魏振承,張瑞芬,鄧媛元,張名位,張 雁,唐小俊,劉 磊,遆慧慧,馬永軒,郭錦欣
(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,農(nóng)業(yè)部功能食品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東廣州510610)
花生多肽飲品抗氧化和緩解體力疲勞作用
魏振承,張瑞芬,鄧媛元,張名位,張雁,唐小俊,劉磊,遆慧慧,馬永軒,郭錦欣
(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,農(nóng)業(yè)部功能食品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東廣州510610)
研究了花生多肽飲品抗氧化和緩解體力疲勞作用及其緩解體力疲勞和抗氧化之間的關(guān)系。以花生多肽和其他活性物質(zhì)為主要功效成分研制營(yíng)養(yǎng)均衡型花生多肽飲品,設(shè)三個(gè)劑量組和對(duì)照組進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),研究其緩解體力疲勞作用及對(duì)抗氧化指標(biāo)的影響。結(jié)果表明,與對(duì)照組小鼠相比,高劑量組與中劑量組SOD含量升高并具有顯著性差異(p<0.05),高劑量組和中劑量組MDA含量降低并具有顯著性差異(p<0.05),各劑量組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯增加(p<0.05),肝糖原含量顯著提高(p<0.05),全血乳酸和血清尿素氮顯著降低(p<0.05)。表明花生多肽飲品具有抗氧化和緩解體力疲勞的作用,其緩解體力疲勞作用與體內(nèi)SOD水平相關(guān)。
花生,多肽,抗氧化,緩解體力疲勞
慢性疲勞綜合癥發(fā)生率較高,女性和男性發(fā)生率分別為每十萬(wàn)人522人和291人[1]。這些患者即使不從事激烈運(yùn)動(dòng)或重體力勞動(dòng),也會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)疲勞和各種身體不適。目前已發(fā)現(xiàn)多種多肽成分具有緩解人體體力疲勞的作用,包括花生多肽[2-3]、大豆肽[4-5]、高F值寡肽[6]、玉米肽[7-9]、大米肽[10]等。另外,還發(fā)現(xiàn)了許多其他功能性成分也有助于緩解體力疲勞,如肉堿[11-13]、?;撬醄14]、精氨酸[15]、膽堿[16]等。國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)多種不同來(lái)源的多肽成分具有抗氧化活性,如花生多肽[3]、大豆多肽[5,17]、玉米多肽[9]、大米多肽[10]、羅非魚(yú)多肽[18]、魚(yú)精多肽[19]等。國(guó)內(nèi)外眾多研究結(jié)果表明氧化應(yīng)激反應(yīng)與慢性疲勞相關(guān)[20],然而氧化應(yīng)激是導(dǎo)致機(jī)體疲勞的原因還是機(jī)體疲勞產(chǎn)生的結(jié)果仍沒(méi)有定論[21]。目前已發(fā)現(xiàn)多種活性物質(zhì)的緩解體力疲勞作用與其抗氧化活性有關(guān),包括大豆低聚肽[17]、杜仲葉黃酮苷[22]、番茄紅素[23]、乳源免疫調(diào)節(jié)肽[24]、新疆野生黨參總黃酮[25]、魚(yú)精多肽[19]等。
目前已有的關(guān)于抗疲勞成分報(bào)道大多數(shù)是通過(guò)人工灌胃方法對(duì)單一成分進(jìn)行緩解體力疲勞功能評(píng)價(jià)從而確定該物質(zhì)的緩解體力疲勞作用,未考慮到不同成分間可能存在的減效或增效作用,并異于動(dòng)物正常取食習(xí)慣,導(dǎo)致其結(jié)果對(duì)抗疲勞產(chǎn)品研發(fā)的參考意義受到了限制。在產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中,考慮到口感和營(yíng)養(yǎng)均衡等因素,產(chǎn)品很少只采用單一成分。在成分復(fù)雜的飲料體系中,不同成分間存在相互作用,導(dǎo)致產(chǎn)品外觀和產(chǎn)品功效可能會(huì)發(fā)生變化。在以多肽為功效成分研發(fā)緩解體力疲勞產(chǎn)品方面,蘇永昌等[18]以羅非魚(yú)多肽為功效成分制備了羅非魚(yú)多肽飲料,并證實(shí)了產(chǎn)品能提高小鼠體內(nèi)抗氧化水平,延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,具有抗氧化和抗疲勞作用;在花生多肽抗疲勞研究方面,雖然彭維兵等[2]用單一花生多肽成分采用灌胃方法證實(shí)了花生多肽的抗疲勞作用,但目前還沒(méi)有采用花生多肽為功效成分研發(fā)抗疲勞飲品方面的報(bào)道。本文以花生多肽和其他活性物質(zhì)為主要功效成分研制營(yíng)養(yǎng)均衡型花生多肽飲品,研究其抗疲勞作用及對(duì)抗氧化活性指標(biāo)的影響,以期為抗疲勞功能性飲品的開(kāi)發(fā)及闡明抗疲勞作用和抗氧化的關(guān)系提供參考。
