郭津津　李英杰　辛璐璐

(滄州市中心醫(yī)院泌尿外一科,河北　滄州　061000)

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前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清白細(xì)胞介素-6、-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白及轉(zhuǎn)移灶中骨形成蛋白的表達(dá)變化及意義

郭津津李英杰辛璐璐

(滄州市中心醫(yī)院泌尿外一科,河北滄州061000)

摘要〔〕目的探討前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白(sTfR)、骨形成蛋白(BMP)等指標(biāo)的表達(dá)變化及其臨床意義。方法選擇86例前列腺癌患者作為研究對(duì)象，其中發(fā)生前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的患者有36例(骨轉(zhuǎn)移組)、未發(fā)生轉(zhuǎn)移的50例(前列腺癌組)，選取前列腺良性增生患者50例(前列腺增生組)，比較三組患者血清中IL-6、IL-10、sTfR的水平差異，同時(shí)分析前列腺癌組織中、轉(zhuǎn)移病灶中BMP6、BMP4及BMP7的表達(dá)強(qiáng)度差異。結(jié)果骨轉(zhuǎn)移組患者的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平顯著高于前列腺癌組和前列腺增生組(P<0.05)；前列腺癌組患者的PSA水平顯著高于前列腺良性增生組(P<0.05)。前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清IL-6、IL-10、sTfr值與PSA水平具有顯著的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為0.296、0.410、-0.337，P均<0.005。免疫組化染色結(jié)果顯示：骨轉(zhuǎn)移組患者的BMP6、BMP4、BMP7評(píng)分〔(5.13±1.08)、(4.47±0.96)、(4.73±0.92)分〕均顯著高于前列腺癌組〔(3.14±0.82)、(2.01±0.57)、(1.89±0.38)分〕(P<0.05)。結(jié)論前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清IL-6、IL-10、PSA水平顯著增高，sTfR值顯著降低，并與PSA呈相關(guān)性；前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的轉(zhuǎn)移病灶組織中BMP6、BMP4及BMP7表達(dá)顯著高于前列腺癌組織中的表達(dá)。

關(guān)鍵詞〔〕前列腺癌骨轉(zhuǎn)移；白細(xì)胞介素-6；轉(zhuǎn)鐵蛋白；骨形成蛋白

第一作者：郭津津(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事泌尿系腫瘤的臨床治療研究。

骨轉(zhuǎn)移是影響前列腺癌患者病情進(jìn)展以及生存率的重要因素，其體內(nèi)白細(xì)胞介素(IL)-6含量與前列腺腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切，通過(guò)對(duì)腫瘤特異性抗原及腫瘤細(xì)胞的增殖水平進(jìn)行干預(yù)，進(jìn)而影響腫瘤的進(jìn)展，且與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及分期有關(guān)〔1〕。前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者體內(nèi)IL-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白(sTfR)以及骨形成蛋白(BMP)等指標(biāo)也有不同程度改變。本研究探討IL-6、IL-10、sTfR以及BMP6等指標(biāo)在前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者中的表達(dá)變化及其臨床意義。

1材料與方法

1.1一般材料以本院泌尿外科收集的86例前列腺癌患者及50例前列腺良性增生患者作為研究對(duì)象，分為骨轉(zhuǎn)移組36例，年齡59～78〔平均(67.24±6.18)〕歲；前列腺癌組(未發(fā)生轉(zhuǎn)移)50例，年齡56～79〔平均(66.82±6.47)〕歲；前列腺增生組50例，年齡54～75〔平均(65.18±7.44)〕歲。三組患者的年齡構(gòu)成無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有較好的均衡性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：以前列腺穿刺活檢結(jié)果作為前列腺癌患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)，以全身核素骨掃描檢查結(jié)果作為前列腺癌骨轉(zhuǎn)移診斷依據(jù)，以經(jīng)尿道前列腺切除術(shù)(TURP)術(shù)后病理結(jié)果作為前列腺良性增生的診斷依據(jù)。所有患者在標(biāo)本采集前均未接受放療或化療治療。

排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有泌尿系統(tǒng)腫瘤病史及手術(shù)史的患者；急性炎癥反應(yīng)期的患者；肝功能異常的患者；具有心、肺、肝、腎功能疾病的患者。

1.2樣本采集患者入院后，取清晨空腹肘靜脈5 ml，注入到不抗凝試管凝固后，3 000 r/min離心15 min，提取血清放置-70℃保存待測(cè)。

1.3檢測(cè)方法血清IL-6、IL-10、sTfR含量的檢測(cè)采用ELISA法，按照ELISA試劑盒的操作說(shuō)明對(duì)相應(yīng)樣本進(jìn)行檢測(cè)。

采用免疫組化EnVision法對(duì)前列腺癌組組織、轉(zhuǎn)移病灶標(biāo)本中BMP6、BMP4及BMP7的表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)：樣本用10%甲醛進(jìn)行固定，并用石蠟進(jìn)行包埋后切片，平均片厚約2 μm，脫蠟后采用3%雙氧水室溫下孵育5～10 min，清除內(nèi)源性的過(guò)氧化氫酶活性。蒸餾水清洗3次后置入磷酸鹽緩沖液進(jìn)行浸泡，5 min后置于95℃的環(huán)境下，15 min后降至室溫進(jìn)行冷卻。將新配制的二氨基聯(lián)苯胺溶液滴于切片上，顯色3 min后置于顯微鏡下進(jìn)行觀察，蒸餾水充分沖洗后使用蘇木紫進(jìn)行再次染色，脫水后封片。

