術(shù)觀察其對(duì)UUO大鼠的影響，莪術(shù)組腎間質(zhì)中TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型膠原（COLI）的表達(dá)較模型組均下調(diào)，溫莪術(shù)通過阻止上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化（EMT）和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的積聚來拮抗腎間質(zhì)纖維化。與氯沙坦組無差異。

1.5威靈仙

能祛風(fēng)濕、利尿、通經(jīng)、鎮(zhèn)痛，并有抗炎作用。張翠薇等[5]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，威靈仙減少UUO大鼠α-SMA的表達(dá)和改善血流變學(xué)，起到保護(hù)腎小管間質(zhì)的作用。

1.6澤瀉

具有利水、滲濕、泄熱的功效。張瑞芳等[6]應(yīng)用澤瀉干預(yù)大鼠UUO模型后能減少補(bǔ)體成分C3和α-SMA的表達(dá)，增加E-cad的表達(dá)，抑制EMT。

2　中藥有效提取物

2.1川芎嗪

川芎中提取的生物堿單體，張瑞寧等[7]應(yīng)用川芎嗪治療UUO模型大鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，川芎嗪能下調(diào)Id1mRNA和蛋白、Cav1、TGFβ1、α-SMA和I型膠原的表達(dá)，增加E-cad表達(dá)來減輕RIF。療效與厄貝沙坦相似。李健芝等[8]證實(shí)川芎嗪能明顯減少基質(zhì)金屬蛋白酶2、金屬蛋白酶組織抑制因子2蛋白和mRNA基因表達(dá)，從而改善UUO大鼠的腎間質(zhì)纖維化。

2.2大黃酚

是大黃的有效成分之一，朱祎等[9]研究發(fā)現(xiàn)大黃酚可降低UUO大鼠血肌酐、尿素氮水平，下調(diào)CTGF、α-SMA、FN的陽性表達(dá)，從而減緩腎間質(zhì)纖維化的發(fā)展。

2.3薏苡仁油

從中藥薏苡仁中提取的有效成分制成的脂肪乳劑，胡穎等[10]發(fā)現(xiàn)應(yīng)用薏苡仁油治療UUO大鼠后，腎組織中α-SMA、TGF-β1和磷酸化Smad2蛋白表達(dá)顯著減少，抗纖維化作用的Smad7蛋白增加，腎小管間質(zhì)纖維化改善。

2.4丹酚酸B，C均是丹參水溶性成分的重要組分

李均等[11]將丹酚酸B,C用于治療UUO大鼠后發(fā)現(xiàn)，各治療組顯著降低尿β2-MG，NAG水平，α-SMA平均吸光度A顯著降低。丹酚酸B，C分子藥對(duì)配伍可更大程度減慢UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展。

2.5地龍組分

地龍組分絲氨酸蛋白水解酶，主要成分為蚯蚓纖溶酶，鄭敏敏等[12]應(yīng)用地龍組分證實(shí)，地龍組分能減輕UUO梗阻側(cè)腎臟的腫大及積水程度，改善UUO大鼠的腎功，延緩RIF。低劑量組優(yōu)于高劑量組。

3　經(jīng)驗(yàn)方和經(jīng)典方

3.1和解聚散方

方由黃芪、當(dāng)歸、海藻、牡蠣、穿山甲等藥物組成。劉尚建等[13]用本方治療UUO大鼠，NF-κB表達(dá)水平明顯低于模型組。HE、Masson染色示治療組病理變化較UUO模型組減輕。沈存等[14]證實(shí)和解聚散方可通過降低CTGF和LN的表達(dá)，從而抑制腎間質(zhì)纖維化。第21天效果優(yōu)于貝那普利。

