楊一天,葉蔚,劉彬彬
1.浙江中醫(yī)藥大學(xué),浙江 杭州 310053;2.杭州市中醫(yī)院,浙江 杭州 310007
中藥灌腸療法對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎β-arrestin 2信號(hào)通路影響的研究概況
楊一天1,葉蔚2,劉彬彬2
1.浙江中醫(yī)藥大學(xué),浙江 杭州 310053;2.杭州市中醫(yī)院,浙江 杭州 310007
本文通過(guò)文獻(xiàn)復(fù)習(xí),對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎(UC)中醫(yī)病因病機(jī)、治法,UC與β-arrestin 2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的相關(guān)性,中藥灌腸療法在UC治療中的臨床應(yīng)用,中藥灌腸療法對(duì)β-arrestin 2通路下游因子NF-κB p65表達(dá)的影響等進(jìn)行綜述了分析。認(rèn)為中藥灌腸能夠直達(dá)病所,充分發(fā)揮藥物療效,使病灶局部炎癥分泌物減少,血絡(luò)凝滯改善,加速潰瘍愈合;而其機(jī)制可能通過(guò)加強(qiáng)β-arrestin 2信號(hào)通路的活性,從而減輕結(jié)腸組織炎癥損傷,有效改善潰結(jié)臨床癥狀。
潰瘍性結(jié)腸炎;中藥灌腸;β-arrestin 2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是以反復(fù)發(fā)作性腹瀉、黏液膿血便及腹部疼痛為主要癥狀,病因至今不清的一類(lèi)炎癥性腸病(IBD),其病變部位局限于結(jié)直腸黏膜與黏膜下層,主要以連續(xù)性彌漫性分布的慢性非特異性炎癥及潰瘍形成為特點(diǎn),易反復(fù)發(fā)作并能引起癌變[1]。目前國(guó)內(nèi)外已提出多種發(fā)病機(jī)制的假設(shè),其中β2AR/β-arrestin2/NF-κBp65信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路近年來(lái)越來(lái)越受到關(guān)注。中醫(yī)在治療UC上有特色的治療療法—中藥灌腸療法,雖然中藥灌腸能夠直達(dá)病所,充分發(fā)揮藥物療效,減少病灶局部炎癥分泌物,改善血絡(luò)凝滯,加速潰瘍愈合,但其作用機(jī)制未知,目前已有多項(xiàng)研究證實(shí)中藥灌腸可能通過(guò)加強(qiáng)β-arrestin 2信號(hào)通路的活性,減輕結(jié)腸組織炎癥損傷,有效改善潰結(jié)臨床癥狀?,F(xiàn)將中醫(yī)灌腸療法對(duì)UC β-arrestin2信號(hào)通路影響的研究進(jìn)展概況陳述如下。
中醫(yī)學(xué)并無(wú)潰瘍性結(jié)腸炎之具體病名,但可根據(jù)其反復(fù)腹瀉、黏液膿血便等臨床癥狀,歸屬為中醫(yī)學(xué)腸澼、痢疾、便血等病,目前臨床多將其歸屬于腸澼范疇[2]。根據(jù)2003年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)消化專(zhuān)業(yè)委員會(huì)分型標(biāo)準(zhǔn)可將UC分為大腸濕熱、脾胃氣虛、脾腎陽(yáng)虛、肝郁脾虛、氣滯血瘀和陰血虧虛6個(gè)證型,其中臨床上以大腸濕熱型居多。
中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,該病為本虛標(biāo)實(shí)之證,由于感受外邪、飲食不節(jié)、情志失調(diào)、勞倦內(nèi)傷等多種原因?qū)е缕⑽柑撊?,中焦運(yùn)化、通降功能失調(diào),濕熱濁毒不能排出體外,壅塞腸中,阻滯氣機(jī),瘀血內(nèi)生,與腸中糟粕搏結(jié)并滯積于腸道,肉腐血敗,腸絡(luò)被傷,腐肉與絡(luò)血共下,故而見(jiàn)下痢赤白,其本在脾腎,標(biāo)在大腸[3]。中醫(yī)臨床上除了運(yùn)用湯藥辨證治療外,還有保留灌腸治療UC的特色療法,多個(gè)臨床研究顯示部分中藥制劑灌腸對(duì)腸黏膜能起到直接的修復(fù)與保護(hù)作用,促進(jìn)炎癥物質(zhì)吸收和潰瘍愈合;另藥物物理的溫?zé)岽碳み€能引起腸黏膜的血管擴(kuò)張,促進(jìn)局部血液和淋巴循環(huán),增強(qiáng)新陳代謝,改善局部組織的營(yíng)養(yǎng)和全身機(jī)能[4]。
