葛麗麗　楊俊梅　李進(jìn)香

【摘要】 目的 探討神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）測(cè)定標(biāo)本影響因素。方法 采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光法， 取50例健康體質(zhì)兒童的血樣6 ml進(jìn)行研究， 分成六組， 每組1 ml放于監(jiān)測(cè)試管中， 按順序進(jìn)行編號(hào)， 1、2、3、4號(hào)試管在室溫25℃的環(huán)境中分別放置30 min、1 h、3 h、5 h后分離血清， 測(cè)定NSE水平， 5號(hào)試管在室溫下放置30 min后離心， 6號(hào)試管放置于-20℃的冰箱中24 h后離心， 測(cè)定血清中的NSE水平。結(jié)果 血清標(biāo)本放置3 h組和5 h組與30 min組NSE水平比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 放置1 h組與30 min組NSE水平比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 未冰凍30 min組與冰凍組NSE水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 血清中NSE的含量與標(biāo)本放置時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)， 與是否經(jīng)過(guò)冰凍處理無(wú)關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 神經(jīng)元特異性烯醇化酶；標(biāo)本；影響因素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.02.023

神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是臨床上很有價(jià)值的分子學(xué)標(biāo)記物[1， 2]。一方面NSE可以作為肺癌和兒童神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)記物， 用于肺小細(xì)胞癌和非小細(xì)胞癌的鑒別診斷， 另一方面NSE活性改變同神經(jīng)損傷所致的許多神經(jīng)性疾病關(guān)系密切。由于NSE可以同時(shí)存在紅細(xì)胞和血小板中， 所以在NSE的測(cè)定中， 應(yīng)避免溶血， 血液標(biāo)本放置時(shí)間太長(zhǎng)， 血液中血細(xì)胞會(huì)進(jìn)行一定的代謝活動(dòng)， 會(huì)導(dǎo)致血清中的成分發(fā)生變化， 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果[3]。本文著重探討不同放置時(shí)間對(duì)血液中NSE的影響情況， 以及放置條件冰凍與未冰凍對(duì)NSE含量的影響， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 隨機(jī)選取2013年6月～2014年6月本院體檢50例體質(zhì)健康兒童， 年齡5～15歲的血樣6 ml進(jìn)行研究， 分成六組， 每組1 ml放于監(jiān)測(cè)試管中， 按順序進(jìn)行編號(hào)， 1號(hào)試管在室溫25℃下放置30 min后離心、2號(hào)試管1 h后離心、3號(hào)試管3 h后離心、4號(hào)試管5 h后離心， 5號(hào)試管在室溫下放置30 min后離心， 6號(hào)試管放置于-20℃的冰箱中24 h后離心。觀測(cè)血清中NSE的含量情況。

1. 2 方法 按Elscsys全制動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀說(shuō)明書(shū)進(jìn)行嚴(yán)格、規(guī)范的操作， 采用雙抗體夾心法檢測(cè)血清中的NSE含量， 及用生物素化的抗單克隆抗體和用釕記的抗單克隆抗體與標(biāo)本中的NSE結(jié)合形成夾心復(fù)合物， 通過(guò)電化學(xué)儀進(jìn)行測(cè)定。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

血清標(biāo)本放置3 h組和5 h組與30 min組NSE比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 放置1 h組與30 min組NSE比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 未冰凍30 min組與冰凍組NSE比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

NSE是參與糖酵解途徑的烯醇化酶中的一種， 存在于神經(jīng)組織和神經(jīng)內(nèi)分泌組織中[4， 5]。由于NSE可以同時(shí)存在紅細(xì)胞和血小板中， 所以在NSE的測(cè)定中， 應(yīng)避免溶血， 血液標(biāo)本放置時(shí)間太長(zhǎng)。血液中血細(xì)胞會(huì)進(jìn)行一定的代謝活動(dòng)， 會(huì)導(dǎo)致血清中的成分發(fā)生變化[6]。在本實(shí)驗(yàn)中提取出來(lái)的血清， 在不同放置時(shí)間下， NSE的含量明顯不同， 放置30 min組與1 h組差異不明顯， 而與3 h、5 h組有明顯差異， 說(shuō)明NSE的含量與放置時(shí)間的長(zhǎng)短有密切的關(guān)系， 進(jìn)而說(shuō)明血液標(biāo)本在久置未及時(shí)分離的情況下， 會(huì)導(dǎo)致血液中血小板及紅細(xì)胞內(nèi)的烯醇化酶進(jìn)入血清， 使血清中NSE的水平上升， 就容易造成誤診。在冰凍與未冰凍兩種條件下血清中的對(duì)比中， NSE水平無(wú)顯著差異， 說(shuō)明冰凍對(duì)此酶活性無(wú)影響。

實(shí)際工作中， 在做檢驗(yàn)實(shí)踐中， 檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性除了受到檢驗(yàn)方法、儀器靈敏度、精密程度的影響外， 對(duì)源自標(biāo)本自身的影響也是一個(gè)不容忽視的因素。尤其是病房血液標(biāo)本在采集后往往不能立即送到檢測(cè)中心而導(dǎo)致血清放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)， 就會(huì)導(dǎo)致NSE的含量在測(cè)定結(jié)果中偏高[7， 8]。

綜上所述， 血清中的NSE含量與放置時(shí)間有關(guān)。隨著放置時(shí)間的增加而有明顯的上升趨勢(shì)。因此臨床醫(yī)師在檢測(cè)血樣標(biāo)本， 應(yīng)盡快從病理區(qū)送到實(shí)驗(yàn)室對(duì)血樣立即離心處理， 這樣就可以縮短標(biāo)本的放置時(shí)間， 減少了細(xì)胞的破壞， 以便提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性與可靠性。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2015-08-06]