3.2黃芪山甲方

方由黃芪、炮山甲、當(dāng)歸、蒲公英、大黃等組成。高艷霞等[15]將給藥組分為中藥組（UUOA），西藥組（UUOE），中西藥組（UUOAE），分別治療UUO大鼠2周后，各組BUN及 Scr、TGF-β1、FN表達(dá)及腎小管間質(zhì)損傷評(píng)分，UUOAE組＞UUOA組＞UUOE組＞UUO組。黃芪山甲方可能通過下調(diào)腎組織TGF-β1、FN的表達(dá)，緩解腎間質(zhì)纖維化發(fā)展。

3.3芪附湯

由黃芪、附子組成。孫偉等[16]證實(shí)，芪附湯用于UUO大鼠，可顯著提高大鼠血清cAMP、cAMP/cGMP和E-cad蛋白的表達(dá)，下調(diào)α-SMA、TGF-β1、CTGF、p-ERK1/2蛋白表達(dá)水平，Uβ2-MG和UNAG降低。改善腎小管EMT，從而減輕RIF。療效優(yōu)于依那普利。

3.4真武湯

方由炮附子、茯苓、白術(shù)、芍藥、生姜組成。韓凌等[17]證實(shí)，與模型組比較，真武湯低、高劑量組可明顯降低UUO大鼠外周血激活物抑制劑-1(PAI-1)。其中低劑量組可明顯降低白介素（IL-6）含量，高劑量組可明顯降低MCP-1含量。提示真武湯可能通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子，改變微炎癥狀態(tài)，從而緩解腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化。

3.5益腎解毒湯

組方:生黃芪、生地黃、生大黃、六月雪、茯苓、黃柏、山萸肉、丹參、鹿銜草、淮山藥。于昊新等[18]用益腎解毒湯治療UUO大鼠，與模型組比較，腎組織勻漿超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)明顯升高，Scr、BUN、24hUpro、丙二醛(MDA)明顯下降。有效減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)，抑制腎間質(zhì)纖維化。

3.6怡腎丸

藥物成分:熟地、生地、白術(shù)、五味子、山茱萸、人中黃、砂仁、蟬蛻。李旭華等[19]證實(shí)，怡腎丸用于UUO大鼠，減少M(fèi)asson染色腎小管間質(zhì)纖維化面積，降低Scr、BUN水平，下調(diào)腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1及P38MAPK的表達(dá)，延緩腎間質(zhì)纖維化。

3.7軟腎散

方劑組成:三七、大黃、水蛭、紅景天等。何敏等[20]證實(shí)，該方能使UUO大鼠血BUN、SCr水平降低，減輕腎間質(zhì)病理積分，下調(diào)TGF-β1和α-SMA的表達(dá)，減輕UUO大鼠RIF程度。與依那普利效果無差異。

3.8加味黑地黃湯

藥物組成:熟地黃、白花蛇舌草、白術(shù)、生地黃、山茱萸、砂仁、五味子、蟬蛻。周珂等[21]實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，本方可明顯降低UUO大鼠血肌酐和尿素氮，腎組織細(xì)胞凋亡面密度明顯減小，全血高切黏度（Hηb）、低切黏度（Lηb）、血漿黏度（ηp）、紅細(xì)胞壓積（Hct）均明顯降低。通過改善腎組織的細(xì)胞凋亡和血液流變學(xué)指標(biāo)來達(dá)到延緩UUO大鼠腎組織的纖維化的作用。

4　復(fù)方中成藥

4.1尿毒清顆粒

尿毒清顆粒(廣州康臣)由大黃、黃芪、甘草、茯苓、川芎、丹參、白術(shù)、制首烏、姜半夏等組成。胡志娟等[22]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示使用尿毒清顆粒治療UUO大鼠，可通過減少尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白，抑制梗阻側(cè)腎組織中Toll樣受體（TLR4）、NF-κB的表達(dá)來改善腎間質(zhì)纖維化。