1.1材料與儀器
昆明種小鼠許可證號(hào),SCXK(粵)2009-0011,中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;冰乙酸AR(≥99.5) 天津市大茂化學(xué)試劑廠;無(wú)水乙酸AR(≥99.7) 天津市富宇精細(xì)化工有限公司;水解蛋白酶2.4L諾維信(中國(guó))生物技術(shù)有限公司;硫酸優(yōu)級(jí)純(95~98) 天津進(jìn)豐化工有限公司;甘油三酯試劑盒、總膽固醇試劑盒、SOD試劑盒、GSH-PX試劑盒、MDA試劑盒、尿素氮(BUN)試劑盒、全血乳酸(LD)試劑盒、肝糖原試劑盒南京建成生物工程研究所;花生粕市售;水解乳清蛋白、蔗糖、中鏈脂肪、卵磷脂、單甘酯、蔗糖酯、氯化鉀、維生素B1、維生素B2、維生素C、L-肉堿、?;撬?、精氨酸、肌醇、氯化膽堿、L-賴氨酸鹽酸鹽市售食品級(jí)原料。
UV-1800型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)日本島津有限公司;XHF-D型高速分散器寧波新芝生物科技股份有限公司;JY92-IZN型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)寧波新芝生物科技股份有限公司;TGL-16G型高速臺(tái)式離心機(jī)上海醫(yī)用分析儀器廠;GYB 60-65型高壓均質(zhì)機(jī)上海東華高壓均質(zhì)機(jī)廠;JMS-130型膠體磨廊體通用機(jī)械有限公司;冷凍干燥儀北京德天佑科技發(fā)展公司;KDN-08A型定氮儀上海新嘉電子有限公司;BL-75A型立式壓力蒸汽滅菌器上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療儀器廠。
1.2花生多肽飲品的設(shè)計(jì)與制備工藝
根據(jù)中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)2005年制訂的中國(guó)居民膳食營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入量標(biāo)準(zhǔn),合理配伍蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、礦物質(zhì)、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分,以花生多肽為主要氮源、辛葵酸甘油酯為脂肪來(lái)源、蔗糖等為碳水化合物來(lái)源,添加人體所需的礦物質(zhì)和維生素,以及肉堿、牛磺酸、精氨酸、肌醇、膽堿、賴氨酸等生物活性物質(zhì),按以下工藝制備營(yíng)養(yǎng)均衡型花生多肽飲品。
1.2.1花生多肽制備工藝花生粕→1∶10料水比加水浸泡→勻漿→調(diào)pH至9.5→52℃浸提2h→3000r/min離心10min→收集上清液→二次浸提→合并上清液→調(diào)pH至4.5→3000r/min離心15min→取沉淀→加水分散→堿性蛋白酶酶解(酶解溫度53.7℃,底物濃度7.7%,堿性蛋白酶與底物質(zhì)量比4.18%,酶解時(shí)間2h)→90℃水浴滅酶15min→4000r/min離心10min→上清液冷凍干燥→得花生多肽粉末。
1.2.2花生多肽飲品制作工藝按適當(dāng)比例分別稱取水溶性原料(花生多肽、蔗糖、蔗糖酯、高鈣奶安定劑、氯化鉀、L-肉堿、復(fù)合維生素、牛磺酸、精氨酸、肌醇、氯化膽堿、L-賴氨酸鹽酸鹽)和脂溶性材料(中鏈脂肪、單甘酯、卵磷酯)→加適當(dāng)重量的水至水溶性原料→邊加熱邊攪拌使其溶解→加入溶解好的脂溶性材料→煮沸→調(diào)pH至7.0→均質(zhì)→裝罐→121℃滅菌20min→冷卻→成品。
1.3實(shí)驗(yàn)方法
參照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003版)[26]之“緩解體力疲勞功能檢驗(yàn)方法”。
1.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組昆明種健康清潔級(jí)雄性小鼠192只,18~22g,共分為四批進(jìn)行實(shí)驗(yàn),分別用于a.負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn),b.血清尿素氮的測(cè)定,c.肝糖原、臟器指數(shù)及血清氧化應(yīng)激水平的測(cè)定,d.全血乳酸的測(cè)定。每批隨機(jī)分為4組,每組12只。
1.3.2劑量與喂養(yǎng)方法該產(chǎn)品的人體推薦量為每人每天飲用3瓶花生多肽飲品(每瓶250mL),即750mL/60kg,將人體推薦量的10倍設(shè)為低劑量,即2.5mL/20g,另設(shè)中劑量為5mL/20g,高劑量為7.5mL/20g。
