譚宏偉，韓加敏，董 霞，王小平，周昱恒，董 坤

(1.重慶市畜牧技術(shù)推廣總站，重慶 401121；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 65020；4.重慶市彭水苗族土家族自治縣畜牧發(fā)展中心，重慶 409600)

1 引言

蜜粉源植物是為蜜蜂提供花蜜和花粉的食物來(lái)源，是蜜蜂賴以生存、繁殖和發(fā)展的生活資料，是發(fā)展養(yǎng)蜂生產(chǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ)[1]。

川續(xù)斷主要含有生物堿、皂苷、揮發(fā)油、多糖及其他生物活性成分[2]。豐富多樣的成分使其具有行血消腫、生肌止痛、續(xù)筋接骨、補(bǔ)肝腎、強(qiáng)腰膝、安胎等作用[3-19]。川續(xù)斷是一種中藥材也是一種蜜粉源植物，其多年生草本，頭狀花序球形，花期7～9月，果期9～11月[3]。近年來(lái)，醫(yī)藥市場(chǎng)對(duì)天然中藥材的需求量逐年增加[20]，川續(xù)斷的野生產(chǎn)量因被大量采摘而逐年下降，無(wú)法滿足人們的需求[21]，所以一些地區(qū)（如攀西地區(qū)[22]）進(jìn)行了人工種植。

川續(xù)斷在重慶彭水地區(qū)屬野生蜜源，零星廣布，多生于田埂、林緣及荒地處，花粉和花蜜都很豐富，而且在生長(zhǎng)多而集中處可采到此蜜[23]，其豐富的花粉可為該區(qū)域的蜜蜂提供一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。《中國(guó)蜜粉源植物》記載與之同屬植物續(xù)斷均為蜜源植物，但未見(jiàn)關(guān)于該種蜜源植物開(kāi)花泌蜜等的研究報(bào)道。本研究通過(guò)對(duì)其開(kāi)花方式及順序、開(kāi)花期、蜜蜂采集習(xí)性及花冠和花粉的超微結(jié)構(gòu)研究，可為川續(xù)斷作為蜜源的開(kāi)發(fā)利用提供一定的參考。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 開(kāi)花方式及順序

對(duì)觀察區(qū)域的川續(xù)斷花序進(jìn)行標(biāo)記、觀察和記錄，找出其開(kāi)花方式及順序并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，實(shí)驗(yàn)中開(kāi)花方式統(tǒng)計(jì)了200個(gè)花序。

2.2 開(kāi)花期

對(duì)觀察區(qū)域川續(xù)斷的整體花期進(jìn)行記錄，選取10個(gè)花序?qū)位ㄐ蚧ㄆ谶M(jìn)行記錄與統(tǒng)計(jì)。

2.3 蜜蜂采集習(xí)性

選取1 m2川續(xù)斷生長(zhǎng)區(qū)域，在3天晴朗日的8：00～18：00整點(diǎn)時(shí)統(tǒng)計(jì)該區(qū)域蜜蜂數(shù)量，緊接著跟著一只蜜蜂記錄其訪花（花序）數(shù)量及其在每個(gè)花序上的停留時(shí)間，直至蜜蜂離開(kāi)觀察區(qū)域。

2.4 超微結(jié)構(gòu)研究

花冠采集后放入固定液中4℃冷藏保存，然后進(jìn)行乙醇脫水，臨界點(diǎn)干燥后進(jìn)行電鏡掃描；花粉采集后放入裝有變色硅膠的密封袋中干燥，然后進(jìn)行電鏡掃描。利用Image J軟件對(duì)所拍圖像進(jìn)行測(cè)量，利用Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。

3 實(shí)驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)于2018年8～9月在重慶市彭水苗族土家族自治縣摩圍山上進(jìn)行。

4 結(jié)果與分析

4.1 開(kāi)花方式及順序

川續(xù)斷為頭狀花序，球形，花序開(kāi)花時(shí)可分為4個(gè)部位（如圖1）。

圖1 川續(xù)斷開(kāi)花部位

川續(xù)斷根據(jù)開(kāi)花時(shí)不同部位的先后順序不同，總體可分為3種方式。方式一：部位2最先開(kāi)放，其次部位4，最后是部位1、3同時(shí)開(kāi)放，由于部位3的面積較大，最后開(kāi)完的一般是部位3。方式二：部位2和部位4同時(shí)開(kāi)放，然后部位1、3開(kāi)放方式基本與方式一一致。方式三：部位4最先開(kāi)放，其次部位2，然后部位1、3開(kāi)放方式基本與方式一一致。在川續(xù)斷的開(kāi)放過(guò)程中也并不是全都按這3種方式來(lái)開(kāi)放的，還有很少一部分順序方式比較雜，不是一個(gè)部位同時(shí)開(kāi)放，而是有一二朵先開(kāi)放，不好描述，歸為其他方式(如附圖)。