結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核著色為棕黃色為陽(yáng)性，按照著色強(qiáng)度進(jìn)行分級(jí)，無(wú)色為0分；淡黃色為1分；棕黃色為2分，褐色為3分；顯微鏡下著色陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)：1%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；兩個(gè)得分項(xiàng)目相加為總分?？偡郑?3分為陰性，3分為弱陽(yáng)性、4分為陽(yáng)性，>5分為強(qiáng)陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0軟件。計(jì)量資料比較采用單因素方差分析及SNK-q檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法。

2結(jié)果

2.1三組患者血清IL-6、IL-10、sTfR、PAS水平比較三組的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；骨轉(zhuǎn)移組的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平顯著高于前列腺癌組和前列腺增生組(P<0.05)；前列腺癌組患者的PSA水平顯著高于前列腺良性增生組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.2骨轉(zhuǎn)移組患者的血清PSA水平與IL-6、IL-10、sTfR檢測(cè)值的相關(guān)性分析前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清IL-6、IL-10、sTfR值與PSA水平具有顯著的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為0.296、0.410、-0.337，P均<0.005。

2.3前列腺癌組癌組織中、骨轉(zhuǎn)移組患者轉(zhuǎn)移病灶的BMP6、BMP4、BMP7免疫組化染色結(jié)果免疫組化染色結(jié)果顯示：骨轉(zhuǎn)移組患者的BMP6、BMP4、BMP7評(píng)分〔(5.13±1.08)、(4.47±0.96)、(4.73±0.92)分〕均顯著高于前列腺癌組〔(3.14±0.82)、(2.01±0.57)、(1.89±0.38)分〕(P<0.05)。見(jiàn)圖1。

表1　三組患者IL-6、IL-10、sTfR、PSA檢測(cè)值比較

與前列腺增生組比較:1)P<0.05，與前列腺癌組比較:2)P<0.05

圖1　前列腺癌組、骨轉(zhuǎn)移組患者標(biāo)本中BMP4、BMP6、BMP7免疫組化檢測(cè)結(jié)果

3討論

骨轉(zhuǎn)移是影響前列腺癌患者病情進(jìn)展以及生存率的重要因素，其主要病理學(xué)特征為前列腺癌組織同時(shí)伴有骨母細(xì)胞的活躍增生以及大量溶骨性或混合性的新骨形成〔2〕。普通型前列腺癌在光鏡下表現(xiàn)為正常的大腺泡結(jié)構(gòu)消失，變?yōu)閳A形或卵圓形的小腺體，增生的小腺體可呈瘤樣、乳頭狀的大腺泡結(jié)構(gòu)。腺腔內(nèi)可見(jiàn)淀粉樣小體消失，基底層消失〔3〕。

機(jī)體內(nèi)IL-6含量與前列腺腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切，通過(guò)對(duì)腫瘤特異性抗原及腫瘤細(xì)胞的增殖水平進(jìn)行干預(yù)，進(jìn)而影響腫瘤的進(jìn)展，且與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及分期有關(guān)，是一種在細(xì)胞生成、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤發(fā)生和炎癥反應(yīng)中均起到重要作用的細(xì)胞因子，其受體異常表達(dá)還和多種自身免疫性疾病、多發(fā)性骨髓瘤及多種實(shí)體腫瘤密切相關(guān)〔4〕。腫瘤細(xì)胞分泌的IL-6通過(guò)兩種途徑對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)行調(diào)節(jié)，一是通過(guò)自分泌途徑與自身靶細(xì)胞的IL-6受體(IL-6R)結(jié)合，進(jìn)而產(chǎn)生作用；二是通過(guò)旁分泌途徑作用于其他細(xì)胞表面的IL-6R而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)〔5〕。一旦IL-6 與IL-6R之間的相互協(xié)調(diào)作用異常，會(huì)導(dǎo)致內(nèi)環(huán)境紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致造血、免疫以及內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的紊亂，甚至誘發(fā)惡性腫瘤〔6〕。Kobayashi等〔7〕研究顯示，在前列腺癌的癌變過(guò)程中，IL-10水平和腫瘤分化程度與腫瘤淋巴結(jié)、局部與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，認(rèn)為這可能與IL-10通過(guò)抑制IL-12和γ-干擾素(IFN-γ)來(lái)抑制免疫反應(yīng)，進(jìn)而產(chǎn)生免疫抑制、促進(jìn)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展，同時(shí)在放療中導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加劇。PSA是目前前列腺癌診斷的主要指標(biāo)，其敏感度可達(dá)93.82%，但由于前列腺癌的早期臨床癥狀并不明顯，因此當(dāng)檢測(cè)到PSA升高時(shí)，已經(jīng)預(yù)示著癌癥的發(fā)生〔8〕。BMP6作為BMPs家族中的成員，通過(guò)BMP6或SMAD途徑信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)并刺激鐵調(diào)素，進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)鐵的平衡〔9〕。sTfR則可以對(duì)前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的貧血程度進(jìn)行判斷。本研究結(jié)果顯示，對(duì)前列腺癌患者進(jìn)行IL-6、IL-10、sTfR以及PSA檢測(cè)可以提高前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的早期檢出率，進(jìn)而提高患者的治愈率以及生存率，提高患者的生存質(zhì)量〔10〕。BMP結(jié)合IL-6、IL-10、sTfR值與PSA水平對(duì)前列腺病變?cè)\斷及預(yù)測(cè)其發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的潛能比單個(gè)指標(biāo)更有效。

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〔2014-12-17修回〕

(編輯袁左鳴)

通訊作者：李英杰(1964-)，男，主任醫(yī)師，主要從事泌尿系腫瘤的臨床治療研究。

中圖分類號(hào)〔〕R739〔

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

文章編號(hào)〕1005-9202(2016)01-0109-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.049