小鼠每周稱重2次,對(duì)照組自由飲水,低、中、高劑量組每天早上(8∶30~9∶00)以飲品替換水,飲品量根據(jù)體重供給。記錄飲水瓶和飲品的總重量,每2h稱量一次,利用差量法,記錄每組小鼠每天實(shí)際飲用飲品量。每天飼喂飲品量達(dá)到要求后,再以水替換飲品?;A(chǔ)飼料正常供給,每3d記錄一次,連續(xù)30d。
1.3.3負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)?zāi)┐谓o予受試物后,將小鼠置于游泳箱(50cm×50cm×40cm)中進(jìn)行負(fù)重游泳。水深約30cm,水溫(25±1)℃,小鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛塊。記錄小鼠自游泳開(kāi)始至死亡所需的時(shí)間作為小鼠負(fù)重游泳時(shí)間(S)。
1.3.4血清尿素氮(BUN)的測(cè)定末次給予小鼠受試物后,在溫度為30℃的水中游泳90min,休息60min后,立即摘除眼球取血約0.5mL,10000r/min離心2min分離血清。血清尿素氮水平測(cè)定采用試劑盒測(cè)定。
1.3.5肝糖原、臟器指數(shù)及血清氧化應(yīng)激水平的測(cè)定末次給予小鼠受試物后,乙醚麻醉后摘除眼球取血,分離血清用于氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)測(cè)定。頸椎脫臼處死動(dòng)物后,分離心臟、肝臟、脾臟和兩側(cè)腎臟并稱重,剪取適量肝臟-20℃保存,用于肝糖原測(cè)定。肝糖原及氧化應(yīng)激指標(biāo)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)測(cè)定采用試劑盒測(cè)定。
按下式計(jì)算三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各動(dòng)物血乳酸曲線下面積:
血乳酸曲線下面積=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后休息20min的血乳酸值)。
1.4數(shù)據(jù)處理
2.1花生多肽飲品對(duì)小鼠體重的影響
花生多肽飲品對(duì)第一批實(shí)驗(yàn)小鼠體重的影響見(jiàn)表1。第一批用于負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的小鼠初始體重在(21.71± 2.41)~(23.36±2.52)g之間,各組之間無(wú)顯著差異(p>0.05)。實(shí)驗(yàn)期間各組體重增加,30d后體重增加至(41.45±3.13)~(43.73±3.28)g之間,各組之間無(wú)顯著性差異(p>0.05),說(shuō)明給予花生多肽飲品沒(méi)有影響該批小鼠體重。其余三批動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的小鼠初始體重和最終體重組間均無(wú)顯著差異。
表1 花生多肽飲品對(duì)小鼠體重的影響(±S,n=12)Table.1 The effects of peanut peptide beverage on the body weights of the mice(±S,n=12)
表1 花生多肽飲品對(duì)小鼠體重的影響(±S,n=12)Table.1 The effects of peanut peptide beverage on the body weights of the mice(±S,n=12)
注:同列不同字母表示數(shù)據(jù)具有顯著性差異,p<0.05;表2、表3同。
組別 0 d(g) 3 0 d(g)對(duì)照組 2 3 . 3 6 ± 2 . 5 2a 4 3 . 7 3 ± 3 . 2 8a低劑量組 2 3 . 2 4 ± 2 . 1 8a 4 1 . 4 5 ± 3 . 1 3a中劑量組 2 2 . 1 3 ± 2 . 3 4a 4 2 . 2 5 ± 6 . 3 9a高劑量組 2 1 . 7 1 ± 2 . 4 1a 4 2 . 2 3 ± 3 . 4 7a
2.2花生多肽飲品對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響
花生多肽飲品對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響見(jiàn)圖1。對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的肝臟指數(shù)分別為(5.11±0.64)、(5.55±0.64)、(5.62±0.56)和(5.82± 0.44)g/100g體重。與對(duì)照組小鼠的肝臟指數(shù)相比,低劑量組沒(méi)有顯著性差異(p>0.05),中劑量組和高劑量組升高并具有顯著性差異(p<0.05);不同劑量組間沒(méi)有顯著性差異(p>0.05)。
