崔 巖 張瑩瑩

（遼寧省朝陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧 朝陽(yáng) 122000）

前列回春膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

崔 巖 張瑩瑩

（遼寧省朝陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧 朝陽(yáng) 122000）

目的建立前列回春膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。方法采用HPLC-ELSD法測(cè)定前列回春膠囊中黃芪的活性成分黃芪甲苷的含量；使用KromasilC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱；以乙腈-水（32∶68）為流動(dòng)相，流量1.0 mL/min。結(jié)果黃芪甲苷進(jìn)樣量在0.1950～4.8750 μg（r=0.9996）線性范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，平均回收率98.42%，RSD=1.1%（n=6）。結(jié)論該方法準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于前列回春膠囊的質(zhì)量控制。

前列回春膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器

前列回春膠囊收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十七冊(cè)，由黃芪、虎杖、地龍、關(guān)木通等19味藥制備而成的膠囊劑，具有益腎回春、活血通淋、清熱解毒之功效，用于慢性前列腺炎以及前列腺炎引起的尿頻、尿急、尿道路澀痛、淋濁、性欲減退、陽(yáng)萎早泄等證。由于原標(biāo)準(zhǔn)過(guò)于簡(jiǎn)單，無(wú)含量測(cè)定方法，本文增加了黃芪的含量測(cè)定項(xiàng)[1-3]。

1 儀器與試藥

島津LC-2010A型高效液相色譜儀（包括LC-2010型紫外檢測(cè)器，LC solution色譜工作站），黃芪甲苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110781-200613）；前列回春膠囊（吉林省東豐藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：20130332、20130505、20140108），乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件：色譜柱KromasilC18（4.6 mm×250 mm；5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（32∶68）；柱溫：28 ℃；流量：1.0 mL/min；漂移管溫度：50 ℃，氣流（壓縮空氣）壓力：400 Pa，理論板數(shù)：按黃芪甲苷計(jì)算不低于4000。

2.2 溶液制備：精密稱(chēng)取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥16 h的黃芪甲苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物4.0 g，精密稱(chēng)定，置錐形瓶中，精密加入甲醇100 mL，稱(chēng)定重量，密塞，冷浸過(guò)夜，加熱回流2 h，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液50 mL，蒸干，殘?jiān)铀?0 mL，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40 mL，合并正丁醇提取液，用濃氨試液充分洗滌3次，每次40 mL，棄去洗滌液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，并轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按處方及工藝制備不含黃芪的陰性樣品，同供試品溶液的制備方法學(xué)考察陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察：陰性干擾實(shí)驗(yàn)：取2.2項(xiàng)下3種溶液各20 μL，分別注入高效液相色譜儀，測(cè)定。結(jié)果色譜圖中在黃芪甲苷峰相應(yīng)的保留時(shí)間附近未檢出干擾峰（圖1）。

線性關(guān)系考察：分別精密吸取對(duì)照品溶液1、5、10、15、20、25 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=21365；X-30712，r=0.9996。結(jié)果表明，黃芪甲苷對(duì)照品進(jìn)樣量在0.1950～4.8750 μg范圍內(nèi)與峰面積有良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：精密吸取對(duì)照品溶液20 μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，按峰面積計(jì)算。結(jié)果的RSD為0.58%（n=6），結(jié)果儀器精密度良好。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一批號(hào)（批號(hào)為20130332）樣品6份，分別依法處理后測(cè)定。結(jié)果的RSD為0.94%，表明該方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液（批號(hào)為20130332）20 μL，按上述色譜條件，分別于0、2、4、8、12、24 h時(shí)測(cè)定，以峰面積計(jì)算，RSD為0.56%。結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

加樣回收率試驗(yàn)：精密稱(chēng)取己知含量的供試品（批號(hào)20130332，黃芪甲苷含量為0.1033 mg/g）6份，每份2.0 g，精密加入黃芪甲苷對(duì)照品溶液（0.1950 mg/mL）1 mL，按供試品溶液方法制備，依法測(cè)定含量并計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1 前列回春膠囊HPLC色譜圖

表1 回收率試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

2.4 樣品含量測(cè)定：取3批樣品，按供試品溶液方法制備，分別進(jìn)樣20 μL，依法測(cè)定，采用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算樣品中黃芪甲苷的含量，批號(hào)20130332黃芪甲苷含量0.0304毫克/粒，批號(hào)20130505黃芪甲苷含量0.0356毫克/粒，批號(hào)20140108黃芪甲苷含量0.02949毫克/粒[4-5]。

3 討 論

黃芪為處方中君藥，原標(biāo)準(zhǔn)未對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，由于黃芪的活性成分黃芪甲苷在紫外幾乎無(wú)吸收，所以本文采用HPLC-ELSD法對(duì)其進(jìn)行定量分析。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:643.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:595.

[3]施法,侯峰,隋添爽,等.虛寒胃痛顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn),2013,13(3):184-188.

[4]王尚.HPLC法測(cè)定排石湯顆粒中黃芪甲苷的含量[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2013,7(22):223-224.

[5]陳錫琨.HPLC-ELSD法測(cè)定玉屏風(fēng)膠囊中黃芪甲苷的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2013,11(23):8-9.

R284.1

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1671-8194（2015）05-0060-02