2.1 β-arrestin 2通路簡(jiǎn)介 β-arrestin 2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中主要信號(hào)表達(dá)包擴(kuò)β2AR(β2腎上腺素能受體)、β-arrestin2與NF-κBp。其中位于通路下游的NF-κB是一種高度保守的轉(zhuǎn)錄因子,它廣泛存在于人體各類(lèi)組織中,可與多種細(xì)胞基因啟動(dòng)子、增強(qiáng)子的kB轉(zhuǎn)錄序列位發(fā)生特異性結(jié)合,在免疫和炎癥反應(yīng)、細(xì)胞生長(zhǎng)、病毒感染等方面發(fā)揮重要作用[5]。NF-κB是由p50、p52、p65(-RelA)、RelB及c-Rel組成的同源或異源二聚體復(fù)合物[6],靜息狀態(tài)時(shí)能與抑制蛋白結(jié)合形成三聚體,以無(wú)活性方式存在,當(dāng)細(xì)胞受到通路上游信號(hào)因子直接及間接刺激時(shí),NF-κB即可被激活,并移位至細(xì)胞核內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)錄,啟動(dòng)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng),引起內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,從而引發(fā)炎癥,其功能主要受IκB蛋白家族調(diào)控。
目前為止 Arrestin家族共發(fā)現(xiàn)六大類(lèi)成員,其中β-arrestin 1、β-arrestin 2廣泛存在于各種細(xì)胞中,可調(diào)節(jié)大多數(shù) G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)的活性[7]。研究證實(shí),β-arrestin2可以通過(guò)以下2種途徑抑制NF-κB活化,進(jìn)而參與免疫調(diào)節(jié)與炎癥抑制[8]。一是與NF-κB的抑制蛋白IκBα結(jié)合形成復(fù)合物,掩蓋核定位信號(hào),進(jìn)而阻止NF-κB從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄;二是抑制腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6(TRAF6)的自動(dòng)泛素化負(fù)性調(diào)節(jié)NF-κB的活化[9]。
β-arrestin2是Benovie等[10]在對(duì)牛腦中的β-腎上腺素受體激酶(βARK)提純的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的。研究證實(shí)用β2AR的激動(dòng)劑異丙腎上腺素(isoprot-erenol,Iso)處理細(xì)胞后能夠顯著增強(qiáng)β-arrestin 2與抑制蛋白IκBα的結(jié)合作用,加強(qiáng)抑制NF-κB下游基因轉(zhuǎn)錄的作用[11]。這也間接揭示了β2AR和NF-κB間存在著以β-arrestin 2為介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路,并提示交感神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控免疫系統(tǒng)是一種可能的作用方式。
2.2 UC中β-arrestin 2信號(hào)通路的表達(dá) β-arrestin2可通過(guò)與抑制蛋白IκBα和TRAF6相互作用限制NF-κB的活化,并通過(guò)β2AR/β-arrestin2信號(hào)通路與另一條信號(hào)通路——TLR/NF-κB的交叉對(duì)話等機(jī)制調(diào)節(jié)TLR活化的NF-κB活性[12]。因此β-arrestin可以通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κB的活化進(jìn)而影響多種炎癥相關(guān)基因的表達(dá),參與到IBD的炎癥反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)的過(guò)程中。