?Niessen,C.,Weseler,D.& Kostova,P.,“When and why do individuals craft their jobs?The role of individual motivation and work characteristics for job crafting”,Human Relations,2016,9(6),pp.1287 ~1313.
注:同一指標(biāo)不同字母表示差異顯著(p<0.05)。
對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的腎臟指數(shù)分別為(1.26±0.10)、(1.29±0.12)、(1.23±0.18)和(1.16±0.07)g/100g體重。與對(duì)照組小鼠的腎臟指數(shù)相比,高劑量組降低并具有顯著性差異(p<0.05),低劑量組和中劑量組沒(méi)有顯著性差異(p>0.05);高劑量組和低劑量組之間具有顯著性差異(p<0.05),高劑量組和中劑量組之間、低劑量組和中劑量組之間沒(méi)有顯著性差異(p>0.05)。對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠之間的脾臟指數(shù)和心臟指數(shù)未呈現(xiàn)顯著性差異(p>0.05)。
2.3花生多肽飲品對(duì)氧化應(yīng)激水平的影響
表2為花生多肽飲品對(duì)氧化應(yīng)激水平的影響。從表2可以看出,對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組小鼠SOD含量在(121.49±20.34)~(169.31±22.90)U/mL之間,隨著劑量的增加,SOD含量增加。與對(duì)照組小鼠SOD含量相比,高劑量組與中劑量組升高并具有顯著性差異(p<0.05),低劑量組無(wú)顯著性差異(p>0.05);與低劑量組相比,高劑量組含量升高并具有顯著性差異(p<0.05),中劑量組含量升高,但差異不顯著(p>0.05);與中劑量組相比,高劑量組含量升高并具有顯著性差異(p<0.05)。
對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的GSHPx含量在(253.53±43.62)~(289.04±48.80)U/mL之間,隨著劑量增加,GSH-Px含量提高,但各組之間沒(méi)有顯著性差異。對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的MDA含量在(6.10±1.20)~(7.92±1.19)nmol/mL之間。與對(duì)照組小鼠的MDA含量相比,中劑量組和高劑量組降低并具有顯著性差異(p<0.05),低劑量組則沒(méi)有顯著性差異(p>0.05);與低劑量組相比,高劑量組和中劑量組MDA生成降低并具有顯著性差異(p<0.05);高劑量組和中劑量組之間沒(méi)有顯著性差異(p>0.05)。
SOD對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用,其活力的高低反映了機(jī)體清除自由基能力。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)特異催化還原型谷胱甘肽(GSH)對(duì)過(guò)氧化氫的還原反應(yīng),起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用,從而起到抗氧化作用。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化物中毒性最大的一種,它能破壞膜結(jié)構(gòu)和膜蛋白功能,影響核酸的功能和代謝,還可致使自身免疫功能紊亂。因此通過(guò)MDA的測(cè)定可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的程度,間接了解機(jī)體組織、細(xì)胞的損傷程度。本研究結(jié)果表明,花生多肽飲品可以提高實(shí)驗(yàn)小鼠SOD含量,降低MDA生成,對(duì)GSH-PX含量影響不顯著,說(shuō)明花生多肽飲品可以通過(guò)提高小鼠的SOD含量和降低MDA生成來(lái)增強(qiáng)抗氧化性。
表2 花生多肽飲品對(duì)氧化應(yīng)激水平的影響(±S,n=12)Table.2 The effects of peanut peptide beverage on the levels of oxidative stress(±S,n=12)
表2 花生多肽飲品對(duì)氧化應(yīng)激水平的影響(±S,n=12)Table.2 The effects of peanut peptide beverage on the levels of oxidative stress(±S,n=12)
