劉頁(yè)玲　尹春華(江西護(hù)理職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江西　南昌　330052)

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趨化因子配體2、5在前列腺癌組織中的表達(dá)

劉頁(yè)玲尹春華1(江西護(hù)理職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330052)

〔摘要〕目的探討趨化因子配體( CXCL) 2、5在前列腺癌( PC)組織中的表達(dá)。方法156例PC患者根據(jù)其所患病癥類型分為三組，PC組82例，前列腺上皮內(nèi)瘤( PIN)組32例，良性前列腺增生( BPH)組42例，Western印跡檢測(cè)各組CXCL2和CXCL5的表達(dá)情況。結(jié)果PC組、PIN組的CXCL2和CXCL5的陽(yáng)性表達(dá)率高于BPH組( P＜0．05)。PC組的CXCL2和CXCL5的陽(yáng)性表達(dá)率高于PIN組( P＜0．05)。Western印跡結(jié)果表明: CXCL2和CXCL5在PC組相對(duì)表達(dá)量，PC組＞PIN組＞BPH組( P＜0．05)。結(jié)論CXCL2和CXCL5在PC中高表達(dá)。

〔關(guān)鍵詞〕趨化因子配體5;前列腺癌

1南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科

第一作者:劉頁(yè)玲( 1977－)，女，碩士，副教授，主要從事神經(jīng)解剖學(xué)研究。

前列腺癌( PC)是男性常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤〔1〕。文獻(xiàn)認(rèn)為〔2〕，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程是由趨化因子及其家族成員嚴(yán)密調(diào)控的。部分趨化因子具有促血管生成的作用，如趨化因子配體( CXCL1、2、5、8)等。本文擬觀察CXCL2和CXCL5在PC組織的表達(dá)。

1材料與方法

1. 1一般資料收集2005年1月至2014年1月在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的患者標(biāo)本，年齡52～81〔平均( 68．2± 8．1)〕歲。根據(jù)其病癥類型分為PC組82例;前列腺上皮內(nèi)瘤( PIN)組32例;良性前列腺增生( BPH組) 42例。

1. 2試劑山羊CXCL2多克隆抗體、小鼠抗人CXCL5單克隆抗體、小鼠抗人β－actin單克隆抗體均購(gòu)自Abnova公司。Western印跡發(fā)光試劑購(gòu)自普利萊公司。SP染色試劑盒、DAB顯色劑、抗體稀釋液均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。

1. 3方法嚴(yán)格按照二步快捷免疫組化法試劑盒使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，行CXCL2和CXCL5免疫組化染色，二氨基聯(lián)苯胺( DAB)顯色。以磷酸鹽緩沖液( PAB)代替一抗行陰性染色，用已知陽(yáng)性切片做陽(yáng)性對(duì)照。根據(jù)染色的深度及陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量分別計(jì)分〔3〕。無(wú)著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%為0分，5%～25%為1分，26% ～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分。兩項(xiàng)結(jié)果相加，＜2分為陰性，≥2分為陽(yáng)性。

1. 4 Western印跡按每孔30 μg上樣，10%聚丙烯酰胺凝膠( SDS－PAGE) 120 V電壓下分離，再用30 V電壓將凝膠上的蛋白濕轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜( NC膜)上。5%脫脂奶粉將膜封閉2 h后，加人一抗(抗體稀釋度參見(jiàn)說(shuō)明書(shū))，4℃孵育過(guò)夜。Tris鹽酸緩沖液( TBST)充分漂洗后加人辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗(抗體稀釋度參見(jiàn)說(shuō)明書(shū))孵育1 h。最后用Western印跡發(fā)光試劑顯色，暗室曝光顯像于膠片上。

1. 5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13．0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2. 1 CXCL2和CXCL5的表達(dá)情況PC組、PIN組CXCL2〔53 例( 64．6%)、8例( 25．0%)〕和CXCL5〔49例( 59．8%)、11例( 34．4%)〕的陽(yáng)性表達(dá)率高于BPH組〔均為2例( 4．8%)〕( P＜0．05)。PC組的CXCL2和CXCL5的陽(yáng)性表達(dá)率都高于PIN組( P＜0．05)。

2. 2 CXCL2和CXCL5的蛋白表達(dá)Western印跡結(jié)果表明，CXCL2和CXCL5相對(duì)表達(dá)量PC組＞PIN組＞BPH組( P＜0．05)。見(jiàn)圖1?！?〕