有研究表明,UC模型組結(jié)腸黏膜表面上皮細(xì)胞NF-κB p65表達(dá)較正常組顯著增強(qiáng),呈彌漫狀分布,固有層也有NF-κB p65的高表達(dá),可總結(jié)為UC患者腸黏膜炎性反應(yīng)越重,NF-κB p65表達(dá)越強(qiáng)[13],說(shuō)明UC患者可見(jiàn)NF-κB的異?;罨?。另外Gao等[14]研究發(fā)現(xiàn),β-arrestin 2的氨基末端結(jié)構(gòu)域可以與IκBα的羧基末端結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合,顯著抑制IκB激酶對(duì)IκBα的磷酸化過(guò)程,通過(guò)加強(qiáng)穩(wěn)定IκBα來(lái)阻止NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核,從而減弱 NF-κB的活化,證實(shí)了β-arrestin 2對(duì)NF-κB存在抑制作用。而β2AR受體信號(hào)可降低β-arrestin2磷酸化和誘導(dǎo)β-arrestin2的特異性構(gòu)象改變,加強(qiáng) β-arrestin2與 IκBα的結(jié)合,穩(wěn)定 IκBα,抑制NF-κB活化。因此β2AR/β-arrestin2/NF-κBp信號(hào)通路中,增強(qiáng)β2AR可加強(qiáng)β-arrestin2對(duì)NF-κB的抑制作用,為UC的診治提供新的臨床思路。
中藥灌腸療法作為一種中醫(yī)針對(duì)UC局部治療的特色方法,通過(guò)直接使用特定中藥制劑灌腸,直達(dá)病灶,使局部藥物濃度達(dá)到最大化,充分延長(zhǎng)藥物與病灶接觸時(shí)間,發(fā)揮中藥療效。研究表明中藥灌腸療法可減少病灶局部炎癥分泌,改善血絡(luò)凝滯,加速潰瘍愈合,藥液保留時(shí)間越長(zhǎng),吸收可越充分,病情癥狀改善越快,預(yù)后愈佳[15]。
3.1 中醫(yī)灌腸療法治療UC的臨床應(yīng)用 中醫(yī)灌腸療法能直接使藥物與患者病灶接觸,緩解炎癥,促進(jìn)潰瘍愈合,有明確的臨床療效,有臨床推廣的意義。如宋麗琴等[16]通過(guò)灌腸療法和柳氮磺吡啶的對(duì)比研究,顯示治療組患者應(yīng)用中藥保留灌腸治療后療效較對(duì)照組顯著提高,進(jìn)一步證實(shí)了中藥治療的良好效果。灌腸方由芍藥、當(dāng)歸、馬齒莧、白頭翁、白花蛇舌草、黃連、黃芩、黃柏、木香、檳榔、白芨、五倍子、苦參等組成,諸藥合用,共奏清熱化濕、涼血解毒和止瀉之功效。竇紅宇等[17]自擬消潰方,與使用硫酸依替米星聯(lián)合奧硝唑的對(duì)照組對(duì)照,結(jié)果顯示中藥保留灌腸組患者近期療效顯著高于對(duì)照組(P<0.05),說(shuō)明中藥保留灌腸有利于促進(jìn)潰瘍愈合,減輕腸黏膜病變,提示自擬消潰方保留灌腸治療UC在改善消化道癥狀方面較西醫(yī)藥物優(yōu)勢(shì)明顯。席作武[18]擬清潰灌腸方(黃連、白術(shù)、白及、地榆、三七粉、赤芍、烏梅等)保留灌腸,并根據(jù)不同中醫(yī)證型配以不同的中成藥內(nèi)服治療本病,結(jié)果顯示治療后中藥組Baron評(píng)分和Sutherland疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分低于西藥組,腹瀉、膿血便和腹痛評(píng)分低于西藥組,總有效率為91.2%高于西藥組的75.0%,提示了中藥干預(yù)措施能促進(jìn)潰瘍的愈合、減輕臨床癥狀、降低疾病活動(dòng)指數(shù)。
3.2 中藥灌腸療法對(duì)β-arrestin 2通路下游因子NF-κB p65表達(dá)的影響 到目前為止,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)研究通過(guò)測(cè)量通路中NF-κB p65表達(dá)來(lái)證實(shí)中藥灌腸的臨床療效,對(duì) β2AR、β-arrestin2指標(biāo)含量相對(duì)關(guān)注較少。如杜群等[19]通過(guò)給予四神丸浸膏劑灌胃腸,與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比,發(fā)現(xiàn)空白組大鼠結(jié)腸黏膜NF-κB p65mRNA表達(dá)處于較低水平,與空白組比較,模型組NF-κB p65 mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0.01),與模型組比較,四神丸組NF-κB p65 mRNA表達(dá)水平明顯降低,說(shuō)明四神丸浸膏劑灌胃腸能顯著降低NF-κB p65含量,從而發(fā)揮抗炎作用。