組別 S O D(U / m L) G S H -P x(U / m L)M D A(n m o l / m L)對(duì)照組 1 2 1 . 4 9 ± 2 0 . 3 4a 2 5 3 . 5 3 ± 4 3 . 6 2a 7 . 6 8 ± 1 . 2 5b低劑量組 1 3 5 . 5 0 ± 2 2 . 1 7ab 2 6 5 . 8 5 ± 3 9 . 4 1a 7 . 9 2 ± 1 . 1 9b中劑量組 1 4 1 . 3 3 ± 1 4 . 4 6b 2 8 7 . 0 0 ± 3 2 . 4 6a 6 . 1 0 ± 1 . 2 0a高劑量組 1 6 9 . 3 1 ± 2 2 . 9 0c 2 8 9 . 0 4 ± 4 8 . 8 0a 6 . 3 9 ± 1 . 0 9a
現(xiàn)有文獻(xiàn)表明大部分抗氧化肽在N端包含疏水性氨基酸如Val或Leu,并且序列中含有Pro、His、Tyr、Trp和Cys等氨基酸[27]。本研究的花生多肽飲品含有花生多肽以及肉堿、?;撬帷⒕彼岬壬锘钚晕镔|(zhì)。本研究采用的花生多肽其疏水性氨基酸占30.57%。另外,產(chǎn)品中的肉堿[13]、?;撬醄28]、精氨酸[29]都有利于提高飲品的抗氧化活性。
2.4花生多肽飲品對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、肝糖原、血乳酸曲線下面積和血清尿素氮的影響
花生多肽飲品對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、肝糖原、血乳酸曲線下面積和血清尿素氮的影響見(jiàn)表3。結(jié)果表明,對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組負(fù)重游泳時(shí)間在(280.18±77.11)~(634.41±144.72)s之間。與對(duì)照組相比,低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯增加,且都具有顯著性差異(p<0.05);各劑量組之間隨著劑量的增加,負(fù)重游泳時(shí)間增加,其中高劑量組與低劑量組、中劑量組相比具有顯著性差異(p<0.05),但低劑量組和中劑量組之間則沒(méi)有顯著性差異(p>0.05)。
對(duì)照組和各劑量組肝糖原含量在(1308±469)~(3311±767)mg/100g肝之間。與對(duì)照組相比,低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的肝糖原含量顯著提高(p<0.05);各劑量組之間隨著劑量的增加,肝糖原含量增加,其中高劑量組和中劑量組與低劑量組之間具有顯著性差異(p<0.05),而高劑量組和中劑量組之間則無(wú)顯著性差異(p>0.05)。
對(duì)照組和各劑量組血乳酸曲線下面積在(95.13± 19.01)~(131.89±19.14)之間。與對(duì)照組相比,低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的全血乳酸值顯著降低(p<0.05);但各劑量組之間沒(méi)有顯著性差異(p>0.05)。
對(duì)照組和各劑量組血清尿素氮含量在(9.97±0.77)~(14.23±1.08)mmol/L之間。與對(duì)照組相比,低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的血清尿素氮顯著降低(p<0.05);但各劑量組之間沒(méi)有顯著性差異(p>0.05)。
游泳實(shí)驗(yàn)是觀察動(dòng)物抗疲勞能力的公認(rèn)指標(biāo),動(dòng)物的負(fù)重游泳時(shí)間直接反映了機(jī)體的運(yùn)動(dòng)耐力。本研究結(jié)果表明,與對(duì)照組比較,花生多肽飲品低、中、高劑量組均能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,各劑量組之間隨著劑量的增加,負(fù)重游泳時(shí)間增加,并呈現(xiàn)一定的劑量效應(yīng),說(shuō)明花生多肽飲品能提高小鼠的運(yùn)動(dòng)耐力。糖原是肌肉組織重要能量來(lái)源,糖原含量高低影響動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力,肝糖原對(duì)于維持血糖水平起著非常重要的作用。本研究結(jié)果表明,與對(duì)照組比較,各劑量組小鼠的肝糖原含量顯著提高,各劑量組之間隨著劑量的增加,肝糖原含量增加,并表現(xiàn)出一定的劑量關(guān)系,說(shuō)明花生多肽飲品能提高小鼠的肝糖原含量,為維持血糖水平提供了保證,從而提高動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力。血乳酸是一種酸性代謝產(chǎn)物,其水平升高可導(dǎo)致肌肉中H+濃度上升,從而導(dǎo)致機(jī)體能量代謝水平降低和運(yùn)動(dòng)能力下降。