圖2 川續(xù)斷開(kāi)花方式一

圖3 川續(xù)斷開(kāi)花方式二

圖4 川續(xù)斷開(kāi)花方式三

圖5 川續(xù)斷其他開(kāi)花方式

對(duì)川續(xù)斷200個(gè)花序進(jìn)行標(biāo)記與觀察，并統(tǒng)計(jì)了各種開(kāi)花方式的數(shù)量，結(jié)果如圖6所示。結(jié)果顯示，82.5%的川續(xù)斷花序以方式一開(kāi)放，占大多數(shù)；其次是方式二，有12.5%；少數(shù)以方式三和其他方式開(kāi)放，2種方式總共占5%。

圖6 川續(xù)斷不同開(kāi)花方式統(tǒng)計(jì)

4.2 川續(xù)斷開(kāi)花期

川續(xù)斷開(kāi)花過(guò)程中，會(huì)從主枝上不斷長(zhǎng)出新花序，從而總體花期較長(zhǎng)，在彭水縣的總體花期為8～9月。

川續(xù)斷開(kāi)花過(guò)程中，將其單花序分為開(kāi)花期和敗花期。此開(kāi)花期是指川續(xù)斷總狀球形花序上第一朵花開(kāi)始開(kāi)放至最后一朵花開(kāi)放的時(shí)間；敗花期是指花序上所有花朵開(kāi)放后開(kāi)始變黃、凋謝及掉落，直至所有花朵掉落的時(shí)間。

結(jié)果如表1所示，川續(xù)斷單花序開(kāi)花期4.48 d，最多6 d，最少3 d；單花序敗花期2.9 d，最多4 d，最少2 d；總花期7.38 d，最多9 d，最少6 d。

表1 川續(xù)斷花期時(shí)間

4.3 川續(xù)斷蜜蜂采集習(xí)性

觀察了蜜蜂從早上8：00到下午18：00整點(diǎn)時(shí)采集川續(xù)斷的數(shù)量、單只蜜蜂的采集頻率及在單花序上的停留時(shí)間，結(jié)果如圖7所示。

圖7 川續(xù)斷蜜蜂采集習(xí)性

一天中每個(gè)時(shí)段蜜蜂采集川續(xù)斷的數(shù)量差異不是特別大，只是在早上9：00以前可能氣溫太低，蜜蜂比較少，還可能沒(méi)有蜜蜂，但在9：00以后數(shù)量波動(dòng)不大，在下午16：00達(dá)到最大值。單只蜜蜂的采集頻率變化就比較大，從8：00～12：00一直在上升，12：00開(kāi)始下降，在12：00達(dá)到最大值，一只蜜蜂可以在觀察區(qū)域內(nèi)16.5個(gè)花序上停留。蜜蜂在11：00單花停留時(shí)間最長(zhǎng)，為22.83 s。據(jù)觀察，蜜蜂可以在川續(xù)斷花序上停留的時(shí)間最長(zhǎng)可以達(dá)到10 min以上，但不是整點(diǎn)觀察到的。

4.4 川續(xù)斷超微結(jié)構(gòu)

4.4.1 花管內(nèi)壁電鏡掃描

根據(jù)觀察，開(kāi)始是猜測(cè)川續(xù)斷的蜜腺在花管內(nèi)壁上的，經(jīng)過(guò)電鏡掃描，在花管內(nèi)壁上只發(fā)現(xiàn)了一些細(xì)毛（圖8-B、C黑色圈處），德國(guó)C.K.施佩格爾發(fā)現(xiàn)尼泊爾老鸛草的花瓣基部有細(xì)毛，細(xì)毛之下也有分泌甜汁的腺體，這些分泌甜汁的腺體就是蜜腺[3]，但是川續(xù)斷細(xì)毛之下的結(jié)構(gòu)沒(méi)有觀察到。至于這些細(xì)毛是不是川續(xù)斷分泌花蜜的組織，還需要對(duì)其及花的其他部位進(jìn)行研究才能確定。

圖8 川續(xù)斷花管內(nèi)壁掃描圖

4.4.2 花粉形態(tài)

花粉近等腰三角形，3個(gè)角上有萌發(fā)溝，沒(méi)有像三角形那樣輪廓分明，“邊”所在的面有一定的弧度。2邊長(zhǎng)54.97(28.99～30.29)μm，底邊不包括萌發(fā)孔位置長(zhǎng) 58.41(57.04～59.78)μm，最寬處長(zhǎng) 73.50（65.50～84.36） μm，厚度約為16.06μm。萌發(fā)溝凹陷有線開(kāi)口，開(kāi)口長(zhǎng)46.12（43.96～48.57） μm，寬3.71（2.57～4.38）μm，開(kāi)口面積約為110.64μm2。具乳突狀紋飾，大小不一，分布不規(guī)則。

圖9 川續(xù)斷花粉電鏡掃描圖

5 結(jié)論

通過(guò)對(duì)川續(xù)斷的開(kāi)花方式、開(kāi)花期和蜜蜂采集習(xí)性的研究，川續(xù)斷單花序開(kāi)花時(shí)一般分為4個(gè)部分、3種方式，總體花期2個(gè)月左右，單花序花期7.38 d，是蜜蜂喜愛(ài)采集的一種蜜源植物。得到了川續(xù)斷花粉超微結(jié)構(gòu)，但花蜜腺具體位置還有待進(jìn)一步研究。

致謝：電鏡掃描由中國(guó)科學(xué)院東亞植物多樣性與生物地理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室谷志佳協(xié)助完成，特此致謝！