徐進(jìn)等[20]通過(guò)灌腸復(fù)方甘草酸苷劑及SAPA,并與正常對(duì)照組及模型組進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果證實(shí)復(fù)方甘草酸苷保留灌腸對(duì)UC有一定治療作用并能影響NF-κB p65蛋白表達(dá)。陸文洪等[21]采用復(fù)方芩柏顆粒劑通過(guò)保留灌腸干預(yù)治療,并與正常組、模型組、西藥組進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果提示復(fù)方芩柏顆粒劑保留灌腸對(duì)UC實(shí)驗(yàn)大鼠有良好治療作用,能有效抑制NF-κB的活性,減輕結(jié)腸組織的炎癥損傷,從而改善結(jié)腸組織病理學(xué)分級(jí)水平。
4.1 臨床治法的選擇 目前UC的治療藥物主要是5-ASA類(lèi)和激素類(lèi),如有激素抵抗和激素依賴的患者則需用免疫抑制劑[22]。但臨床上可見(jiàn)5-ASA類(lèi)價(jià)格昂貴;氫化可的松灌腸液效果確切,但不能維持臨床緩解,且長(zhǎng)期使用可能引發(fā)激素不良反應(yīng)[23]。對(duì)病變?cè)谶h(yuǎn)段結(jié)腸的患者,筆者推薦局部用藥灌腸為主,優(yōu)于口服給藥,中藥保留灌腸可通過(guò)清熱解毒、活血祛瘀、利濕消腫等手段達(dá)到控制癥狀,改善患者的生活質(zhì)量的作用。筆者查找文獻(xiàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)很多實(shí)驗(yàn)研究著重于中藥灌胃對(duì)UC發(fā)病的影響,卻忽略了最直接的中藥灌腸療法,這也是目前灌腸療法在臨床上難以推廣開(kāi)的原因。
4.2 組方用藥的選擇 縱觀大部分中藥灌腸治療,其所用藥物或?yàn)榍鍩峤舛?,或?yàn)闆鲅寡?,或?yàn)榻∑⒃餄裰?,大多?shù)方中包含黃連、生白術(shù)、白及、地榆、三七粉、延胡索、赤芍、烏梅等,這提示清熱涼血、健脾利濕法在UC診治中的重要作用,這與上文所提臨床多見(jiàn)之大腸濕熱型相符合,可見(jiàn)血熱、濁毒、濕邪是UC發(fā)展過(guò)程中重要的病機(jī)及病理產(chǎn)物,也為進(jìn)一步研究中藥治療UC提供了客觀依據(jù)。
4.3 檢測(cè)指標(biāo)的選擇 雖然許多研究及臨床應(yīng)用也證實(shí)中藥灌腸法有很好的改善UC癥狀,減輕患者痛苦的作用,但對(duì)中藥在體內(nèi)如何發(fā)揮其藥理作用卻研究甚少。筆者所引用的上述很多實(shí)驗(yàn)研究?jī)H僅從通路下游因子NF-κBp65含量來(lái)探討UC的可能發(fā)病機(jī)制,已證明大部分中藥灌腸能抑制NF-κB活化及表達(dá),減少促炎因子的釋放,調(diào)節(jié)UC患者結(jié)腸中異常的免疫反應(yīng),從而減輕結(jié)腸炎癥,證實(shí)NF-κB的活化是目前所認(rèn)知的UC發(fā)病過(guò)程中的重要環(huán)節(jié)之一。但筆者同時(shí)也發(fā)現(xiàn),目前鮮有實(shí)驗(yàn)測(cè)量β2AR、β-arrestin2的表達(dá)濃度并探究其與UC發(fā)病的內(nèi)在關(guān)系,所查閱中僅有烏梅丸灌胃、氧化苦參堿肌肉注射等實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測(cè)了上述指標(biāo),而對(duì)于中藥灌腸之指標(biāo)檢測(cè)少之又少。若能在實(shí)驗(yàn)中留意β2AR、β-arrestin2的表達(dá),則可發(fā)現(xiàn)中藥灌腸在治療潰瘍性結(jié)腸炎的可能機(jī)制,并能證實(shí)中藥灌腸療法是通過(guò)加強(qiáng)β-arrestin2信號(hào)通路的活性,從而抑制NF-κB的表達(dá),減輕結(jié)腸組織炎癥損傷,促進(jìn)黏膜愈合,有效改善潰結(jié)臨床癥狀。
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(責(zé)任編輯:馮天保)
R574.1
A
0256-7415(2016)12-0198-03
10.13457/j.cnki.jncm.2016.12.085
2016-05-12
杭州市衛(wèi)生局資助課題(2013B16)
楊一天(1991-),女,碩士研究生,研究方向:消化內(nèi)科。