4.2桂枝茯苓膠囊

桂枝茯苓膠囊（江蘇康緣藥業(yè)）其成分由桂枝、茯苓、芍藥、牡丹皮、桃仁等組成。趙德安等[23]應(yīng)用桂枝茯苓膠囊用于UUO大鼠，治療組光鏡下各時(shí)間點(diǎn)腎臟纖維化程度均較模型組輕，桂枝茯苓膠囊可通過下調(diào)腎小管間質(zhì)α-SMA、TGF-β1、Ⅳ型膠原（collagenⅣ）表達(dá)延緩RIF進(jìn)展。

4.3腎康注射液

腎康注射液（西安世紀(jì)盛康藥業(yè)）其主要成分為大黃、黃芪、丹參、紅花。田曉等[24]證實(shí)，該方能使UUO大鼠血BUN、Scr水平下降，光鏡下腎間質(zhì)纖維化面積較模型組明顯減小。腎小管間質(zhì)中半定量分析顯示，TGF-β1、α-SMA表達(dá)均低于模型組，腎康注射液可減輕腎間質(zhì)纖維化。與纈沙坦組效果無差異。

4.4復(fù)方金錢草顆粒

復(fù)方金錢草顆粒（廣西萬通制藥）由金錢草、石韋、玉米須、車前草組成。趙慧[25]將其用于UUO大鼠，與UUO組相比較TGF-β1和III型膠原水平均明顯減少，尿素氮和肌酐水平均顯著減少。復(fù)方金錢草顆粒可以改善腎功能及減緩梗阻性大鼠腎間質(zhì)纖維化。

4.5參麥注射液

參麥注射液（正大青春寶藥業(yè)）主要成分是紅參、麥冬。陳蓉等[26]研究證實(shí)，參麥注射液用于治療UUO大鼠，梗阻的左腎形態(tài)隨梗阻時(shí)間的延長，周圍脂肪包裹、腎間質(zhì)纖維化程度較模型組輕，α-SMA、丙二醛（MDA）含量下降，超氧化物歧化酶（SOD）活性增加。參麥注射液可通過減少氧化應(yīng)激而抑制RIF。

5　討論

目前，中醫(yī)藥對(duì)于腎功能衰竭的研究側(cè)重于培補(bǔ)腎元，活血化瘀，溫陽益氣，健脾益腎，解毒泄?jié)岬确矫?，?nèi)容涵蓋了單味中藥、中藥有效提取物、經(jīng)驗(yàn)方和經(jīng)典方、復(fù)方中成藥。

單味中藥以及提取物等應(yīng)用現(xiàn)代先進(jìn)技術(shù)提取的有效成分以其作用方式、靶點(diǎn)和途徑明確越來越成為研究熱點(diǎn)。經(jīng)驗(yàn)方和經(jīng)典方在臨床中療效得到證實(shí)后，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中獲得更深層次的研究，被越來越多的挖掘和總結(jié)出來。如和解聚散方、黃芪山甲方、芪附湯、真武湯等。近幾年的不斷出現(xiàn)的復(fù)方中成藥以其服用方便，有效期長，療效明確，制作工藝成熟在臨床應(yīng)用中體現(xiàn)出獨(dú)有的優(yōu)勢(shì)。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究具體方向涉及了腎間質(zhì)纖維化過程中的細(xì)胞凋亡、細(xì)胞因子、血流變、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等多個(gè)環(huán)節(jié)，多方位多靶點(diǎn)的系統(tǒng)治療，證實(shí)了中醫(yī)藥在保護(hù)腎功能，延緩腎間質(zhì)纖維化中確有療效，中醫(yī)藥對(duì)治療慢性腎衰竭有廣闊的前景。但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也有諸多不足之處，其檢測(cè)指標(biāo)較簡單、反復(fù)，沒有更創(chuàng)新、更綜合的機(jī)理探討，且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，審判標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一，有待于進(jìn)一步完善和提高。

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（2016-02-02收稿）

*哈爾濱市科技創(chuàng)新人才研究專項(xiàng)資金項(xiàng)目。項(xiàng)目編號(hào)：RC2014XK004059