3討論

趨化因子能使相關(guān)細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動(dòng)。這類小分子通過(guò)與受體結(jié)合而引起多種生理反應(yīng)〔5〕，如在細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化及凋亡中發(fā)揮作用，還可使淋巴細(xì)胞向炎癥部位聚集，啟動(dòng)炎癥反應(yīng)〔6〕，除此之外還具有促進(jìn)病毒感染和腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移等功能。CXCL5也稱上皮中性粒細(xì)胞活化肽( ENA)－78，屬于CXC趨化因子家族的成員之一〔7〕，可與其受體CXCR2發(fā)生特異性結(jié)合，引起促血管生成的生物學(xué)效應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、發(fā)展及轉(zhuǎn)移。CXCL2也屬于趨化因子家族的成員之一，也稱巨噬細(xì)胞炎性蛋白( MIP)－2。CXCL2結(jié)構(gòu)上與CXCL1、5、8具有同源性〔8〕。本研究表明CXCL5與PC的生成有密切的關(guān)系。腫瘤的分化程度越低、惡性程度越高、病變程度越強(qiáng)，CXCL5的表達(dá)越高，表明CXCL5可能與PC的發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移有關(guān)，其可能機(jī)制為: CXCL5與其受體CXCR2特異性結(jié)合后，激活了酪氨酸激酶受體，生成新生血管，為PC的生長(zhǎng)及發(fā)展提供養(yǎng)分及轉(zhuǎn)移通道〔9〕。筆者推測(cè)，腫瘤細(xì)胞表面的CXCR2能夠增強(qiáng)腫瘤的增殖及侵染能力，破壞內(nèi)皮的屏蔽功能，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞骨架的重建，這有待進(jìn)一步深入研究。

4參考文獻(xiàn)

1 Davis EJ，Beebe－Dimmer JL，Yee CL，et al．Risk of second primary tumors in men diagnosed with prostate cancer: a population－based cohort study〔J〕．Cancer，2014; 120( 17) : 2735－41．

2 Kogan－Sakin I，Cohen M，Paland N，et al．Prostate stromal cells produce CXCL－1，CXCL－2，CXCL－3 and IL－8 in response to epithelia－secreted IL－1〔J〕．Carcinogenesis，2009; 30( 4) : 698－705．

3袁振，蔣雷鳴，王松．趨化因子受體7和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C在前列腺癌中的表達(dá)〔J〕．中國(guó)老年學(xué)雜志，2013; 33( 19) : 4695－7．

4 Torisawa YS，Mosadegh B，Bersano－Begey T，et al．Microfluidic platform for chemotaxis in gradients formed by CXCL12 source－sink cells〔J〕．Integr Biol，2010; 2( 11－12) : 680－6．

5 van der Meulen AA，Biber K，Lukovac S，et al．The role of CXC chemokine ligand( CXCL) 12－CXC chemokine receptor( CXCR) 4 signalling in the migration of neural stem cells towards a brain tumour〔J〕．Neuropathol Appl Neurobiol，2009; 35( 6) : 579－91．

6 Wong YF，Cheung TH，Lo KW，et al．Identification of molecular markers and signaling pathway in endometrial cancer in Hong Kong Chinese women by genome－wide gene expression profiling〔J〕．Oncogene，2007; 26 ( 13) : 1971－82．

7 Okabe H，Beppu T，Ueda M，et al．Identification of CXCL5/ENA－78 as a factor involved in the interaction between cholangiocarcinoma cells and cancer－associated fibroblasts〔J〕．Int J Cancer，2012; 131( 10) : 2234－41．

8 Park JY，Park KH，Bang S，et al．CXCL5 overexpression is associated with late stage gastric cancer〔J〕．J Cancer Res Clin Oncol，2007; 133 ( 11) : 835－40．

9 Reiland J，F(xiàn)urcht LT，McCarthy JB．CXC－chemokines stimulate invasion and chemotaxis in prostate carcinoma cells through the CXCR2 receptor 〔J〕．Prostate，1999; 41( 2) : 78－88．

〔2015－03－16修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

通訊作者:尹春華( 1976－)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤學(xué)研究。

基金項(xiàng)目:江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃( No．20142008)

〔中圖分類號(hào)〕R737. 25

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202( 2016) 02-0295-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2016. 02. 018