本研究結(jié)果表明,各劑量組可顯著降低血乳酸水平,但各劑量組之間血乳酸水平?jīng)]有顯著性差異,說(shuō)明花生多肽飲品通過(guò)降低血乳酸水平提高動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力,飲品對(duì)血乳酸的清除作用并不隨著劑量的增加而增強(qiáng)。血清尿素氮是反映蛋白質(zhì)代謝的指標(biāo),在正常情況下,尿素的生成和排泄處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài),尿素氮含量相對(duì)穩(wěn)定。當(dāng)動(dòng)物進(jìn)行較為激烈的運(yùn)動(dòng)時(shí),蛋白質(zhì)和氨基酸的分解代謝加強(qiáng),尿素生成增加,導(dǎo)致尿素氮含量升高。本研究結(jié)果表明,各劑量組均能顯著降低血清尿素氮含量,但各劑量組之間血清尿素氮水平?jīng)]有顯著性差異,說(shuō)明花生多肽飲品通過(guò)降低運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮的生成延緩疲勞的發(fā)生,飲品對(duì)血清尿素氮生成的抑制作用并不隨著劑量的增加而提高。
本飲品中的花生多肽比完整蛋白質(zhì)能更快地被消化利用;辛葵酸甘油酯是中鏈脂肪,比長(zhǎng)鏈脂肪酸更容易被消化吸收,可快速提供能量;另外飲品中的肉堿[11-13]、?;撬醄14]、精氨酸[15]、膽堿[16]都可以增強(qiáng)機(jī)體的抗疲勞功能,推斷飲品通過(guò)各種營(yíng)養(yǎng)成分和活性物質(zhì)的綜合作用達(dá)到緩解體力疲勞的效果。
表3 花生多肽飲品對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、肝糖原、血乳酸曲線下面積和血清尿素氮的影響(±S,n=12)Table.3 The effects of peanut peptide beverage on the load swimming time,liver glycogen,blood lactic acid and serum urea nitrogen of the mice(±S,n=12)
表3 花生多肽飲品對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、肝糖原、血乳酸曲線下面積和血清尿素氮的影響(±S,n=12)Table.3 The effects of peanut peptide beverage on the load swimming time,liver glycogen,blood lactic acid and serum urea nitrogen of the mice(±S,n=12)
組別 負(fù)重游泳時(shí)間(S) 肝糖原(m g / 1 0 0 g肝) 血乳酸曲線下面積 血清尿素氮(m m o l / L)對(duì)照組 2 8 0 . 1 8 ± 7 7 . 1 1a 1 3 0 8 ± 4 6 9a 1 3 1 . 8 9 ± 1 9 . 1 4b 1 4 . 2 3 ± 1 . 0 8b低劑量組 4 3 0 . 4 5 ± 1 4 5 . 4 9b 2 1 6 0 ± 6 1 8b 9 8 . 5 4 ± 1 7 . 0 3a 1 1 . 6 3 ± 1 . 1 6a中劑量組 5 0 8 . 2 5 ± 1 5 7 . 0 2b 3 0 3 6 ± 7 6 5c 9 6 . 0 8 ± 2 2 . 3 4a 1 0 . 5 0 ± 0 . 8 8a高劑量組 6 3 4 . 4 1 ± 1 4 4 . 7 2c 3 3 1 1 ± 7 6 7c 9 5 . 1 3 ± 1 9 . 0 1a 9 . 9 7 ± 0 . 7 7a
2.5抗氧化活性與緩解體力疲勞的關(guān)系
Porsolt[30]采用游泳實(shí)驗(yàn)確證了抗氧化的膳食成分可延緩疲勞。SOD水平、GSH-Px水平和MDA生成量都能在一定程度上反映機(jī)體抗氧化能力。本研究中的對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠SOD平均值分別為121.49、135.50、141.33和169.31U/mL(表2),其對(duì)應(yīng)平均負(fù)重游泳時(shí)間分別為280.18、430.45、508.25和634.41s(表3),表現(xiàn)出隨著SOD水平提高,小鼠負(fù)重游泳時(shí)間增加的趨勢(shì),這與陳園園等[17]用大豆低聚肽獲得SOD水平與游泳時(shí)間呈正相關(guān)的結(jié)果吻合。雖然本研究結(jié)果表明小鼠負(fù)重游泳時(shí)間與SOD水平有一定的正相關(guān)關(guān)系,但小鼠表現(xiàn)出的力竭運(yùn)動(dòng)耐力的提高卻與GSH-Px水平不相關(guān)。與Singh等[31]發(fā)現(xiàn)的抗氧化劑通過(guò)減少脂類(lèi)的過(guò)氧化來(lái)延緩了疲勞產(chǎn)生的結(jié)果不同,本研究發(fā)現(xiàn)負(fù)重游泳時(shí)間與脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA生成量沒(méi)有呈現(xiàn)出很好的相關(guān)性。
綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,以花生多肽和其他活性物質(zhì)為主要功效成分的營(yíng)養(yǎng)均衡型花生多肽飲品能顯著提高小鼠的SOD含量,明顯增加小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,顯著提高肝糖原含量,顯著降低全血乳酸和血清尿素氮。表明花生多肽飲品具有抗氧化和緩解體力疲勞的作用,其緩解體力疲勞作用與體內(nèi)SOD水平相關(guān)。本研究結(jié)果對(duì)于拓寬抗疲勞功能性食品的研發(fā)思路具有重要的參考意義。
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Anti-oxidation and anti-fatigue effects of a peanut peptide beverage
WEI Zhen-cheng,ZHANG Rui-fen,DENG Yuan-yuan,ZHANG Ming-wei,ZHANG Yan,TANG Xiao-jun,LIU Lei,TI Hui-hui,MA Yong-xuan,GUO Jin-xin
(Sericultural and Agri-Food Research Institute,Guangdong Academy of Agricultural Sciences,Key Laboratory of Functional Foods,Ministry of Agriculture,Guangdong Key Laboratory of Agricultural Products Processing,Guangzhou 510610,China)
The anti-oxidation and anti-fatigue effects and their correlation of a peanut peptide beverage were investigated.A nutritionally balanced peanut peptide beverage was prepared using peanut peptide and other active substances as main active ingredients,an animal experiment consisting of three treatment groups and one control group was conducted to investigate anti-fatigue function and its effect on anti-oxidation indexes of the beverage.The results showed that compared with the control group,SOD contents of mice in the mediumand high-dose groups were significantly higher(p<0.05),MDA contents in the medium-and high-dose groups were significantly lower(p<0.05),the load swimming time and hepatic glycogen of all three treatment groups were significantly increased(p<0.05),while the whole blood lactic acid content and blood serum urea nitrogen significantly decreased(p<0.05).It could be concluded that the peanut peptide beverage had antifatigue function and anti-oxidation effect,and its anti-fatigue function was correlated to the SOD contents.
peanut;peptide;anti-oxidation;anti-fatigue
TS201.4
A
1002-0306(2015)04-0357-05
10.13386/j.issn1002-0306.2015.04.069
2014-06-05
魏振承(1963-),男,本科,研究員,研究方向:農(nóng)產(chǎn)品加工。
國(guó)家科技項(xiàng)目(2012BAD33B10,2012BAD37B08,2013AA102208);廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012A061100004,2011A080803011,2012B091100411)。